專題14生物技術(shù)與工程一、單選題（2021年山東卷）1．粗提取DNA時(shí)，向雞血細(xì)胞液中加入一定量的蒸餾水并攪拌，過(guò)濾后所得濾液進(jìn)行下列處理后再進(jìn)行過(guò)濾，在得到的濾液中加入特定試劑后容易提取出DNA相對(duì)含量較高的白色絲狀物的處理方式是（

）A．加入適量的木瓜蛋白酶B．37～40℃的水浴箱中保溫10～15分鐘C．加入與濾液體積相等的、體積分?jǐn)?shù)為95%的冷卻的酒精D．加入NaCl調(diào)節(jié)濃度至2mol/L→過(guò)濾→調(diào)節(jié)濾液中NaCl濃度至0．14mol/L【答案】A【解析】【分析】DNA粗提取和鑒定的原理：（1）DNA的溶解性：DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液，但細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精；DNA對(duì)酶、高溫和洗滌劑的耐受性。（2）DNA的鑒定：在沸水浴的條件下，DNA遇二苯胺會(huì)被染成藍(lán)色?！驹斀狻緼、木瓜蛋白酶可以水解DNA中的蛋白質(zhì)類雜質(zhì)，由于酶具有專一性，不能水解DNA，過(guò)濾后在得到的濾液中加入特定試劑后容易提取出DNA相對(duì)含量較高的白色絲狀物，A正確；B、37～40℃的水浴箱中保溫10～15分鐘不能去除濾液中的雜質(zhì)，應(yīng)該放在60~75℃的水浴箱中保溫10～15分鐘，使蛋白質(zhì)變性析出，B錯(cuò)誤；C、向雞血細(xì)胞液中加入一定量的蒸餾水并攪拌，過(guò)濾后在得到的濾液中加入與濾液體積相等的、體積分?jǐn)?shù)為95%的冷卻的酒精，此時(shí)DNA析出，不會(huì)進(jìn)入濾液中，C錯(cuò)誤；D、加入NaCl調(diào)節(jié)濃度至2mol/L→過(guò)濾→調(diào)節(jié)濾液中NaCl濃度至0．14mol/L，DNA在0．14mol/L的NaCl溶液中溶解度小，DNA析出，不會(huì)進(jìn)入濾液中，D錯(cuò)誤。故選A。（2021年1月浙江卷）2．下圖為動(dòng)物成纖維細(xì)胞的培養(yǎng)過(guò)程示意圖。下列敘述正確的是（）A．步驟①的操作不需要在無(wú)菌環(huán)境中進(jìn)行B．步驟②中用鹽酸溶解細(xì)胞間物質(zhì)使細(xì)胞分離C．步驟③到④的分瓶操作前常用胰蛋白酶處理D．步驟④培養(yǎng)過(guò)程中不會(huì)發(fā)生細(xì)胞轉(zhuǎn)化【答案】C【解析】【分析】動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程：取動(dòng)物組織塊→剪碎組織→用胰蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中（原代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞用酶分散為單個(gè)細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液（傳代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)。【詳解】A、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程需要無(wú)菌操作，故步驟①的操作需要在無(wú)菌環(huán)境中進(jìn)行，A錯(cuò)誤；B、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程需要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理動(dòng)物組織，分散成單個(gè)細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液，B錯(cuò)誤；C、傳代培養(yǎng)時(shí)需要用胰蛋白酶處理貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞，使之分散成單個(gè)細(xì)胞，再分瓶培養(yǎng)，C正確；D、步驟④為傳代培養(yǎng)過(guò)程，該過(guò)程中部分細(xì)胞可能發(fā)生細(xì)胞轉(zhuǎn)化，核型改變，D錯(cuò)誤。3．（2020年山東省高考生物試卷（新高考)·13）兩種遠(yuǎn)緣植物的細(xì)胞融合后會(huì)導(dǎo)致一方的染色體被排出。若其中一個(gè)細(xì)胞的染色體在融合前由于某種原因斷裂，形成的染色體片段在細(xì)胞融合后可能不會(huì)被全部排出，未排出的染色體片段可以整合到另一個(gè)細(xì)胞的染色體上而留存在雜種細(xì)胞中。依據(jù)該原理，將普通小麥與耐鹽性強(qiáng)的中間偃麥草進(jìn)行體細(xì)胞雜交獲得了耐鹽小麥新品種，過(guò)程如下圖所示。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）A．過(guò)程①需使用纖維素酶和果膠酶處理細(xì)胞B．過(guò)程②的目的是使中間偃麥草的染色體斷裂C．過(guò)程③中常用滅活的病毒誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合D．耐鹽小麥的染色體上整合了中間偃麥草的染色體片段【答案】C【解析】【分析】從圖中看出①是去掉植物細(xì)胞壁，②是用紫外線誘導(dǎo)染色體變異，③融合形成雜種細(xì)胞?！驹斀狻緼、過(guò)程1是獲得植物細(xì)胞的原生質(zhì)體，需要用纖維素酶和果膠酶將細(xì)胞壁分解，A正確；B、根據(jù)題干信息“將其中一個(gè)細(xì)胞的染色體在融合前斷裂，形成的染色體片段在細(xì)胞融合后可能不會(huì)被全部排出，未排出的染色體片段可以整合到另一個(gè)細(xì)胞的染色體上而留存在雜種細(xì)胞中，將普通小麥與耐鹽性強(qiáng)的中間偃麥草進(jìn)行體細(xì)胞雜交獲得了耐鹽小麥新品種，”故過(guò)程②通過(guò)紫外線照射是使中間偃麥草的染色體斷裂，B正確；C、滅活的病毒誘導(dǎo)是動(dòng)物細(xì)胞融合特有的方法，誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合常用物理法、化學(xué)法，C錯(cuò)誤；D、實(shí)驗(yàn)最終將不抗鹽的普通小麥和抗鹽的偃麥草整合形成耐鹽小麥，說(shuō)明耐鹽小麥染色體上整合了中間偃麥草的染色體片段，D正確。故選C?！军c(diǎn)睛】本題的難點(diǎn)是對(duì)過(guò)程②的分析，考生需要結(jié)合題干中的信息作答。4．（2020年山東省高考生物試卷（新高考)·14）經(jīng)遺傳改造的小鼠胚胎干細(xì)胞注入囊胚，通過(guò)胚胎工程的相關(guān)技術(shù)可以獲得具有不同遺傳特性的實(shí)驗(yàn)小鼠。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）A．用促性腺激素處理雌鼠可以獲得更多的卵子B．體外受精前要對(duì)小鼠的精子進(jìn)行獲能處理C．胚胎移植前要檢查胚胎質(zhì)量并在囊胚或原腸胚階段移植D．遺傳改造的小鼠胚胎干細(xì)胞可以通過(guò)轉(zhuǎn)基因等技術(shù)獲得【答案】C【解析】【分析】1、胚胎移植的基本程序主要包括：①對(duì)供、受體的選擇和處理。選擇遺傳特性和生產(chǎn)性能優(yōu)秀的供體，有健康的體質(zhì)和正常繁殖能力的受體，供體和受體是同一物種。并用激素進(jìn)行同期發(fā)情處理，用促性腺激素對(duì)供體母牛做超數(shù)排卵處理。②配種或人工授精。③對(duì)胚胎的收集、檢查、培養(yǎng)或保存。配種或輸精后第7天，用特制的沖卵裝置，把供體母牛子宮內(nèi)的胚胎沖洗出來(lái)（也叫沖卵）。對(duì)胚胎進(jìn)行質(zhì)量檢查，此時(shí)的胚胎應(yīng)發(fā)育到桑椹或胚囊胚階段。直接向受體移植或放入-196℃的液氮中保存。④對(duì)胚胎進(jìn)行移植。⑤移植后的檢查。對(duì)受體母牛進(jìn)行是否妊娠的檢查。2、體外受精主要包括：卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)、精子的采集和獲能、受精?！驹斀狻緼、促性腺激素可以使雌鼠超數(shù)排卵，獲得更多的卵子，A正確；B、精子只有獲能后才能完成受精，故體外受精前要對(duì)小鼠的精子進(jìn)行獲能處理，B正確；C、胚胎移植通常選擇囊胚期之前的階段，如桑椹胚或囊胚階段，C錯(cuò)誤；D、轉(zhuǎn)基因技術(shù)可以定向改造小鼠的基因，所以遺傳改造的小鼠胚胎干細(xì)胞可以通過(guò)轉(zhuǎn)基因等技術(shù)獲得，D正確。故選C?！军c(diǎn)睛】本題考查胚胎工程的基本知識(shí)，考生需要識(shí)記基本操作，D項(xiàng)中需要結(jié)合基因工程的目的進(jìn)行解答。5．（2020年天津高考生物試卷·1）在克隆哺乳動(dòng)物過(guò)程中，通常作為核移植受體細(xì)胞的是去核的（）A．卵原細(xì)胞B．初級(jí)卵母細(xì)胞C．次級(jí)卵母細(xì)胞D．卵細(xì)胞【答案】C【解析】【分析】體細(xì)胞核移植過(guò)程：【詳解】在克隆哺乳動(dòng)物過(guò)程中，通常選擇減數(shù)第二次分裂中期的去核卵母細(xì)胞作為受體細(xì)胞，即次級(jí)卵母細(xì)胞。故選C。6．（2020年浙江省高考生物試卷（7月選考)·15）下列關(guān)于病毒的敘述，錯(cuò)誤的是（）A．有的病毒經(jīng)滅活處理后，可用于細(xì)胞工程中介導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞的融合B．適當(dāng)增加機(jī)體內(nèi)參與免疫的細(xì)胞數(shù)量與活性，可提高對(duì)新型冠狀病毒的抵御能力C．在某人的分泌物中檢測(cè)到新型冠狀病毒，推測(cè)該病毒的增殖不依賴于宿主細(xì)胞D．用高溫高壓處理病毒使其失去感染能力，原因之一是病毒的蛋白質(zhì)發(fā)生了熱變性【答案】C【解析】【分析】誘導(dǎo)細(xì)胞融合的方法有三種：生物方法（病毒）、化學(xué)方法（聚乙二醇PEG）、物理方法（離心、震動(dòng)、電刺激）。某些病毒如：仙臺(tái)病毒、副流感病毒和新城雞瘟病毒的被膜中有融合蛋白，可介導(dǎo)病毒同宿主細(xì)胞融合，也可介導(dǎo)細(xì)胞與細(xì)胞的融合，因此可以用紫外線滅活的此類病毒誘導(dǎo)細(xì)胞融合?！驹斀狻緼、有的病毒經(jīng)滅活處理后，可用于細(xì)胞工程中介導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞的融合，如滅活的病毒，A正確；

B、適當(dāng)增加機(jī)體內(nèi)參與免疫的細(xì)胞數(shù)量與活性，可以參與免疫調(diào)節(jié)中的體液和細(xì)胞免疫，盡可能殺死更多的病毒，可提高對(duì)新型冠狀病毒的抵御能力，B正確；

C、在某人的分泌物中檢測(cè)到新型冠狀病毒，是因?yàn)椴《窘爰?xì)胞后大量繁殖，病毒從細(xì)胞中釋放出來(lái)，不能說(shuō)明該病毒的增殖不依賴于宿主細(xì)胞，C錯(cuò)誤；

D、用高溫高壓處理病毒使其失去感染能力，原因之一是病毒的蛋白質(zhì)在高溫高壓下，空間結(jié)構(gòu)發(fā)生變化，肽鏈松散，發(fā)生了變性，D正確。

