試卷第=page11頁，共=sectionpages33頁試卷第=page11頁，共=sectionpages33頁甘肅省蘭州市一中2022-2023學(xué)年高二4月期中生物試題學(xué)校:___________姓名：___________班級(jí)：___________考號(hào)：___________一、單選題1．葡萄酒呈現(xiàn)紅色的原因（

）A．在發(fā)酵過程中產(chǎn)生了紅色的物質(zhì)B．酒精發(fā)酵的最終產(chǎn)物C2H5OH是紅色的C．在發(fā)酵的最后程序中，加入了紅色的食用色素D．紅色葡萄皮中的色素溶解在發(fā)酵液中【答案】D【分析】1、參與果酒制作的微生物是酵母菌，其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型。果酒制作的原理：（1）在有氧條件下，反應(yīng)式如下：C6H12O6+6H2O+6O26CO2+12H2O+能量；（2）在無氧條件下，反應(yīng)式如下：C6H12O62CO2+2C2H5OH+能量。2、在發(fā)酵過程中，隨著酒精度的提高，紅葡萄皮上的色素進(jìn)入發(fā)酵液，使得葡萄酒成紅色?！驹斀狻緼、在發(fā)酵過程中并沒有產(chǎn)生紅色的物質(zhì)，A錯(cuò)誤；B、酒精發(fā)酵的最終產(chǎn)物C2H5OH是無色的，B錯(cuò)誤；C、在發(fā)酵的最后程序中并沒有加入紅色的食用色素，C錯(cuò)誤；D、在發(fā)酵過程中，隨酒精度數(shù)的提高，紅葡萄皮中的色素進(jìn)入發(fā)酵液，使葡萄酒呈現(xiàn)紅色，D正確。故選D。2．下列有關(guān)果酒、果醋和腐乳制作的敘述正確的是（

）A．家庭制作腐乳的菌種一般來自空氣中的毛霉孢子B．參與果酒發(fā)酵和果醋發(fā)酵的微生物都含有線粒體C．在腐乳裝瓶時(shí)自下而上隨層數(shù)的增加逐漸減少鹽量D．果酒制成后只需將裝置轉(zhuǎn)移至溫度較高的環(huán)境中即可制作果醋【答案】A【分析】多種微生物參與了豆腐的發(fā)酵，其中起主要作用的是毛霉?！驹斀狻緼、家庭制作的腐乳的菌種一般來自空氣中的毛霉孢子，毛霉可以產(chǎn)生蛋白酶、脂肪酶等，可以將蛋白質(zhì)、脂肪等分解成小分子物質(zhì)，A正確；B、參與果醋發(fā)酵的微生物為原核生物，無線粒體，B錯(cuò)誤；C、在腐乳裝瓶時(shí)自下而上隨層數(shù)的增加逐漸增加鹽量，C錯(cuò)誤；D、果酒制成后需要改變溫度，還要補(bǔ)充氧氣，D錯(cuò)誤。故選A?！军c(diǎn)睛】3．在制作果酒時(shí)，如果一直往發(fā)酵罐中通充足的氧氣，會(huì)發(fā)生何種現(xiàn)象（）A．酵母菌死亡，不產(chǎn)生酒精 B．酵母菌大量繁殖，產(chǎn)生較多的酒精C．酵母菌大量繁殖，不產(chǎn)生酒精 D．酵母菌數(shù)目較少，不產(chǎn)生酒精【答案】C【解析】制作果酒時(shí)，用到的微生物是菌酵母，單細(xì)胞真核微生物，它的代謝類型是兼性厭氧型（有氧時(shí)進(jìn)行繁殖，無氧時(shí)進(jìn)行酒精發(fā)酵），主要以出芽方式繁殖。【詳解】在制作果酒時(shí)，如果一直往發(fā)酵罐中通充足的氧氣，酵母菌大量繁殖，不產(chǎn)生酒精，ABD錯(cuò)誤，C正確。故選C。4．下列關(guān)于傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)應(yīng)用的敘述，正確的是（

）A．夏天開瓶后的紅酒容易變酸，主要是醋酸菌將糖分解成醋酸B．利用乳酸菌制作酸奶過程中，先通氣培養(yǎng)，后密封發(fā)酵C．腐乳制作過程中，毛霉等原核生物產(chǎn)生了蛋白酶和脂肪酶起發(fā)酵作用D．泡菜制作過程中的一段時(shí)間內(nèi)，亞硝酸鹽含量會(huì)先升高后下降【答案】D【分析】1、醋酸菌好氧型細(xì)菌，當(dāng)缺少糖源時(shí)和有氧條件下，可將乙醇（酒精）氧化成醋酸；當(dāng)氧氣、糖源都充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的葡萄糖分解成醋酸；醋酸菌生長(zhǎng)的最佳溫度是在30℃～35℃。2、參與腐乳制作的微生物主要是毛霉，其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型．腐乳制作的原理：毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可將脂肪分解成甘油和脂肪酸。3、泡菜的制作所使用的微生物是乳酸菌，代謝類型是異養(yǎng)厭氧型，在無氧條件下乳酸菌能夠?qū)⑹卟酥械钠咸烟茄趸癁槿樗??！驹斀狻緼、夏天開瓶后的紅酒，在有氧的條件下，空氣中的醋酸菌將乙醇變成乙醛而后變?yōu)橐宜幔瑢?dǎo)致紅酒變酸，A錯(cuò)誤；B、乳酸菌是厭氧菌，故利用乳酸菌制作酸奶過程中要密封發(fā)酵，不能通氣培養(yǎng)，B錯(cuò)誤；C、腐乳制作過程中，主要利用毛霉等真核生物產(chǎn)生的脂肪酶和蛋白酶進(jìn)行發(fā)酵，C錯(cuò)誤；D、泡菜制作過程中的一段時(shí)間內(nèi)，亞硝酸鹽含量先升高后下降，發(fā)酵10天以上的泡菜中亞硝酸鹽含量相對(duì)較低，可以食用，D正確。故選D。5．我國傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)是最早發(fā)展和應(yīng)用的食品加工技術(shù)之一，如酸菜、腐乳和釀酒等。以下相關(guān)說法錯(cuò)誤的是（

