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器官移植配型理論與技術(shù)基本概念廣義的器官移植:用自身或異體的正常器官、組織或細(xì)胞置換病變或功能缺失的器官、組織或細(xì)胞,以維持和重建機(jī)體的生理功能。影響移植成功的關(guān)鍵因素是可能發(fā)生的免疫排斥反應(yīng);一.基本概念人人豬相關(guān)概念同種異體移植異種移植同系移植移植自體移植引起排斥反應(yīng)的抗原ABO血型抗原;組織特異性抗原;主要組織相容性抗原(MHA,majorhistocompatibilityantigen),又稱人類白細(xì)胞抗原(HLA);次要組織相容性抗原(mHA,minorhistocompatibilityantigen)H-Y抗原;HLA的基因結(jié)構(gòu)、抗原結(jié)構(gòu)及特點(diǎn)由第6號(hào)染色體短臂21.31區(qū)編碼,按功能分為HLA-I,Ⅱ,Ⅲ三個(gè)區(qū)域,其中I,Ⅱ區(qū)編碼抗原與移植關(guān)系密切。HLA-I類抗原主要由A、B、C位點(diǎn)編碼;HLA-Ⅱ類抗原由DR、DP、DQ位點(diǎn)編碼;HLA-I類抗原是由第6號(hào)染色體相應(yīng)I類基因編碼的α鏈與第15號(hào)染色體編碼的β2微球蛋白非共價(jià)鍵結(jié)合的糖蛋白,主要表達(dá)在有核細(xì)胞表面;HLA-Ⅱ類抗原由第6號(hào)染色體相應(yīng)Ⅱ類基因編碼的α鏈和β鏈非共價(jià)鍵結(jié)合的糖蛋白,主要表達(dá)在抗原遞呈細(xì)胞,胸腺上皮細(xì)胞表面;HLA抗原的生物學(xué)功能1.參與蛋白質(zhì)抗原的處理與遞呈;2.調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答;3.參與T細(xì)胞分化過(guò)程;4.介導(dǎo)同種免疫應(yīng)答;HLA基因的遺傳特點(diǎn)1.高度多態(tài)性;HLA基因呈現(xiàn)多位點(diǎn)復(fù)等位的特點(diǎn);2.共顯性遺傳:每對(duì)等位基因同時(shí)表達(dá);3.單倍型遺傳:位于同一條染色體上的HLA各位點(diǎn)的基因組合;4.連鎖不平衡:?jiǎn)伪缎突蚍请S機(jī)分布的現(xiàn)象;2.傳統(tǒng)的HLA分型技術(shù)血清學(xué)分型:補(bǔ)體依賴的細(xì)胞毒實(shí)驗(yàn);待測(cè)淋巴細(xì)胞與已知抗體孵育,再加入補(bǔ)體,若該抗體與淋巴細(xì)胞膜上HLA分子相匹配,則激活補(bǔ)體系統(tǒng)導(dǎo)致待測(cè)細(xì)胞膜的破壞,否則細(xì)胞膜完整不受影響。局限性:需要活的淋巴細(xì)胞;存在交叉反應(yīng);隱蔽抗原無(wú)法識(shí)別;人為影響因素多質(zhì)控難做;細(xì)胞學(xué)分型:混合淋巴細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù);受者淋巴細(xì)胞與已知類型的淋巴細(xì)胞或者供者淋巴細(xì)胞混合培養(yǎng),兩種細(xì)胞HLA分子表型如果相同則不能刺激淋巴細(xì)胞增殖,反之則刺激淋巴細(xì)胞增殖,分為單雙向兩種類型。局限性:需要活的純合子表型的淋巴細(xì)胞;增殖檢測(cè)方法要用到同位素;分子生物學(xué)技術(shù)分型HLA抗原蛋白分子的多態(tài)性取決于相應(yīng)編碼基因的多態(tài)性;RFLP/PCR-RFLP/PCR-SSP;PCR-SSCP;PCR-Sequencing;PCR-SSO/基因芯片技術(shù);流式細(xì)胞儀技術(shù);氨基酸殘基配型標(biāo)準(zhǔn)分析技術(shù);聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)
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