1常綠杜鵑花亞屬雜交技術(shù)規(guī)程本文件規(guī)定了常綠杜鵑花亞屬人工雜交中親本選配、雜交、雜交果實(shí)采收與種子收集、雜交苗培育和性狀測(cè)定、技術(shù)歸檔的技術(shù)內(nèi)容與要求。本文件適用于常綠杜鵑花亞屬的人工雜交。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。DB53/T998-2020高山杜鵑組培苗盆花無土栽培技術(shù)規(guī)程LY/T1853-2009植物新品種特異性、一致性、穩(wěn)定性測(cè)試指南杜鵑花屬常綠杜鵑亞屬和杜鵑花亞屬3術(shù)語和定義本文件沒有需要界定的術(shù)語和定義。4親本選配4.1親本選擇根據(jù)育種目標(biāo)選擇常綠杜鵑花亞屬具有目標(biāo)性狀的植物作親本，同雜種群或同亞組內(nèi)的親本較易雜交成功。4.2親本配組4.2.1雙親性狀雙親具有突出的優(yōu)點(diǎn)，在主要性狀上能夠優(yōu)缺點(diǎn)互補(bǔ)。4.2.2雙親花期4.2.2.1花期重疊的親本可以直接進(jìn)行雜交?；ㄆ诓恢丿B的，早花親本作為父本，采集其花粉貯藏待4.2.2.2如需將早花親本作為母本，宜采取適當(dāng)?shù)臏毓庹{(diào)控措施使其延遲開花再進(jìn)行授粉。4.2.3雙親育性雙親應(yīng)具有較好的育性，父本花粉具有活力，母本柱頭具有可授性且能夠正常結(jié)實(shí)。5雜交25.1雜交前準(zhǔn)備5.1.1雜交計(jì)劃制定制定雜交計(jì)劃，主要包括選擇親本、確定雜交組合配置、時(shí)間安排等。5.1.2親本植株選擇親本植株應(yīng)生長(zhǎng)健壯，父本有充足的花粉且花粉具有活力，母本有用于授粉的花朵且雌蕊健康。5.1.3工具準(zhǔn)備鑷子、剪刀、毛刷、硫酸紙袋、標(biāo)簽、棉簽、夾子、鉛筆、培養(yǎng)皿、記錄本等。5.2雜交授粉5.2.1去雄、套袋選擇母本植株頂部向陽上部花蕾顯色的緊實(shí)花序，用鑷子摘除花序內(nèi)部未顯色花蕾，保留外部顯色花蕾3朵～5朵。用鑷子輕輕撥開保留花冠上部，用剪刀剪除雄蕊，清除殘存花藥，立即用硫酸紙袋將整個(gè)花序套袋隔離，掛上標(biāo)簽并注明去雄日期。5.2.2花粉采集與保存雜交前1d～2d，從新鮮花朵上采集發(fā)育良好并成熟的花藥帶回室內(nèi)，置于鋪有硫酸紙的培養(yǎng)皿中，蔭干過夜，待花藥破裂后收集花粉，將花粉放于1mL離心管內(nèi)，貼上標(biāo)簽，注明父本名稱并及時(shí)進(jìn)行授粉，需要短期保存1個(gè)月）的花粉應(yīng)放置于-20℃冰箱中，長(zhǎng)期保存1個(gè)月）的花粉應(yīng)放置于-80℃超低溫冰箱內(nèi)。5.2.3花粉活力檢測(cè)授粉前用液體培養(yǎng)基檢測(cè)花粉活力。液體培養(yǎng)基配方為10%蔗糖+0.01%硼酸+0.01%氯化鈣+0.02%硫酸鎂+0.01%磷酸二氫鉀。用毛刷將花粉粒抖落在放有液體培養(yǎng)基的細(xì)胞培養(yǎng)板上，將細(xì)胞培養(yǎng)板置于25℃的恒溫箱下培養(yǎng)2h～6h，后在顯微鏡下檢測(cè)花粉粒萌發(fā)情況，花粉管長(zhǎng)度大于花粉粒直徑的視為有活力花粉。花粉萌發(fā)率≥15%的適宜授粉。5.2.4授粉5.2.4.1授粉時(shí)間母本花朵柱頭分泌粘液即可授粉，宜選擇上午8:00～10:00，無風(fēng)、無雨的天氣進(jìn)行授粉。5.2.4.2授粉方法用棉簽沾取父本的花粉輕輕均勻涂在母本花朵的柱頭上，直至肉眼看到柱頭上沾有花粉后隨即套上硫酸紙袋，再用夾子封住袋口。5.2.4.3標(biāo)記記錄對(duì)授粉套袋的花朵掛上標(biāo)簽，標(biāo)明父母本名稱、授粉日期、授粉花朵數(shù)量、花序編號(hào)和操作人等，并登記記錄。5.3雜交后管理3授粉后待花朵柱頭干燥時(shí)去除套袋。去除母本植株坐果枝的側(cè)芽，加強(qiáng)水肥和病蟲害管理。6雜交果實(shí)采收與種子收集6.1雜交果實(shí)采收雜交果實(shí)由綠色轉(zhuǎn)為褐色，果柄自下而上出現(xiàn)干枯時(shí)，即可按不同組合及時(shí)對(duì)雜交果實(shí)進(jìn)行采收，統(tǒng)計(jì)坐果率，即結(jié)籽的果實(shí)數(shù)/授粉花朵總數(shù)×100。6.2種子收集將雜交果實(shí)置于鋪有紙的平臺(tái)上，陰干，待雜交果實(shí)開裂時(shí)收集種子，去除雜質(zhì)和無胚的癟種子。7雜交苗培育和性狀測(cè)定7.1雜交苗培育7.1.1基質(zhì)和容器雜交種子播種采用粒徑＜10mm的無菌泥炭，育苗容器宜采用營(yíng)養(yǎng)缽或穴盤。7.1.2播種7.1.2.1對(duì)雜交種子分組合播種育苗，種子可隨采隨播，氣溫20℃~25℃下種苗生長(zhǎng)較宜。7.1.2.2播種前充分澆透泥炭，播種時(shí)將雜交種子均勻撒播在泥炭表面。播種完成后用噴霧器噴濕種子，后用0.2mm～0.3mm的無紡布或松針等覆蓋保濕。種苗長(zhǎng)出1片～2片真葉時(shí)，揭開無紡布煉苗。7.1.3種苗移栽在種苗3片～4片真葉時(shí)移栽，移栽養(yǎng)護(hù)方法按DB53/T998-2020執(zhí)行。7.2雜交苗性狀測(cè)定待常綠杜鵑花雜交苗開花時(shí)進(jìn)行性狀測(cè)定。雜交苗性狀測(cè)定包括開花所需年限、植株性狀、葉片性狀、花性狀。性狀測(cè)定方法按LY/T1853-2009執(zhí)行。8技術(shù)歸檔常綠杜鵑花雜交技術(shù)檔案包括雜交親本、雜交時(shí)間及方法、開花所需年限、植株性狀、葉片性狀、花性狀、觀賞價(jià)值、植株抗性、繁殖特點(diǎn)等記錄材料，分別逐項(xiàng)記錄于附錄A表A.1中。4（資料性）常綠杜鵑花亞屬雜交技術(shù)檔案及優(yōu)株性狀記錄常綠杜鵑花雜交