口腔扁平苔蘚的發(fā)病機(jī)制及趨化因子研究進(jìn)展

扁平口腔疾?。╫lp）是一種常見的口腔粘膜疾病之一。其主要病理變化為基底細(xì)胞層的液化變化率，以及表皮固定層中的大量淋巴結(jié)呈帶狀濕潤(rùn)。WHO將之定義為癌前狀態(tài),OLP的病因及發(fā)病機(jī)制目前仍不明確,但大量研究證實(shí)OLP的發(fā)生發(fā)展與T細(xì)胞介導(dǎo)的免疫應(yīng)答密切相關(guān)。趨化因子是一類特殊的細(xì)胞因子,在淋巴細(xì)胞的遷移和激活中起著極其重要的作用。研究趨化因子及其受體在OLP中的作用,有助于我們從新的角度認(rèn)識(shí)OLP的發(fā)病機(jī)制并為其治療提供新的途徑。1趨化因子檢測(cè)趨化因子是一類能趨化細(xì)胞定向移動(dòng)的可誘導(dǎo)的分泌型的小分子分泌蛋白,相對(duì)分子質(zhì)量約為8～10×103。根據(jù)其N端的半胱氨酸殘基結(jié)構(gòu)的不同,可將其分為CXC、CC、C和CX3C四個(gè)亞類,趨化因子通過與相應(yīng)靶細(xì)胞膜上的受體結(jié)合,在調(diào)節(jié)白細(xì)胞定向移動(dòng)、淋巴細(xì)胞歸巢、免疫應(yīng)答等眾多生理病理過程中起著非常重要的作用。根據(jù)趨化因子的分類,趨化因子受體也分為四類,即CC類受體CCR、CXC類受體CXCR、C類受體CR和CX3C類受體CX3CR。2009年,Bonecchi等對(duì)趨化因子及其受體進(jìn)行了綜述,同時(shí)還列舉了表達(dá)各種趨化因子受體的炎性細(xì)胞。2010年,Lazennec等對(duì)此進(jìn)行了補(bǔ)充。2ip-10和cxcr3在治療現(xiàn)有例外發(fā)育中的作用2.1CXC型趨化因子及其受體與OLPCXC型趨化因子,又稱α亞家族,人的CXC型趨化因子家族的編碼基因位于染色體4q12-21,其特征為第一、第二個(gè)半胱氨酸殘基之間隔有一個(gè)其他氨基酸,主要功能是促進(jìn)中性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞的的游走和趨化。典型代表有γ干擾素誘導(dǎo)蛋白-10(interferon-γ-inducibleprotein-10,IP-10)即CXCL10、γ干擾素誘導(dǎo)性單核因子(monokineinducedbyinterferon-γ,MIG)即CXCL9、γ干擾素誘導(dǎo)性T細(xì)胞α趨化因子(interferon-γ-inducibleT-cell-α-chemoattractant,I-TAC)即CXCL11。IP-10對(duì)T細(xì)胞、B細(xì)胞、單核巨噬細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞、NK細(xì)胞等有較強(qiáng)的趨化功能和活化作用,對(duì)于正常生理?xiàng)l件下淋巴細(xì)胞的循環(huán)、代謝和數(shù)量的穩(wěn)定及免疫損傷均有重要作用。CXCR3是IP-10的惟一受體,在活化的T細(xì)胞、CD45RO+的記憶T細(xì)胞及NK細(xì)胞高表達(dá),在靜止的T細(xì)胞、B細(xì)胞、單核細(xì)胞及粒細(xì)胞上表達(dá)水平較低。IP-10與靶細(xì)胞上的相應(yīng)受體相互作用,通過一系列信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑介導(dǎo)免疫細(xì)胞的遷移、活化,在許多疾病的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮重要作用。有學(xué)者發(fā)現(xiàn)在結(jié)核菌素試驗(yàn)陽(yáng)性患者的滴注局部有大量淋巴細(xì)胞聚集,這些聚集的淋巴細(xì)胞80%為CD4+T細(xì)胞,且高表達(dá)IFN-γ。試驗(yàn)結(jié)果顯示結(jié)核菌素滴注的局部分泌了大量的IP-10,其與細(xì)胞上的受體CXCR3結(jié)合,趨化炎性細(xì)胞至結(jié)核菌素周圍,從而導(dǎo)致炎性反應(yīng)的發(fā)生。IP-10的這種促炎作用同樣表現(xiàn)在OLP中,Iijima等發(fā)現(xiàn)不僅OLP上皮角質(zhì)形成細(xì)胞強(qiáng)烈表達(dá)CXCR3及其配體IP-10,浸潤(rùn)區(qū)的CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞也主要表達(dá)IP-10。結(jié)果提示,IP-10及其受體CXCR3在CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞向病損區(qū)的浸潤(rùn)及募集中起著重要作用。