）A．腐乳發(fā)酵過程中起主要作用的是毛霉B．酸菜制作過程中，主要起作用的微生物是乳酸菌C．傳統(tǒng)發(fā)酵利用的微生物一般為天然存在的單一菌種D．果酒制成后轉(zhuǎn)移到溫度較高環(huán)境，通風(fēng)通氧后可以制作成果醋【答案】C【分析】傳統(tǒng)發(fā)酵：利用酵母菌發(fā)酵制造啤酒、果酒、工業(yè)酒精，乳酸菌發(fā)酵制造奶酪和酸牛奶，利用真菌大規(guī)模生產(chǎn)青霉素等都是這方面的例子。【詳解】A、腐乳發(fā)酵過程中起主要作用的是毛霉，毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可將脂肪分解成甘油和脂肪酸，A正確；B、酸菜制作過程中，主要起作用的微生物是乳酸菌，乳酸菌進(jìn)行無氧呼吸能產(chǎn)生乳酸，B正確；C、傳統(tǒng)發(fā)酵利用的微生物一般為天然存在的多種菌種，C錯(cuò)誤；D、果酒發(fā)酵是酵母菌作用的結(jié)果，果醋發(fā)酵是醋酸菌作用的結(jié)果，醋酸菌適宜的溫度比酵母菌高，且醋酸菌為好氧菌，因此果酒制成后轉(zhuǎn)移到溫度較高環(huán)境，通風(fēng)通氧后可以制作成果醋，D正確。故選C。6．微生物培養(yǎng)過程中，要十分重視無菌操作，現(xiàn)代生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中的許多方面也要進(jìn)行無菌操作，防止雜菌污染。下列無菌操作錯(cuò)誤的是（）A．接種時(shí)培養(yǎng)皿蓋只打開一條縫隙B．菌種和培養(yǎng)基使用前均需滅菌處理C．用接種環(huán)接種之前要在酒精燈焰上灼燒D．高壓蒸汽滅菌既能殺死微生物的營養(yǎng)體，也能殺死芽孢等休眠體【答案】B【分析】無菌技術(shù)的主要內(nèi)容：①對(duì)實(shí)驗(yàn)操作的空間、操作者的衣著和手，進(jìn)行清潔和消毒；②將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等器具進(jìn)行滅菌；③為避免周圍環(huán)境中微生物的污染，實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行；④實(shí)驗(yàn)操作時(shí)應(yīng)避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與周圍的物品相接觸?！驹斀狻緼、接種時(shí)用左手的拇指和食指將培養(yǎng)皿打開一條稍大于錐形瓶瓶口的縫隙即可，A正確；B、培養(yǎng)基在使用前需滅菌處理，但是菌種不能滅菌處理，否則菌種也會(huì)死亡，B錯(cuò)誤；C、用接種環(huán)接種之前要在酒精燈焰上灼燒，即灼燒滅菌，C正確；D、滅菌是指使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外一切微生物的細(xì)胞、芽孢和孢子的過程，常用的方法有灼燒滅菌、干熱滅菌和高圧蒸汽滅菌，D正確。故選B。7．下列與傳統(tǒng)發(fā)酵有關(guān)的微生物的比較中，不正確的是（）ABCD微生物酵母菌醋酸菌毛霉乳酸菌生物學(xué)分類真核生物原核生物真核生物原核生物代謝類型異養(yǎng)兼性厭氧型異養(yǎng)需氧型異養(yǎng)需氧型異養(yǎng)厭氧型適宜溫度18~30℃20~25℃15~18℃室溫主要用途釀酒、發(fā)面釀醋、酸奶制作腐乳制作泡菜A．A B．B C．C D．D【答案】B【分析】1、參與果酒制作的微生物是酵母菌，其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型。2、參與果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型．果醋制作的原理：當(dāng)氧氣、糖源都充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的果糖分解成醋酸；當(dāng)缺少糖源時(shí)，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿帷?、參與腐乳制作的微生物主要是毛霉，其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。4、泡菜的制作的原理：泡菜的制作離不開乳酸菌；在無氧條件下，乳酸菌將葡萄糖分解成乳酸。【詳解】A、酵母菌是一種真菌，屬于真核生物，其代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型，生存的適宜溫度為18~30℃，可用于釀酒、發(fā)面等，A正確；B、醋酸菌是一種原核生物，其代謝類型為異養(yǎng)需氧型，生存的適宜溫度為30～35℃，可用于釀醋，而參與酸奶制作的微生物主要是乳酸菌，B錯(cuò)誤；C、毛霉是一種真菌，屬于真核生物，其代謝類型為異養(yǎng)需氧型，生存的適宜溫度為15～18℃，可用于制作腐乳，C正確；D、乳酸菌是一種原核生物，其代謝類型為異養(yǎng)厭氧型，可用于制作泡菜，D正確。故選B。8．配制培養(yǎng)異養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基時(shí)，哪種不是必須添加的成分（）A．瓊脂 B．水 C．無機(jī)鹽 D．碳源【答案】A【分析】培養(yǎng)基，是指供給微生物、植物或動(dòng)物（或組織）生長(zhǎng)繁殖的，由不同營養(yǎng)物質(zhì)組合配制而成的營養(yǎng)基質(zhì)。一般都含有碳水化合物、含氮物質(zhì)、無機(jī)鹽（包括微量元素）、維生素和水等幾大類物質(zhì)。【詳解】水、無機(jī)鹽、碳源（能為異養(yǎng)生物提供碳源和能源）、氮源（能為生物生長(zhǎng)提供氮元素）等是培養(yǎng)基的基本成分，瓊脂是凝固劑，固體培養(yǎng)基才需要加入瓊脂，液體培養(yǎng)基不需要加入瓊脂。故選A。9．生物技術(shù)在食品加工中具有廣泛的應(yīng)用，如利用微生物釀制果酒。下列有關(guān)利用葡萄釀制果酒過程的敘述，錯(cuò)誤的是（