故選C。7．（2020年浙江省高考生物試卷（7月選考)·24）下列關(guān)于基因工程的敘述，正確的是（）A．若受體大腸桿菌含有構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)用到的限制性核酸內(nèi)切酶，則一定有利于該重組質(zhì)粒進(jìn)入受體并保持結(jié)構(gòu)穩(wěn)定B．抗除草劑基因轉(zhuǎn)入某抗鹽植物獲得2個(gè)穩(wěn)定遺傳轉(zhuǎn)基因品系，抗性鑒定為抗除草劑抗鹽和抗除草劑不抗鹽。表明一定是抗鹽性的改變與抗除草劑基因的轉(zhuǎn)入無(wú)關(guān)C．抗除草劑基因轉(zhuǎn)入某植物獲得轉(zhuǎn)基因植株，其DNA檢測(cè)均含目的基因，抗性鑒定為抗除草劑和不抗除草劑。表明一定是前者表達(dá)了抗性蛋白而后者只表達(dá)抗性基因RNAD．已知不同分子量DNA可分開(kāi)成不同條帶，相同分子量的為一條帶。用某種限制性核酸內(nèi)切酶完全酶切環(huán)狀質(zhì)粒后，出現(xiàn)3條帶。表明該質(zhì)粒上一定至少有3個(gè)被該酶切開(kāi)的位置【答案】D【解析】【分析】基因工程中通常要有多種工具酶、目的基因、載體和宿主細(xì)胞等基本要素，并按一定的程序進(jìn)行操作，包括目的基因的獲得、重組DNA的形成、重組DNA導(dǎo)入受體細(xì)胞、篩選含有目的基因的受體細(xì)胞和目的基因的表達(dá)等幾個(gè)方面?！驹斀狻緼、若受體大腸桿菌含有構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)用到的限制性核酸內(nèi)切酶，則該酶會(huì)對(duì)進(jìn)入受體的重組質(zhì)粒進(jìn)行切割，不利于其保持結(jié)構(gòu)穩(wěn)定，A錯(cuò)誤；B、抗除草劑基因轉(zhuǎn)入抗鹽植物，獲得了抗除草劑抗鹽品系和抗除草劑不抗鹽品系，不抗鹽品系的產(chǎn)生可能是轉(zhuǎn)入的抗除草劑基因插入到抗鹽基因內(nèi)，影響其表達(dá)造成，B錯(cuò)誤；C、轉(zhuǎn)基因植物中均含抗除草劑基因，但存在抗除草劑和不抗除草劑兩種植株，前者表達(dá)了抗性蛋白，后者可能抗除草劑基因未轉(zhuǎn)錄出mRNA，或轉(zhuǎn)錄出的mRNA未能翻譯成蛋白質(zhì)，C錯(cuò)誤；D、某種限制性內(nèi)切酶完全酶切環(huán)狀質(zhì)粒后，出現(xiàn)3條帶，即3種不同分子量DNA，因此環(huán)狀質(zhì)粒上至少有3個(gè)酶切位點(diǎn)，D正確。故選D。8．（2019北京卷·4）甲、乙是嚴(yán)重危害某二倍體觀賞植物的病害。研究者先分別獲得抗甲、乙的轉(zhuǎn)基因植株。再將二者雜交后得到F1，結(jié)合單倍體育種技術(shù)，培育出同時(shí)抗甲、乙的植物新品種，以下對(duì)相關(guān)操作及結(jié)果的敘述，錯(cuò)誤的是A．將含有目的基因和標(biāo)記基因的載體導(dǎo)入受體細(xì)胞B．通過(guò)接種病原體對(duì)轉(zhuǎn)基因的植株進(jìn)行抗病性鑒定C．調(diào)整培養(yǎng)基中植物激素比例獲得F1花粉再生植株D．經(jīng)花粉離體培養(yǎng)獲得的若干再生植株均為二倍體【答案】D【解析】要獲得轉(zhuǎn)基因的抗甲或抗乙植株，需要構(gòu)建基因表達(dá)載體（含目的基因、標(biāo)記基因、啟動(dòng)子、終止子、復(fù)制原點(diǎn)），再把基因表達(dá)載體導(dǎo)入受體細(xì)胞中，A正確；對(duì)轉(zhuǎn)基因植株進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，可以通過(guò)抗病接種實(shí)驗(yàn)進(jìn)行個(gè)體水平的檢測(cè)，B正確；對(duì)F1的花粉進(jìn)行組織培養(yǎng)時(shí)，需要經(jīng)過(guò)脫分化和再分化過(guò)程，其中生長(zhǎng)素/細(xì)胞分裂素比例高時(shí)利于根的分化，比例低時(shí)利于芽的分化，C正確；經(jīng)花粉離體培養(yǎng)獲得的植株是單倍體，D錯(cuò)誤。因此，本題答案選D。9．（2019江蘇卷·16）下列生物技術(shù)操作對(duì)遺傳物質(zhì)的改造，不會(huì)遺傳給子代的是A．將胰島素基因表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)入大腸桿菌，篩選獲得基因工程菌B．將花青素代謝基因?qū)胫参矬w細(xì)胞，經(jīng)組培獲得花色變異植株C．將腸乳糖酶基因?qū)肽膛Ｊ芫?，培育出產(chǎn)低乳糖牛乳的奶牛D．將腺苷酸脫氨酶基因轉(zhuǎn)入淋巴細(xì)胞后回輸患者，進(jìn)行基因治療【答案】D【解析】將含胰島素基因表達(dá)載體的重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)入大腸桿菌獲得的轉(zhuǎn)基因菌，可以通過(guò)二分裂將胰島素基因傳給后代，A不符合題意；將花青素代謝基因?qū)胫参矬w細(xì)胞，再經(jīng)植物組織培養(yǎng)獲得的植株所有細(xì)胞均含有花青素代謝基因，花青素代謝基因會(huì)隨該植物傳給后代，B不符合題意；將腸乳糖酶基因?qū)肽膛Ｊ芫?，培育出產(chǎn)低乳糖牛乳的奶牛所有細(xì)胞均含有腸乳糖酶基因，可以遺傳給后代，C不符合題意；該患者進(jìn)行基因治療時(shí)，只有淋巴細(xì)胞含有該腺苷酸脫氨酶基因，性原細(xì)胞不含該基因，故不能遺傳給后代，D符合題意。10．（2019江蘇卷·23）下圖為雜交瘤細(xì)胞制備示意圖。骨髓瘤細(xì)胞由于缺乏次黃嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶（HGPRT-），在HAT篩選培養(yǎng)液中不能正常合成DNA，無(wú)法生長(zhǎng)。下列敘述正確的是A．可用滅活的仙臺(tái)病毒誘導(dǎo)細(xì)胞融合B．兩兩融合的細(xì)胞都能在HAT培養(yǎng)液中生長(zhǎng)C．雜交瘤細(xì)胞需進(jìn)一步篩選才能用于生產(chǎn)D．細(xì)胞膜的流動(dòng)性是細(xì)胞融合的基礎(chǔ)【答案】ACD【解析】誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法有電激、聚乙二醇、滅活的病毒（如滅活的仙臺(tái)病毒）等，A正確；兩兩融合的細(xì)胞包括免疫B細(xì)胞與免疫B細(xì)胞融合的具有同種核的細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合的具有同種核的細(xì)胞、免疫B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合的雜交瘤細(xì)胞，骨髓瘤細(xì)胞雖然能無(wú)限增殖，但缺乏次黃嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶，免疫B細(xì)胞雖然有次黃嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶，但不具有無(wú)限增殖的本領(lǐng)，所以在HAT篩選培養(yǎng)液中，兩兩融合的具有同種核的細(xì)胞都無(wú)法生長(zhǎng)，只有雜交瘤細(xì)胞才能生長(zhǎng)，B錯(cuò)誤；因每個(gè)免疫B細(xì)胞只分泌一種特異性抗體，因此在HAT篩選培養(yǎng)液中篩選出來(lái)的眾多的雜交瘤細(xì)胞所分泌的抗體，不一定都是人類所需要的，還需要進(jìn)一步把能分泌人類所需要抗體的雜交瘤細(xì)胞篩選出來(lái)，C正確；動(dòng)物細(xì)胞融合是以細(xì)胞膜的流動(dòng)性為基礎(chǔ)的，D正確。11．（2019天津市七校聯(lián)考）利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)羧酸酯酶（CarE）制劑，用于降解某種農(nóng)藥的殘留，基本流程如圖。下列敘述正確的是A．過(guò)程①的反應(yīng)體系中需要加入逆轉(zhuǎn)錄酶和核糖核苷酸

B．過(guò)程②需使用限制酶和DNA聚合酶，是基因工程的核心步驟

C．過(guò)程③需要使用NaCL溶液制備感受態(tài)的大腸桿菌細(xì)胞D．過(guò)程可利用DNA分子雜交技術(shù)鑒定CarE基因是否成功導(dǎo)入受體細(xì)胞【答案】D【解析】過(guò)程①表示通過(guò)反轉(zhuǎn)錄法合成目的基因，該過(guò)程需要逆轉(zhuǎn)錄酶和脫氧核糖核苷酸，A錯(cuò)誤；過(guò)程②需使用限制酶和DNA連接酶構(gòu)建基因表達(dá)載體，是基因工程的核心步驟，B錯(cuò)誤；過(guò)程③常用Ca2+處理大腸桿菌使其成為易于吸收DNA的感受態(tài)細(xì)胞，C錯(cuò)誤；過(guò)程④可利用DNA分子雜交技術(shù)鑒定CarE基因是否成功導(dǎo)入了受體細(xì)胞，D正確。12．（2019上海二模）下圖為植物體細(xì)胞雜交過(guò)程示意圖。在利用植物細(xì)胞A和B培育成為雜種植株過(guò)程中，運(yùn)用的技術(shù)有A．干細(xì)胞技術(shù)和細(xì)胞融合技術(shù) B．細(xì)胞融合技術(shù)和植物組織培養(yǎng)技術(shù)