Wenzel等人的研究也發(fā)現(xiàn)了IP-10在LP病損區(qū)的強(qiáng)表達(dá),且與病損區(qū)表達(dá)CXCR3的T淋巴細(xì)胞關(guān)系密切。表達(dá)CXCR3的T淋巴細(xì)胞數(shù)目與病損區(qū)的粒酶B的數(shù)目有關(guān),粒酶B是殺傷性T淋巴細(xì)胞(CTL)和NK細(xì)胞顆粒中最重要的絲氨酸蛋白酶,通過Caspases依賴途徑、直接入核途徑及不依賴Caspases的胞漿途徑,啟動(dòng)CTL介導(dǎo)靶細(xì)胞凋亡,促進(jìn)OLP的發(fā)生及遷延。除IP-10外,CXCR3還是MIG/CXCL9和I-TAC/CXCL11的主要受體。MIG不僅具有趨化激活T細(xì)胞的功能,而且還可以趨化NK細(xì)胞和B細(xì)胞,參與體內(nèi)次級(jí)二淋巴器官中T或B細(xì)胞的成熟,促進(jìn)免疫細(xì)胞間的相互作用。I-TAC主要對(duì)T細(xì)胞有趨化作用,尤其是Thl細(xì)胞。McColl等經(jīng)皮膚給老鼠注射I-TAC能夠誘導(dǎo)T細(xì)胞向注射部位遷移,并且這種作用能被抗CXCR3抗體所阻斷。I-TAC不僅對(duì)活化的T細(xì)胞而且對(duì)未活化的T細(xì)胞也具有趨化作用,它們很可能是募集血液中T細(xì)胞向炎癥部位游走的重要因素。Ichimura等運(yùn)用DNA微陣列和RT-PCR等技術(shù)分析OLP患者上皮層和正常牙齦上皮趨化因子及其受體的表達(dá),結(jié)果顯示,不僅IP-10的表達(dá)較正常人高,MIG和I-TAC的表達(dá)水平也明顯高于正常人,MIG、IP-10、I-TAC誘導(dǎo)浸潤(rùn)區(qū)T淋巴細(xì)胞表達(dá)CXCR3,提示CXCR3與其配體IP-10、MIG和I-TAC在OLP的發(fā)病機(jī)制中發(fā)揮著重要作用,其作用主要是通過CXCR3的信號(hào)通路介導(dǎo)實(shí)現(xiàn)。Wenzel等也發(fā)現(xiàn)MIG在LP病損區(qū)呈現(xiàn)強(qiáng)表達(dá)狀態(tài)。IL-8也是一種CXC型趨化因子,主要表達(dá)于單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、中心粒細(xì)胞、成纖維細(xì)胞和角質(zhì)形成細(xì)胞等。IL-8對(duì)中性粒細(xì)胞有很強(qiáng)的趨化作用,同時(shí)也可介導(dǎo)T淋巴細(xì)胞的遷移。有報(bào)道指出,OLP患者血清和唾液中IL-8水平上升,可能會(huì)導(dǎo)致OLP的癥狀加重。此外,Ichimura等發(fā)現(xiàn)在OLP病損上皮中存在大量的朗格斯細(xì)胞(LC),OLP上皮表達(dá)較高水平的CXCL14。CXCL14能夠趨化多種炎性細(xì)胞在正?；蚰[瘤組織中的浸潤(rùn),如B細(xì)胞、單核細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞等。CXCL14對(duì)頭頸部鱗癌有明顯的抑癌作用。CXCL14可能參與了LC在OLP上皮的浸潤(rùn)以及CCL20的CCR6的相互作用。2.2CC型趨化因子及其受體與OLPCC型趨化因子又稱β亞家族,以第1、2個(gè)半胱氨酸殘基緊密相連為特征。人的CC型趨化因子家族基因位于染色體17q11-32,主要作用是對(duì)單核細(xì)胞、淋巴細(xì)胞及其他類型細(xì)胞的游走和趨化。其主要成員有單核細(xì)胞趨化蛋白-1(monocytechemoattractantprotein,MCP-1)、巨噬細(xì)胞炎性蛋白-1α(macrophageinflammatoryprotein,MIP-1α)、正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌的活性調(diào)節(jié)蛋白(regulated-uponactivationnormalTcellexpressedandsecreted,RANTES)即CCL5等。RANTES是CC型趨化因子家族中比較重要的一個(gè)。分子量為8KD,由CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、上皮細(xì)胞等多種細(xì)胞表達(dá),參與急、慢性炎癥反應(yīng)。與IP10一樣,RANTES在趨化因子及其受體信號(hào)通路以及Toll樣受體信號(hào)通路中,均起著非常重要的作用。Zhao等對(duì)OLP患者組與正常對(duì)照組的肥大細(xì)胞脫顆?，F(xiàn)象以及OLP病損區(qū)T細(xì)胞培養(yǎng)上清在肥大細(xì)胞脫顆粒中的作用進(jìn)行了研究,發(fā)現(xiàn)在OLP組約有60%的肥大細(xì)胞脫顆粒。