豬病實驗室快速診斷技術(shù)四川省川龍動科藥業(yè)豬病越來越多、越來越復(fù)雜如何診斷？病理剖檢變化、流行病學(xué)資料、

實驗室診斷、生產(chǎn)記錄等判定疑似疾病細(xì)菌的染色↓形態(tài)學(xué)觀察↓培養(yǎng)基的制備↓細(xì)菌別離培養(yǎng)↓移植↓細(xì)菌的生化試驗↓藥物敏感試驗病豬的現(xiàn)場剖檢病豬病料的采集、保存總RNA的提取↓反轉(zhuǎn)錄↓聚合酶鏈?zhǔn)椒错憽睵CR〕豬瘟病毒抗體豬偽狂犬病病毒gPI抗體(野毒)豬流感血凝抑制試驗豬細(xì)小病毒病乳膠凝集試驗〔LAT〕豬繁殖與呼吸綜合征病毒抗體↓DNA提取↓PCR血清學(xué)檢測分子診斷細(xì)菌別離↓結(jié)果分析一、細(xì)菌學(xué)檢查及藥敏試驗病料采集、包存、運輸細(xì)菌的別離培養(yǎng)細(xì)菌的染色顯微鏡下細(xì)菌的形態(tài)學(xué)觀察藥物敏感試驗指導(dǎo)臨床用藥病料的采集、保存和運輸無菌取樣供細(xì)菌學(xué)檢驗的樣品，必須無菌操作采樣，采樣用具、容器均須滅菌處理。典型采樣選取病癥最典型或病變最明顯的樣品。

低溫保存運輸。細(xì)菌別離培養(yǎng)

普通瓊脂血液瓊脂

EMB培養(yǎng)基大腸桿菌、沙門氏菌麥康凱培養(yǎng)基大腸桿菌、沙門氏菌SS培養(yǎng)基……沙門和志賀菌篩選溶血反響，如鏈球菌EMB培養(yǎng)基－－大腸桿菌呈紫黑色金屬光澤的菌落細(xì)菌的染色

革蘭氏染色法：G＋細(xì)菌、G－細(xì)菌芽孢染色法：梭菌、芽孢桿菌抗酸染色法鞭毛染色法

莢膜染色法顯微鏡下細(xì)菌形態(tài)學(xué)觀察桿菌球菌梭菌芽孢放線菌鞭毛、菌毛革蘭氏染色法－G＋細(xì)菌革蘭氏染色法－

G－細(xì)菌傳統(tǒng)細(xì)菌學(xué)檢查耗時周期長、操作步驟多

細(xì)菌病的快速診斷－－快速藥敏試驗快速篩選治療細(xì)菌感染的敏感藥物無菌操作取一小塊病料組織，涂布于普通瓊脂平板和血平板上，加藥敏紙片培養(yǎng)14-18小時，或采用鋼管法參加待篩選藥液。結(jié)果判斷

抑菌圈直徑大于14mm表示極敏感抑菌圈直徑12－14mm表示敏感抑菌圈直徑10－12mm表示中度敏感抑菌圈直徑小于8mm表示不敏感。選擇敏感度高的即抑菌圈大的藥物進(jìn)行臨床治療二、PCR和血清學(xué)診斷病毒性疾病傳統(tǒng)實驗室診斷方法PCR結(jié)合瓊脂電泳、ELASA〔酶聯(lián)免疫吸附法〕、紅細(xì)胞凝集抑制試驗、LAT(乳膠凝集試驗)、免疫組化等。傳統(tǒng)PCR需要提取純化DNA、RNA，耗時耗資，手動操作步驟多，易受干擾。

直接PCR技術(shù)病毒性疾病的快速診斷－2小時出結(jié)果直接PCR方法使PCR可以直接從樣本開始，為DNA擴(kuò)增帶來前所未有的便捷。未經(jīng)DNA純化而直接使用微量原始樣本做模板，為PCR實驗節(jié)約大量的時間和本錢。

采集血液樣品或組織樣品組織樣經(jīng)裂解液預(yù)處理〔血清不處理〕，與特定的引物及反響體系〔DNA聚合酶、堿基、熒光染料等〕混合均勻，直接放入熒光