）A．適當(dāng)增加酵母菌的接種量，可以縮短發(fā)酵的時(shí)間B．酒精積累是導(dǎo)致發(fā)酵液中細(xì)菌數(shù)量降低的原因之一C．釀酒過程中發(fā)酵罐要始終處于密封狀態(tài)，以保證無氧的環(huán)境D．葡萄的品質(zhì)、酵母菌菌種的純度都會(huì)影響果酒的品質(zhì)【答案】C【分析】參與果酒制作的微生物是酵母菌，其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型?！驹斀狻緼、若適當(dāng)增加酵母菌的接種量，則可以縮短發(fā)酵的時(shí)間，A正確；B、酵母菌無氧呼吸產(chǎn)生酒精，酒精具殺菌作用，發(fā)酵液中酒精積累是細(xì)菌數(shù)量降低的原因之一，B正確；C、釀制果酒時(shí)，一般先通入空氣，以利于酵母菌大量繁殖。酒精發(fā)酵過程中會(huì)產(chǎn)生CO2，應(yīng)適時(shí)排放，C錯(cuò)誤；D、葡萄的品質(zhì)、酵母菌菌種的純度都會(huì)影響果酒的品質(zhì)，D正確。故選C。10．在制作泡菜的過程中，下列描述錯(cuò)誤的是（

）A．所用食鹽水的質(zhì)量百分比為5%～20%B．制作泡菜時(shí)，原料要接種乳酸菌C．鹽水入壇前要煮沸冷卻，以防污染D．在壇蓋邊沿的水槽中要注滿水，以保證壇內(nèi)的無氧環(huán)境【答案】B【分析】1、泡菜的制作所使用的微生物是乳酸菌，代謝類型是異養(yǎng)厭氧型，在無氧條件下乳酸菌能夠?qū)⑹卟酥械钠咸烟茄趸纸鉃槿樗帷?、泡菜的制作流程是：選擇原料、配置鹽水、調(diào)味裝壇、密封發(fā)酵?！驹斀狻緼、所配制鹽水的質(zhì)量百分比為5%～20%，鹽水煮沸，可除雜菌、防污染，A正確；B、制作泡菜用的是自然條件下的菌種，不需要接種乳酸菌，B錯(cuò)誤；C、鹽水入壇前要煮沸，可以殺死鹽水中的微生物，鹽水入壇前煮沸后冷卻，是為了防止殺死乳酸菌，C正確；D、乳酸菌的異化作用類型為厭氧型，在壇蓋邊沿的水槽中要注滿水，以保證壇內(nèi)的無氧環(huán)境，D正確。故選B?！军c(diǎn)睛】11．分別將100mL混有乳酸菌的牛奶，裝入甲（100mL）、乙（150mL）、丙（200mL）、丁（500mL）的四個(gè)錐形瓶中，加塞保存，其中最先發(fā)酵的是（

）A．甲 B．乙 C．丙 D．丁【答案】A【分析】乳酸菌屬于厭氧型細(xì)菌，只能進(jìn)行無氧呼吸，產(chǎn)生乳酸，釋放少量的能量?！驹斀狻咳樗峋荒苓M(jìn)行無氧呼吸，等量的牛奶裝入錐形瓶中，錐形瓶越小，錐形瓶中的氧氣越少，發(fā)酵進(jìn)行得越好，開始的越早，即A正確。故選A?！军c(diǎn)睛】12．下列關(guān)于無菌技術(shù)的敘述，錯(cuò)誤的是（

）A．實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)物在處理掉之前必須經(jīng)過滅菌處理B．在蘸取菌液前后均要將盛有菌液的試管口通過火焰灼燒C．細(xì)菌在一定的條件下可以通過芽孢進(jìn)行繁殖D．實(shí)驗(yàn)室中嚴(yán)格禁止喝水和吃食物【答案】C【分析】1、無菌技術(shù)的主要內(nèi)容：①對(duì)實(shí)驗(yàn)操作的空間、操作者的衣著和手，進(jìn)行清潔和消毒；②將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等器具進(jìn)行滅菌；③為避免周圍環(huán)境中微生物的污染，實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行；④實(shí)驗(yàn)操作時(shí)應(yīng)避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與周圍的物品相接觸。2、實(shí)驗(yàn)室常用的消毒方法：煮沸消毒；化學(xué)藥物消毒；紫外線消毒；實(shí)驗(yàn)室常用的滅菌方法：灼燒滅菌，干熱滅菌，高壓蒸汽滅菌?！驹斀狻緼、實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)物在處理掉之前必須經(jīng)過滅菌處理，以防污染環(huán)境，A正確；B、在蘸取菌液前后均要將盛有菌液的試管口通過火焰灼燒，防止雜菌污染試管中的菌液，B正確；C、細(xì)菌通過二分裂進(jìn)行繁殖，C錯(cuò)誤；D、實(shí)驗(yàn)室中嚴(yán)格禁止喝水和吃食物，以防微生物隨食物進(jìn)入人體內(nèi)，D正確。故選C。13．在“分離土壤中分解尿素的細(xì)菌”實(shí)驗(yàn)中，為判斷是否起到了分離效果，提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度，需要精心設(shè)置對(duì)照。對(duì)照組的設(shè)置方式為（）A．牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上接種相同土壤樣液B．牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上接種無菌水C．篩選分解尿素細(xì)菌的選擇培養(yǎng)基不接種D．篩選分解尿素細(xì)菌的選擇培養(yǎng)基上接種無菌水【答案】A【分析】對(duì)照實(shí)驗(yàn)：在探究某種條件對(duì)研究對(duì)象的影響時(shí)，對(duì)研究對(duì)象進(jìn)行的除了該條件不同以外，其他條件都相同的實(shí)驗(yàn)。根據(jù)變量設(shè)置一組對(duì)照實(shí)驗(yàn)，使實(shí)驗(yàn)結(jié)果具有說服力。一般來說，對(duì)實(shí)驗(yàn)變量進(jìn)行處理的，就是實(shí)驗(yàn)組，沒有處理是的就是對(duì)照組?！驹斀狻緼、本實(shí)驗(yàn)中，目的是為了判斷選擇培養(yǎng)基是否起到了分離效果，故應(yīng)用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基作為對(duì)照，接種相同土壤樣液觀察菌落的多少，通過兩種培養(yǎng)基上菌落的多少，可判斷選擇培養(yǎng)基是否起到了分離效果，A正確；B、牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上接種無菌水可用于檢測(cè)培養(yǎng)基是否合格，與題意不符，B錯(cuò)誤；C、篩選分解尿素細(xì)菌的選擇培養(yǎng)基是實(shí)驗(yàn)組，應(yīng)該接種，否則無法達(dá)到篩選的目的，C錯(cuò)誤；D、篩選分解尿素細(xì)菌的選擇培養(yǎng)是為了增加細(xì)菌的數(shù)量，保證篩選的成功，不是對(duì)照組，故應(yīng)接種適量適宜濃度的土壤樣液，D錯(cuò)誤。故選A。14．下列有關(guān)平板劃線操作的敘述，不正確的是（

