2.2動(dòng)物細(xì)胞工程動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)概念:就是從動(dòng)物機(jī)體中取出相關(guān)的組織,將它分散成單個(gè)細(xì)胞，然后,放在適宜的培養(yǎng)基中,讓這些細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖。培養(yǎng)過程：動(dòng)物機(jī)體組織單個(gè)細(xì)胞原代培養(yǎng)胰蛋白酶膠原蛋白酶稀釋分裝傳代培養(yǎng)一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)1.過程：動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的組織、器官細(xì)胞懸浮液胰蛋白酶10代細(xì)胞原代培養(yǎng)50代細(xì)胞傳代培養(yǎng)細(xì)胞株無限傳代細(xì)胞系單個(gè)細(xì)胞加培養(yǎng)液遺傳物質(zhì)未改變遺傳物質(zhì)已改變動(dòng)物組織細(xì)胞間隙中含有一定量的彈性纖維等蛋白質(zhì)，將細(xì)胞網(wǎng)絡(luò)起來形成具有一定彈性和韌性的組織和器官。（分解彈性纖維）思考：2.為什么選用動(dòng)物胚胎或幼齡個(gè)體的器官或組織做動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)材料？1.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液的主要成分是什么？較植物組培培養(yǎng)基有何獨(dú)特之處？主要成分：葡萄糖、氨基酸、無機(jī)鹽、維生素和動(dòng)物血清等。獨(dú)特之處有：1.液體培養(yǎng)基2.成分中有動(dòng)物血清等因?yàn)檫@些組織或器官上的細(xì)胞生命力旺盛，分裂能力強(qiáng)3.為什么培養(yǎng)前要將組織細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞？成塊組織不利培養(yǎng)，分散了做成細(xì)胞懸浮液利于培養(yǎng)4.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)能否像綠色植物組織培養(yǎng)那樣最終培養(yǎng)成新個(gè)體？不能，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)只能使細(xì)胞數(shù)目增多，不能發(fā)育成新的動(dòng)物個(gè)體多細(xì)胞動(dòng)物和人體的細(xì)胞都生活在內(nèi)環(huán)境中，根據(jù)你所學(xué)的內(nèi)環(huán)境的知識(shí)，思考并討論以下問題：1.體外培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)需要提供哪些物質(zhì)2.體外培養(yǎng)的細(xì)胞需要什么樣的環(huán)境條件？充足的營(yíng)養(yǎng)供給、適宜的溫度、適宜的pH和氣體環(huán)境無菌、無毒的環(huán)境。動(dòng)物組織培養(yǎng)的條件無菌、無毒的環(huán)境營(yíng)養(yǎng)：合成培養(yǎng)基溫度和pH氣體環(huán)境動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的應(yīng)用

1.許多有重要價(jià)值的蛋白質(zhì)生物制品，如病毒疫苗、干擾素、克隆抗體等，都可以借助于動(dòng)物細(xì)胞的大規(guī)模培養(yǎng)來生產(chǎn)。2.用取自燒傷病人皮膚的健康細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，可以獲得大量自身的皮膚細(xì)胞，為大面積燒傷的病人移植。

3.培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞用于檢測(cè)有毒物質(zhì)。許多致畸、致癌物質(zhì)加入培養(yǎng)液后，培養(yǎng)細(xì)胞會(huì)發(fā)生染色體結(jié)構(gòu)和數(shù)目的變異。根據(jù)變異細(xì)胞占全部培養(yǎng)細(xì)胞的百分?jǐn)?shù)，可以判斷某種物質(zhì)的毒性。

4.醫(yī)學(xué)家培養(yǎng)各種正常的或病變的細(xì)胞，用于生理、病理、藥理等方面的研究，為治療和預(yù)防疾病提供理論依據(jù)。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)的比較：植物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)比較項(xiàng)目原理培養(yǎng)基結(jié)果培養(yǎng)目的細(xì)胞的全能性細(xì)胞的增殖固體；營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)；激素液體；營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)動(dòng)物血清培養(yǎng)成植株培養(yǎng)成細(xì)胞系或細(xì)胞株快速繁殖培養(yǎng)無病毒植株等獲得細(xì)胞的產(chǎn)物或細(xì)胞等一、動(dòng)物核移植