C．細(xì)胞融合技術(shù)和細(xì)胞核移植技術(shù) D．干細(xì)胞技術(shù)和植物組織培養(yǎng)技術(shù)【答案】B【解析】該圖為植物體細(xì)胞雜交過(guò)程示意圖，過(guò)程①②③是植物細(xì)胞雜交過(guò)程，運(yùn)用了細(xì)胞融合技術(shù)，體現(xiàn)了細(xì)胞膜具有一定的流動(dòng)性；④⑤是植物組織培養(yǎng)過(guò)程，培育成雜種植株，體現(xiàn)了植物細(xì)胞的全能性，故選B。13．（2018江蘇卷，10）下列關(guān)于采用胚胎工程技術(shù)實(shí)現(xiàn)某良種肉用?？焖俜敝车臄⑹?，正確的是（）A．采取激素注射等方法對(duì)良種母牛作超數(shù)排卵處理B．體外培養(yǎng)發(fā)育到原腸胚期的胚胎即可進(jìn)行移植C．使用免疫抑制劑以避免代孕牛對(duì)植入胚胎的排斥反應(yīng)D．利用胚胎分割技術(shù)，同卵多胎較同卵雙胎成功率更高【答案】A【解析】用促性腺激素對(duì)良種奶牛進(jìn)行注射處理，可促使其超數(shù)排卵，A正確；進(jìn)行移植的胚胎是桑椹胚或囊胚，B錯(cuò)誤；受體對(duì)移植的胚胎幾乎不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，因此無(wú)需使用免疫抑制劑，C錯(cuò)誤；利用胚胎分割技術(shù)，同卵雙胎較同卵多胎成功率更高，D錯(cuò)誤。14．（2018北京卷，5）用XhoI和SalI兩種限制性核酸內(nèi)切酶分別處理同一DNA片段，酶切位點(diǎn)及酶切產(chǎn)物分離結(jié)果如圖。以下敘述不正確的是（）A．如圖中兩種酶識(shí)別的核苷酸序列不同B．如圖中酶切產(chǎn)物可用于構(gòu)建重組DNAC．泳道①中是用SalI處理得到的酶切產(chǎn)物D．圖中被酶切的DNA片段是單鏈DNA【答案】D【解析】限制酶識(shí)別特定的脫氧核苷酸序列，不同的限制酶能識(shí)別不同的核苷酸序列，由電泳圖可知XhoI和SalI兩種酶分別切割時(shí)，識(shí)別的序列不同，A正確；同種限制酶切割出的DNA片段，具有相同的粘性末端，再用DNA連接酶進(jìn)行連接，可以構(gòu)成重組DNA，B正確；SalI將DNA片段切成4段，XhoI將DNA片段切成3段，根據(jù)電泳結(jié)果可知泳道①為SalI，泳道②為XhoI，C正確；限制酶切割雙鏈DNA，酶切后的DNA片段仍然是雙鏈DNA，D錯(cuò)誤。14．（2017年江蘇卷，11）牛雄性胚胎中存在特異性H-Y抗原，可在牛早期胚胎培養(yǎng)液中添加H-Y單克隆抗體，篩選胚胎進(jìn)行移植，以利用乳腺生物反應(yīng)器進(jìn)行生物制藥。下列相關(guān)敘述正確的是（）A．H-Y單克隆抗體由骨髓瘤細(xì)胞分泌 B．應(yīng)選用原腸胚做雌雄鑒別C．鑒別后的雄性胚胎可直接做胚胎移植 D．用H-Y抗原免疫母?？色@得相應(yīng)抗體【答案】D【解析】單克隆抗體由雜交瘤細(xì)胞分泌，A錯(cuò)誤；做雌雄性別鑒別應(yīng)選擇囊胚期的滋養(yǎng)層細(xì)胞，B錯(cuò)誤；由于是利用乳腺生物反應(yīng)器進(jìn)行生物制藥，則鑒別后的雌性胚胎可直接做胚胎移植，雄性胚胎沒(méi)有意義，C錯(cuò)誤；H-Y抗原免疫母牛，使其體內(nèi)產(chǎn)生體液免疫，產(chǎn)生相應(yīng)的漿細(xì)胞，獲得相應(yīng)抗體，D正確。15．（2017年江蘇卷，14）下列關(guān)于小鼠體外受精及胚胎發(fā)育的敘述，錯(cuò)誤的是（）A．精子在獲能液中于37℃、5%CO2條件下培養(yǎng)的目的是使精子獲能B．小鼠在特定光控周期條件下飼養(yǎng)，注射相關(guān)激素有促進(jìn)超數(shù)排卵的作用C．分割的胚胎細(xì)胞有相同的遺傳物質(zhì)，因此發(fā)育成的個(gè)體沒(méi)有形態(tài)學(xué)差異D．注射到囊胚腔中的胚胎干細(xì)胞可以參與個(gè)體器官的發(fā)育【答案】C【解析】精子在獲能液中于37℃、5%CO2條件下培養(yǎng)，可使精子獲能，A正確；給小鼠注射促性腺激素可促進(jìn)其超數(shù)排卵，B正確；分割的胚胎細(xì)胞具有相同的遺傳物質(zhì)，但發(fā)育過(guò)程中基因突變或環(huán)境因素影響等，最終發(fā)育成的個(gè)體可能會(huì)有形態(tài)學(xué)差異，C錯(cuò)誤；胚胎干細(xì)胞具有發(fā)育的全能性，能分化成各種組織器官，D正確。16．（2017年北京卷，5）為了增加菊花花色類型，研究者從其他植物中克隆出花色基因C（圖1），擬將其與質(zhì)粒（圖2）重組，再借助農(nóng)桿菌導(dǎo)入菊花中。下列操作與實(shí)驗(yàn)?zāi)康牟环氖牵ǎ〢．用限制性核酸內(nèi)切酶EcoRI和連接酶構(gòu)建重組質(zhì)粒B．用含C基因的農(nóng)桿菌侵染菊花愈傷組織，將C基因?qū)爰?xì)胞C．在培養(yǎng)基中添加卡那霉素，篩選被轉(zhuǎn)化的菊花細(xì)胞D．用分子雜交方法檢測(cè)C基因是否整合到菊花染色體上【答案】C【解析】用限制性核酸內(nèi)切酶EcoRI處理目的基因和質(zhì)粒，可以使目的基因兩側(cè)和質(zhì)粒產(chǎn)生相同的黏性末端，再用連接酶把切口連起來(lái)就能構(gòu)建成重組質(zhì)粒，A正確；農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法適用于雙子葉植物或裸子植物，菊花屬于雙子葉植物，故可用含C基因的農(nóng)桿菌侵染菊花愈傷組織，將C基因?qū)爰?xì)胞，B正確；質(zhì)粒中只有潮霉素抗性基因，被轉(zhuǎn)化的菊花細(xì)胞只對(duì)潮霉素具有抗性，在培養(yǎng)基中添加卡那霉素，不能篩選被轉(zhuǎn)化的菊花細(xì)胞，C錯(cuò)誤；檢測(cè)目的基因是否整合到受體細(xì)胞的染色體上，可采用DNA分子雜交技術(shù)，D正確。17.（2015·江蘇卷.3）下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞工程和胚胎工程的敘述,正確的是（）A.乳腺細(xì)胞比乳腺癌細(xì)胞更容易進(jìn)行離體培養(yǎng)B.細(xì)胞核移植主要在同種動(dòng)物、同種組織的細(xì)胞之間進(jìn)行C.采用胚胎分割技術(shù)產(chǎn)生同卵多胚的數(shù)量是有限的D.培養(yǎng)早期胚胎的培養(yǎng)液中含維生素、激素等多種能源物質(zhì)【答案】C【解析】乳腺癌細(xì)胞的分裂能力比乳腺細(xì)胞強(qiáng)，所以乳腺癌細(xì)胞比乳腺細(xì)胞更容易進(jìn)行離體培養(yǎng)，A錯(cuò)誤；細(xì)胞核移植發(fā)生在同種或異種生物的細(xì)胞之間，B錯(cuò)誤；由于胚胎分割形成的多胚中遺傳物質(zhì)少，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)少，成功的可能性低，所以胚胎分割技術(shù)產(chǎn)生同卵多胚的數(shù)量有限，C正確；培養(yǎng)早期胚胎的培養(yǎng)液中維生素、激素起調(diào)節(jié)作用，不是能源物質(zhì)，D錯(cuò)誤。18.(2015·四川卷.2)精子內(nèi)的頂體由溶酶體特化而來(lái)。精卵識(shí)別后，頂體膜與精子細(xì)胞膜融合，釋放溶酶體酶使卵子外層形成孔洞，以利于精卵融合形成受精卵。下列敘述正確的是（）A．頂體內(nèi)儲(chǔ)存的溶酶體酶是在精子的溶酶體中合成的B．精子游向卵子所需的能量來(lái)自線粒體和細(xì)胞質(zhì)基質(zhì) C．頂體膜和精子細(xì)胞膜融合體現(xiàn)生物膜的選擇透過(guò)性D．受精卵中的遺傳物質(zhì)一半來(lái)自父方另一半來(lái)自母方【答案】B【解析】應(yīng)選用桑椹胚或囊胚期的胚胎進(jìn)行胚胎移植,B項(xiàng)錯(cuò)誤;人β-酪蛋白基因在細(xì)胞核內(nèi)進(jìn)行轉(zhuǎn)錄,D項(xiàng)錯(cuò)誤。19.（2015·天津卷.6）2015年2月3日，英國(guó)議會(huì)下院通過(guò)一項(xiàng)歷史性法案，允許以醫(yī)學(xué)手段培育“三親嬰兒”。三親嬰兒的培育過(guò)程可選用如下技術(shù)路線。據(jù)圖分析，下列敘述錯(cuò)誤的是（）A、該技術(shù)可避免母親的線粒體遺傳病基因傳遞給后代B、捐獻(xiàn)者攜帶的紅綠色盲基因不能遺傳給三親嬰兒C、三親嬰兒的染色體全部來(lái)自母親提供的細(xì)胞核D、三親嬰兒的培育還需要早期環(huán)胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù)【答案】C【解析】受體母親提供細(xì)胞核，供體提供去核卵母細(xì)胞，這樣就可避免受體母親的線粒體遺傳物質(zhì)（線粒體中的致病基因）傳遞給子代；A正確。紅綠色盲屬于核基因控制的遺傳病，而由圖示可知捐獻(xiàn)者提供的是去核的卵細(xì)胞，因此不會(huì)把其攜帶的紅綠色盲基因傳遞給三親嬰兒；B正確。由圖示可知三親嬰兒的的染色體來(lái)自于母親和父親；C錯(cuò)誤。由圖示可知三親嬰兒的獲得運(yùn)用了動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、核移植技術(shù)，體外受精形成早期胚胎需要進(jìn)行早期胚胎培養(yǎng)等；D正確。20.（2015·北京卷.5）在應(yīng)用農(nóng)桿菌侵染植物葉片獲得轉(zhuǎn)基因植株的常規(guī)實(shí)驗(yàn)步驟中，不需要的是（）A.用攜帶目的基因的農(nóng)桿菌侵染植物細(xì)胞B.用選擇培養(yǎng)基篩法導(dǎo)入目的基因的細(xì)胞C.用聚乙二醇誘導(dǎo)轉(zhuǎn)基因細(xì)胞的原生物質(zhì)融合D.用適當(dāng)比例的生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素誘導(dǎo)愈傷組織生芽【答案】C【解析】農(nóng)桿菌侵染細(xì)菌是基因工程中常常用到的把目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法，A正確；目的基因是否導(dǎo)入了細(xì)胞，需要在選擇培養(yǎng)基上進(jìn)行篩選，B正確；在植物細(xì)胞組織培養(yǎng)的過(guò)程中，需要調(diào)整培養(yǎng)基中生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的比例，來(lái)達(dá)到是對(duì)其脫分化和再分化的控制，D也正確；在農(nóng)桿菌侵染植物細(xì)胞的過(guò)程中并沒(méi)有涉及到原生質(zhì)體的融合，所以C錯(cuò)誤。21.(2015·重慶卷.6)下列有關(guān)人胰島素基因表達(dá)載體的敘述，正確的是（）A．表達(dá)載體中的胰島素基因可通過(guò)人肝細(xì)胞mRNA反轉(zhuǎn)錄獲得B．表達(dá)載體的復(fù)制和胰島素基因的表達(dá)均啟動(dòng)于復(fù)制原（起）點(diǎn)C．借助抗生素抗性基因可將含胰島素基因的受體細(xì)胞篩選出來(lái)D．啟動(dòng)子和終止密碼子均在胰島素基因的轉(zhuǎn)錄中起作用【答案】C【解析】人肝細(xì)胞中胰島素基因不表達(dá)，因而不存在胰島素mRNA；A錯(cuò)誤。復(fù)制原點(diǎn)是基因表達(dá)載體復(fù)制的起點(diǎn)，而胰島素基因表達(dá)的起點(diǎn)是啟動(dòng)子；B錯(cuò)誤。借助抗生素抗性基因可將含胰島素基因的受體細(xì)胞篩選出來(lái)；C正確。啟動(dòng)子與RNA聚合酶結(jié)合啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄過(guò)程，終止密碼子是翻譯的終止信號(hào)；D錯(cuò)誤。22．[2014·天津卷]為達(dá)到相應(yīng)目的，必須通過(guò)分子檢測(cè)的是()A．?dāng)y帶鏈霉素抗性基因受體菌的篩選B．產(chǎn)生抗人白細(xì)胞介素-8抗體的雜交瘤細(xì)胞的篩選C．轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉植株抗蟲(chóng)效果的鑒定D．21三體綜合征的診斷【答案】B【解析】可通過(guò)將受體菌接種在含鏈霉素的培養(yǎng)基中篩選攜帶鏈霉素抗性基因的受體菌，A項(xiàng)錯(cuò)誤。抗人白細(xì)胞介素-8抗體的雜交瘤細(xì)胞應(yīng)通過(guò)抗原抗體雜交技術(shù)篩選產(chǎn)生，B項(xiàng)正確。在棉花田中人工放入害蟲(chóng)可檢驗(yàn)轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉的抗蟲(chóng)效果，C項(xiàng)錯(cuò)誤?？衫蔑@微鏡檢測(cè)21三體綜合征患者的染色體組成，D項(xiàng)錯(cuò)誤。23．[2014·天津卷]哺乳動(dòng)物卵原細(xì)胞減數(shù)分裂形成成熟卵子的過(guò)程，只有在促性腺激素和精子的誘導(dǎo)下才能完成。下面為某哺乳動(dòng)物卵子及早期胚胎的形成過(guò)程示意圖(N表示染色體組)。據(jù)圖分析，下列敘述錯(cuò)誤的是()A．次級(jí)卵母細(xì)胞形成的過(guò)程需要激素調(diào)節(jié)B．細(xì)胞Ⅲ只有在精子的作用下才能形成成熟卵子C．Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ細(xì)胞分裂后期染色體數(shù)目相同D．培育轉(zhuǎn)基因動(dòng)物應(yīng)選擇細(xì)胞Ⅳ作為受體細(xì)胞【答案】C【解析】本題綜合考查卵細(xì)胞的形成過(guò)程，涉及細(xì)胞分裂過(guò)程中的變化、基因工程等相關(guān)內(nèi)容，屬于理解、識(shí)圖能力。據(jù)圖可知，初級(jí)卵母細(xì)胞形成次級(jí)卵母細(xì)胞的過(guò)程需要促性腺激素的調(diào)節(jié)，A項(xiàng)正確；細(xì)胞Ⅲ為次級(jí)卵母細(xì)胞，其減數(shù)第二次分裂是在輸卵管中伴隨著受精作用完成的，B項(xiàng)正確；Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ分別為初級(jí)卵母細(xì)胞、次級(jí)卵母細(xì)胞和受精卵，它們?cè)诩?xì)胞分裂后期的染色體組數(shù)依次為2N、2N、4N，染色體數(shù)目不同，C項(xiàng)錯(cuò)誤；動(dòng)物細(xì)胞的受精卵全能性高，因此培育轉(zhuǎn)基因動(dòng)物常用受精卵作為受體細(xì)胞，D項(xiàng)正確。24．[2014·重慶卷]如圖是利用基因工程培育抗蟲(chóng)植物的示意圖。以下相關(guān)敘述，正確的是()A．②的構(gòu)建需要限制性核酸內(nèi)切酶和DNA聚合酶參與B．③侵染植物細(xì)胞后，重組Ti質(zhì)粒整合到④的染色體上C．④的染色體上若含抗蟲(chóng)基因，則⑤就表現(xiàn)出抗蟲(chóng)性狀D．⑤只要表現(xiàn)出抗蟲(chóng)性狀就表明植株發(fā)生了可遺傳變異【答案】D【解析】構(gòu)建重組質(zhì)粒需要限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶，而不需要DNA聚合酶，A項(xiàng)錯(cuò)誤。含重組Ti質(zhì)粒的農(nóng)桿菌侵染植物細(xì)胞后，重組Ti質(zhì)粒的T-DNA整合到受體細(xì)胞的染色體上，而不是重組Ti質(zhì)粒整合到受體細(xì)胞的染色體上，B項(xiàng)錯(cuò)誤。導(dǎo)入受體細(xì)胞的目的基因表達(dá)后，轉(zhuǎn)基因植株方能表現(xiàn)出相應(yīng)性狀，若目的基因在受體細(xì)胞中不表達(dá)，轉(zhuǎn)基因植株則不能表現(xiàn)出相應(yīng)性狀，C項(xiàng)錯(cuò)誤?；蚬こ虒?dǎo)致的生物變異是可遺傳變異，D項(xiàng)正確。25．[2014·北京卷]在25℃的實(shí)驗(yàn)條件下可順利完成的是()A．光合色素的提取與分離B．用斐林(本尼迪特)試劑鑒定還原糖C．大鼠神經(jīng)細(xì)胞的培養(yǎng)D．制備用于植物組織培養(yǎng)的固體培養(yǎng)基【答案】A【解析】光合色素的提取和分離實(shí)驗(yàn)在常溫下進(jìn)行，即在25℃的條件可順利完成，A項(xiàng)正確。用斐林試劑鑒定還原糖實(shí)驗(yàn)中需要水浴加熱，才能出現(xiàn)磚紅色沉淀，常溫條件下不發(fā)生反應(yīng)，B項(xiàng)錯(cuò)誤。哺乳動(dòng)物和人類神經(jīng)細(xì)胞的培養(yǎng)的生存環(huán)境溫度是35～37℃，C項(xiàng)錯(cuò)誤。