第1章第2節(jié)一A級基礎(chǔ)達(dá)標(biāo)練一、選擇題1．培養(yǎng)硝化細(xì)菌的碳源、氮源、能源依次是(C)A．葡萄糖、氨、化學(xué)能 B．葡萄糖、銨鹽、太陽能C．二氧化碳、氨、化學(xué)能 D．二氧化碳、氨、太陽能解析：硝化細(xì)菌為自養(yǎng)型生物，能夠利用二氧化碳合成有機(jī)物，所以其碳源是二氧化碳；硝化細(xì)菌合成有機(jī)物時需要的能量來自其把氨氧化成(亞)硝酸所釋放的化學(xué)能，故培養(yǎng)硝化細(xì)菌的氮源是氨，能源是化學(xué)能。2．微生物的實驗室培養(yǎng)可采用高壓蒸汽滅菌(濕熱滅菌)、酒精擦拭、火焰灼燒等不同的滅菌或消毒方法，這些方法可依次用于處理(C)A．接種針、手、培養(yǎng)基 B．器皿、接種針、手C．培養(yǎng)基、手、接種針 D．菌種、手、接種針解析：高壓蒸汽滅菌法(濕熱滅菌)通常用于培養(yǎng)基的滅菌；用酒精擦拭雙手是用化學(xué)試劑進(jìn)行消毒的方法；火焰灼燒可以迅速徹底地滅菌，適用于微生物接種工具的滅菌，如接種針、接種環(huán)等。3．下列有關(guān)微生物實驗室培養(yǎng)的敘述，正確的是(A)A．利用微生物培養(yǎng)獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止雜菌污染B．為了防止污染，接種環(huán)經(jīng)火焰灼燒滅菌后應(yīng)趁熱快速挑取菌落C．倒平板時，應(yīng)將打開的皿蓋放到一邊，以免培養(yǎng)基濺到皿蓋上D．微生物在液體培養(yǎng)基中生長時，可以形成肉眼可見的菌落解析：利用微生物培養(yǎng)獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止雜菌污染，A項正確；接種環(huán)在火焰上灼燒后，待冷卻后才可以快速挑取菌落，B項錯誤；倒平板時，用左手將培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙，右手將錐形瓶中的培養(yǎng)基(約10～20mL)倒入培養(yǎng)皿，左手立即蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋，C項錯誤；微生物在固體培養(yǎng)基上生長時，可以形成肉眼可見的菌落，D項錯誤。4．如圖為平板劃線法接種的示意圖。觀察或比較各種細(xì)菌菌落形態(tài)的最佳區(qū)域是(D)A．① B．②C．③ D．④解析：由題圖可知，該平板上的劃線順序為①→②→③→④，觀察或比較各種細(xì)菌菌落形態(tài)的最佳區(qū)域是④，故選D。5．(不定項)如圖是微生物平板劃線示意圖，劃線的順序為1、2、3、4、5，下列操作方法錯誤的是(CD)A．每次劃線操作后要將接種環(huán)放在火焰上灼燒滅菌B．劃線操作應(yīng)在超凈工作臺中進(jìn)行C．第3次劃線操作可從第2次開始劃出，也可從第4次開始劃出D．只有在第5次劃線區(qū)域中才可以得到單菌落解析：進(jìn)行平板劃線操作之前，將接種環(huán)在酒精燈火焰上進(jìn)行灼燒滅菌，A項正確；劃線操作應(yīng)在超凈工作臺中進(jìn)行，B項正確；劃線的順序為1、2、3、4、5，應(yīng)保證每次劃線的菌種來自上一次劃線的末端，C項錯誤；有可能在第5次劃線的區(qū)域獲得單菌落，也有可能在第4次劃線的區(qū)域得到所需要的單菌落，D項錯誤。二、非選擇題6．回答下列與細(xì)菌培養(yǎng)相關(guān)的問題。(1)在細(xì)菌培養(yǎng)時，培養(yǎng)基中能同時提供碳源、氮源的成分是__蛋白胨__(填“蛋白胨”“葡萄糖”或“NaNO3”)。通常，制備培養(yǎng)基時要根據(jù)所培養(yǎng)細(xì)菌的不同來調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH，其原因是__不同細(xì)菌生長繁殖所需的最適pH不同__。硝化細(xì)菌在沒有碳源的培養(yǎng)基上__能夠__(填“能夠”或“不能”)生長，原因是__硝化細(xì)菌可以利用空氣中的CO2作為碳源__。(2)用平板培養(yǎng)細(xì)菌時一般需要將平板__倒置__(填“倒置”或“正置”)。(3)單個細(xì)菌在平板上會形成菌落，研究人員通常可根據(jù)菌落的形狀、大小、顏色等特征來初步區(qū)分不同種的微生物，原因是__在一定的培養(yǎng)條件下，不同種微生物表現(xiàn)出各自穩(wěn)定的菌落特征__。