島津GC-17A氣相色譜儀操作規(guī)程一、開機1、 準備H2、N2壓縮空氣。2、 檢查/連接信號傳輸線，使之與對應的檢測器相連接；3、打開氮氣瓶開關(guān)，順時針旋轉(zhuǎn)使氮氣的初級壓為達 0.6Mpa，微調(diào)主機上最中間的壓力表，使之達60Kpa。、首先打開穩(wěn)壓器電源，然后依次打開主機、數(shù)據(jù)采集器、計算機電源，并打開色譜工作站GlassGC10，開機的順序不能顛倒；二、建立分析方法、在打開的色譜工作站的窗口中，打開 Configuration確認/設定工作系統(tǒng)：6、打開CLASS—GC主窗口中的RealTimeAnalysis，設定分析條件。（1）點擊“Setup”進入設定操作；（2）下拉Setup菜單到"Tem”，并雙擊之，分別設定柱溫（ ColumnOven）,進樣口（lnj）、檢測器（Det）的工作溫度，所設的溫度均須低于限溫。如要求程序升溫分析，則須設定各升溫步驟的升溫速度（ Rate）、最終溫度（Temp到設定的最終溫度后的、保持時間（Temp）。點擊"OK退出Temp設定。（3） 下拉Setup菜單至Flow并雙擊之，設定流速、分析柱等：輸入柱前壓（Columnpress）、流速（CollumnFlow）、分流比、柱長（Column）、柱徑（ColumnDiameter）的設定值。點擊“OK'退出Flow設定。（4）下拉Setup菜單至Detector，設為“OFF”關(guān)閉檢測器，并設定衰減值（ Atten）。（5）下拉Setup菜單至StopTime，設定每個樣品的分析時間長。三、數(shù)據(jù)采集7、打開空壓機電源，并調(diào)節(jié)主機最右邊的壓力表數(shù)值達 50Kpa。8、 點擊SystemOn啟動系統(tǒng)，至主機的Ready指示燈亮。此時進樣口、色譜柱、檢測器的溫度達到設定值。9、 點擊GCSetup，將Detector設為"ON打開檢測器。10、 點擊FlamIgnition。主機開始點火操作，火點著后主機顯示屏上會在使用的檢測器的編號上出現(xiàn)“*”，表明該檢測器已點火。11、觀察色譜圖，待基線穩(wěn)定后，下拉 Test/Zero至ZeroChl并點擊之，進行基線調(diào)“O”。下拉至DetetorlChiZero 并點擊之，進行1號檢測器(FID、FPD調(diào)“O'。下拉Test/Zero至SlopeTestchl并點擊之，系統(tǒng)開始斜率檢測。檢測結(jié)束后，將檢測的Slop值加倍后輸入并點擊“0K'退出。12、 進樣：用干凈并經(jīng)待測樣的溶劑洗滌過的進樣器吸取一定量的樣品，通過使用的進樣口快速進樣。抽出進樣器后，立即按主機的“ START鍵開始分析。分析結(jié)束后，計算給出該樣品色譜峰的峰高、面積等數(shù)據(jù)。待主機“ READY燈亮后，可進行下一樣品的分析操作。13、 待測樣品的測定結(jié)束后，立即關(guān)閉氫氣瓶主閥。14、 降溫：點擊GCSetup，設定下列參數(shù)至“25":ColumnOvenInj、Det。關(guān)閉Detector(OFF)。點擊“Set”。四、數(shù)據(jù)處理點擊CLAS—GC1APostRunAnalysis 進入數(shù)據(jù)處理程序。15、 點擊Batch進行數(shù)據(jù)批處理。16、下拉FiletLoadDataFiles宀依次移動鼠標至待計算的數(shù)據(jù)并點擊“ Select”宀Load。17、在Batch窗口下的表格中，改變數(shù)據(jù)類型( Type。為標準(S)或待測(U)。