1臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞制備及質(zhì)量控制規(guī)范GB50346生物安全實(shí)驗(yàn)室建筑技術(shù)在特定時(shí)間從受試者或捐獻(xiàn)者中采集的器官、組織等標(biāo)），2干細(xì)胞質(zhì)量控制stemcellqualitycont4.1.1臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞制備機(jī)構(gòu)選址應(yīng)符合《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》要求，空氣質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)符合4.1.2臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞制備機(jī)構(gòu)實(shí)驗(yàn)室或廠房應(yīng)由具有潔凈實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)建設(shè)資質(zhì)的工程公司設(shè)計(jì)與建造，并應(yīng)符合GB19489、GB50073、GB50346和GB50591的規(guī)定。建設(shè)完4.1.3干細(xì)胞制備功能區(qū)應(yīng)按臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞制備工藝進(jìn)行各區(qū)域設(shè)計(jì)，符合《藥品生產(chǎn)質(zhì)量4.2.1臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的制備機(jī)構(gòu)應(yīng)優(yōu)先選用符合《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》和《干細(xì)胞制劑質(zhì)量4.2.2臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的制備機(jī)構(gòu)應(yīng)對(duì)設(shè)備、儀器、耗材和試劑供應(yīng)商進(jìn)行資質(zhì)審核認(rèn)證，要求供應(yīng)商提供產(chǎn)品質(zhì)量報(bào)告和批次檢驗(yàn)報(bào)告，并對(duì)耗材及試劑進(jìn)行質(zhì)量4.2.3臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的制備機(jī)構(gòu)設(shè)備和儀器正式使用前應(yīng)做安裝確認(rèn)(IQ)、運(yùn)行確認(rèn)(0Q)和性能確認(rèn)(PQ),并定期進(jìn)行第三方校準(zhǔn)，不得使用有安全4.2.4臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的制備機(jī)構(gòu)應(yīng)對(duì)設(shè)備與儀器進(jìn)行編號(hào)建檔，并建立標(biāo)準(zhǔn)操作流程(SOP),確保4.3.3臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞制備和質(zhì)控技術(shù)人員應(yīng)半年接受體檢一次，有呼吸道感染或發(fā)熱等疾病狀態(tài)3T/XXXXXXX—XXXX4.3.4臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞制備和質(zhì)控技術(shù)人員上崗前應(yīng)經(jīng)過(guò)專(zhuān)業(yè)培訓(xùn)，內(nèi)容包括但不限于干細(xì)胞理論5.1.1臍帶的采集應(yīng)在指定的取得《醫(yī)療機(jī)構(gòu)執(zhí)業(yè)許可證5.1.2臍帶采集應(yīng)符合醫(yī)學(xué)倫理的相關(guān)要求，獲取其供者或法定代表人、監(jiān)護(hù)人的同意和授權(quán)，并簽5.1.3應(yīng)建立合適的供者篩選標(biāo)準(zhǔn)，至少應(yīng)包括既往病史和家族病史的調(diào)查、傳染性疾病的結(jié)果、近5.1.4臍帶采集過(guò)程應(yīng)采取措施保護(hù)供者的健康和安全，并通過(guò)無(wú)菌技術(shù)最大限度降低污染、感染和5.2.1運(yùn)輸人員應(yīng)是經(jīng)過(guò)專(zhuān)業(yè)培訓(xùn)合格的人員，對(duì)樣本運(yùn)輸應(yīng)制定規(guī)范及應(yīng)急預(yù)案，并對(duì)至少30年。5.2.4樣本運(yùn)輸溫度應(yīng)維持在2℃~8℃,運(yùn)輸時(shí)間不超過(guò)12小時(shí)。5.3.1樣本接收人員應(yīng)是經(jīng)過(guò)專(zhuān)業(yè)培訓(xùn)合格的人，應(yīng)遵從安全與準(zhǔn)確的原則對(duì)樣本接收制定規(guī)范及應(yīng)急預(yù)案，并對(duì)樣本接收過(guò)程進(jìn)行記錄，相關(guān)記錄入檔保留至少30年。5.3.2樣本接收時(shí)，接收人員應(yīng)做好自我防護(hù)工作，接觸樣本之前應(yīng)佩戴手套與口罩5.3.3接收樣本后應(yīng)先觀察樣本容器外包裝的外觀，檢查有無(wú)破損。5.3.4檢查外觀后，工作人員應(yīng)檢查樣本采集信息記錄表是否齊全，同時(shí)確認(rèn)記錄表上信息是否填寫(xiě)5.3.5樣本接收后，使用75%醫(yī)用酒精消毒清理容器外表面，如不能及時(shí)對(duì)樣本進(jìn)行處理，需把樣本保存在2℃~8℃條件下，最長(zhǎng)時(shí)間不超過(guò)12小時(shí)。5.3.6樣本量應(yīng)能夠滿(mǎn)足制備和檢測(cè)的最低要求。5.3.7樣本接收后應(yīng)及時(shí)將信息反饋給樣本發(fā)送方。5.3.8臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞制備方應(yīng)5.4.2可采用組織貼塊法或酶消化法等方法分離間充質(zhì)干細(xì)胞，分離方法應(yīng)經(jīng)過(guò)驗(yàn)證。