(4)有些使用后的培養(yǎng)基在丟棄前需要經(jīng)過__滅菌__處理，這種處理可以殺死丟棄物中所有的微生物。解析：(1)能同時提供碳源、氮源的成分必須同時含有碳和氮兩種元素，蛋白胨、葡萄糖和NaNO3中，只有蛋白胨同時含有這兩種元素。不同細(xì)菌生長繁殖所需的最適pH不同，所以在配制培養(yǎng)基時，在分裝前必須調(diào)節(jié)pH。硝化細(xì)菌能夠進(jìn)行化能合成作用，即能夠利用化學(xué)反應(yīng)產(chǎn)生的化學(xué)能固定外界的CO2，所以能夠在沒有碳源的培養(yǎng)基上生長。(2)用平板培養(yǎng)細(xì)菌時，為防止培養(yǎng)基冷凝后形成的水滴滴落在培養(yǎng)基上污染培養(yǎng)基，要將平板倒置。(3)通常根據(jù)菌落的形狀、大小、顏色等特征初步區(qū)分不同種的微生物，因為不同微生物的菌落的形狀、大小、顏色、凹凸情況等不同，且在一定的培養(yǎng)條件下微生物的菌落特征是穩(wěn)定的。(4)為防止污染環(huán)境，使用后的培養(yǎng)基在丟棄前需進(jìn)行滅菌處理，這種處理可以殺死丟棄物中所有的微生物。B級合格達(dá)標(biāo)練一、選擇題1．(2022·長郡中學(xué)月考)在生產(chǎn)、生活和科研實踐中，經(jīng)常通過消毒和滅菌來避免雜菌的污染。下列關(guān)于消毒和滅菌的敘述，錯誤的是(B)A．牛奶的消毒常用巴氏消毒法或高溫瞬時消毒法B．水廠供應(yīng)的自來水通常是經(jīng)過高錳酸鉀消毒的C．用紫外燈對密閉教室消毒前，適量噴灑消毒液可強(qiáng)化消毒效果D．培養(yǎng)基不能放入干熱滅菌箱中進(jìn)行干熱滅菌解析：用巴氏消毒法或高溫瞬時消毒法對牛奶等飲品消毒，既能殺菌，又能保持營養(yǎng)和風(fēng)味，A正確；高錳酸鉀是強(qiáng)氧化劑，不宜用于自來水消毒，自來水消毒常用氯氣，B錯誤；用紫外燈對密閉空間消毒前，適量噴灑消毒液可強(qiáng)化消毒效果，常噴灑石炭酸，C正確；培養(yǎng)基應(yīng)該用高壓蒸汽滅菌(濕熱滅菌)，D正確。2．(2022·運(yùn)城聯(lián)考)下列有關(guān)平板劃線操作的敘述，正確的是(B)A．用接種環(huán)蘸取菌液后需要立即塞上棉塞B．待灼燒滅菌的接種環(huán)冷卻后再進(jìn)行劃線C．劃線結(jié)束后要形成首尾相連的環(huán)形圈D．每次劃線都要在菌液中蘸取一環(huán)菌液解析：用接種環(huán)蘸取菌液后，要將試管口再次通過火焰滅菌后再塞上棉塞，A錯誤；待灼燒滅菌的接種環(huán)冷卻后再進(jìn)行劃線，B正確；劃線結(jié)束后最后一次劃線不能和第一次劃線相連，C錯誤；只在第一次劃線時蘸取一環(huán)菌液，后續(xù)的劃線不需要再蘸取菌液，D錯誤。3．如圖是倒平板的操作，下列相關(guān)敘述錯誤的是(D)A．正確的操作順序是丙→乙→甲→丁B．甲應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行C．此培養(yǎng)基不可能為液體培養(yǎng)基D．完成甲后應(yīng)快速進(jìn)行丁操作解析：結(jié)合倒平板的操作步驟可知，正確的操作順序為丙→乙→甲→丁，A正確；甲在酒精燈火焰附近進(jìn)行可以避免雜菌污染，B正確；圖示操作中的培養(yǎng)基是固體培養(yǎng)基，C正確；等待培養(yǎng)基冷卻凝固后，再將培養(yǎng)皿倒過來放置，D錯誤。4．下列關(guān)于微生物營養(yǎng)的說法，不正確的是(C)A．對異養(yǎng)微生物而言，牛肉膏既是碳源，又是氮源B．生長因子是指氨基酸、維生素、堿基等不可缺少的微量有機(jī)物C．氮源不能為微生物提供能量D．氮源主要用于合成蛋白質(zhì)、核酸以及含氮的代謝產(chǎn)物解析：同一種物質(zhì)可以既作為碳源又作為氮源，如牛肉膏，A正確；生長因子是指氨基酸、維生素、堿基等不可缺少的微量有機(jī)物，B正確；自然界中一些微生物如硝化細(xì)菌，可以通過氧化氨釋放的能量獲得生長所需能量，C錯誤；蛋白質(zhì)、核酸以及含氮的代謝產(chǎn)物等都含有氮元素，所以氮源主要用于合成這些含氮的化合物，D正確。5．(不定項)防止外來雜菌的入侵，獲得純凈的培養(yǎng)物，是研究和應(yīng)用微生物的前提。