18、雙擊濃度最低的標準樣的數(shù)據(jù)文件( DataFile。，在SingleChromatogramProcessing窗口中，下拉Process至Integrat，對色譜峰進行積分計算。下拉Edit菜單至Quantitation進行定量設定：Method(Externalstandard等。，CurveFitType(Leastsquaremethod。、CalibrationLevels,MinCounttOK在Quantitation 窗口下，下拉EditTable至Fill。在ID表中分別輸入每個組分的Name及其對應的濃度。t OKT點擊“x”退出 SingleChromatogramprocessingt點擊“是”。19、在Batch窗口下，點擊“RUN,對選擇的樣品進行計算t輸入數(shù)據(jù)處理文件名 (Filename)tSave。20、標準典線：點擊任何一個標準樣的 DataFiletRF(1)、RF(2)。21、計算結(jié)果：點擊任何一個檢測樣的 DataFilet下拉SinglechromatogramprocessingDisplay菜單至PeakReport宀獲得計算結(jié)果。五、關(guān)機22、 ColumnOven、Inj、Det的溫度低于40C后，可進行關(guān)機操作：點擊"SystemOff退出色譜工作站t關(guān)閉數(shù)據(jù)采集器電源t關(guān)閉主機電源t關(guān)閉 N2f關(guān)門空壓機，打開閥門排出空氣f關(guān)閉主電源。23、 清潔儀器桌面、地板，登記儀器使用情況，關(guān)好門窗水電。如何選擇色譜柱？要選擇色譜柱，首先需要確定要使用的是填充柱還是毛細管柱。 填充柱或毛細管柱？填充柱比毛細管柱具有更高的樣品容量，雖然這一差距由于HP發(fā)明了大孔530mm毛細管而大大縮小。檢測器靈敏度的改進也減少了對大劑量樣品的需要。填充柱可能具有優(yōu)勢的領(lǐng)域是氣體樣品的分析。對于幾乎所有的其他樣品，毛細管柱具有高很多的效率（窄峰），這可以大大改進峰分離。實際上，分離能力很大，以至于許多分析物在很簡單的分析中使用非常短的色譜柱就可以完成分離了。節(jié)省的時間可以直接轉(zhuǎn)化為循環(huán)時間的縮短和樣品通量的增加。 對于新的或更新的方法，如果沒有非常具有說服力的理由使用填充柱的話，我們推薦使用毛細管柱。色譜柱材料這種材料必須盡可能是惰性的，尤其是對于痕量分析或容易拖尾的化合物，例如硫醇或類似的活性化合物。對于毛細管柱，熔融石英是可選的材料。有兩種類型的熔融石英毛細管柱：壁涂開管柱（WCOT）色譜柱和多孔層開管柱（PLOT）色譜柱。WCOT色譜柱是固定相液膜涂漬在去活的色譜柱壁上。這是氣相色譜中最常用的色譜柱。 PLOT色譜柱中固定相是固體物質(zhì)涂漬到色譜柱壁上。填充柱可以是玻璃或金屬，通常是不銹鋼的。金屬雖然比較有活性，但其對非極性物質(zhì)比較穩(wěn)定。但是如果樣品中有極性組分需要分析，請選擇玻璃柱。如果玻璃柱還是活性強（引起峰拖尾、樣品丟失等），請進行去活處理。固定相選擇毛細管柱時，首先需要確定是否需要PLOT色譜柱。下面是3種PLOT色譜柱的典型應用領(lǐng)域：分子篩不揮發(fā)氣體，對水比較敏感二乙烯基苯（DVB）—HP-PLOTQC1到C3全部異構(gòu)體的分離，部分C4和更高的（直到C14）的異構(gòu)體分離，極性化合物，揮發(fā)性溶劑可以允許含水氧化鋁Al2O3C1到C10異構(gòu)體的分離,對水比較敏感如果上面提到的應用沒有感興趣的，則您可以選擇一個WCOT類型色譜柱。