）A．在第二次劃線時(shí)，接種環(huán)上的菌種直接來源于菌液B．第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物C．每次劃線前，灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后接種環(huán)上殘留的菌種D．劃線結(jié)束后，灼燒接種環(huán)能殺死接種環(huán)上的菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者【答案】A【解析】1、平板劃線法是指通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種，逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面，最后得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而來的菌落。2、平板劃線法可用來分離微生物，但不能用于微生物的計(jì)數(shù)?！驹斀狻緼、在第二區(qū)域內(nèi)劃線時(shí)，接種環(huán)上的菌種直接來源于第一區(qū)域的劃線末端，A錯(cuò)誤；B、接種前先要用酒精燈火焰灼燒接種環(huán)，目的是避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物，B正確；C、每次劃線前，灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后接種環(huán)上殘留的菌種，從而保證第一次劃線后的每次劃線的菌種來自上一次劃線的末端，C正確；D、劃線結(jié)束后，灼燒接種環(huán)能殺死接種環(huán)上的菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者，D正確。故選A。15．黑茶是一種后發(fā)酵茶，通常用采摘的鮮茶經(jīng)過數(shù)道工序制成，富含多肽、氨基酸、維生素等營養(yǎng)物質(zhì)。黑茶剛制成時(shí)有酒香氣，滑潤(rùn)甘甜，保存時(shí)間越久的老茶，茶香味越濃厚。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A．黑茶制作過程利用了酵母菌等多種微生物進(jìn)行發(fā)酵B．發(fā)酵過程中發(fā)酵條件變化會(huì)影響微生物的生長(zhǎng)繁殖和代謝途徑C．黑茶發(fā)酵可以將蛋白質(zhì)等大分子轉(zhuǎn)化成小分子有機(jī)物D．新茶發(fā)酵完成后要進(jìn)行滅菌并密封，有利于茶的長(zhǎng)期保存【答案】D【分析】酒精發(fā)酵是在無氧條件下，微生物（如酵母菌）分解葡萄糖等有機(jī)物，產(chǎn)生酒精、二氧化碳等不徹底氧化產(chǎn)物，同時(shí)釋放出少量能量的過程。【詳解】A、黑茶剛制成時(shí)有酒香氣，說明黑茶制作過程中有酵母菌（無氧呼吸可以產(chǎn)生酒精）的參與，A正確；B、發(fā)酵一般為微生物的無氧呼吸（部分為有氧呼吸），溫度、pH、氧氣含量等等發(fā)酵條件，都會(huì)影響到微生物的生長(zhǎng)繁殖和代謝途徑，B正確；C、黑茶富含多肽、氨基酸、維生素等營養(yǎng)物質(zhì)，說明黑茶發(fā)酵可以將蛋白質(zhì)等大分子轉(zhuǎn)化成小分子有機(jī)物，C正確；D、老茶保存過程中仍在發(fā)酵，因此新茶發(fā)酵完成后進(jìn)行滅菌并密封不利于進(jìn)一步發(fā)酵，D錯(cuò)誤。故選D。二、多選題16．下圖為實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)和純化大腸桿菌過程中的部分操作步驟，下列說法正確的是（）

A．操作③到④的過程中，接種環(huán)共灼燒處理了5次B．制備①步驟使用的培養(yǎng)基一般是經(jīng)過高壓蒸汽滅菌過的C．②③④步驟操作時(shí)只需要在接種前和劃線結(jié)束后灼燒滅菌D．接種結(jié)束后，將④倒置培養(yǎng)，皿底上標(biāo)注菌種及接種日期等信息【答案】BD【分析】由圖可知，①是倒平板，②是用接種環(huán)沾取菌液，③是進(jìn)行平板劃線，④是培養(yǎng)。制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的基本過程為計(jì)算、稱量、溶化、調(diào)pH、滅菌、倒平板五個(gè)步驟?！驹斀狻緼、接種環(huán)在每次接種前和接種結(jié)束后都要通過灼燒來滅菌，所以完成步驟④中5次劃線操作前都要灼燒滅菌，接種結(jié)束后還需灼燒滅菌1次，防止造成污染，由此可見，完成步驟④共需灼燒接種環(huán)6次，A錯(cuò)誤；B、①是倒平板，制備①步驟使用的培養(yǎng)基一般是經(jīng)過高壓蒸汽滅菌過的，B正確；C、②③④步驟操作時(shí)需要在酒精燈火焰旁進(jìn)行，防止被雜菌污染，同時(shí)在接種前和每次劃線結(jié)束后都要灼燒滅菌，C錯(cuò)誤；D、圖中操作結(jié)束后，為了防止培養(yǎng)皿蓋上的水珠滴落到培養(yǎng)基造成污染，需要將培養(yǎng)皿倒置培養(yǎng)，且同時(shí)在培養(yǎng)基皿底標(biāo)注菌種及接種日期等信息，D正確。故選BD。三、單選題17．紙片擴(kuò)散法藥物敏感試驗(yàn)是在涂有細(xì)菌的瓊脂平板培養(yǎng)基上按照一定要求貼上浸有不同種類抗生素的紙片，培養(yǎng)一段時(shí)間后測(cè)量抑菌圈的大小，從而得出受試菌株藥物敏感性的結(jié)論。某次試驗(yàn)結(jié)果如圖所示，下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（