制備用于植物組織培養(yǎng)的固體培養(yǎng)基的溫度一般是18～22℃，D項(xiàng)錯(cuò)誤。26．[2014·北京卷]在25℃的實(shí)驗(yàn)條件下可順利完成的是()A．光合色素的提取與分離B．用斐林(本尼迪特)試劑鑒定還原糖C．大鼠神經(jīng)細(xì)胞的培養(yǎng)D．制備用于植物組織培養(yǎng)的固體培養(yǎng)基【答案】A【解析】光合色素的提取和分離實(shí)驗(yàn)在常溫下進(jìn)行，即在25℃的條件可順利完成，A項(xiàng)正確。用斐林試劑鑒定還原糖實(shí)驗(yàn)中需要水浴加熱，才能出現(xiàn)磚紅色沉淀，常溫條件下不發(fā)生反應(yīng)，B項(xiàng)錯(cuò)誤。哺乳動(dòng)物和人類神經(jīng)細(xì)胞的培養(yǎng)的生存環(huán)境溫度是35～37℃，C項(xiàng)錯(cuò)誤。制備用于植物組織培養(yǎng)的固體培養(yǎng)基的溫度一般是18～22℃，D項(xiàng)錯(cuò)誤。27．[2014·天津卷]為達(dá)到相應(yīng)目的，必須通過(guò)分子檢測(cè)的是()A．?dāng)y帶鏈霉素抗性基因受體菌的篩選B．產(chǎn)生抗人白細(xì)胞介素-8抗體的雜交瘤細(xì)胞的篩選C．轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉植株抗蟲(chóng)效果的鑒定D．21三體綜合征的診斷【答案】B【解析】可通過(guò)將受體菌接種在含鏈霉素的培養(yǎng)基中篩選攜帶鏈霉素抗性基因的受體菌，A項(xiàng)錯(cuò)誤?？谷税准?xì)胞介素-8抗體的雜交瘤細(xì)胞應(yīng)通過(guò)抗原抗體雜交技術(shù)篩選產(chǎn)生，B項(xiàng)正確。在棉花田中人工放入害蟲(chóng)可檢驗(yàn)轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉的抗蟲(chóng)效果，C項(xiàng)錯(cuò)誤?？衫蔑@微鏡檢測(cè)21三體綜合征患者的染色體組成，D項(xiàng)錯(cuò)誤。28．[2014·浙江卷]下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述，正確的是()A．連續(xù)細(xì)胞系的細(xì)胞大多具有二倍體核型B．某些癌細(xì)胞在合適條件下能逆轉(zhuǎn)為正常細(xì)胞C．由多個(gè)祖細(xì)胞培養(yǎng)形成的細(xì)胞群為一個(gè)克隆D．未經(jīng)克隆化培養(yǎng)的細(xì)胞系細(xì)胞具有相同的性狀【答案】B【解析】本題考查的是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程。連續(xù)細(xì)胞系被認(rèn)為是發(fā)生了轉(zhuǎn)化的細(xì)胞系，大多數(shù)具有異倍體核型，A項(xiàng)錯(cuò)誤。一般來(lái)說(shuō)，癌細(xì)胞是不能逆轉(zhuǎn)為正常細(xì)胞的，但在一些因素(如放射治療)的作用下可使癌細(xì)胞恢復(fù)為正常細(xì)胞，B項(xiàng)正確。細(xì)胞克隆的基本要求是來(lái)源于單個(gè)細(xì)胞(一個(gè)共同的祖細(xì)胞)，不能來(lái)自多個(gè)細(xì)胞，C項(xiàng)錯(cuò)誤。未經(jīng)克隆化培養(yǎng)的細(xì)胞系細(xì)胞具有異質(zhì)性，所以不是都具有相同的性狀，D項(xiàng)錯(cuò)誤。29．[2014·江蘇卷]杜泊羊以其生長(zhǎng)速度快、肉質(zhì)好等優(yōu)點(diǎn)，被稱為“鉆石級(jí)”肉用綿羊?？蒲泄ぷ髡咄ㄟ^(guò)胚胎工程快速繁殖杜泊羊的流程如下圖所示，相關(guān)敘述正確的是()A．為了獲得更多的卵母細(xì)胞，需用雌激素對(duì)雌性杜泊羊進(jìn)行處理B．從卵巢中采集的卵母細(xì)胞可直接與獲能的精子進(jìn)行體外受精C．為避免代孕綿羊?qū)χ踩肱咛ギa(chǎn)生排斥反應(yīng)，應(yīng)注射免疫抑制劑D．為了進(jìn)一步擴(kuò)大繁殖規(guī)模，可通過(guò)胚胎分割技術(shù)獲得同卵雙胎【答案】D【解析】胚胎工程中用促性腺激素來(lái)促使雌性個(gè)體超數(shù)排卵，A項(xiàng)錯(cuò)誤。從卵巢中采集的卵母細(xì)胞為初級(jí)卵母細(xì)胞，需要培養(yǎng)至減數(shù)第二次分裂中期才能與獲能的精子進(jìn)行受精，B項(xiàng)錯(cuò)誤。胚胎學(xué)原理中母體對(duì)外來(lái)胚胎沒(méi)有排斥作用，故不需要注射免疫抑制劑，C項(xiàng)錯(cuò)誤。胚胎分割產(chǎn)生的胚胎遺傳物質(zhì)來(lái)源相同，分割產(chǎn)生的多個(gè)胚胎能用于擴(kuò)大繁殖規(guī)模，如用胚胎分割技術(shù)獲得同卵雙胎，D項(xiàng)正確。30．[2014·江蘇卷]下列關(guān)于蛙胚胎發(fā)育過(guò)程的敘述，正確的是()A．通過(guò)細(xì)胞分裂不斷增加細(xì)胞數(shù)量，并在一定時(shí)期發(fā)生細(xì)胞分化B．胚胎發(fā)育過(guò)程中細(xì)胞不斷分裂，但不發(fā)生凋亡C．隨著細(xì)胞分裂次數(shù)的增加，蛙胚的有機(jī)物總量不斷增加D．發(fā)育過(guò)程中蛙胚從環(huán)境中獲得的氧氣和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)逐漸增加【答案】A【解析】蛙受精卵經(jīng)過(guò)細(xì)胞分裂形成早期胚胎，在早期胚胎發(fā)育過(guò)程中從囊胚期就開(kāi)始出現(xiàn)分化，A項(xiàng)正確。胚胎發(fā)育過(guò)程中細(xì)胞不斷分裂，但是到一定時(shí)期部分細(xì)胞就不再分裂而分化為有特定形態(tài)、結(jié)構(gòu)及功能的細(xì)胞，行使功能一段時(shí)間后就會(huì)衰老和凋亡，B項(xiàng)錯(cuò)誤。在胚胎發(fā)育的早期，有機(jī)物在不斷分解為細(xì)胞分裂供能，所以有機(jī)物總量減少，C項(xiàng)錯(cuò)誤。蛙胚胎發(fā)育過(guò)程中始終由卵黃提供營(yíng)養(yǎng)，D項(xiàng)錯(cuò)誤。31．[2014·重慶卷]生物技術(shù)安全性和倫理問(wèn)題是社會(huì)關(guān)注的熱點(diǎn)。下列敘述，錯(cuò)誤的是()A．應(yīng)嚴(yán)格選擇轉(zhuǎn)基因植物的目的基因，避免產(chǎn)生對(duì)人類有害的物質(zhì)B．當(dāng)今社會(huì)的普遍觀點(diǎn)是禁止克隆人的實(shí)驗(yàn)，但不反對(duì)治療性克隆C．反對(duì)設(shè)計(jì)試管嬰兒的原因之一是有人濫用此技術(shù)選擇性設(shè)計(jì)嬰兒D．生物武器是用微生物、毒素、干擾素及重組致病菌等來(lái)形成殺傷力【答案】D【解析】在應(yīng)用基因工程技術(shù)培育轉(zhuǎn)基因植物時(shí)，應(yīng)避免選擇可能產(chǎn)生對(duì)人類有害物質(zhì)的目的基因，A項(xiàng)正確。在對(duì)克隆技術(shù)引發(fā)的倫理問(wèn)題的爭(zhēng)論中，普遍的觀點(diǎn)是禁止克隆人的實(shí)驗(yàn)，但不反對(duì)治療性克隆，B項(xiàng)正確。在對(duì)胚胎工程技術(shù)引發(fā)的倫理問(wèn)題的爭(zhēng)論中，反對(duì)設(shè)計(jì)試管嬰兒的原因之一是可能有人濫用此技術(shù)選擇性設(shè)計(jì)嬰兒，C項(xiàng)正確。生物武器種類包括致病菌、病毒、基因重組的致病菌、生化毒劑等，不包括干擾素，干擾素是動(dòng)物細(xì)胞在受到某些病毒感染后分泌的具有抗病毒功能的宿主特異性糖蛋白，D項(xiàng)錯(cuò)誤。32．[2013·安徽卷]下圖為通過(guò)DNA分子雜交鑒定含有某特定DNA的細(xì)菌克隆示意圖。下列敘述正確的是()A．根據(jù)培養(yǎng)皿中菌落數(shù)可以準(zhǔn)確計(jì)算樣品中含有的活菌實(shí)際數(shù)目B．外源DNA必須位于重組質(zhì)粒的啟動(dòng)子和終止子之間才能進(jìn)行復(fù)制C．重組質(zhì)粒與探針能進(jìn)行分子雜交是因?yàn)镈NA分子脫氧核糖和磷酸交替連接D．放射自顯影結(jié)果可以顯示原培養(yǎng)皿中含有特定DNA的細(xì)菌菌落位置【答案】D【解析】本題主要考查微生物培養(yǎng)和利用DNA分子雜交法鑒定目的菌等知識(shí)。培養(yǎng)皿中的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目低，這是因?yàn)楫?dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，培養(yǎng)皿中觀察到的只是一個(gè)菌落，因此根據(jù)培養(yǎng)皿中的菌落數(shù)只能估算樣品中含有的活菌數(shù)，故A錯(cuò)誤；外源DNA必須位于重組質(zhì)粒的啟動(dòng)子和終止子之間才能表達(dá)，而不是復(fù)制，故B錯(cuò)誤；重組質(zhì)粒與探針之間的雜交原理是堿基互補(bǔ)配對(duì)原則，故C錯(cuò)誤；放射自顯影結(jié)果顯示的雜交鏈位置與原培養(yǎng)皿中有特定DNA的細(xì)菌位置相同，故D正確。33．[2013·全國(guó)卷]下列實(shí)踐活動(dòng)包含基因工程技術(shù)的是()A．水稻F1花藥經(jīng)培養(yǎng)和染色體加倍，獲得基因型純合新品種B．抗蟲(chóng)小麥與矮稈小麥雜交，通過(guò)基因重組獲得抗蟲(chóng)矮稈小麥C．將含抗病基因的重組DNA導(dǎo)入玉米細(xì)胞，經(jīng)組織培養(yǎng)獲得抗病植株D．用射線照射大豆使其基因結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，獲得種子性狀發(fā)生變異的大豆【答案】C【解析】本題通過(guò)生物變異、育種考查學(xué)生對(duì)基因工程的理解。基因工程指在生物體外，通過(guò)對(duì)DNA分子進(jìn)行人工“剪切”和“拼接”對(duì)生物的基因進(jìn)行改造和重新組合，然后導(dǎo)入受體細(xì)胞，并在受體細(xì)胞表達(dá)，得到人類所需要的基因產(chǎn)物的技術(shù)。選項(xiàng)中只有C項(xiàng)符合。A項(xiàng)是單倍體育種，原理是染色體數(shù)目變異，B項(xiàng)是雜交育種，D項(xiàng)是誘變育種，三項(xiàng)都與基因工程無(wú)關(guān)。34．[2013·廣東卷]從某海洋動(dòng)物中獲得一基因，其表達(dá)產(chǎn)物為一種抗菌性和溶血性均較強(qiáng)的多肽P1。目前在P1的基礎(chǔ)上研發(fā)抗菌性強(qiáng)但溶血性弱的多肽藥物，首先要做的是()A．合成編碼目的肽的DNA片段B．構(gòu)建含目的肽DNA片段的表達(dá)載體C．依據(jù)P1氨基酸序列設(shè)計(jì)多條模擬肽D．篩選出具有優(yōu)良活性的模擬肽作為目的肽【答案】C【解析】本題考查蛋白質(zhì)工程的有關(guān)知識(shí)。蛋白質(zhì)工程的基本途徑是從預(yù)期蛋白質(zhì)(目的肽多肽藥物)的功能(抗菌性強(qiáng)但溶血性弱)出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列(即C項(xiàng)表述)→合成相應(yīng)的基因(即A項(xiàng)表述)→構(gòu)建相應(yīng)的基因表達(dá)載體(即B項(xiàng)表述)→導(dǎo)入受體細(xì)胞，相應(yīng)基因的表達(dá)與鑒定(即D項(xiàng)表述)。從中可看出，首先要做的是依據(jù)P1氨基酸序列設(shè)計(jì)多條模擬肽，故選C。35．[2013·全國(guó)卷]關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)的敘述，錯(cuò)誤的是()A．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)所用培養(yǎng)基不同B．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)過(guò)程中都要用到胰蛋白酶C．煙草葉片離體培養(yǎng)能產(chǎn)生新個(gè)體，小鼠雜交瘤細(xì)胞可離體培養(yǎng)增殖D．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)可用于檢測(cè)有毒物質(zhì)，莖尖培養(yǎng)可用于植物脫除病毒【答案】B【解析】本題考查動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用的是液體培養(yǎng)基，含有動(dòng)物血清等物質(zhì)，植物組織培養(yǎng)應(yīng)用的是固體培養(yǎng)基，需要添加蔗糖、植物激素等物質(zhì)，A項(xiàng)正確；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中需要使用胰蛋白酶，使細(xì)胞分離開(kāi)，植物組織培養(yǎng)不需要使用胰蛋白酶，B項(xiàng)錯(cuò)誤；植物細(xì)胞的全能性較高，煙草葉片離體培養(yǎng)可獲得新個(gè)體，而動(dòng)物細(xì)胞的全能性受到抑制，雜交瘤細(xì)胞離體培養(yǎng)時(shí)，可無(wú)限增殖，C項(xiàng)正確；有毒物質(zhì)會(huì)對(duì)動(dòng)物細(xì)胞增殖產(chǎn)生影響，可通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)檢測(cè)物質(zhì)的毒性；植物的莖尖是無(wú)病毒組織，離體培養(yǎng)得到的是無(wú)病毒植株，D項(xiàng)正確。36．[2013·重慶卷]某興趣小組擬用組織培養(yǎng)繁殖一種名貴花卉，其技術(shù)路線為“取材→消毒→愈傷組織培養(yǎng)→出芽→生根→移栽”。下列有關(guān)敘述，錯(cuò)誤的是()A．消毒的原則是既殺死材料表面的微生物，又減少消毒劑對(duì)細(xì)胞的傷害B．在愈傷組織培養(yǎng)中加入細(xì)胞融合的誘導(dǎo)劑，可獲得染色體加倍的細(xì)胞C．出芽是細(xì)胞再分化的結(jié)果，受基因選擇性表達(dá)的調(diào)控D．生根時(shí)，培養(yǎng)基通常應(yīng)含α－萘乙酸等生長(zhǎng)素類調(diào)節(jié)劑【答案】B【解析】本題考查植物組織培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用。植物組織培養(yǎng)過(guò)程中，對(duì)外植體消毒時(shí)應(yīng)依據(jù)的原則是既要?dú)⑺啦牧媳砻娴奈⑸铮植荒軐?duì)細(xì)胞造成傷害，A項(xiàng)正確；愈傷組織細(xì)胞有細(xì)胞壁，加入誘導(dǎo)劑也不能誘導(dǎo)細(xì)胞融合，B項(xiàng)錯(cuò)誤；出芽是愈傷組織再分化的結(jié)果，再分化的機(jī)理是基因的選擇性表達(dá)，C項(xiàng)正確；誘導(dǎo)生根時(shí)要加入促使生根的生長(zhǎng)素類調(diào)節(jié)劑，D項(xiàng)正確。37．[2013·全國(guó)卷]關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)的敘述，錯(cuò)誤的是()A．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)所用培養(yǎng)基不同B．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)過(guò)程中都要用到胰蛋白酶C．煙草葉片離體培養(yǎng)能產(chǎn)生新個(gè)體，小鼠雜交瘤細(xì)胞可離體培養(yǎng)增殖D．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)可用于檢測(cè)有毒物質(zhì)，莖尖培養(yǎng)可用于植物脫除病毒【答案】B【解析】本題考查動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用的是液體培養(yǎng)基，含有動(dòng)物血清等物質(zhì)，植物組織培養(yǎng)應(yīng)用的是固體培養(yǎng)基，需要添加蔗糖、植物激素等物質(zhì)，A項(xiàng)正確；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中需要使用胰蛋白酶，使細(xì)胞分離開(kāi)，植物組織培養(yǎng)不需要使用胰蛋白酶，B項(xiàng)錯(cuò)誤；植物細(xì)胞的全能性較高，煙草葉片離體培養(yǎng)可獲得新個(gè)體，而動(dòng)物細(xì)胞的全能性受到抑制，雜交瘤細(xì)胞離體培養(yǎng)時(shí)，可無(wú)限增殖，C項(xiàng)正確；有毒物質(zhì)會(huì)對(duì)動(dòng)物細(xì)胞增殖產(chǎn)生影響，可通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)檢測(cè)物質(zhì)的毒性；植物的莖尖是無(wú)病毒組織，離體培養(yǎng)得到的是無(wú)病毒植株，D項(xiàng)正確。