當面對一種未知樣品時，首先嘗試目前在GC上的色譜柱。如果不能獲得滿意的結(jié)果，請考慮所了解的樣品信息。基本原理是分析物與具有相似化學性質(zhì)的固定相間更容易相互作用。這意味著了解的樣品信息越多，越容易找到最佳分離固定相。 最重要的步驟是確定分析物的極性特征：非極性分子—通常只包含碳氫原子沒有偶極距。直鏈碳氫化合物（n-烷烴）是非極性化合物的例子。極性分子—主要包含碳氫，也包含氮、氧、磷、硫或鹵原子。例如醇、胺、硫醇、酮、腈、有機鹵化物等?？蓸O化的分子—主要包含碳氫，也包含不飽和鍵。例如烯烴、炔烴和芳香族化合物。安捷倫科技公司針對特定分離需要提供正確的固定相：樣品是具有相同化學類型的非極性物質(zhì)的混合物嗎？例如大多數(shù)石油餾分中的碳氫化合物？請嘗試非極性色譜柱， 如HP-1，可以將它們按(近似)沸點順序分離。如果懷疑有一些芳香族化合物，請嘗試HP-5或HP-35等適用苯基化合物的色譜柱。極性或可極化化合物通常在含有苯基的更強極性和/或可極化基團的固定相上進行分離，其分離度會更好一些。例如HP-210或HP-225色譜柱。如果需要更強的極性固定相，則可以選擇聚乙二醇(PEG)固定相，通常稱為WAX固定相。請參見后面幾頁中的選擇圖表，這些圖表根據(jù)應用和分析物的極性特征推薦固定相。鍵合可以在固定相和色譜柱管間產(chǎn)生化學鍵。交聯(lián)在適當位置聚合固定相以增加分子量。這兩個過程是在制備鍵合/交聯(lián)色譜柱過程中同時發(fā)生的，它可以增加熱穩(wěn)定性并減少色譜柱流失?？梢詻_洗鍵合/交聯(lián)色譜柱以去除可能隨時間積累的污染物并允許更大的進樣量。 如果可以選擇，則我們建議在標準涂漬型色譜柱類型中選擇鍵合/交聯(lián)色譜柱。膜厚一般規(guī)律為薄液膜比厚液膜分離物質(zhì)的速度快一些，并可以在相對較低溫度下得到更高的分離度。這說明它適合于高沸點化合物、接近的化合物或熱敏性化合物?！皹藴省蹦ず駷?.25~0.5mm。這些厚度對在高達300°C溫度下分離的大多數(shù)樣品(包括石蠟、甘油三酸酯和類固醇)效果很好。對于需要在更高溫度下分離的物質(zhì)，可以使用薄液膜(0.1mm)色譜柱。標準或薄液膜色譜柱用于分離高沸點物質(zhì)，而厚液膜柱用于分離低沸點物質(zhì)。1~1.5mm的膜可以很好的分離沸點為100~200°C的物質(zhì)。超厚液膜(3~5mm)用于氣體、溶劑和吹掃物以提高它們和固定相的相互作用。使用超厚液膜色譜柱的另一個原因是當更換大孔徑色譜柱時，可以保持分離度和保留時間。由于這個原因，大孔徑色譜柱都使用厚液膜。厚液膜意味著色譜柱中有更多物質(zhì)，因此會有更多的流失。隨著膜厚度的增加，能達到的最高溫度將降低。柱長一般而言，15m色譜柱用于快速分離、簡單混合物或大分子量化合物。對于大多數(shù)分析， 30m長的色譜柱是最常用的一種。很長的色譜柱(50、60和105m)用于非常復雜的樣品。柱長并不是色譜柱性能中一個很重要的參數(shù)。例如，柱長加倍，等溫分析時間加倍，但峰分離度僅增加 40%。如果分析不是很理想，則有比柱長更有效的途徑來改善它?？梢赃x擇薄一點的液膜、優(yōu)化載氣通過色譜柱的流速、使用溫度程序等。一種特殊情況是含有非?；钚越M分的樣品分析。如果它們接觸色譜柱材料，則它們拖尾會非常嚴重。相對短一些的色譜柱，使用厚膜可以減少接觸的機會，這是由于接觸色譜柱材料的時間相對少一些，并可以將分析物用固定相封閉與活化點的接觸。內(nèi)徑增加內(nèi)徑意味著固定相增加，即使厚度不變，可以分析更大量的樣品。它也意味著減小分離能力和更大的流失。細柱用于復雜樣品分離，但是通常要求分流進樣，這是由于允許的樣品