人參膨化加工技術(shù)的實驗研究

胡蘿卜c.a.梅耶。中藥膨化是采用食品膨化原理對中藥進行加工的一種方法,本文觀察了膨化加工對人參改善小鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響,以探索中藥膨化加工技術(shù)的可行性。健康ICR小鼠,雌雄各半,由西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院實驗動物中心提供。合格證編號:醫(yī)動字第08-004號。人參購自西安市醫(yī)藥公司,經(jīng)鑒定符合《中國藥典》2005年版一部人參項下的各項要求。人參膨化制品,用膨化機將人參膨化,即得。分別取人參、膨化人參加水煎煮2次,每次1.5小時,濾過,水浴濃縮,制成1g生藥/ml的混懸液,冰箱保存?zhèn)溆?。XZC-5Q型跳臺式測定儀,山東醫(yī)學(xué)科學(xué)院設(shè)備供應(yīng)維修站。TXDM-I型小動物Y型電迷路,冀星試驗儀器有限公司。氯霉素注射液,陜西省西安婦幼制藥廠生產(chǎn),生產(chǎn)批號:20021029;東莨菪堿注射液,上海禾豐制藥有限公司生產(chǎn),生產(chǎn)批號:02100017;吡拉西坦片(腦復(fù)康),東北制藥廠生產(chǎn),生產(chǎn)批號:200301011。本實驗所有數(shù)據(jù)統(tǒng)計均采用SPSS10.0統(tǒng)計軟件處理,統(tǒng)計結(jié)果用xˉ±sxˉ±s表示。2學(xué)習(xí)記憶的基本過程取ICR小鼠84只,雌雄各半,按性別、體重均衡隨機分為7組。膨化人參組5g/kg、2g/kg(藥物劑量以生藥表示,以下相同)和人參組5g/kg、2g/kg分別灌胃1g/ml的膨化人參和人參混懸液。腦復(fù)康組灌胃吡拉西坦0.365g/kg。模型組和對照組給予同體積常水。各組每天給藥一次,連續(xù)10d。模型組、對照組在末次給藥后1h采用跳臺裝置進行訓(xùn)練。訓(xùn)練前10min除空白對照組外,其余各組小鼠腹腔以10ml/kg注射東莨菪堿2mg/kg體重訓(xùn)練時將小鼠放入反應(yīng)箱內(nèi),先適應(yīng)3min,然后通電,記錄5min內(nèi)動物錯誤次數(shù)。24h后開始測試。先將小鼠放于反應(yīng)箱內(nèi)的跳臺上并開始計時,記錄小鼠第一次跳下臺的時間,為觸電潛伏期,并記錄5min內(nèi)錯誤次數(shù)(以小鼠雙腳同時接觸銅柵為準(zhǔn)),結(jié)果見表1。動物分組及給藥同2.1。在末次給藥后1小時采用跳臺裝置進行訓(xùn)練。24h后記憶測試。記憶測試前30min除空白對照組外,各組灌胃30%乙醇10m1/kg然后測試記憶成績。記錄潛伏期及5min內(nèi)的錯誤次數(shù),結(jié)果見表2。實驗分組及給藥同2.1。在末次給藥后1h采用電迷路裝置進行訓(xùn)練。訓(xùn)練前10min腹腔注射氯霉素注射液200mg/kg,訓(xùn)練時輕提小鼠尾巴放入起步區(qū),適應(yīng)1min后,以36～40V進行電刺激,當(dāng)小鼠偶然進入安全區(qū),令其在安全區(qū)保留30s以鞏固記憶。第二次以此安全區(qū)作為起步區(qū),再給予第二次電刺激,反復(fù)訓(xùn)練。在多次電擊后動物處于安全區(qū)為正確反應(yīng),否則為錯誤反應(yīng)。訓(xùn)練10次,記錄錯誤次數(shù)。