鼠單抗制備過程中的常見問題及解決措施提供單B細胞篩選技術(shù)制備鼠單抗過程中遇到的問題及如何解決？B細胞培養(yǎng)在多大的孔板中培養(yǎng)？在96孔板進行培養(yǎng)[1]?？装逯忻總€孔有多少個B細胞？根據(jù)每個細胞生長情況不同，細胞個數(shù)在幾百到上千個不等。動物如果對抗原產(chǎn)生過度免疫反應怎么辦？調(diào)整抗原的劑量和免疫頻率，使用合適的免疫佐劑，并監(jiān)測動物的免疫反應以確保其健康。雜交瘤細胞融合效率低。優(yōu)化融合條件，考慮使用不同的雜交瘤細胞系，或嘗試其他融合方法。單個B細胞篩選后，抗體是如何組裝的，如何設(shè)計它的重鏈和輕鏈引物？分別從單個B細胞中擴出抗體的重輕鏈基因，共表達轉(zhuǎn)染細胞。引物可以通過germline基因序列來設(shè)計[2]。單克隆細胞穩(wěn)定性差怎么辦？定期檢測單克隆細胞的穩(wěn)定性，選擇穩(wěn)定的單克隆細胞進行擴增和抗體生產(chǎn)?？贵w樣品可能受到污染或包含雜質(zhì)。使用適當?shù)募兓夹g(shù)，例如親和層析或凝膠過濾，以提高抗體樣品的純度。B細胞大概培養(yǎng)多久可以用于ELISA檢測，抗體量會達到多少？B細胞培養(yǎng)10-12天可用于ELISA檢測，抗體量在0.2μg/mL~>10μg/mL。單個B細胞技術(shù)會成為治療性抗體開發(fā)的金標準嗎？雖然單個B細胞技術(shù)逐漸成為抗體開發(fā)的主流技術(shù)之一，但是抗體開發(fā)的技術(shù)路線仍然有很多種，如雜交瘤和噬菌體展示等，這些方法各有優(yōu)缺點，相互之間是互補關(guān)系[3]。單個B細胞直接裂解后與培養(yǎng)后的PCR成功率哪個更高？單個B細胞培養(yǎng)后的PCR成功率更高。培養(yǎng)后的B細胞經(jīng)過擴增，細胞數(shù)增加，模板量更高。卡梅德生物擁有豐富的經(jīng)驗積累、嚴格的質(zhì)控體系，提供的單B細胞單抗制備服務的周期短、不限種屬、可獲得抗體序列，得到的抗體具有更高的特異性和親和力。為了滿足客戶的不同需求，卡梅德生物能夠提供從抗原設(shè)計，合成與修飾，到動物免疫，噬菌體文庫構(gòu)建與篩選，下游抗體修飾與應用鑒定等一站式技術(shù)服務。參考文獻[1]TanSH,YoungD,ElsamanoudiS,etal.Abstract2565:DetectionofETV1expressioninhumanprostatetissuespecimensusinganovelandhighlyspecificrabbitmonoclonalantibody[C]//Proceedings:AACRAnnualMeeting2021;April10-15,2021andMay17-21,2021;Philadelphia,PA.2021.DOI:10.1158/1538-7445.AM2021-2565.[2]WallaceJL,ArforsKE,McknightGW.AmonoclonalantibodyagainsttheCD18leukocyteadhesionmoleculepreventsindomethacin-inducedgastricdamageintherabbit[J].Gastroenterology,1991,100(4):878-883.DOI:10.1016/0016-5085(91)90259-N.[3]Powell,WilliamC,Hicks,etal.Anewrabbitmonoclonalantibody(4B5)fortheimmunohistochemical(IHC)determinationoftheHER2statusinbreastcancer:comparisonwithCB11,fluorescenceinsituhybridization(FISH),andinterlaboratoryreproducibility.[J].