下列敘述正確的是(ACD)A．實驗室里可以用紫外線或化學(xué)藥劑進(jìn)行消毒B．接種環(huán)、接種針等金屬用具，直接在酒精燈火焰的內(nèi)焰部位灼燒滅菌C．在實驗室中，切不可吃東西、喝水，離開實驗室時一定要洗手，防止被微生物感染D．使用后的培養(yǎng)基丟棄前一定要進(jìn)行滅菌處理，以免污染環(huán)境解析：實驗室里可以用紫外線或化學(xué)藥劑進(jìn)行消毒，也可以用煮沸消毒法或巴氏消毒法，A項正確；灼燒滅菌應(yīng)該在酒精燈火焰的外焰部位灼燒，B項錯誤；為防止被微生物感染，切不可在實驗室中吃東西、喝水，離開實驗室時一定要洗手，C項正確；使用后的培養(yǎng)基丟棄前一定要進(jìn)行滅菌處理，以免污染環(huán)境，D項正確。6．(不定項)生長圖形法是一種測定微生物營養(yǎng)需求的簡便方法。為探究某嗜熱菌所需生長因子的種類，研究小組把該菌的懸浮液與不含任何生長因子但含有其他必需營養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基混合后倒成平板，然后在平板上劃分?jǐn)?shù)區(qū)，將甲、乙、丙三種生長因子分別添加到不同區(qū)域，培養(yǎng)結(jié)果如下圖所示。下列說法正確的是(ACD)A．倒成平板后直接培養(yǎng)可判斷有無污染B．倒成平板后需要進(jìn)行滅菌處理C．圖示結(jié)果表明該菌需要生長因子乙和丙D．生長圖形法還可用于某些菌種的篩選解析：倒平板后不接種任何菌種直接進(jìn)行培養(yǎng)觀察有無菌落的出現(xiàn)，可以判斷培養(yǎng)基有無污染，A項正確；在制作培養(yǎng)基的過程中，需要先進(jìn)行滅菌再倒平板，B項錯誤；圖中嗜熱菌在添加了乙、丙生長因子的區(qū)域生長，故該菌需要的生長因子是乙和丙，C項正確；不同的菌種所需的生長因子不同，利用生長圖形法可用于某些菌種的篩選，菌種只會在提供有其需要的生長因子的區(qū)域生長，D項正確。二、非選擇題7．多環(huán)芳烴是具有致癌、致畸、致突變作用的全球性污染物，是煤、石油、有機(jī)高分子化合物等有機(jī)物不完全燃燒時產(chǎn)生的揮發(fā)性碳?xì)浠衔铮ㄝ?、蒽、菲、芘?50余種化合物。某研究小組從一污水處理廠的污泥中篩選到一株可降解萘、蒽的細(xì)菌，命名為BDP01。(1)該研究小組所用的培養(yǎng)基應(yīng)以萘或蒽作為唯一碳源，其目的是__篩選出BDP01菌株__，從功能上看，該培養(yǎng)基類型屬于__選擇__培養(yǎng)基。(2)接種時所用的接種環(huán)通過__灼燒__滅菌，在第二次及其后的劃線操作時，總是從__上一次劃線的末端__開始劃線，該分離純化方法稱為__平板劃線__法。(3)下面的圖1和圖2為該研究小組進(jìn)行的其中兩個實驗的實驗結(jié)果圖，菌株的生長量以分光光度計于600nm處測定的光吸收值(OD600)表示。①測定菌株生長量時用液體培養(yǎng)基，并需振蕩培養(yǎng)。振蕩培養(yǎng)的細(xì)菌比靜置培養(yǎng)的細(xì)菌生長速度快。分析其原因是振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液中__氧氣__的含量，同時可使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高_(dá)_營養(yǎng)物質(zhì)__的利用率。②由圖1可見，菌株生長量較高的溫度范圍是__30～35℃__。圖2結(jié)果表明，BDP01對pH的適應(yīng)范圍較小，在酸性條件下的生長量要__小__于堿性條件下的。③結(jié)合圖2推測，進(jìn)行圖1相關(guān)實驗時培養(yǎng)基的pH最可能為__7__(用圖2中相關(guān)數(shù)值表示)。(4)通常，對獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的形狀、大小等菌落特征對細(xì)菌進(jìn)行初步的__鑒定(或分類)__。解析：(1)篩選微生物用選擇培養(yǎng)基，以萘或蒽作為唯一碳源的培養(yǎng)基篩選出的是能降解萘或蒽的微生物。(2)接種環(huán)通過灼燒滅菌，使用接種環(huán)操作的分離方法是平板劃線法，從第二次開始每次都是從上一次劃線的末端開始劃線，因為線條末端細(xì)菌的數(shù)目比線條起始處要少。(3)①測定菌株的生長