24h后,將實驗動物置Y型迷路內(nèi)10次,觀察錯誤次數(shù),結(jié)果見表3。結(jié)果表明,記憶測試時模型組錯誤反應(yīng)次數(shù)較對照組明顯增加(P<0.01),提示東莨菪堿造模成功。各藥物組均能顯減少錯誤反應(yīng)次數(shù),延長觸電潛伏期。膨化人參5g/kg、2g/kg及人參5g/kg的累計錯誤次數(shù)和觸電潛伏期與模型組比較差異有顯著性意義(P<0.05、0.01、0.001)。膨化人參2g/kg與對應(yīng)劑量的人參組比較差異有顯著性意義(P<0.05)。結(jié)果表明,正式試驗時模型組錯誤反應(yīng)次數(shù)較對照組較明顯增加(P<0.05),提示乙醇造模成功。各藥物組均能顯減少錯誤反應(yīng)次數(shù),延長觸電潛伏期。膨化人參5g/kg、2g/kg及人參5g/kg與模型組比較差異有顯著性意義(P<0.05、0.01、0.001)。膨化人參兩個劑量組與對應(yīng)劑量的人參組比較差異均無顯著性意義(P>0.05)。結(jié)果表明,記憶測試時模型組錯誤反應(yīng)次數(shù)較對照組較明顯增加(P<0.05),提示氯霉素造模成功。除人參2g/kg組外,其他各藥物組均能明顯減少錯誤反應(yīng)次數(shù),與模型組比較差異有顯著性意義(P<0.05、0.01、0.001)。膨化人參的兩個劑量組與對應(yīng)劑量的人參組比較,錯誤次數(shù)均有所減少,但差異無顯著性意義(P>0.05)。學(xué)習(xí)記憶是腦的高級功能,是構(gòu)成智能的要素。在學(xué)習(xí)記憶的整個神經(jīng)活動中,共分為獲得、鞏固、再現(xiàn)3個基本神經(jīng)過程。學(xué)習(xí)記憶障礙是多種腦病所共有的癥狀,發(fā)生率較高,舞蹈病、腦葉萎縮癥、神經(jīng)衰弱以及老年期的腦血管硬化、腦供血不足、癡呆等。檢測學(xué)習(xí)記憶功能的實驗方法有多種,如跳臺法、避暗法、迷路法、穿梭箱法等,這些檢測方法對正常動物不易觀察到藥物的益智或保護作用,因此,常依賴記憶操作模型動物對藥物的促智或保護作用進行檢測來評價其活動性作用。根據(jù)學(xué)習(xí)記憶的生理生化基礎(chǔ),常選用M膽堿受體阻滯劑、中樞神經(jīng)系統(tǒng)抑制劑、腦蛋白質(zhì)合成抑制劑、致腦缺氧劑等化學(xué)物質(zhì)造成各種記憶損傷動物模型,如訓(xùn)練前給以東莨菪或樟柳堿復(fù)制學(xué)習(xí)記憶獲得障礙模型,或訓(xùn)練后立即電休克或立即吸入純CO或皮下注射亞硝酸鈉、氯霉素等誘導(dǎo)腦細胞缺氧來復(fù)制學(xué)習(xí)記憶鞏固障礙模型,以及測試前30分鐘灌胃給子乙醇復(fù)制學(xué)習(xí)、記憶再現(xiàn)缺失模型,從不同機理檢測藥物作用。本文采用經(jīng)典實驗方法,觀察了人參及其膨化制品對記憶獲得、記憶鞏固和記憶再現(xiàn)障礙的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn),膨化人參和人參對東莨菪堿、乙醇、氯霉素導(dǎo)致的小鼠記憶獲得、記憶再現(xiàn)、記憶鞏固障礙均有明顯的改善作用,與模型組比較差異有顯著性意義(P<0.05、0.01、0.001)。但二者相比大多數(shù)指標(biāo)差異幾無顯著性意義(P>0.05)。提示,膨化加工對人參改善小鼠學(xué)習(xí)記憶能