單擊此處編輯母版標(biāo)題樣式單擊此處編輯母版副標(biāo)題樣式*1食物來源胡蘿卜素：深色蔬菜水果——西蘭花、胡蘿卜、菠菜、芒果、橘子等胡蘿卜素〔μg/100g〕芒果8050橘子1660枇杷700西蘭花7210胡蘿卜4010菠菜2920莧菜2110小白菜〔青菜〕1853生菜1790油菜620一、

實驗?zāi)康模菏煜な卟酥泻}卜素的測定原理測定樣品中的胡蘿卜素的含量二、原理：蔬菜的植物色素包括葉綠素、葉黃素及胡蘿卜素等

蔬菜中各種色素均可溶于石油醚，將一定量的植物色素石油醚提取液點在層析紙的一端，用石油醚作展開劑，進行上行展開。

由于胡蘿卜素極性最小，故被石油醚洗走的速度最快，從而可將胡蘿卜素與其它色素分開。·

用石油醚將胡蘿卜素洗脫，用比色法直接測定。三、儀器組織搗碎機層析缸新華中速濾紙〔16cm×20cm〕分液漏斗125ml具塞試管

50ml

、10ml瓷蒸發(fā)皿分光光度計天平水浴鍋四、試劑石油醚〔分析純〕丙酮〔分析純〕3．3:7丙酮-石油醚4．無水硫酸鈉5．5%硫酸鈉溶液6．β-胡蘿卜素標(biāo)準(zhǔn)液〔20μg/ml〕五、操作步驟1.150g蔬菜(洗凈晾干)+350ml水→搗碎

3min(公用)2.稱取10g勻漿〔相當(dāng)于原樣品3g〕入具塞比色管→參加丙酮20ml、石油醚5ml→用力振搖1min(脫色)→靜置5min于125ml分液漏斗內(nèi)先放入5%硫酸鈉溶液30ml，用滴管吸上清液入分液漏斗用3:7丙酮-石油醚混合溶劑提取殘渣，每次10ml，共3次，直至提取液無色為止，每次提取液入分液漏斗振搖分液漏斗使水與提取液混合均勻為宜〔不宜重?fù)u〕,靜置分層，放掉下層再以5%硫酸鈉溶液15

ml振搖洗滌，反復(fù)三次以除盡丙酮。6.將上液通過盛有無水硫酸鈉的漏斗濾入蒸發(fā)皿，用少量石油醚分?jǐn)?shù)次洗盡無水硫酸鈉及分液漏斗中的色素，洗液合并于蒸發(fā)皿。棉花團無水硫酸鈉7.在60~70℃水浴上蒸至近干，立刻用滴管吸至5ml具塞刻度試管內(nèi)，反復(fù)用少量石油醚洗滌蒸發(fā)皿，洗液并入刻度試管，直至洗至無色，定容至5ml，混勻待檢。8． 層析〔1〕點樣：距濾紙底邊4cm處用鉛筆劃一基線，在基線上取兩點，每點距紙兩側(cè)不少于4cm。準(zhǔn)確吸取檢液0.3

ml，以畫好的點為中心，迅速進行帶狀點樣，一次點完?！?〕展開：將點好樣的濾紙卷成圓筒狀，固定兩邊〔不使兩邊重疊〕，放入預(yù)先用石油醚飽和的層析缸內(nèi)。紙筒必須放正，濾紙筒基線以下1/3浸入液內(nèi)，進行上行層析。4cm4cm9．洗脫及比色待胡蘿卜素與其它色素完全別離后，停止層析，將胡蘿卜素層析帶剪下，放入盛有5ml石油醚的試管中，用力振搖，使之洗入醚內(nèi)，以石油醚為空白，立即在450nm波長處比色。10.

作標(biāo)準(zhǔn)曲線取胡蘿卜素標(biāo)準(zhǔn)液〔20

μg/ml

〕0.05，0.1，0.2

，0.4，0.8

ml入試管

加石油醚至5ml

以石油醚為空白在450nm波長處比色。六、計算A1001胡蘿卜素=————×

V2

×——×

—1000V1W〔mg/100g〕A=樣品光密度相當(dāng)于標(biāo)準(zhǔn)的μg數(shù)V1=點樣ml數(shù)七、本卷須知在使用比色管和分液漏斗前要檢查密閉性水浴上蒸醚時，蒸醚時蒸發(fā)皿中不能進水，不能蒸干石油醚不能倒入水池比色皿不能接觸水思考題本次實驗的關(guān)鍵步驟有哪些