38．[2013·江蘇卷]某種極具觀賞價(jià)值的蘭科珍稀花卉很難獲得成熟種子。為盡快推廣種植，可應(yīng)用多種技術(shù)獲得大量?jī)?yōu)質(zhì)苗，下列技術(shù)中不能選用的是()A．利用莖段扦插誘導(dǎo)生根技術(shù)快速育苗B．采用花粉粒組織培養(yǎng)獲得單倍體苗C．采集幼芽嫁接到合適的其他種類植物體上D．采用幼葉、莖尖等部位的組織進(jìn)行組織培養(yǎng)【答案】B【解析】本題考查植物組織培養(yǎng)的有關(guān)內(nèi)容，屬于應(yīng)用能力。A、C、D項(xiàng)中的扦插、嫁接、體細(xì)胞組織培養(yǎng)均屬無(wú)性繁殖，可保持親本優(yōu)良性狀，獲得大量?jī)?yōu)質(zhì)苗，而B(niǎo)項(xiàng)花粉粒形成時(shí)，在減數(shù)分裂過(guò)程中會(huì)發(fā)生基因重組，再經(jīng)組織培養(yǎng)獲得的單倍體苗不能保持親本優(yōu)良性狀，所以B項(xiàng)錯(cuò)誤。39．[2013·浙江卷]實(shí)驗(yàn)小鼠皮膚細(xì)胞培養(yǎng)(非克隆培養(yǎng))的基本過(guò)程如圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是()eq\x(實(shí)驗(yàn)小鼠)eq\o(→,\s\up7(甲))eq\x(皮膚組織)eq\o(→,\s\up7(乙))eq\x(皮膚細(xì)胞)eq\o(→,\s\up7(丙))eq\x(培養(yǎng)細(xì)胞1)eq\o(→,\s\up7(丁))eq\x(培養(yǎng)細(xì)胞2)A．甲過(guò)程需要對(duì)實(shí)驗(yàn)小鼠進(jìn)行消毒B．乙過(guò)程對(duì)皮膚組織可用胰蛋白酶消化C．丙過(guò)程得到的細(xì)胞大多具有異倍體核型D．丁過(guò)程得到的細(xì)胞具有異質(zhì)性【答案】C【解析】該題主要考查了動(dòng)物細(xì)胞克隆的知識(shí)。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)要避免雜菌感染，在取材和培養(yǎng)過(guò)程中必須嚴(yán)格消毒，所以A選項(xiàng)正確。取下的動(dòng)物組織必須經(jīng)過(guò)機(jī)械消化或胰蛋白酶消化(胰蛋白酶分解組織細(xì)胞間的組織蛋白)，使其分散成單個(gè)的細(xì)胞，所以B選項(xiàng)正確。丙過(guò)程是細(xì)胞的原代培養(yǎng)，一般指十代以內(nèi)的細(xì)胞培養(yǎng)物，該過(guò)程的子代細(xì)胞一般都是二倍體核型，所以C選項(xiàng)錯(cuò)誤。丁是指?jìng)鞔囵B(yǎng)，由于該細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程取材是組織而不是單個(gè)細(xì)胞，所以，未經(jīng)過(guò)細(xì)胞克隆培養(yǎng)，未經(jīng)克隆化的細(xì)胞系具有異質(zhì)性，所以D選項(xiàng)正確。40．[2013·江蘇卷]軟骨發(fā)育不全為常染色體顯性遺傳病，基因型為HH的個(gè)體早期死亡。一對(duì)夫妻均為該病患者，希望通過(guò)胚胎工程技術(shù)輔助生育一個(gè)健康的孩子。下列做法錯(cuò)誤的是()A．首先經(jīng)超排卵處理后進(jìn)行體外受精B．從囊胚中分離細(xì)胞，培養(yǎng)后檢測(cè)基因型C．根據(jù)檢測(cè)結(jié)果篩選基因型為hh的胚胎D．將胚胎培養(yǎng)至原腸胚期后移植到子宮【答案】D【解析】本題考查胚胎工程的相關(guān)內(nèi)容，屬于理解能力。進(jìn)行體外受精首先要用促性腺激素進(jìn)行超數(shù)排卵處理，得到多個(gè)次級(jí)卵母細(xì)胞便于體外受精得到更多的胚胎，A項(xiàng)正確；因軟骨發(fā)育不全為常染色體顯性遺傳病，基因型為HH的個(gè)體早期死亡，Hh的個(gè)體患病，所以應(yīng)在囊胚期時(shí)檢測(cè)基因型，培養(yǎng)并篩選基因型為hh的胚胎，B、C項(xiàng)均正確；將胚胎一般培養(yǎng)至桑椹胚或囊胚期后移植到子宮，D項(xiàng)錯(cuò)誤。41．[2013·江蘇卷]下列關(guān)于轉(zhuǎn)基因生物安全性的敘述中，錯(cuò)誤的是()A．我國(guó)已經(jīng)對(duì)轉(zhuǎn)基因食品和轉(zhuǎn)基因農(nóng)產(chǎn)品強(qiáng)制實(shí)施了產(chǎn)品標(biāo)識(shí)制度B．國(guó)際上大多數(shù)國(guó)家都在轉(zhuǎn)基因食品標(biāo)簽上警示性注明可能的危害C．開(kāi)展風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估、預(yù)警跟蹤和風(fēng)險(xiǎn)管理是保障轉(zhuǎn)基因生物安全的前提D．目前對(duì)轉(zhuǎn)基因生物安全性的爭(zhēng)論主要集中在食用安全性和環(huán)境安全性上【答案】B【解析】本題考查轉(zhuǎn)基因生物安全的相關(guān)內(nèi)容，屬于識(shí)記能力。我國(guó)為保護(hù)消費(fèi)者的知情權(quán)，已經(jīng)對(duì)轉(zhuǎn)基因食品和轉(zhuǎn)基因農(nóng)產(chǎn)品強(qiáng)制實(shí)施了產(chǎn)品標(biāo)識(shí)制度，A項(xiàng)正確；轉(zhuǎn)基因生物是否存在安全問(wèn)題，尚在爭(zhēng)論之中，國(guó)家為了維護(hù)消費(fèi)者對(duì)轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的選擇權(quán)和知情權(quán)，一般會(huì)加貼標(biāo)注，但不會(huì)警示性注明可能的危害，B項(xiàng)錯(cuò)誤；保障轉(zhuǎn)基因生物安全的前提是開(kāi)展風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估、預(yù)警跟蹤和風(fēng)險(xiǎn)管理等，C項(xiàng)正確；目前對(duì)轉(zhuǎn)基因生物安全性的爭(zhēng)論主要集中在食用安全性和環(huán)境安全性上，此外還有生物安全問(wèn)題，D項(xiàng)正確。二、多選題1．（2020年江蘇省高考生物試卷·23）小鼠胚胎干細(xì)胞經(jīng)定向誘導(dǎo)可獲得多種功能細(xì)胞、制備流程如圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A．為獲得更多的囊胚，采用激素注射促進(jìn)雄鼠產(chǎn)生更多的精子B．細(xì)胞a和細(xì)胞b內(nèi)含有的核基因不同，所以全能性高低不同C．用胰蛋白酶將細(xì)胞a的膜白消化后可獲得分散的胚胎干細(xì)胞D．胚胎干細(xì)胞和誘導(dǎo)出的各種細(xì)胞都需在CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)【答案】ABC【解析】【分析】1、胚胎干細(xì)胞簡(jiǎn)稱ES或EK細(xì)胞，來(lái)源于早期胚胎或原始性腺（即囊胚期的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)）。2、ES細(xì)胞在飼養(yǎng)層細(xì)胞上或在添加抑制因子的培養(yǎng)液中，能夠維持不分化的狀態(tài)．在培養(yǎng)液中加入分化誘導(dǎo)因子，如牛黃酸、丁酰環(huán)腺苷酸等化學(xué)物質(zhì)時(shí)，就可以誘導(dǎo)ES細(xì)胞向不同類型的組織細(xì)胞分化，這為揭示細(xì)胞分化和細(xì)胞凋亡機(jī)理提供了有效的手段?！驹斀狻緼、為了獲得更多的囊胚，可以采用激素促進(jìn)成熟雌性個(gè)體超數(shù)排卵，然后將卵細(xì)胞從母體內(nèi)取出，在試管內(nèi)與人工采集的精子進(jìn)行體外受精，培育成胚胎，A錯(cuò)誤；B、細(xì)胞a和細(xì)胞b是由同一個(gè)受精卵經(jīng)過(guò)有絲分裂形成的，故核基因相同，B錯(cuò)誤；C、運(yùn)用細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可以從哺乳動(dòng)物的早期胚胎中獲得胚胎干細(xì)胞，首先必須用胰蛋白酶處理內(nèi)細(xì)胞團(tuán)，分解細(xì)胞間的膠原蛋白等，使之分散成單個(gè)細(xì)胞，C錯(cuò)誤；D、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)需要在5%CO2的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)，以維持培養(yǎng)液的pH，D正確。故選ABC。2．（2018江蘇卷，22）如圖為細(xì)胞融合的示意圖，下列敘述正確的是（）A．若a細(xì)胞和b細(xì)胞是植物細(xì)胞，需先去分化再誘導(dǎo)融合B．a(chǎn)細(xì)胞和b細(xì)胞之間的融合需要促融處理后才能實(shí)現(xiàn)C．c細(xì)胞的形成與a、b細(xì)胞膜的流動(dòng)性都有關(guān)D．c細(xì)胞將同時(shí)表達(dá)a細(xì)胞和b細(xì)胞中的所有基因【答案】BC【解析】若a細(xì)胞和b細(xì)胞是植物細(xì)胞，應(yīng)該先用酶解法去掉它們的細(xì)胞壁再誘導(dǎo)融合，A錯(cuò)誤；無(wú)論是動(dòng)物細(xì)胞還是植物細(xì)胞，兩個(gè)細(xì)胞的融合都需要促融處理后才能實(shí)現(xiàn)，B正確；兩個(gè)細(xì)胞融合成一個(gè)細(xì)胞，利用了細(xì)胞膜的流動(dòng)性，C正確；c細(xì)胞同時(shí)具備了a細(xì)胞和b細(xì)胞中的所有基因，但是基因是選擇性表達(dá)的，因此c細(xì)胞中基因不一定都能夠表達(dá)，D錯(cuò)誤。3.（2015·廣東卷.25）圖9為培育轉(zhuǎn)基因山羊生產(chǎn)人β-酪蛋白的流程圖下列敘述正確的是過(guò)程①所用的人β-酪蛋白基因可從人cDNA文庫(kù)中獲得過(guò)程②可選用囊胚期或原腸胚期的胚胎進(jìn)行移植過(guò)程③可使用胚胎分割技術(shù)擴(kuò)大轉(zhuǎn)基因山羊群體過(guò)程④人β-酪蛋白基因在細(xì)胞質(zhì)內(nèi)進(jìn)行轉(zhuǎn)錄、翻譯【答案】AC【解析】由圖可知，①過(guò)程表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建；目的基因的獲得方法很多，從人C-DNA文庫(kù)中獲取就是其中之一，A正確；過(guò)程②表示胚胎移植，山羊的胚胎移植應(yīng)在囊胚期以前，B錯(cuò)誤；胚胎分割可以得到多個(gè)遺傳性狀相同的個(gè)體，在③過(guò)程中可以應(yīng)用，C正確；真核生物的基因的表達(dá)的轉(zhuǎn)錄過(guò)程發(fā)生在細(xì)胞核，翻譯過(guò)程發(fā)生在細(xì)胞質(zhì)，D錯(cuò)誤。4．[2014·廣東卷](雙選)利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)羧酸酯酶(CarE)制劑的流程如圖所示，下列敘述正確的是()A．過(guò)程①需使用逆轉(zhuǎn)錄酶B．過(guò)程②需使用解旋酶和PCR獲取目的基因C．過(guò)程③使用的感受態(tài)細(xì)胞可用NaCl溶液制備D．過(guò)程④可利用DNA分子雜交鑒定目的基因是否已導(dǎo)入受體細(xì)胞【答案】AD【解析】過(guò)程①是以mRNA為模板合成DNA的過(guò)程，即逆轉(zhuǎn)錄過(guò)程，需要逆轉(zhuǎn)錄酶的催化，A項(xiàng)正確。過(guò)程②表示利用PCR擴(kuò)增目的基因，在PCR過(guò)程中不需要解旋酶解旋，通過(guò)控制溫度來(lái)達(dá)到解旋的目的，B項(xiàng)錯(cuò)誤。利用氯化鈣處理大腸桿菌，使之成為感受態(tài)細(xì)胞，C項(xiàng)錯(cuò)誤。檢測(cè)目的基因是否成功導(dǎo)入受體細(xì)胞的染色體DNA中，可以采用DNA分子雜交技術(shù)，D項(xiàng)正確。5．[2014·江蘇卷](多選)下列關(guān)于基因工程技術(shù)的敘述，錯(cuò)誤的是()A．切割質(zhì)粒的限制性核酸內(nèi)切酶均特異性地識(shí)別6個(gè)核苷酸序列B．PCR反應(yīng)中溫度的周期性改變是為了DNA聚合酶催化不同的反應(yīng)C．載體質(zhì)粒通常采用抗生素合成基因作為篩選標(biāo)記基因D．抗蟲(chóng)基因即使成功地插入到植物細(xì)胞染色體上也未必能正常表達(dá)【答案】ABC【解析】限制酶的識(shí)別序列不都是6個(gè)核苷酸，比如基因工程中的BamHⅠ酶識(shí)別序列為GATC，A項(xiàng)錯(cuò)誤。PCR中溫度的改變過(guò)程是：雙鏈DNA在95℃變性解旋，50～55℃退火使引物與DNA單鏈結(jié)合；65～75℃是耐熱性DNA聚合酶的適宜溫度，用于子鏈的延伸，B項(xiàng)錯(cuò)誤。質(zhì)粒常用抗生素抗性基因作為標(biāo)記基因，C項(xiàng)錯(cuò)誤?？瓜x(chóng)基因即使成功插入到植物細(xì)胞內(nèi)，也可能由于基因選擇性表達(dá)或者細(xì)胞內(nèi)基因的互作等其他原因而不能正常表達(dá)，D項(xiàng)正確。6．[2013·江蘇卷]小鼠雜交瘤細(xì)胞表達(dá)的單克隆抗體用于人體試驗(yàn)時(shí)易引起過(guò)敏反應(yīng)，為了克服這個(gè)缺陷，可選擇性擴(kuò)增抗體的可變區(qū)基因(目的基因)后再重組表達(dá)。下列相關(guān)敘述正確的是()A．設(shè)計(jì)擴(kuò)增目的基因的引物時(shí)不必考慮表達(dá)載體的序列B．用PCR方法擴(kuò)增目的基因時(shí)不必知道基因的全部序列C．PCR體系中一定要添加從受體細(xì)胞中提取的DNA聚合酶D．一定要根據(jù)目的基因編碼產(chǎn)物的特性選擇合適的受體細(xì)胞【答案】BD【解析】本題考查基因工程的相關(guān)內(nèi)容，屬于應(yīng)用能力。設(shè)計(jì)引物時(shí)應(yīng)當(dāng)與表達(dá)載體兩端的序列進(jìn)行互補(bǔ)配對(duì)，A項(xiàng)錯(cuò)誤；PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因只需要知道基因兩端的序列設(shè)計(jì)合適的引物即可，而不必知道其全部序列，B項(xiàng)正確；PCR中應(yīng)用耐高溫的TaqDNA聚合酶，C項(xiàng)錯(cuò)誤；根據(jù)目的基因的編碼產(chǎn)物選擇合適的受體細(xì)胞，有利于基因的表達(dá)，D項(xiàng)正確。三、非選擇題1．（2022·全國(guó)甲卷·高考真題）某牧場(chǎng)引進(jìn)一只產(chǎn)肉性能優(yōu)異的良種公羊，為了在短時(shí)間內(nèi)獲得具有該公羊優(yōu)良性狀的大量后代，該牧場(chǎng)利用胚胎工程技術(shù)進(jìn)行了相關(guān)操作。回答下列問(wèn)題，(1)為了實(shí)現(xiàn)體外受精需要采集良種公羊的精液，精液保存的方法是____________。在體外受精前要對(duì)精子進(jìn)行獲能處理，其原因是____________；精子體外獲能可采用化學(xué)誘導(dǎo)法，誘導(dǎo)精子獲能的藥物是___________（答出1點(diǎn)即可）。利用該公羊的精子進(jìn)行體外受精需要發(fā)育到一定時(shí)期的卵母細(xì)胞，因?yàn)槁涯讣?xì)胞達(dá)到___________時(shí)才具備與精子受精的能力。(2)體外受精獲得的受精卵發(fā)育成囊胚需要在特定的培養(yǎng)液中進(jìn)行，該培養(yǎng)液的成分除無(wú)機(jī)鹽、激素、血清外，還含的營(yíng)養(yǎng)成分有___________（答出3點(diǎn)即可）等。將培養(yǎng)好的良種囊胚保存?zhèn)溆谩?3)請(qǐng)以保存的囊胚和相應(yīng)數(shù)量的非繁殖期受體母羊?yàn)椴牧线M(jìn)行操作，以獲得具有該公羊優(yōu)良性狀的后代。主要的操作步驟是___________?！敬鸢浮?1)