）A．接種細(xì)菌時(shí)可以選用平板劃線法或稀釋涂布平板法B．出現(xiàn)抑菌圈的說明在接觸抗生素后細(xì)菌受到抑制或已死亡C．抑菌圈越大，說明細(xì)菌對(duì)該種抗生素越敏感D．抗生素在培養(yǎng)基中的擴(kuò)散速率會(huì)影響抑菌圈的大小【答案】A【分析】由題圖信息分析可知，不同的抑菌藥物的抑菌圈直徑不同，是因?yàn)槭芩幬镌诃傊袛U(kuò)散速度的影響，抑菌圈的大小可以反映測(cè)試菌對(duì)藥物的敏感程度。抑菌圈越大，說明該菌對(duì)此藥敏感性越大，反之越小，若無抑菌圈，則說明該菌對(duì)此藥具有耐藥性。透明圈直徑大小與藥物濃度、細(xì)菌濃度等有直接關(guān)系?！驹斀狻緼、圖中需要比較不同種類抗生素的紙片周圍的抑菌圈，則要求培養(yǎng)基的菌落分布比較均勻，因此接種細(xì)菌時(shí)應(yīng)稀釋后均勻涂布，選用的是稀釋涂布平板法，A錯(cuò)誤；B、出現(xiàn)抑菌圈說明紙片上的抗生素發(fā)生擴(kuò)散，細(xì)菌接觸到抗生素后生長(zhǎng)受到抑制或死亡，B正確；C、抑菌圈的大小可以反映測(cè)試菌對(duì)藥物的敏感程度，由此推測(cè)形成的抑菌圈越大，說明細(xì)菌對(duì)該種抗生素抗性越強(qiáng)，對(duì)抗生素越敏感，C正確；D、在平板上擴(kuò)散速度慢的抗生素，形成的透明圈可能會(huì)比實(shí)際結(jié)果偏小，因此，不同抗生素在平板.上的擴(kuò)散速度不同會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成影響，D正確。故選A。18．溫泉中含有能夠分解淀粉的耐熱古細(xì)菌，在固體培養(yǎng)基中，該類細(xì)菌分解淀粉會(huì)形成透明圈。下圖表示篩選能高效產(chǎn)生淀粉酶的耐熱古細(xì)菌的過程，下列分析正確的是（

）A．②過程是利用稀釋涂布平板法分離并篩選古細(xì)菌B．配制Ⅰ號(hào)培養(yǎng)基時(shí)需要加入瓊脂，先滅菌再調(diào)節(jié)pHC．為防止污染需要對(duì)Ⅰ、Ⅱ培養(yǎng)基及培養(yǎng)皿進(jìn)行干熱滅菌D．從Ⅰ號(hào)培養(yǎng)基中選擇透明圈最小的菌落接種到Ⅱ號(hào)培養(yǎng)基【答案】A【解析】1、微生物常見的接種的方法：（1）平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng):。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落。（2）稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。2、實(shí)驗(yàn)室常用的滅菌方法：①灼燒滅菌：將微生物的接種工具，如接種環(huán)、接種針或其他金屬工具，直接在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒，可以迅速徹底地滅菌，此外，在接種過程中，試管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通過火焰燃燒來滅菌；②干熱滅菌：能耐高溫的，需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培養(yǎng)皿）和金屬用具等，可以采用這種方法滅菌；③高壓蒸汽滅菌：將滅菌物品放置在盛有適量水的高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi)，為達(dá)到良好的滅菌效果，一般在壓力為100kPa，溫度為121℃的條件下，維持15～30min?！驹斀狻緼、據(jù)圖可知，該平板上形成的單個(gè)菌落分布均勻，②過程是利用稀釋涂布平板法分離并篩選古細(xì)菌，A正確；B、配制Ⅰ號(hào)培養(yǎng)基時(shí)需要加入瓊脂，先調(diào)節(jié)pH再滅菌，B錯(cuò)誤；C、為防止污染需要對(duì)Ⅰ、Ⅱ培養(yǎng)基進(jìn)行高壓蒸汽滅菌，對(duì)培養(yǎng)皿進(jìn)行干熱滅菌，C錯(cuò)誤；D、在固體培養(yǎng)基中，耐熱古細(xì)菌分解淀粉會(huì)形成透明圈，透明圈越大說明分解淀粉的能力越強(qiáng)。為篩選能高效產(chǎn)生淀粉酶的耐熱古細(xì)菌，從Ⅰ號(hào)培養(yǎng)基中選擇透明圈最大的菌落接種到Ⅱ號(hào)培養(yǎng)基，D錯(cuò)誤。故選A。19．大腸桿菌是人和動(dòng)物腸道寄生菌，在一定條件下會(huì)引起胃腸道等局部組織感染。檢驗(yàn)水樣中大腸桿菌數(shù)目是否符合生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)，常用濾膜法測(cè)定，其操作流程如圖。大腸桿菌的代謝產(chǎn)物能與伊紅美藍(lán)（EMB培養(yǎng)基的指示劑）反應(yīng)，菌落呈黑色。下列對(duì)實(shí)驗(yàn)操作的分析，不正確的是（）A．測(cè)定前，濾杯、濾膜和濾瓶均可用干熱滅菌法滅菌處理B．配制好的培養(yǎng)基一般倒置，防止冷凝水滴至培養(yǎng)基造成污染C．配制EMB培養(yǎng)基時(shí)，需考慮大腸桿菌所需要的營養(yǎng)物質(zhì)及pH等條件D．EMB培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基，只有大腸桿菌能正常生長(zhǎng)并形成黑色菌落【答案】D【分析】大腸桿菌的代謝能與伊紅美藍(lán)（EMB培養(yǎng)基的指示劑）反應(yīng)，菌落呈黑色，因此可以制備EMB培養(yǎng)基來鑒別大腸桿菌。在實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行微生物培養(yǎng)的時(shí)候都需要進(jìn)行嚴(yán)格的無菌操作，盡量減少雜菌的污染。【詳解】A、干熱滅菌法適用于對(duì)濾杯、濾膜和濾瓶進(jìn)行滅菌，防止雜菌的污染，A正確；B、培養(yǎng)微生物時(shí)，為了防止水珠掉落在培養(yǎng)基造成污染，應(yīng)將培養(yǎng)基倒置，B正確；C、配制EMB培養(yǎng)基時(shí)，需考慮大腸桿菌所需要的營養(yǎng)物質(zhì)及pH等條件，C正確；D、EMB培養(yǎng)基屬于鑒別培養(yǎng)基，沒有選擇作用，D錯(cuò)誤。故選D。20．如圖為“土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離和計(jì)數(shù)”實(shí)驗(yàn)示意圖。據(jù)圖分析正確的是（

