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實驗三機(jī)體天然免疫功能測定實驗內(nèi)容吞噬作用(玻片示教)溶菌酶實驗(1個平板/組)補(bǔ)體經(jīng)典途徑激活實驗——溶血反應(yīng)
(1份/組)1二、天然免疫的組成1、屏障結(jié)構(gòu)
(1)體表屏障:物理屏障化學(xué)屏障生物學(xué)屏障(2)體內(nèi)屏障結(jié)構(gòu)全身淋巴結(jié)屏障血-腦屏障
血-胎屏障22.參與天然免疫的效應(yīng)分子
防御素補(bǔ)體系統(tǒng)細(xì)胞因子溶菌酶其他效應(yīng)分子33.參與天然免疫的效應(yīng)細(xì)胞吞噬細(xì)胞NK細(xì)胞T細(xì)胞B1細(xì)胞(CD5+)肥大細(xì)胞NKT細(xì)胞上皮細(xì)胞及其附屬成分4一、吞噬細(xì)胞及吞噬作用吞噬作用是指白細(xì)胞游出到炎癥灶,吞噬病原體以及組織碎片的過程。完成此功能的吞噬細(xì)胞主要有兩種,其吞噬異物的過程基本相同,但其結(jié)構(gòu)和化學(xué)成分則有所不同。中性粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞
5實驗方法:中性粒細(xì)胞的吞噬作用金黃色葡萄球菌1-2ml,注入小白鼠腹腔內(nèi)5小時后,解剖,腹腔液涂片,染色觀察小吞噬細(xì)胞吞噬金黃色葡萄球菌的現(xiàn)象6實驗方法:巨噬細(xì)胞的吞噬作用10%雞紅細(xì)胞懸液注入小白鼠腹腔內(nèi)分別于6小時抽取腹腔液涂片,染色觀察巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞的現(xiàn)象7二、溶菌酶試驗溶菌酶是正常體液與分泌液中所含的一種低分子量的堿性蛋白質(zhì),主要來源于巨噬細(xì)胞,是天然免疫中一種重要的體液殺菌成分。肽聚糖是細(xì)菌細(xì)胞壁中的重要成分,溶菌酶能夠水解肽聚糖從而使細(xì)菌溶解。細(xì)革蘭氏陽性:溶解菌革蘭氏陰性:肽聚糖外面有一層脂多糖和脂蛋白,一般情況下不受溶菌酶的影響。81、實驗室準(zhǔn)備:(1)帶菌平板的準(zhǔn)備:處理好溶壁微球菌加入瓊脂內(nèi),到平板,冷凝備用。(2)每平板打4個小孔,如圖。123492、同學(xué)們操作步驟:清水漱口將唾液涂于空平板中用吸管吸出,按下圖滴入孔內(nèi)37℃過夜明天上午測量溶菌環(huán)的直徑,記錄分析104123PBS陰性對照雞蛋清陽性對照3,4加入唾液標(biāo)本11三、補(bǔ)體溶血反應(yīng)原理:補(bǔ)體經(jīng)過經(jīng)典途徑激活后產(chǎn)生溶解細(xì)胞等作用。RBC(Ag)+溶血素(Ab)+補(bǔ)體紅細(xì)胞溶解12方法:
管號2%紅細(xì)胞溶血素補(bǔ)體生理鹽水結(jié)果10.250.250.250.2520.250.25----0.530.25----0.250.540.25--------0.75室溫15-30min后看結(jié)果13結(jié)果與判斷紅細(xì)胞溶解,液體變?yōu)榧t色透明(+)不溶解,液體均勻渾濁或有少量紅細(xì)胞沉于管底(-)14細(xì)胞免疫功能測定
E玫瑰花環(huán)花環(huán)形成實驗(玻片示教)T淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化實驗(玻片示教)15一、細(xì)胞免疫功能測定檢測免疫細(xì)胞的數(shù)量和功能,是判斷集
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