OLP病損區(qū)T細(xì)胞分泌RANTES,RANTES可誘導(dǎo)人肥大細(xì)胞脫顆粒,脫顆粒的肥大細(xì)胞釋放TNF-α和組胺,TNF-α又可上調(diào)OLP病損區(qū)T細(xì)胞RANTES的分泌,這樣一個(gè)循環(huán)機(jī)制與OLP病變的遷延密切相關(guān)。之后他們又運(yùn)用免疫組化、RT-PCR和體外趨化試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)OLP病損區(qū)T細(xì)胞和肥大細(xì)胞分別表達(dá)RANTES和CCR1,OLP病損區(qū)T細(xì)胞培養(yǎng)上清不僅可上調(diào)CCR1mRNA在人白血病肥大細(xì)胞上的表達(dá),還可刺激人白血病肥大細(xì)胞的遷移,且這種遷移可被抗RANTES抗體所阻斷。這些發(fā)現(xiàn)意味著RANTES及其受體CCR1很可能參與了OLP炎癥細(xì)胞的聚集,且OLP病損區(qū)T細(xì)胞分泌的RANTES與肥大細(xì)胞到達(dá)OLP發(fā)病區(qū)域密切相關(guān)。Little等人報(bào)道在OLP患者約60%口腔黏膜角質(zhì)形成細(xì)胞表達(dá)ICAM-1。CD4+T細(xì)胞可通過ICAM-1和淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原-1,促進(jìn)上皮組織裂解。除此之外,24例OLP樣本中有21例角質(zhì)形成細(xì)胞還表達(dá)RANTES,而對(duì)照組沒有此現(xiàn)象。據(jù)此,作者認(rèn)為ICAM-1和RANTES在OLP患者上皮角質(zhì)形成細(xì)胞中的表達(dá)可能是OLP炎癥機(jī)制的一個(gè)重要因素。Iijima等的研究不僅發(fā)現(xiàn)OLP病損區(qū)T細(xì)胞CXCR3及其配體的高表達(dá),還觀察到CCR5及其配體RANTES的表達(dá)也較正常高,提示CCR5和RANTES相互作用,趨化T淋巴細(xì)胞向病變組織浸潤(rùn),導(dǎo)致OLP病變的發(fā)生和遷延。Spandau等的研究證實(shí),MIP-1α可加重扁平苔蘚的炎癥反應(yīng)。他們運(yùn)用免疫組化和原位雜交技術(shù)分析了LP病損區(qū)MIP-1α的表達(dá),發(fā)現(xiàn)MIP-1αmRNA呈現(xiàn)中度表達(dá),且浸潤(rùn)區(qū)內(nèi)主要是巨噬細(xì)胞、CD4+T細(xì)胞以及CD8+T細(xì)胞,CD4+T細(xì)胞的數(shù)量多于CD8+T細(xì)胞,該研究提示MIP-1α促進(jìn)了炎癥細(xì)胞向病損區(qū)的遷移。除了以上發(fā)現(xiàn),Ichimura等的研究顯示LC在OLP病損上皮的浸潤(rùn)除了有CXCL14的參與外,CCL20及其受體CCR6也起到了很重要的作用,控制了LC向OLP病損上皮的浸潤(rùn)。Christopherson等發(fā)現(xiàn)CCL21在扁平苔蘚等多種自身免疫性皮膚病中呈現(xiàn)高表達(dá),其受體CCR7在病損區(qū)浸潤(rùn)T細(xì)胞上也呈強(qiáng)表達(dá)狀態(tài),而表達(dá)CCR7的T細(xì)胞主要是CD45RO表型。作者認(rèn)為CCL21/CCR7很可能是一個(gè)新的有效治療T細(xì)胞介導(dǎo)的自身免疫性皮膚病的靶點(diǎn)。2.3其他類型趨化因子及其受體Fractalkine(Fkn)又稱CX3CL1,是Bazan等于1997年首先發(fā)現(xiàn)的趨化因子,它是CXC亞家族唯一的成員,其編碼基因位于16號(hào)染色體。Fkn主要以兩種形式存在:膜結(jié)合型和溶解型糖蛋白。Fkn主要表達(dá)在活化的T細(xì)胞上,不僅具有對(duì)T細(xì)胞和單核細(xì)胞的趨化功能,同時(shí)還充當(dāng)黏附分子的角色。CX3CR1是Fkn的唯一受體,與Fkn高親和力結(jié)合,通過介導(dǎo)細(xì)胞黏附和跨膜轉(zhuǎn)移調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞的游走。Sugaya等運(yùn)用RT-PCR、蛋白印跡法和免疫染色等技術(shù)觀察Fkn在人表皮角質(zhì)形成細(xì)胞上的表達(dá),發(fā)現(xiàn)FknmRNA及其蛋白在扁平苔蘚的角質(zhì)形成細(xì)胞的胞質(zhì)中呈現(xiàn)強(qiáng)表達(dá),其受體CX3CR1在NK細(xì)胞、單核細(xì)胞、小膠質(zhì)細(xì)胞、CD4+T和CD8+T細(xì)胞表面都有表達(dá),且TNF-a和IFN-r聯(lián)合可增強(qiáng)Fkn在角質(zhì)形成細(xì)胞上的表達(dá)。該結(jié)果意味著Fkn在LP的發(fā)病機(jī)制中具有重要作用,阻斷Fkn-CX3CR1系統(tǒng)將是治療LP的一個(gè)靶點(diǎn)。綜