）A．4號(hào)稀釋液培養(yǎng)得到的菌落平均數(shù)恰為5號(hào)試管的10倍B．5號(hào)試管的結(jié)果表明每克土壤中的菌株數(shù)為1.7×109個(gè)C．將稀釋液涂布到以尿素為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng)D．該實(shí)驗(yàn)方法統(tǒng)計(jì)得到的結(jié)果往往會(huì)比實(shí)際活菌數(shù)目要高【答案】B【分析】從土壤中分離尿素分解菌的一般步驟是：土壤取樣、選擇培養(yǎng)、梯度稀釋、涂布培養(yǎng)和篩選菌株。圖中5支試管為梯度稀釋，最后經(jīng)稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后進(jìn)行計(jì)數(shù)。【詳解】A、4號(hào)中稀釋液進(jìn)行平板培養(yǎng)，稀釋倍數(shù)比5號(hào)的低10倍，如果稀釋倍數(shù)適當(dāng)，得到的菌落平均數(shù)可能是5號(hào)的10倍，但不一定，A錯(cuò)誤；B、統(tǒng)計(jì)菌落時(shí)應(yīng)選擇30-300之間的進(jìn)行計(jì)數(shù)，5號(hào)試管進(jìn)行稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)的結(jié)果表明每克土壤中的菌株數(shù)為（168+175+167）÷3÷0.1×106=1.7×109個(gè)，B正確；C、本實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖恰巴寥乐蟹纸饽蛩氐募?xì)菌的分離和計(jì)數(shù)”，故應(yīng)將稀釋液涂布到以尿素為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng)，C錯(cuò)誤；D、稀釋涂布平板得到的菌落可能存在兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌細(xì)胞長(zhǎng)成一個(gè)菌落，使該實(shí)驗(yàn)方法統(tǒng)計(jì)得到的結(jié)果往往會(huì)比實(shí)際活菌數(shù)目要低，D錯(cuò)誤。故選B。21．某化工廠的污水池中含有一種有害的難以降解的有機(jī)化合物A，研究人員用化合物A、磷酸鹽、鎂鹽以及微量元素等配制的培養(yǎng)基，成功篩選到高效降解化合物A的細(xì)菌（目的菌），實(shí)驗(yàn)的主要步驟如下圖所示。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A．該培養(yǎng)基中化合物A可能既作碳源又作氮源B．實(shí)驗(yàn)需要振蕩培養(yǎng)，由此推測(cè)目的菌呼吸作用的類型是有氧呼吸C．培養(yǎng)若干天后，應(yīng)選擇培養(yǎng)瓶中化合物A含量顯著降低的培養(yǎng)液接種D．若要研究目的菌的生長(zhǎng)規(guī)律，可挑取單個(gè)菌落進(jìn)行液體培養(yǎng)，再采用平板劃線法進(jìn)行計(jì)數(shù)【答案】D【分析】分析題干信息，該實(shí)驗(yàn)的目的是篩選出高效降解化合物A的細(xì)菌，在以化合物A為唯一碳源和氮源的培養(yǎng)基中只有能降解化合物A的微生物才能以化合物A為碳源和氮源生長(zhǎng)繁殖，不能利用化合物A的微生物因缺乏碳源和氮源，無法生長(zhǎng)繁殖?！驹斀狻緼、磷酸鹽、鎂鹽以及一些微量元素中不含有N元素，由此可推測(cè)該培養(yǎng)基中化合物A可能既作碳源又作氮源，A正確；B、振蕩培養(yǎng)可以增加培養(yǎng)液中氧氣濃度，因此實(shí)驗(yàn)需要振蕩培養(yǎng)，由此推測(cè)目的菌呼吸作用的類型是有氧呼吸，B正確；C、培養(yǎng)瓶中化合物A含量顯著降低，說明該培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的菌體降解化合物A的能力較強(qiáng)，因此培養(yǎng)若干天后，應(yīng)選擇培養(yǎng)瓶中化合物A含量顯著降低的培養(yǎng)液接種，以獲得高效降解化合物A的細(xì)菌，C正確；D、若要研究目的菌的生長(zhǎng)規(guī)律，就需要計(jì)數(shù)菌體的數(shù)量，而平板劃線法不能用于菌體計(jì)數(shù)，應(yīng)采用稀釋涂布平板法接種以計(jì)數(shù)菌體數(shù)量，D錯(cuò)誤。故選D。22．下面的簡(jiǎn)式表示植物組織培養(yǎng)的大致過程，據(jù)此判斷正確的是（）A．若①是番茄莖尖細(xì)胞，則④一定能獲得抗病毒植株B．③→④過程發(fā)生了細(xì)胞的分裂、分化C．①需要進(jìn)行滅菌D．若再分化時(shí)培養(yǎng)基中生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素的比例大于1，則③為生芽【答案】B【分析】題圖分析：①表示離體的組織或細(xì)胞（外植體），②表示愈傷組織，③表示根芽或胚狀體，④表示試管苗?！驹斀狻緼、若①是番茄莖尖細(xì)胞，因含病毒較少或不含病毒，因此通過植物組織培養(yǎng)，可得到無病毒植株④，但不能得到抗病毒植株，A錯(cuò)誤；B、③→④過程是從根芽或胚狀體發(fā)育到試管苗的過程，此過程發(fā)生了細(xì)胞的分裂、分化，B正確；C、①表示外植體，需要保持活性，只能消毒，不能滅菌，C錯(cuò)誤；D、若再分化時(shí)培養(yǎng)基中生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素的比例大于1，則③為生根，D錯(cuò)誤。故選B。23．單倍體育種的最大優(yōu)點(diǎn)是A．單倍體植株高度不育 B．單倍體植株果實(shí)大C．明顯縮短育種年限 D．集多種優(yōu)良性狀于一身【答案】C【分析】單倍體是指體細(xì)胞中含有本物種配子中染色體組的個(gè)體；單倍體的特點(diǎn)一般是植株矮小瘦弱，一般高度不育；單倍體育種的過程一般是首先花藥離體培養(yǎng)，從而獲得單倍體植株，然后進(jìn)行秋水仙素加倍，從而獲得所需性狀的純合個(gè)體．單倍體育種的優(yōu)點(diǎn)是能迅速獲得純合體，加快育種進(jìn)程．依據(jù)的原理是染色體變異?！驹斀狻繂伪扼w育種能獲得所需性狀的純合個(gè)體，自交后代不發(fā)生性狀分離，所以能迅速獲得純合體，縮短育種年限，加快育種進(jìn)程。故選C。24．培育甘藍(lán)和蘿卜體細(xì)胞雜交植株過程中，運(yùn)用的技術(shù)包括（）A．干細(xì)胞技術(shù)和基因工程技術(shù)B．植物組織培養(yǎng)技術(shù)和干細(xì)胞技術(shù)C．體細(xì)胞雜交和細(xì)胞核移植技術(shù)D．體細(xì)胞雜交和植物組織培養(yǎng)技術(shù)【答案】D【分析】細(xì)胞融合技術(shù)是指將不同種的植物細(xì)胞，在一定條件條融合成雜種細(xì)胞的過程。植物組織培養(yǎng)技術(shù)就是在無菌和人工控制條件下，將離體的植物器官、組織、細(xì)胞，培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基上，給予適宜的培養(yǎng)條件，誘導(dǎo)其產(chǎn)生愈傷組織、叢芽，最終形成完整的植株。【詳解】培育“甘藍(lán)和蘿卜”雜種植株是將甘藍(lán)和蘿卜的體細(xì)胞雜交后培育成植株的過程，體細(xì)胞雜交過程運(yùn)用了細(xì)胞融合技術(shù)，將雜種細(xì)胞培育成雜種植株過程運(yùn)用了植物組織培養(yǎng)技術(shù)，D正確。故選D。25．紅薯是我國種植面積較大的一類作物，但長(zhǎng)期以來的連種，造成了紅薯品種退化，產(chǎn)量和品質(zhì)逐年下降，其主要原因是所用的種薯攜帶了大量的病毒。研究人員利用現(xiàn)代生物技術(shù)，對(duì)紅薯進(jìn)行脫毒培養(yǎng)。下列說法錯(cuò)誤的是（

