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實(shí)驗(yàn)六線粒體和液泡系的超活染色與觀察一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?、觀察動(dòng)植物活細(xì)胞內(nèi)線粒體、液泡系的形態(tài)數(shù)量與分布;2、學(xué)習(xí)一些細(xì)胞器的超活染色技術(shù)。二、實(shí)驗(yàn)原理細(xì)胞的各項(xiàng)活動(dòng)所需要的能量,主要通過(guò)線粒體呼吸作用來(lái)提供。活體染色是應(yīng)用無(wú)毒或毒性較小的染色劑真實(shí)地顯示活細(xì)胞內(nèi)某些結(jié)構(gòu)而又很少影響細(xì)胞生命活動(dòng)的一種染色方法。詹納斯綠B是線粒體的專(zhuān)一性活體染色劑,線粒體中細(xì)胞色素氧化酶使染料保持氧化狀態(tài)(即有色狀態(tài))呈藍(lán)綠色,而在周?chē)募?xì)胞質(zhì)中染料被還原,成為無(wú)色狀態(tài)。中性紅為弱堿性染料,3-氨基-6甲氨基-2-甲基吩嗪鹽酸鹽。對(duì)液泡系(即高爾基體)的染色有專(zhuān)一性,只將活細(xì)胞中的液泡系染成紅色,細(xì)胞核與細(xì)胞質(zhì)完全不著色,這可能是與液泡中某些蛋白質(zhì)有關(guān)。三、實(shí)驗(yàn)用品1、器材
顯微鏡、恒溫水浴鍋、剪刀、鑷子、刀片、載玻片、蓋玻片、吸管、牙簽、吸水紙.
2、試劑(1)Ringer溶液(2)10%,1/3000中性紅溶液(3)1%,1/5000詹納斯綠B溶液四、實(shí)驗(yàn)材料
人口腔上皮細(xì)胞洋蔥鱗莖內(nèi)表皮綠豆幼根根尖五、實(shí)驗(yàn)步驟1、人口腔粘膜上皮細(xì)胞線粒體的超活染色與觀察
清潔載玻片放在37℃恒溫水浴鍋的金屬板上
↓
滴2滴1/5000詹納斯綠B染液
↓
用牙簽口腔頰粘膜處稍用力刮取上皮細(xì)胞
↓
刮下的粘液狀物放到載玻片的染液滴中
↓
染色10~l5min(注意不可使染液干燥,必要時(shí)可再加滴染液)
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