香菇多糖的高壓提取工藝研究

香乍得含有各種藥物成分。香提取糖是一種重要的生物反應(yīng)活性劑。通過(guò)刺激免疫細(xì)胞的成熟、分化和復(fù)制，它可以改善主要身體的平衡。由于它是間接效應(yīng)，毒副作用小。因此,建立高效的香菇多糖提取方法具有重要的意義。本研究探討了高壓熱水浸提法從香菇中提取活性多糖的最佳工藝條件,以期為開(kāi)發(fā)利用香菇資源提供依據(jù)。1材料和機(jī)器1.1材料表面香菇購(gòu)于黑龍江省綏化市華辰超市。苯酚、3,5-二硝基水楊酸(DNS)、無(wú)水乙醇、三氯乙酸、濃硫酸等試劑均為國(guó)產(chǎn)分析純。1.2儀器、設(shè)備和試鍋752型紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)(上海市菁華科技儀器有限公司)、FW100型高速萬(wàn)能粉碎機(jī)(天津市泰斯特儀器有限公司)、DK-98-ⅡA型電熱恒溫水浴鍋(天津市泰斯特儀器有限公司)、YXQ-LS-100SⅢ型立式壓力蒸汽滅菌鍋(上海市博訊實(shí)業(yè)有限公司)。1.3總糖含量的測(cè)定香菇經(jīng)除雜、干燥、粉碎等預(yù)處理后,得到香菇子實(shí)體干粉。稱(chēng)取香菇粉若干份,每份1g。每份香菇粉進(jìn)行高壓熱水浸提,提取后進(jìn)行離心,上清液用70℃水浴濃縮到原體積的1/2,按1∶3(體積比)添加15%三氯乙酸溶液后靜置12h,3500r/min離心10min,將上清液適當(dāng)濃縮后與95%乙醇按1∶3(體積比)混合,4℃下醇沉12h,3500r/min離心10min,所得沉淀用無(wú)水乙醇洗滌2~3次,最后用60℃蒸餾水溶解沉淀并定容。以葡萄糖為標(biāo)準(zhǔn)樣,用DNS法測(cè)定還原糖含量,用苯酚-硫酸法測(cè)定總糖含量。多糖提取率計(jì)算方法見(jiàn)公式(1)。1.4在高壓下加熱和提取蘑菇葡萄糖的最佳工藝條件中1.4.1高壓熱水浸提液液比的確定稱(chēng)取香菇粉5份,將每份香菇粉分別按料液比1∶30、1∶40、1∶50、1∶60、1∶70加蒸餾水,115℃下高壓熱水浸提80min。后續(xù)處理方法同“1.3”。將每份香菇粉按最佳料液比加蒸餾水,分別于115℃下高壓熱水浸提40、60、80、100、120min。后續(xù)處理方法同“1.3”。將每份香菇粉按最佳料液比加蒸餾水,分別于75、90、108、115、121℃下高壓熱水浸提80min。后續(xù)處理方法同“1.3”。1.5不同方法對(duì)蘑菇糖進(jìn)行比較研究分別采用熱水浸提法、超聲波輔助熱水浸提法、復(fù)合酶法、高壓熱水浸提法提取香菇多糖。2結(jié)果與分析2.1確定測(cè)量方法和試驗(yàn)參數(shù)2.1.1根據(jù)苯硫酸法測(cè)定總糖含量的標(biāo)準(zhǔn)曲線2.1.2dns法測(cè)定了還原糖含量的標(biāo)準(zhǔn)曲線2.2在高壓下加熱水中提取蘑菇葡萄糖由表1可知,香菇多糖提取的最佳料液比為1g∶50mL,此時(shí)香菇多糖提取率為7.76%。2.2.2高壓熱水浸法提取香菇多糖最佳工藝條件的確定將每份香菇粉按最佳料液比1g∶50mL加蒸餾水,分別于75、90、108、115、121℃下高壓熱水浸提80min。由表3可知,香菇多糖提取的最佳高壓熱水浸提溫度為115℃,此時(shí)香菇多糖提取率為7.76%。在單因素試驗(yàn)基礎(chǔ)上選擇對(duì)香菇多糖提取率影響較大的因素進(jìn)行正交試驗(yàn),以確定高壓熱水浸提法提取香菇多糖的最佳工藝條件。試驗(yàn)因素水平見(jiàn)表4,正交試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表5。由表5可知,各因素對(duì)香菇多糖提取率的影響由大到小依次為料液比、高壓熱水浸提時(shí)間、高壓熱水浸提溫度。香菇多糖最優(yōu)提取條件為A3B1C3,此時(shí)香菇多糖提取率為7.83%。2.3不同方法對(duì)蘑菇糖進(jìn)行比較研究用不同方法提取香菇多糖,測(cè)定多糖提取率。由圖3可知,高壓熱水浸提法所獲得的香菇多糖提取率最高。3不同工藝條件對(duì)香菇多糖提取率的影響本研究采用單因素試驗(yàn)及正交試驗(yàn)探討了提取香菇多糖的最適工藝條件,結(jié)果表明,高壓熱水浸提香菇多糖的最佳工藝條件為:料液比為1g∶60mL,高壓浸提溫度為108℃,高壓浸提時(shí)間為100min。在此條件下,香菇多糖的提取率為7.83%。與傳統(tǒng)的提取方法相比,高壓熱水浸提法明顯提高了香菇多糖提取率。高壓提取可將被提取物的組織細(xì)胞及亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)解體,使細(xì)胞內(nèi)的化學(xué)成分與溶媒充分接觸。1.4.1.1.溶液比對(duì)蘑菇糖提取率的影響1.4.1.2.2高壓熱提取物時(shí)間對(duì)蘑菇糖提取率的影響1.4.1.3.3在堿性和高濕的浸泡條件下，對(duì)蘑菇糖提取率的影響苯酚硫酸法測(cè)定總糖標(biāo)準(zhǔn)曲線見(jiàn)圖1。DNS法測(cè)定還原糖含量標(biāo)準(zhǔn)曲線見(jiàn)圖2。2.2.1高壓熱水浸提液將每份香菇粉按最佳料液比1g∶50mL加蒸餾水,分別于115℃下高壓熱水浸提40、60、