）A．可以選擇紅薯莖尖或根尖的分生區(qū)作為外植體B．若選擇的外植體體積過大，可能會(huì)導(dǎo)致脫毒率降低C．培育紅薯脫毒苗的過程中，需要適時(shí)調(diào)整激素的比例D．培育紅薯脫毒苗過程中，激素使用不當(dāng)會(huì)導(dǎo)致性狀分離【答案】D【分析】離體的植物器官、組織或細(xì)胞能夠被培養(yǎng)成新的植物體說明了植物細(xì)胞具有全能性。植物組織培養(yǎng)技術(shù)所用的激素主要是生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素。【詳解】A、由于莖尖或根尖等部位所攜帶病毒很少，或者幾乎不攜帶病毒，故可以選擇紅薯莖尖或根尖的分生區(qū)作為外植體，A正確；B、一般而言，莖尖越小，脫毒率越高，但成苗率越低，故若選擇的外植體體積過大，可能會(huì)導(dǎo)致脫毒率降低，B正確；C、培育紅薯脫毒苗的過程中，需要適時(shí)調(diào)整激素的比例，如細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素比例高的時(shí)候可以促進(jìn)芽的分化，C正確；D、培育紅薯脫毒苗過程中，細(xì)胞分裂的方式為有絲分裂，激素使用不當(dāng)不會(huì)導(dǎo)致性狀分離，D錯(cuò)誤。故選D。四、實(shí)驗(yàn)題26．孔雀石綠(C23H25N2Cl)常用作紡織業(yè)的染料，也可用作水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的殺菌驅(qū)蟲劑。但它具有高毒性、高殘留的危害，因此對(duì)孔雀石綠廢水的處理已成為環(huán)境科學(xué)領(lǐng)域關(guān)注的熱點(diǎn)?？蒲腥藛T從某化工廠污水池中分離獲得了能降解孔雀石綠的細(xì)菌菌株A。主要步驟如所示。(1)①過程稱為，②過程是為了。(2)在分離過程中，以下操作中正確的有_____________A．Ⅰ、Ⅱ號(hào)培養(yǎng)基均使用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基B．使用平板劃線法可以在Ⅱ號(hào)培養(yǎng)基上獲得單菌落C．為了保持細(xì)菌菌株A的活性，培養(yǎng)時(shí)溫度應(yīng)設(shè)置為37℃D．實(shí)驗(yàn)過程中防止雜菌污染，接種操作應(yīng)在酒精燈火焰旁進(jìn)行(3)實(shí)驗(yàn)中使用的培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿需要高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌，高壓蒸汽滅菌的要求是，因?yàn)榇藯l件下可以殺死包括芽孢在內(nèi)的所有微生物。(4)研究人員進(jìn)一步研究了不同金屬離子對(duì)菌株A降解孔雀石綠的影響，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖。從圖中可以看出多數(shù)金屬離子對(duì)菌株A降解孔雀石綠有作用，唯有Pb2+的作用相反。(5)若要排除Pb2+本身對(duì)孔雀石綠有降解作用，則應(yīng)如何設(shè)置可作對(duì)照的培養(yǎng)基樣本：?！敬鸢浮?1)稀釋篩選獲得降解孔雀師旅的細(xì)菌單菌落(2)BD(3)121℃，1.05kg/cm2，15-30min(4)抑制(5)含等量的Pb2+，但不接種菌落【分析】1、微生物培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源、無機(jī)鹽，此外還要滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求．對(duì)異養(yǎng)微生物來說，含C、N的化合物既是碳源，也是氮源，即有些化合物作為營養(yǎng)要素成分時(shí)并不是起單一方面的作用。2、微生物常見的接種的方法①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)．在線的開始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落。②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落?！驹斀狻浚?）分析實(shí)驗(yàn)可知，圖中①過程稱為稀釋，用無菌水對(duì)污水樣品進(jìn)行稀釋；②過程是為了篩選能降解孔雀石綠的細(xì)菌菌株A。（2）A、本實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖菑哪郴S污水池中分離獲得了能降解孔雀石綠的細(xì)菌菌株A，I號(hào)培養(yǎng)基中應(yīng)加入孔雀石綠作為唯一碳源，A錯(cuò)誤；B、使用稀釋涂布平板（或平板劃線）法接種可以在II號(hào)培養(yǎng)基上獲得單個(gè)菌落，B正確；C、37℃不一定是細(xì)菌菌株A的最適溫度，C錯(cuò)誤；D、接種時(shí)的關(guān)鍵是“無菌”，確保無菌的方法有在超凈臺(tái)中進(jìn)行接種、接種操作在酒精燈火焰附近進(jìn)行、接種環(huán)（針）在接種前后要過火并燒成紅色，D正確。故選BD。（3）實(shí)驗(yàn)中使用的培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿需要高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌，高壓蒸汽滅菌的要求是1.05kg/cm2（103kPa），121℃，時(shí)間15～30分鐘，因?yàn)榇藯l件下可以殺死包括芽孢在內(nèi)的所有微生物。（4）由圖分析可知，與不加金屬離子的對(duì)照組相比，多數(shù)金屬離子對(duì)菌株A降解孔雀石綠有抑制作用，唯有Pb2+的作用相反。（5）若要排除Pb2+本身對(duì)孔雀石綠有降解作用，則應(yīng)設(shè)置含等量的Pb2+但不接種菌株的培養(yǎng)基樣本作為對(duì)照。27．圓褐固氮菌能將大氣中的氮?dú)廪D(zhuǎn)化為氨，用于合成蛋白質(zhì)等含氮的有機(jī)物，是異養(yǎng)需氧型的原核生物。某興趣小組對(duì)土壤中的圓褐固氮菌進(jìn)行計(jì)數(shù)，請(qǐng)回答相關(guān)問題：（1）要想獲得圓褐固氮菌的菌種最好選擇（填“表層”或“深層”）的土壤。（2）在培養(yǎng)圓褐固氮菌的培養(yǎng)基中不需要加入的成分是；該培養(yǎng)基從功能上劃分，屬于培養(yǎng)基。（3）在配制含瓊脂的培養(yǎng)基和倒平板的過程中，下列器材不需要的是（填序號(hào)）。①酒精燈②接種環(huán)③高壓蒸汽滅菌鍋④棉塞（4）本實(shí)驗(yàn)采用的接種方法是，其統(tǒng)計(jì)結(jié)果一般用數(shù)而不是活菌數(shù)來表示；接種好的平板放入38℃恒溫箱中培養(yǎng)，每隔12h統(tǒng)計(jì)一次菌落數(shù)目，選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)的記錄作為結(jié)果，其原因是?！敬鸢浮勘韺拥催x擇②稀釋涂布平板法菌落防止因培養(yǎng)時(shí)間不足導(dǎo)致遺漏菌落數(shù)目【解析】微生物常見的接種的方法：1、平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分,微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落。2、稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。【詳解】（1）據(jù)題干信息可知：圓褐固氮菌是好氧細(xì)菌，需要氧氣，且還需要空氣中的氮?dú)庾鳛榈?，故要想獲得圓褐固氮菌的菌種最好選擇氧氣含量較高的表層土壤。（2）因圓褐固氮菌能將大氣中的氮?dú)廪D(zhuǎn)化為氨，用于合成含氮有機(jī)物，故在培養(yǎng)圓褐固氮菌的培養(yǎng)基中不需要加入氮源;該培養(yǎng)基從功能上劃分，屬于選擇培養(yǎng)基。（3）平板培養(yǎng)基配制的基本流程為：計(jì)算→稱量→溶化→調(diào)節(jié)PH→分裝→滅菌→倒平板→倒置平板，不需要接種環(huán)接種。故選②。（4）結(jié)合信息可知，該實(shí)驗(yàn)還需對(duì)菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)，故采用的接種方法為稀釋涂布平板法；為防止因培養(yǎng)時(shí)間不足導(dǎo)致遺漏菌落數(shù)目，應(yīng)每隔12h統(tǒng)計(jì)一次菌落數(shù)目，選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)的記錄作為結(jié)果。【點(diǎn)睛】本題主要考查了微生物分離與培養(yǎng)的有關(guān)知識(shí)，要求考生能夠掌握微生物分離與純化的方法，學(xué)會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)的分析，再結(jié)合所學(xué)知識(shí)準(zhǔn)確答題。五、綜合題28．飼養(yǎng)動(dòng)物常用的植物飼料中含有難溶的植酸鈣等物質(zhì)，很難被動(dòng)物吸收利用，還影響對(duì)其他營養(yǎng)物質(zhì)的利用?若在飼料中添加植酸酶，則能催化其水解成為可以吸收利用的磷酸鹽等?以下是科研人員從作物根部土壤中分離產(chǎn)植酸酶的菌株的過程示意圖?請(qǐng)分析作答?