將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核，移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎，這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育為動(dòng)物個(gè)體。用核移植的方法得到的動(dòng)物稱為克隆動(dòng)物。胚胎細(xì)胞核移植體細(xì)胞核移植二、體細(xì)胞核移植的過程黑面綿羊去核卵母細(xì)胞供體細(xì)胞培養(yǎng)重組細(xì)胞早期胚胎另一頭綿羊的子宮克隆羊多利培養(yǎng)黑面綿羊卵母細(xì)胞至減二中期取白面綿羊乳腺細(xì)胞顯微操作1997年,美國(guó)威斯康星州的一個(gè)奶牛場(chǎng)有一頭叫盧辛達(dá)的奶牛，年產(chǎn)奶量為30.8噸,創(chuàng)造了世界奶牛產(chǎn)奶量最高紀(jì)錄.目前世界各國(guó)高產(chǎn)奶牛場(chǎng)的奶牛,年平均產(chǎn)奶量一般為十幾噸,而我國(guó)奶牛產(chǎn)奶量年平均水平僅為3-4噸.

能利用體細(xì)胞核移植技術(shù)克隆高產(chǎn)奶牛盧辛達(dá)嗎?三、體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景1.在畜牧業(yè)中可以加速家畜遺傳改良的進(jìn)程2.保護(hù)瀕危物種3.醫(yī)藥衛(wèi)生領(lǐng)域生產(chǎn)醫(yī)用蛋白質(zhì)及組織器官的移植四、體細(xì)胞核移植技術(shù)存在的問題克隆動(dòng)物基因組重新編程的機(jī)制尚不清楚，克隆技術(shù)效率低，克隆動(dòng)物畸形率高、死亡率高、易出現(xiàn)早衰等問題。這些問題尚在研究中。在應(yīng)用上，生產(chǎn)克隆動(dòng)物費(fèi)用昂貴，距大規(guī)模應(yīng)用還有一定距離。

讓羊產(chǎn)牛奶,科學(xué)家對(duì)此做了相關(guān)的構(gòu)想,過程如下圖所示:牛乳蛋白基因羊M受精卵產(chǎn)牛奶的羊N羊O

細(xì)胞核去核卵細(xì)胞小羊a羊1

小羊b羊2早期胚胎重組細(xì)胞小羊c羊31.圖中涉及的現(xiàn)代生物技術(shù)有：（至少寫出三種）２.小羊a、小羊b、小羊c的性狀是否相同，請(qǐng)說明理由３.小羊a與羊Ｎ的性狀是否相同，為什么？４.研究發(fā)現(xiàn)羊Ｎ細(xì)胞中線粒體發(fā)達(dá)，故而它的產(chǎn)奶率高，則小羊a會(huì)有這一優(yōu)良性狀嗎？為什么？５.有人設(shè)想將羊體細(xì)胞與牛體細(xì)胞進(jìn)行融合，以獲得新物種“羊－牛”，你認(rèn)為這一構(gòu)想能否實(shí)現(xiàn)？F

A

BCDE動(dòng)物細(xì)胞融合滅活的病毒顆粒黏附于細(xì)胞表面細(xì)胞膜被病毒顆粒穿通細(xì)胞膜連接細(xì)胞融合，形成雜種細(xì)胞主要用于制備單克隆抗體獲得雜種植株用途物理、化學(xué)方法（同左）滅活的病毒物理（離心、振蕩、電刺激）化學(xué)（聚乙二醇）誘導(dǎo)方法使細(xì)胞分散后誘導(dǎo)細(xì)胞融合去除細(xì)胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合細(xì)胞融合的方法細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞膜的流動(dòng)性、植物細(xì)胞全能性原理動(dòng)物細(xì)胞融合植物體細(xì)胞雜交比較項(xiàng)目植物、動(dòng)物細(xì)胞融合的比較(三）單克隆抗體

抗體

抗原動(dòng)物體內(nèi)刺激效應(yīng)B抗原不純抗體不純篩選單一效應(yīng)B細(xì)胞不能增值，產(chǎn)生大量抗體特異性差、純度低；產(chǎn)量低、反應(yīng)不夠靈敏(三）單克隆抗體設(shè)計(jì)方案：一個(gè)B淋巴細(xì)胞－－只分泌一種特異性抗體小鼠骨髓瘤細(xì)胞－－能無限增殖-化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體。雜種細(xì)胞

？

？誘導(dǎo)其融合的方法有哪些？(三）單克隆抗體1、制備過程：？AA型、BB型AB型雜交瘤細(xì)胞能產(chǎn)生特定抗體篩選

相應(yīng)抗原

B淋巴細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞篩選

2.單克隆抗體的應(yīng)用：①在基礎(chǔ)理論研究中具有重要意義②在疾病診斷、治療和預(yù)防方面，