冷凍保存

剛排出的精子必須在雌性生殖道內(nèi)發(fā)生相應(yīng)生理變化后才能獲得受精能力

肝素或鈣離子載體A23187

MⅡ中期(2)維生素、氨基酸、核苷酸(3)對(duì)受體母羊進(jìn)行發(fā)情處理，將保存的囊胚進(jìn)行胚胎移植，對(duì)受體母羊進(jìn)行是否妊娠的檢查，一段時(shí)間后受體母羊產(chǎn)下具有該公羊優(yōu)良性狀的后代【解析】【分析】試管動(dòng)物技術(shù)是指通過(guò)人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精，并通過(guò)培養(yǎng)發(fā)育為早期胚胎后，再經(jīng)移植后產(chǎn)生后代的技術(shù)。(1)精液可以冷凍保存，使用前再將精液解凍離心分離。剛排出的精子必須在雌性生殖道內(nèi)發(fā)生相應(yīng)生理變化后才能獲得受精能力，故在體外受精前要對(duì)精子進(jìn)行獲能處理。通常采用的體外獲能方法有培養(yǎng)法和化學(xué)誘導(dǎo)法，化學(xué)誘導(dǎo)法是將精子放在一定濃度的肝素或鈣離子載體A23187溶液中，用化學(xué)藥物誘導(dǎo)精子獲能。卵母細(xì)胞需要培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期（MⅡ中期）才能具備與精子受精的能力。(2)進(jìn)行早期胚胎培養(yǎng)的培養(yǎng)液中，除了無(wú)機(jī)鹽、激素、血清外，還含有維生素、氨基酸、核苷酸等。(3)要利用保存的囊胚和相應(yīng)數(shù)量的非繁殖期受體母羊?yàn)椴牧?，獲得具有該公羊優(yōu)良性狀的后代，主要是利用胚胎移植技術(shù)，即對(duì)受體母羊進(jìn)行發(fā)情處理，將保存的囊胚進(jìn)行胚胎移植，對(duì)受體母羊進(jìn)行是否妊娠的檢查，一段時(shí)間后受體母羊產(chǎn)下具有該公羊優(yōu)良性狀的后代。2．（2022·全國(guó)乙卷·高考真題）新冠疫情出現(xiàn)后，病毒核酸檢測(cè)和疫苗接種在疫情防控中發(fā)揮了重要作用?；卮鹣铝袉?wèn)題。(1)新冠病毒是一種RNA病毒，檢測(cè)新冠病毒RNA（核酸檢測(cè)）可以采取RT-PCR法。這種方法的基本原理是先以病毒RNA為模板合成cDNA，這一過(guò)程需要的酶是______，再通過(guò)PCR技術(shù)擴(kuò)增相應(yīng)的DNA片段。根據(jù)檢測(cè)結(jié)果判斷被檢測(cè)者是否感染新冠病毒。(2)為了確保新冠病毒核酸檢測(cè)的準(zhǔn)確性，在設(shè)計(jì)PCR引物時(shí)必須依據(jù)新冠病毒RNA中的______來(lái)進(jìn)行。PCR過(guò)程每次循環(huán)分為3步，其中溫度最低的一步是______。(3)某人同時(shí)進(jìn)行了新冠病毒核酸檢測(cè)和抗體檢測(cè)（檢測(cè)體內(nèi)是否有新冠病毒抗體），若核酸檢測(cè)結(jié)果為陰性而抗體檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性，說(shuō)明______（答出1種情況即可）；若核酸檢測(cè)和抗體檢測(cè)結(jié)果均為陽(yáng)性，說(shuō)明______。(4)常見(jiàn)的病毒疫苗有滅活疫苗、蛋白疫苗和重組疫苗等。已知某種病毒的特異性蛋白S（具有抗原性）的編碼序列（目的基因）。為了制備蛋白疫苗，可以通過(guò)基因工程技術(shù)獲得大量蛋白S。基因工程的基本操作流程是______。【答案】(1)逆轉(zhuǎn)錄酶##反轉(zhuǎn)錄酶(2)