5.4.3臍帶組織塊或臍帶消化產(chǎn)物的接種密度應(yīng)適宜。5.4.4分離操作需符合無(wú)菌操作要求，保證無(wú)外源微生物污染。5.5.1臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞換液操作應(yīng)嚴(yán)格遵照《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》和《干細(xì)胞制劑質(zhì)臨床前研究指導(dǎo)原則》要求，保證無(wú)外源微生物污染，相關(guān)操作均進(jìn)行記錄并入檔保存至少30年。45.5.2換液時(shí)間及頻次應(yīng)根據(jù)臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞生長(zhǎng)情況及培養(yǎng)基狀態(tài)進(jìn)行判斷，以保障臍帶間充質(zhì)5.5.3換液操作時(shí)吸棄培養(yǎng)瓶中原有的部分或全部培養(yǎng)液，再加入新鮮培養(yǎng)液。首次換液需要在鏡下5.5.4培養(yǎng)基成分應(yīng)符合臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞分離與培養(yǎng)基本要求，盡量采用已獲國(guó)家批準(zhǔn)的臨床級(jí)產(chǎn)5.6.1臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞傳代操作應(yīng)嚴(yán)格遵照《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》和《干細(xì)胞制劑質(zhì)量控制及臨床前研究指導(dǎo)原則》要求，保證無(wú)外源微生物污染，相關(guān)操作均進(jìn)行記錄并入檔保存至少30年。5.6.2臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞一般情況在達(dá)到80%～90%融合度可講行傳代操作，傳代操作應(yīng)密度適5.6.3傳代所使用消化酶應(yīng)符合臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞分離與培養(yǎng)的基本要求，盡量采用國(guó)家已5.7.1臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞凍存操作應(yīng)嚴(yán)格遵照《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》和《干細(xì)胞制劑質(zhì)量控制及臨床前研究指導(dǎo)原則》要求，保證無(wú)外源微生物污染，相關(guān)操作均進(jìn)行記錄并入檔保存至少30年。5.7.2經(jīng)制備數(shù)量達(dá)到凍存要求的臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞系可進(jìn)行凍存操作，凍存細(xì)胞應(yīng)加5.7.3凍存液成分應(yīng)符合臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞分離與培養(yǎng)的基本要求，盡量采用國(guó)家已批準(zhǔn)的臨床級(jí)產(chǎn)品或藥品輔料，二甲基亞砜含量不得超過(guò)10%,如必須使用動(dòng)物源性血清，應(yīng)確保其無(wú)特定動(dòng)物源性病5.7.4凍存細(xì)胞應(yīng)標(biāo)明干細(xì)胞名稱(chēng)、培養(yǎng)條件、代次、批次、操作人員、凍存日期等信息，5.8.1將凍存管從冷凍罐中取出后，盡快放入37℃~42℃水浴鍋中，輕搖凍存管使其內(nèi)容物在3min內(nèi)融化。用75%酒精擦拭凍存管外部后，將其移入無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)。5.8.2將干細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至含有培養(yǎng)基的離心管中進(jìn)行離心，去除冷凍保護(hù)劑。離心后用完全培養(yǎng)基5.8.3復(fù)蘇后細(xì)胞的活率應(yīng)不低于75%。復(fù)蘇后細(xì)胞的接種密度應(yīng)適宜。5.9.1復(fù)蘇檢測(cè)合格的工作庫(kù)細(xì)胞，按規(guī)定的接種密度進(jìn)行接種、培養(yǎng)；融合度達(dá)到70%～905T/XXXXXXX—XXXXd)生物學(xué)有效性評(píng)價(jià)包括多向分化功能的評(píng)價(jià)、免疫調(diào)控功能的評(píng)價(jià)等。每一批次臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞制劑在臨床使用前應(yīng)在完成例行質(zhì)量檢驗(yàn)的基礎(chǔ)上，由干細(xì)胞臨床研7.1.1供者健康篩查結(jié)果應(yīng)符合合格供者要7.1.3臍帶及檢測(cè)標(biāo)本的接收、標(biāo)識(shí)以及暫存符合標(biāo)準(zhǔn)要求。7.1.5細(xì)胞在分離、處理及檢測(cè)等過(guò)程中所涉及的人員均已通過(guò)考核合格后上崗。7.1.6細(xì)胞分離、處理、檢測(cè)等所使用的設(shè)備應(yīng)符合設(shè)備管理要求(標(biāo)識(shí)清晰正確，在合格計(jì)量校驗(yàn)期內(nèi)定期維護(hù)保養(yǎng)等);與細(xì)胞接觸的器械應(yīng)經(jīng)消毒滅菌并在有效期內(nèi)。7.1.7細(xì)胞制備、檢測(cè)所用物料應(yīng)經(jīng)確認(rèn)來(lái)自合格供應(yīng)商，關(guān)鍵物料均應(yīng)經(jīng)抽樣檢測(cè)并確認(rèn)其質(zhì)量合7.1.8細(xì)胞分離、處理、檢測(cè)和過(guò)程監(jiān)控程序應(yīng)與機(jī)7.1.9樣本在采