2023/10/15Copyright?Jiangyong轉(zhuǎn)基因西紅柿請您欣賞2023/10/15Copyright?Jiangyong抗蟲害作物2023/10/15Copyright?Jiangyong2023/10/15Copyright?Jiangyong番木瓜優(yōu)良抗病品種2023/10/15Copyright?Jiangyong金大米2023/10/15Copyright?Jiangyong地雷探測草擬南芥2023/10/15Copyright?Jiangyong不會引起過敏的大豆2023/10/15Copyright?Jiangyong轉(zhuǎn)基因芥菜可減輕土壤污染2023/10/15Copyright?Jiangyong彩色玉米2023/10/15Copyright?Jiangyong巨型鮭魚2023/10/15Copyright?Jiangyong熒光魚2023/10/15Copyright?Jiangyong超級奶牛2023/10/15Copyright?Jiangyong培育出人耳的小鼠2023/10/15Copyright?Jiangyong轉(zhuǎn)基因豬2023/10/15Copyright?Jiangyong基因工程1944年確認(rèn)了遺傳的物質(zhì)基礎(chǔ)是DNA。1953年JWatson和FCricK提出了DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)模型，1958年MMesselson和FＷStahl證實了DNA半保留復(fù)制的機制，揭示了生物界遺傳性狀能世代遺傳的分子奧秘。重要的里程碑：雙螺旋結(jié)構(gòu)的確立

1962年WSzybalski和ESzybalski

用人類DNA去轉(zhuǎn)化人類細(xì)胞,發(fā)現(xiàn)Ca2+有刺激DNA轉(zhuǎn)移入細(xì)胞的作用，是人工轉(zhuǎn)移遺傳物質(zhì)給其它細(xì)胞的第1次嘗試。

1965年,Jacobf基因操縱子.1968年,NirenbergM,遺傳密碼.1967年Nirenberg提出遺傳工程可用于人類的基因治療。

60年代分子生物學(xué)作為一門獨立學(xué)科正式出現(xiàn)70年代初Graessmann和Dicumako莫定了用顯微注射法轉(zhuǎn)移基因。

1972年Grahant等對磷酸鈣介導(dǎo)的DNA轉(zhuǎn)移過程進(jìn)行了詳細(xì)的研究，使這技術(shù)能被普遍接受和應(yīng)用。

1972年,P.Berg:構(gòu)建第一個DNA重組分子

2種病毒DNA的重組

1973年,S.S.Cohen:第一個基因克隆實驗基因工程的開始

1977年，基因工程產(chǎn)品的出現(xiàn)

H.W.Boyer,第一個基因工程產(chǎn)品(SS)

somatostatin

生長素釋放抑素70年代出現(xiàn)基因工程并有初步成果基因重組技術(shù)80年代的代表性研究領(lǐng)域基因工程產(chǎn)品的開發(fā)應(yīng)用定點突變的研究與應(yīng)用癌基因的發(fā)現(xiàn)

DNA-蛋白質(zhì)分子相互辨認(rèn)

PCR技術(shù)的出現(xiàn)人類基因組計劃開始醞釀90年代基因診斷技術(shù)漸趨成熟基因治療合法化人類基因計劃的啟動分子生物學(xué)各分支學(xué)科的建立與發(fā)展從20世紀(jì)50年代起，分子生物學(xué)領(lǐng)域的研究成果共獲得40項諾貝爾醫(yī)學(xué)-生理科學(xué)獎，說明分子生物學(xué)在生命科學(xué)研究中的重要性

根據(jù)桑格法開發(fā)的DNA自動定序機使一周（24小時運轉(zhuǎn)）解讀100萬甚至幾百萬個堿基成為可能。它為“人類基因組計劃”立下了汗馬功勞

2023/10/15Copyright?Jiangyong理論基礎(chǔ)DNA是遺傳物質(zhì)的證明DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)和中心法則的確立遺傳密碼的破譯工程技術(shù)基因轉(zhuǎn)移載體的發(fā)現(xiàn)工具酶的發(fā)現(xiàn)DNA合成和測序技術(shù)的發(fā)現(xiàn)DNA體外重組的實現(xiàn)重組DNA表達(dá)實驗的成功第一例轉(zhuǎn)基因動物的問世PCR技術(shù)的發(fā)明基因工程：就是重組DNA技術(shù)，指在體外將不同來源的DNA進(jìn)行剪切和重組，形成雜合DNA或稱嵌合DNA分子，然后將其導(dǎo)入特定的宿主細(xì)胞，得到大量擴(kuò)增和表達(dá)，使宿主細(xì)胞獲得新的遺傳特性，產(chǎn)生新的基因產(chǎn)物。2023/10/15Copyright?Jiangyong已學(xué)：基因工程的“專用工具”基因的剪刀——限制性核酸內(nèi)切酶基因的針線——DNA連接酶基因的運輸工具——運載體分子手術(shù)刀----限制性核酸內(nèi)切酶(限制酶)磷酸二酯鍵EcoRI、SmaI限制酶提醒①切割的化學(xué)鍵為磷酸二酯鍵。②在切割目的基因和運載體時要求用同一種限制酶，目的是產(chǎn)生相同的黏性末端。③將一個基因從DNA分子上切割下來，需要2個限制酶，同時產(chǎn)生4個黏性末端2023/10/15Copyright?Jiangyong限制性核酸內(nèi)切酶(限制酶)來源：主要從原核生物中分離化學(xué)本質(zhì)：蛋白質(zhì)作用：能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開。特性：特異性。即限制酶識別特定的脫氧核苷酸序列，切割特定位點切割后的DNA末端：黏性末端；平末端分子縫合針----DNA連接酶功能：將切下來的DNA片段拼接成新的DNA分子種類T4DNA連接酶：既能“縫合”雙鏈DNA片段互補的黏性末端，也能“縫合”雙鏈DNA的平末端（效率低）E·coliDNA連接酶：只能將雙鏈片段互補的黏性末端連接常用載體質(zhì)粒λ噬菌體的衍生物動植物病毒基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體（分子運輸車）2023/10/15Copyright?Jiangyong2023/10/15Copyright?Jiangyong(1)載體是基因運輸工具，在基因操作過程中，使用載體有兩個目的：一是用它作為運載工具，將目的基因送到宿主細(xì)胞中去；二是利用它在宿主細(xì)胞內(nèi)對目的基因進(jìn)行大量復(fù)制。

(2)種類：質(zhì)粒(既存在于原核生物細(xì)菌中，也存在