特異性核苷酸序列

退火##復(fù)性(3)

曾感染新冠病毒，已康復(fù)

已感染新冠病毒，是患者(4)獲取S蛋白基因→構(gòu)建S蛋白基因與運(yùn)載體的表達(dá)載體→導(dǎo)入受體細(xì)胞→目的基因的檢測(cè)與鑒定（檢測(cè)受體能否產(chǎn)生S蛋白）【解析】【分析】PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)；過(guò)程：①高溫變性：DNA解旋過(guò)程（PCR擴(kuò)增中雙鏈DNA解開(kāi)不需要解旋酶，高溫條件下氫鍵可自動(dòng)解開(kāi)）；低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補(bǔ)鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈。(1)分析題意可知，新冠病毒的遺傳物質(zhì)是RNA，而RT-PCR法需要先得到cDNA，由RNA到DNA的過(guò)程屬于逆轉(zhuǎn)錄過(guò)程，逆轉(zhuǎn)錄過(guò)程需要的酶是逆轉(zhuǎn)錄酶（反轉(zhuǎn)錄酶）。(2)PCR過(guò)程需要加入引物，設(shè)計(jì)引物時(shí)應(yīng)有一段已知目的基因的核苷酸序列，在該過(guò)程中為了確保新冠病毒核酸檢測(cè)的準(zhǔn)確性，在設(shè)計(jì)PCR引物時(shí)必須依據(jù)新冠病毒RNA中的特異性核苷酸序列來(lái)進(jìn)行；PCR過(guò)程每次循環(huán)分為3步，分別為變性（90-95℃）、復(fù)性（55-60℃）、延伸（70-75℃），故其中溫度最低的一步是復(fù)性。(3)某人同時(shí)進(jìn)行了新冠病毒核酸檢測(cè)和抗體檢測(cè)，若核酸檢測(cè)結(jié)果為陰性而抗體檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性，說(shuō)明該個(gè)體曾經(jīng)感染過(guò)新冠病毒，機(jī)體發(fā)生特異性免疫反應(yīng)，產(chǎn)生抗體，將病毒消滅，則核酸檢測(cè)為陰性，但由于抗體有一定的時(shí)效性，能在體內(nèi)存在一段時(shí)間，故抗體檢測(cè)為陽(yáng)性；若核酸檢測(cè)和抗體檢測(cè)結(jié)果均為陽(yáng)性，說(shuō)明該個(gè)體體內(nèi)仍含有病毒的核酸，機(jī)體仍進(jìn)行特異性免疫過(guò)程，能產(chǎn)生抗體，則說(shuō)明該人已經(jīng)感染新冠病毒，為患者。(4)基因工程的基本操作流程是：獲取目的基因→基因表達(dá)載體的構(gòu)建（基因工程的核心）→將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞→目的基因的檢測(cè)與鑒定，結(jié)合題意，本基因工程的目的是獲得大量的S蛋白，故具體流程為：獲取S蛋白基因→構(gòu)建S蛋白基因與運(yùn)載體的表達(dá)載體→導(dǎo)入受體細(xì)胞→目的基因的檢測(cè)與鑒定（檢測(cè)受體能否產(chǎn)生S蛋白）。3．（2022·湖南·高考真題）水蛭是我國(guó)的傳統(tǒng)中藥材，主要藥理成分水蛭素為水蛭蛋白中重要成分之一，具有良好的抗凝血作用。擬通過(guò)蛋白質(zhì)工程改造水蛭素結(jié)構(gòu)，提高其抗凝血活性。回答下列問(wèn)題:(1)蛋白質(zhì)工程流程如圖所示，物質(zhì)a是_______，物質(zhì)b是_______。在生產(chǎn)過(guò)程中，物質(zhì)b可能不同，合成的蛋白質(zhì)空間構(gòu)象卻相同，原因是_______________________。(2)蛋白質(zhì)工程是基因工程的延伸，基因工程中獲取目的基因的常用方法有___________、__________和利用PCR技術(shù)擴(kuò)增。PCR技術(shù)遵循的基本原理是____________________。(3)將提取的水蛭蛋白經(jīng)甲、乙兩種蛋白酶水解后，分析水解產(chǎn)物中的肽含量及其抗凝血活性，結(jié)果如圖所示。推測(cè)兩種處理后酶解產(chǎn)物的抗凝血活性差異主要與肽的______（填“種類”或“含量”）有關(guān)，導(dǎo)致其活性不同的原因是______________________________。(4)若要比較蛋白質(zhì)工程改造后的水蛭素、上述水蛭蛋白酶解產(chǎn)物和天然水蛭素的抗凝血活性差異，簡(jiǎn)要寫(xiě)出實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)思路________________________________________?！敬鸢浮?1)

氨基酸序列多肽鏈

mRNA

密碼子的簡(jiǎn)并性(2)

從基因文庫(kù)中獲取目的基因

通過(guò)DNA合成儀用化學(xué)方法直接人工合成

DNA雙鏈復(fù)制(3)

種類

提取的水蛭蛋白的酶解時(shí)間和處理的酶的種類不同，導(dǎo)致水蛭蛋白空間結(jié)構(gòu)有不同程度破壞(4)取3支試管，分別加入等量的蛋白質(zhì)工程改造后的水蛭素、上述水蛭蛋白酶解產(chǎn)物和天然水蛭素；用酒精消毒，用注射器取同一種動(dòng)物（如家兔）血液，立即將等量的血液加入1、2、3號(hào)三支試管中，靜置相同時(shí)間，統(tǒng)計(jì)三支試管中血液凝固時(shí)間【解析】【分析】1、蛋白質(zhì)工程的基本途徑是：從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列；2、蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過(guò)基因修飾或基因合成，對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求。也就是說(shuō)，蛋白質(zhì)工程是在基因工程的基礎(chǔ)上，延伸出來(lái)的第二代基因工程，是包含多學(xué)科的綜合科技工程領(lǐng)域。(1)據(jù)分析可知，物質(zhì)a是氨基酸序列多肽鏈，物質(zhì)b是mRNA。在生產(chǎn)過(guò)程中，物質(zhì)b可能不同，合成的蛋白質(zhì)空間構(gòu)象卻相同，原因是密碼子的簡(jiǎn)并性，即一種氨基酸可能有幾個(gè)密碼子。(2)蛋白質(zhì)工程是基因工程的延伸，基因工程中獲取目的基因的常用方法有從基因文庫(kù)中獲取目的基因、通過(guò)DNA合成儀用化學(xué)方法直接人工合成和利用PCR技術(shù)擴(kuò)增。PCR技術(shù)遵循的基本原理是DNA雙鏈復(fù)制。(3)將提取的水蛭蛋白經(jīng)甲、乙兩種蛋白酶水解后，據(jù)圖可知，水解產(chǎn)物中的肽含量隨著酶解時(shí)間的延長(zhǎng)均上升，且差別不大；而水解產(chǎn)物中抗凝血活性有差異，經(jīng)酶甲處理后，隨著酶解時(shí)間的延長(zhǎng)，抗凝血活性先上升后相對(duì)穩(wěn)定，經(jīng)酶乙處理后，隨著酶解時(shí)間的延長(zhǎng)，抗凝血活性先上升后下降，且酶甲處理后的酶解產(chǎn)物的抗凝血活性最終高于經(jīng)酶乙處理后的酶解產(chǎn)物的抗凝血活性，差異明顯，據(jù)此推測(cè)兩種處理后酶解產(chǎn)物的抗凝血活性差異主要與肽的種類有關(guān)，導(dǎo)致其活性不同的原因是提取的水蛭蛋白的酶解時(shí)間和酶的種類不同，導(dǎo)致水蛭蛋白空間結(jié)構(gòu)有不同程度破壞。(4)若要比較蛋白質(zhì)工程改造后的水蛭素、上述水蛭蛋白酶解產(chǎn)物和天然水蛭素的抗凝血活性差異，實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)思路為：取3支試管，分別加入等量的蛋白質(zhì)工程改造后的水蛭素、上述水蛭蛋白酶解產(chǎn)物和天然水蛭素；用酒精消毒，用注射器取同一種動(dòng)物（如家兔）血液，立即將等量的血液加入1、2、3號(hào)三支試管中，靜置相同時(shí)間，統(tǒng)計(jì)三支試管中血液凝固時(shí)間。4．（2022·山東·高考真題）某種類型的白血病由蛋白P引發(fā)，蛋白UBC可使P被蛋白酶識(shí)別并降解，藥物A可通過(guò)影響這一過(guò)程對(duì)該病起到治療作用。為探索藥物A治療該病的機(jī)理，需構(gòu)建重組載體以獲得融合蛋白FLAG-P和FLAG-P△。P△是缺失特定氨基酸序列的P，F(xiàn)LAG是一種短肽，連接在P或P△的氨基端，使融合蛋白能與含有FLAG抗體的介質(zhì)結(jié)合，但不影響P或P△的功能。(1)為構(gòu)建重組載體，需先設(shè)計(jì)引物，通過(guò)PCR特異性擴(kuò)增P基因。用于擴(kuò)增P基因的引物需滿足的條件是_______、為使PCR產(chǎn)物能被限制酶切割，需在引物上添加相應(yīng)的限制酶識(shí)別序列，該限制酶識(shí)別序列應(yīng)添加在引物的______（填“3'端”或“5'端”）。(2)PCR擴(kuò)增得到的P基因經(jīng)酶切連接插入載體后，與編碼FLAG的序列形成一個(gè)融合基因，如圖甲所示，其中“ATGTGCA”為P基因編碼鏈起始序列。將該重組載體導(dǎo)入細(xì)胞后，融合基因轉(zhuǎn)錄出的mRNA序列正確，翻譯出的融合蛋白中FLAG的氨基酸序列正確，但P基因?qū)?yīng)的氨基酸序列與P不同。據(jù)圖甲分析，出現(xiàn)該問(wèn)題的原因是______。修改擴(kuò)增P基因時(shí)使用的帶有EcoRⅠ識(shí)別序列的引物來(lái)解決該問(wèn)題，具體修改方案是______。(3)融合蛋白表達(dá)成功后，將FLAG-P、FLAG-P△、藥物A和UBC按照?qǐng)D乙中的組合方式分成5組。各組樣品混勻后分別流經(jīng)含F(xiàn)LAG抗體的介質(zhì)，分離出與介質(zhì)結(jié)合的物質(zhì)并用UBC抗體檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果如圖丙所示。已知FLAG-P和FLAG-P△不能降解UBC，由①②③組結(jié)果的差異推測(cè)，藥物A的作用是______；由②④組或③⑤組的差異推測(cè)，P△中缺失的特定序列的作用是______。(4)根據(jù)以上結(jié)果推測(cè)，藥物A治療該病的機(jī)理是______?！敬鸢浮?1)

兩種引物分別與兩條模板鏈3'端的堿基序列互補(bǔ)配對(duì)

5'端(2)

在轉(zhuǎn)錄出的mRNA中，限制酶識(shí)別序列對(duì)應(yīng)的最后兩個(gè)堿基與P基因?qū)?yīng)的第一個(gè)堿基構(gòu)成一個(gè)密碼子，導(dǎo)致讀碼框改變，翻譯出的氨基酸序列改變。

在EcoRⅠ識(shí)別序列前后增加堿基，使其堿基數(shù)目加上FLAG的堿基數(shù)目為3的倍數(shù)(3)

