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文檔簡介

23.1產(chǎn)氣莢膜梭菌Clostridium又名魏氏梭菌（ClostridiumWelchi3.2產(chǎn)氣莢膜梭菌毒素Clostridiumperfrinε、CPE、NetB，可將產(chǎn)氣莢膜梭菌分為A~G七種類型，其中對人和動物致病的主要是A型（產(chǎn)生α毒素，部分菌株還產(chǎn)生腸毒素CPE），主要引起食物中毒和壞死性腸炎，甚至可以引起腸毒血3.3洶涌發(fā)酵（stormyfer酪蛋白沖成蜂窩狀，并將液面上的凡士林層向上推擠，甚至沖開管口，38℃~40℃水浴解凍。培養(yǎng)基放入?yún)捬醮怪糜?7℃恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)24h后，觀察菌落形態(tài)，挑取血平板培養(yǎng)基上疑4半透明、中部凸起菌落，菌落周圍出現(xiàn)雙層溶血現(xiàn)象，內(nèi)層完全溶血，外層不完全溶血，見附錄挑取5%脫纖維羊血固體培養(yǎng)基上的單菌落，加入含鐵牛乳培養(yǎng)基（附錄A.3）中，將凡士林取液體培養(yǎng)物2mL，12000r/min離心2min，使用細(xì)菌基因組DNA提取試劑盒對菌體沉淀CpaCpbACTATACAGACAGATCATTCAEtxAGTATCTAATGAAATGTCCATItxnetBATTATGTTTAGGAATACAG），陰性對照、陽性對照和空白對照，用產(chǎn)氣莢膜梭菌標(biāo)準(zhǔn)菌株的DNA作陽性對照模板，用非產(chǎn)氣莢c)4.8中出現(xiàn)大小為325bp的Cpa毒素擴(kuò)增帶的為A型產(chǎn)氣莢膜梭菌；出現(xiàn)大小為325bp的Cpa毒素擴(kuò)增帶，大小為236bp的Cpb擴(kuò)增帶和大小為585bp的Etx擴(kuò)增帶的為B型產(chǎn)氣莢膜梭出現(xiàn)大小為325bp的Cpa毒素擴(kuò)增帶和大小為585bp的Etx擴(kuò)增帶的為D型產(chǎn)氣莢膜梭菌；出現(xiàn)325bp的Cpa毒素擴(kuò)增帶和大小為233bp的Cpe擴(kuò)增帶的為F型產(chǎn)氣莢膜梭菌；出現(xiàn)大小為325bp的Cpa毒素擴(kuò)增帶和大小為741bp的netB擴(kuò)增帶的為一般來說抗生

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