ABO血型鑒定和交叉配血實(shí)驗(yàn)[實(shí)驗(yàn)?zāi)康腯

觀察紅細(xì)胞凝集現(xiàn)象。

學(xué)習(xí)ABO血型鑒定方法，掌握血型鑒定原理。

[實(shí)驗(yàn)原理]

ABO血型是根據(jù)紅細(xì)胞表面存在的凝集原決定的。存在A凝集原的稱為A血型，存在B凝集原的稱為B血型。而血清中還存在凝集素。當(dāng)A凝集原與抗A凝集素相遇或B凝集原與抗B凝集素相遇時，會發(fā)生紅細(xì)胞凝集反應(yīng)。一般A型標(biāo)準(zhǔn)血清中含有抗B凝集素，B型標(biāo)準(zhǔn)血清中含有抗A凝集素，因此可以用標(biāo)準(zhǔn)血清中的凝集素與被測者紅細(xì)胞反應(yīng)，以確定其血型。

同種動物不同個體的紅細(xì)胞凝集稱為同族血細(xì)胞凝集作用。不同動物的血液互相混合有時也可產(chǎn)生紅細(xì)胞凝集，稱為異族血細(xì)胞凝集作用。對于動物的天然血型抗體了解不多，而且免疫效價(jià)也很低，所以同種動物第一次輸血，一般不會引起嚴(yán)重后果。但第二次輸血就必須進(jìn)行交配試驗(yàn)，才能決定是否能相互輸血。

[實(shí)驗(yàn)對象]

正常人。

[實(shí)驗(yàn)藥品]

A型B型標(biāo)準(zhǔn)血清。

[儀器器械]

雙凹玻片，采血針，竹簽，75%酒精棉球，干棉球，玻璃蠟筆（記號筆），尖頭滴管，顯微鏡。

[實(shí)驗(yàn)方法與步驟]

1.ABO血型的鑒定：

（1）取雙凹玻片一塊，在兩端分別標(biāo)上A和B，中央標(biāo)記受試者的號碼。

（2）在A端和B端的凹面中分別滴上相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)血清少許。

圖6.9-1ABO血型鑒定示意圖

（3）75%酒精棉球消毒無名指端，用采血針刺破指端，用消毒后的尖頭滴管吸取少量血（也可用紅細(xì)胞懸浮液，見下述），分別與A端和B端凹面中的標(biāo)準(zhǔn)血清混合，放置1～2min后，能肉眼觀察有無凝血現(xiàn)象，肉眼不易分辨的用顯微鏡觀察。

（4）根據(jù)凝集現(xiàn)象的有無判斷血型（圖6.9-1）。

2.交叉配血實(shí)驗(yàn)：

（1）分別對供血動物和受血動物消毒、靜脈取血，制備成血清和紅細(xì)胞懸浮液。紅細(xì)胞懸浮液是將受檢者的血液一滴，加入裝有生理鹽水約1ml的小試管中，即為2%的紅細(xì)胞懸浮液。加蓋備用。

（2）取雙凹玻片一塊，在兩端分別標(biāo)上供血動物和受血動物的名稱或代號，分別滴上它們的血清少許。

（3）將供血者的紅細(xì)胞懸浮液吸取少量，滴到受血者的血清中（稱為主側(cè)配血,圖6.9-2）；將受血者的紅細(xì)胞懸浮液吸取少量，滴入供血者的血清中（稱為次側(cè)配血），混合。放置10～30

min后，肉眼觀察有無凝集現(xiàn)象，肉眼不易分辨的用顯微鏡觀察。如果兩次交叉配血均無凝集反應(yīng)，說明配血相合，能夠輸血。如果主側(cè)發(fā)生凝集反應(yīng)，說明配血不合，不論次側(cè)配血如何都不能輸血。如果僅次側(cè)配血發(fā)生凝集反應(yīng)，只有在緊急情況下才有可能考慮是否輸血。

[注意事項(xiàng)]

1.指端、采血針和尖頭滴管務(wù)必做好消毒準(zhǔn)備。做到一人一針，不能混用。使用過的物品（包括竹簽）均應(yīng)放入污物桶，不得再到采血部位采血。

2.精消毒部位自然風(fēng)干后再采血，血液容易聚集成滴，便于取血。取血不宜過少，以免影響觀察。

3.采血后要迅速與標(biāo)準(zhǔn)血清混