促進(jìn)UBC與FLAG-P的結(jié)合

P△中缺失的特定序列是與UBC結(jié)合的關(guān)鍵序列(4)藥物A促進(jìn)UBC與FLAG-P的結(jié)合，從而促進(jìn)蛋白P被蛋白酶識(shí)別并降解，達(dá)到治療的目的?！窘馕觥俊痉治觥縋CR過(guò)程：①變性：當(dāng)溫度上升到90℃以上時(shí)，雙鏈DNA解旋為單鏈；②溫度下降到50℃左右時(shí)，兩種引物通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)與兩條單鏈DNA結(jié)合；③延伸：當(dāng)溫度上升到72℃左右時(shí)，溶液中的4種脫氧核苷酸在耐高溫的DNA聚合酶的作用下，根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則合成新的DNA鏈。(1)引物是一小段能與DNA母鏈的一段堿基序列互補(bǔ)配對(duì)的短單鏈核苷酸，因此設(shè)計(jì)擴(kuò)增P基因的引物，需要兩種引物分別與兩條模板鏈3'端的堿基序列互補(bǔ)。DNA聚合酶延伸時(shí)，是將脫氧核苷酸加到引物的3'端，為了不破壞目的基因，該限制酶識(shí)別序列應(yīng)添加在引物的5'端。(2)融合基因轉(zhuǎn)錄出的mRNA序列正確，翻譯出的融合蛋白中FLAG的氨基酸序列正確，但P基因?qū)?yīng)的氨基酸序列與P不同，說(shuō)明P基因翻譯時(shí)出錯(cuò)。由圖可看出，在轉(zhuǎn)錄出的mRNA中，限制酶識(shí)別序列對(duì)應(yīng)的最后兩個(gè)堿基與P基因?qū)?yīng)的第一個(gè)堿基構(gòu)成一個(gè)密碼子，導(dǎo)致讀碼框改變，翻譯出的氨基酸序列改變，可通過(guò)在EcoRⅠ識(shí)別序列前后增加堿基，使其堿基數(shù)目加上FLAG的堿基數(shù)目為3的倍數(shù)，這樣能保證P基因轉(zhuǎn)錄出的mRNA上的讀碼框不改變，能夠正常翻譯。(3)①組僅添加UBC，處理后，用UBC抗體檢測(cè)，不出現(xiàn)雜交帶；②組添加UBC和FLAG-P，出現(xiàn)雜交帶；③組添加UBC、藥物A和FLAG-P，雜交帶更加明顯，說(shuō)明藥物A的作用是促進(jìn)UBC與FLAG-P的結(jié)合。由②④組或③⑤組的差異在于②③組使用FLAG-P，出現(xiàn)雜交帶；④⑤組使用FLAG-P△，不出現(xiàn)雜交帶，據(jù)此推測(cè)P△中缺失的特定序列是與UBC結(jié)合的關(guān)鍵序列。(4)根據(jù)（3）的分析推測(cè)，藥物A促進(jìn)UBC與FLAG-P的結(jié)合，從而促進(jìn)蛋白P被蛋白酶識(shí)別并降解，達(dá)到治療的目的?！军c(diǎn)睛】本題難點(diǎn)在于分析翻譯出錯(cuò)的原因，需要結(jié)合翻譯相關(guān)知識(shí)對(duì)圖進(jìn)行仔細(xì)分析方可得出結(jié)論。5．（2022年6月·浙江·高考真題）回答下列（一）、（二）小題：（一）回答與產(chǎn)淀粉酶的枯草桿菌育種有關(guān)的問(wèn)題：(1)為快速分離產(chǎn)淀粉酶的枯草桿菌，可將土樣用___________制成懸液，再將含有懸液的三角瓶置于80℃的___________中保溫一段時(shí)間，其目的是___________。(2)為提高篩選效率，可將菌種的___________過(guò)程與菌種的產(chǎn)酶性能測(cè)定一起進(jìn)行：將上述懸液稀釋后涂布于淀粉為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)，采用___________顯色方法，根據(jù)透明圈與菌落直徑比值的大小，可粗略估計(jì)出菌株是否產(chǎn)酶及產(chǎn)酶性能。(3)為了獲得高產(chǎn)淀粉酶的枯草桿菌，可利用現(xiàn)有菌種，通過(guò)___________后再篩選獲得，或利用轉(zhuǎn)基因、___________等技術(shù)獲得。（二）回答與植物轉(zhuǎn)基因和植物克隆有關(guān)的問(wèn)題：(4)在用農(nóng)桿菌侵染的方法進(jìn)行植物轉(zhuǎn)基因過(guò)程中，通常要使用抗生素，其目的一是抑制___________生長(zhǎng)，二是篩選轉(zhuǎn)化細(xì)胞。當(dāng)選擇培養(yǎng)基中抗生素濃度___________時(shí)，通常會(huì)出現(xiàn)較多假陽(yáng)性植株，因此在轉(zhuǎn)基因前需要對(duì)受體進(jìn)行抗生素的___________檢測(cè)。(5)為提高培育轉(zhuǎn)基因植株的成功率，植物轉(zhuǎn)基因受體需具有較強(qiáng)的___________能力和遺傳穩(wěn)定性。對(duì)培養(yǎng)的受體細(xì)胞遺傳穩(wěn)定性的早期檢測(cè)，可通過(guò)觀察細(xì)胞內(nèi)___________形態(tài)是否改變進(jìn)行判斷，也可通過(guò)觀察分裂期染色體的___________，分析染色體組型是否改變進(jìn)行判斷。(6)植物轉(zhuǎn)基因受體全能性表達(dá)程度的高低主要與受體的基因型、培養(yǎng)環(huán)境、繼代次數(shù)和___________長(zhǎng)短等有關(guān)。同時(shí)也與受體的取材有關(guān)，其中受體為_(kāi)__________時(shí)全能性表達(dá)能力最高。【答案】(1)

無(wú)菌水

水浴

殺死不耐熱微生物(2)

分離

KI-I2(3)

人工誘變

原生質(zhì)體融合(4)

農(nóng)桿菌

過(guò)低

敏感性(5)

再生

細(xì)胞核

形態(tài)特征和數(shù)量(6)

培養(yǎng)時(shí)間

受精卵【解析】【分析】（一）選擇培養(yǎng)基是根據(jù)某種微生物的特殊營(yíng)養(yǎng)要求或其對(duì)某化學(xué)、物理因素的抗性而設(shè)計(jì)的培養(yǎng)基使混合菌樣中的劣勢(shì)菌變成優(yōu)勢(shì)菌，從而提高該菌的篩選率。（二）農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞，并且整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上。根據(jù)農(nóng)桿菌的這一特點(diǎn)，如果將目的基因插入到Ti質(zhì)粒的T-DNA上，通過(guò)農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用，就可以把目的基因整合到植物細(xì)胞中染色體的DNA上。轉(zhuǎn)化過(guò)程：目的基因插入Ti質(zhì)粒的T-DNA上農(nóng)桿菌→導(dǎo)入植物細(xì)胞→目的基因整合到植物細(xì)胞染色體上→目的基因的遺傳特性得以穩(wěn)定維持和表達(dá)。(1)產(chǎn)生淀粉酶的枯草桿菌的最適溫度為50-75℃，要快速分離枯草桿菌，先將土樣加入無(wú)菌水制成枯草桿菌懸液，再將含有懸液的三角瓶置于80℃的水浴中保溫一段時(shí)間，殺死不耐熱的微生物。(2)將菌種的分離過(guò)程與菌種的產(chǎn)酶性能測(cè)定同時(shí)進(jìn)行可以提高篩選效率。用稀釋涂布平板法可以分離枯草桿菌，在培養(yǎng)基中添加淀粉作為唯一碳源，并且在培養(yǎng)基中添加KI-I2，能合成淀粉酶的枯草桿菌因?yàn)槟芾玫矸鄱婊睿瑫r(shí)淀粉由于被分解在菌落周圍會(huì)出現(xiàn)透明圈，比較透明圈與菌落直徑比值的大小，比值大的說(shuō)明該菌株產(chǎn)酶性能較高。(3)要獲得高產(chǎn)淀粉酶的枯草桿菌，可利用誘變育種，由于變異的不定向性，人工誘變后還需要再篩選才能獲得高產(chǎn)淀粉酶的枯草桿菌。也可以利用轉(zhuǎn)基因、原生質(zhì)體融合等技術(shù)，從其他生物那里獲得與高產(chǎn)淀粉酶有關(guān)的基因，進(jìn)而獲得相應(yīng)的高產(chǎn)性狀。(4)野生的農(nóng)桿菌沒(méi)有抗性基因，用于轉(zhuǎn)化植物細(xì)胞的農(nóng)桿菌一般在其T—DNA中插入一種抗生素抗性基因?？股氐淖饔檬且种萍?xì)菌生長(zhǎng)，農(nóng)桿菌屬于細(xì)菌，在其侵染植物過(guò)程中，可以用另一種抗生素抑制農(nóng)桿菌的生長(zhǎng)，從而達(dá)到在后續(xù)實(shí)驗(yàn)中消除轉(zhuǎn)化植物細(xì)胞中農(nóng)桿菌的作用。具有T-DNA中抗性基因的細(xì)胞能在含有相應(yīng)抗生素的培養(yǎng)基上存活。當(dāng)培養(yǎng)基中抗生素濃度過(guò)低時(shí)，很多沒(méi)有抗性的細(xì)胞也存活下來(lái)，因此出現(xiàn)假陽(yáng)性，故在轉(zhuǎn)基因前要對(duì)受體進(jìn)行抗生素的敏感性檢測(cè)。(5)轉(zhuǎn)基因植株要經(jīng)過(guò)植物組織培育，要提高培育轉(zhuǎn)基因植株的成功率，應(yīng)該選再生能力和遺傳穩(wěn)定性較強(qiáng)的受體，這種受體全能性較高，能保持生物的性狀。對(duì)培養(yǎng)的受體細(xì)胞遺傳穩(wěn)定性的早期檢測(cè)，可通過(guò)觀察細(xì)胞核形態(tài)是否改變進(jìn)行判斷，也可以直接在光學(xué)顯微鏡下觀察分裂期染色體的形態(tài)特征和數(shù)量，分析染色體組型是否改變。(6)植物轉(zhuǎn)基因受體全能性表達(dá)程度高低除了與受體基因型、培養(yǎng)環(huán)境、繼代次數(shù)有關(guān)外，還與培養(yǎng)時(shí)間長(zhǎng)短和受體的取材有關(guān)，受精卵是沒(méi)分化的細(xì)胞，分裂和分化能力都很強(qiáng)，故受體為受精卵時(shí)全能性表達(dá)能力最高。6．（2022年1月·浙江·高考真題）回答下列（一）、（二）小題：（一）紅曲霉合成的紅曲色素是可食用的天然色素，具有防腐、降脂等功能。研究者進(jìn)行了紅曲色素的提取及紅色素的含量測(cè)定實(shí)驗(yàn)，流程如下：(1)取紅曲霉菌種斜面，加適量____________洗下菌苔，制成菌懸液并培養(yǎng)，解除休眠獲得____________菌種。經(jīng)液體發(fā)酵，收集紅曲霉菌絲體，紅曲霉菌絲體與70%乙醇溶液混合，經(jīng)浸提、____________，獲得的上清液即為紅曲色素提取液。為進(jìn)一步提高紅曲色素得率，可將紅曲霉細(xì)胞進(jìn)行____________處理。(2)紅曲色素包括紅色素、黃色素和橙黃色素等，紅色素在390nm、420nm和505nm波長(zhǎng)處均有較大吸收峰。用光電比色法測(cè)定紅曲色素提取液甲的紅色素含量時(shí)，通常選用505nm波長(zhǎng)測(cè)定的原因是____________。測(cè)定時(shí)需用____________作空白對(duì)照。(3)生產(chǎn)上提取紅曲色素后的殘?jiān)?，?jīng)__________處理后作為飼料添加劑或有機(jī)肥，這屬于廢棄物的無(wú)害化和__________處理。（二）我國(guó)在新冠疫情方面取得了顯著的成效，但全球疫情形勢(shì)仍然非常嚴(yán)峻、尤其是病毒出現(xiàn)了新變異株——德?tīng)査?、奧密克戎，更是威脅著全人類的生命健康。(4)新冠病毒核酸定性檢測(cè)原理是：以新冠病毒的單鏈RNA為模板，利用__________酶合成DNA，經(jīng)PCR擴(kuò)增，然后在擴(kuò)增產(chǎn)物中加入特異的__________，如果檢測(cè)到特異的雜交分子則核酸檢測(cè)為陽(yáng)性。(5)接種疫苗是遏制新冠疫情蔓延的重要手段。腺病毒疫苗的制備技術(shù)要點(diǎn)是：將腺病毒的復(fù)制基因敲除；以新冠病毒的__________基因?yàn)槟０搴铣傻腄NA插入腺病毒基因組，構(gòu)建重組腺病毒。重組腺病毒在人體細(xì)胞內(nèi)表達(dá)產(chǎn)生新冠病毒抗原，從而引發(fā)特異性免疫反應(yīng)。在此