(1)培養(yǎng)基中除了添加、以外，應(yīng)含有碳源、氮源、水、無機(jī)鹽等基本營養(yǎng)物質(zhì)?(2)對(duì)涂布器進(jìn)行滅菌常用的方法是?(3)接種前進(jìn)行的一系列操作，目的是?統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)，就能大致推測(cè)出樣品中的活菌數(shù)?通常每種稀釋液需涂布3個(gè)平板，取其平均值，若將最后一個(gè)試管中的菌液每次吸取0．1mL涂布培養(yǎng)后獲得平均值是a，則1g土壤中含有此菌的菌株數(shù)是?該方法統(tǒng)計(jì)獲得的菌落數(shù)比實(shí)際的活菌數(shù)，原因是。(4)若要對(duì)上述菌株進(jìn)行進(jìn)一步純化，通常使用的劃線工具是；接種時(shí)，在第一區(qū)域劃線后須將該工具后再劃線。(5)產(chǎn)植酸酶的菌株會(huì)水解植酸鈣，菌落的周圍將形成透明的區(qū)域，根據(jù)透明區(qū)域的有無，可初步判斷該菌是否產(chǎn)植酸酶?實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示A—E五種菌株中，是產(chǎn)植酸酶最理想的菌株?【答案】(1)植酸鈣瓊脂(2)引燃涂布器上的殘余酒精并完全燃燒(3)在固體培養(yǎng)基表面形成單菌落a×106低當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落(4)接種環(huán)灼燒、冷卻(5)E【分析】平板劃線法：①將接種環(huán)放到火焰上灼燒，直到接種環(huán)的金屬絲燒紅。②在火焰旁冷卻接種環(huán)。同時(shí)，拔出試管的棉塞。③將試管口通過火焰。④在火焰附近用接種環(huán)蘸取一環(huán)菌液。⑤將試管口通過火焰，并塞上棉塞。⑥在火焰附近將皿蓋打開一條縫隙，用接種環(huán)在培養(yǎng)基表面迅速劃三至五條平行線，蓋上皿蓋。⑦灼燒接種環(huán)，待其冷卻后，從第一次劃線的末端開始作第二次劃線。重復(fù)以上操作，作第三、四、