1本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了紅醋栗無性繁殖技術(shù)，包括相關(guān)術(shù)語和定義、分株繁殖、扦插繁殖、壓條繁殖、組織培養(yǎng)以及苗木出圃、育苗檔案等技術(shù)內(nèi)容。本標(biāo)準(zhǔn)適用于遼寧省紅醋栗無性繁殖育苗的生產(chǎn)作業(yè)。2規(guī)范性引用文件下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB6000主要造林樹種苗木質(zhì)量分級GB/T8321農(nóng)藥合理使用準(zhǔn)則LY/T1882林木組織培養(yǎng)育苗技術(shù)規(guī)程3術(shù)語與定義下列術(shù)語和定義適用于本文件。3.1無性繁殖是指沒有精子或卵子直接參與的繁殖過程，是由樹木母體的一群細(xì)胞、部分組織或器官，通過體細(xì)胞有絲分裂，分化發(fā)育成各種組織和器官，形成完整植株的繁殖方法。3.2分株繁殖是將母樹的萌蘗枝、叢生枝、匍匐枝等從母株上分離，栽植為獨(dú)立新植株的方法。3.3扦插繁殖是將母體植株上切離下來的芽、葉、根、莖、變態(tài)莖等營養(yǎng)體插在栽培基質(zhì)中，使之重新形成新的、完整植株的繁殖方法。3.4壓條繁殖是使連在母株上的枝條形成不定根，然后再切離母株成為一個(gè)新生個(gè)體的繁殖方法。3.5植物組織培養(yǎng)2是指通過無菌操作將植物體的一部分接種到培養(yǎng)基上，并在人工控制的條件下使其發(fā)育成完整植株的過程。4紅醋栗無性繁殖技術(shù)4.1分株繁殖技術(shù)4.1.1繁殖時(shí)期分株繁殖時(shí)期為春季芽萌動之前或秋季落葉后。4.1.2繁殖材料材料為4a生以上紅醋栗樹。4.1.3繁殖方法a)將準(zhǔn)備分株的紅醋栗樹挖出，把要分離的植株從母體分離，分離的植株應(yīng)帶有須根，保留3個(gè)~4個(gè)結(jié)果枝。b)分株后，浸根24h后進(jìn)行栽植，栽植株行距為1m×2m。如需遠(yuǎn)距離運(yùn)輸，則分株苗根系需蘸泥漿。c)秋季分株的苗，不立即進(jìn)行栽植，則需要進(jìn)行假植。即在上凍前挖好儲藏溝，溝寬1.2m，深40cm，長度視苗木數(shù)量而定。采用沙藏層積法，完成后灌透水。4.1.4撫育管理a)灌水：春季分株的苗木，栽植后要及時(shí)灌水，7d~10d再灌水1次，15d~20d再灌水1次，5月中旬和6月中旬各灌1次水，霜降前澆1次封凍水。秋季分株的苗木，栽植后立即灌水，霜降前澆上凍水，翌年4月初第1次灌水；5月中旬第2次灌水；6月中旬第3次灌水；第4次封凍水，在土壤封凍前進(jìn)行。b)中耕除草：松土深度10cm~15cm，在一個(gè)生長季中，除草3次~4次。c)施肥：一般1a中進(jìn)行2次追肥。第1次在5月中旬左右，追施以氮、磷為主的化肥，每株叢施50g~100g；第2次在6月中旬至下旬，以磷、鉀化肥為主，每株叢施50g~100g；追肥采用溝施或結(jié)合中耕進(jìn)行，施肥后進(jìn)行灌水。4.2扦插繁殖技術(shù)4.2.1硬枝扦插插條選擇a)選條：通過優(yōu)樹選擇，建立采穗圃，從中選擇優(yōu)質(zhì)插條。b)采條時(shí)間：春季萌芽前（3月~4月）或秋季入冬前（10月~11月）。插條貯存a)溝藏貯存：冬剪采集的插條，宜采用溝藏法貯存。貯存溝選擇排水良好的背陰處，寬1.0m~1.5m、深1.2m，長度根據(jù)插條數(shù)量確定。貯藏插條時(shí)，先在溝底鋪一層濕沙，將插條成捆平放在溝底，一層插條一層濕沙，沙子的濕度以手握成團(tuán)為宜，最上層插條距地面20cm~30cm，最后覆土略高于地面3cm~5cm。b)短期貯存：春季采集的插條可用濕沙覆蓋貯存。插穗的剪截3先將同一插條的基部芽欠飽滿及梢部木質(zhì)化程度不足的部分剪除，再剪取直徑0.5cm~1.5cm、長度10cm~15cm的插條作為插穗。剪穗要在室內(nèi)或庇蔭背風(fēng)處進(jìn)行，上端平剪，剪口距離芽1.0cm~1.5cm，下端斜剪，剪口呈馬耳形。剪好的插穗按粗細(xì)分級，每捆100根~150根，下端對整齊。整地和土壤處理主要是翻耕、耙地、平整、鎮(zhèn)壓，清除草根、石塊等，做到深耕細(xì)整、地平土碎。然后用0.2%高錳酸鉀消毒。壟做好后澆灌大水，自然晾干。扦插a)扦插時(shí)間：春季氣溫穩(wěn)定通過12℃時(shí)，可實(shí)施扦插。b)生根處理：采用木本植物速蘸發(fā)根劑（專利號.10g溶入1L水中，配制成生根劑原液，速蘸10s處理。c)扦插方式：壟插，每壟2行，行距20cm~30cm，株距10cm~20cm，深度3cm~5cm，扦插后踏實(shí)。撫育管理a)扦插后，要及時(shí)澆1次透水。30d為生根期，要保證土壤濕度達(dá)到田間持水量的80%。b)插穗發(fā)芽長出新枝至成活，除繼續(xù)做好土壤的水分管理外，當(dāng)幼苗長至10cm時(shí)，應(yīng)及時(shí)摘除側(cè)芽，每穗留一個(gè)直立、健壯的新枝，同時(shí)對葉面噴施0.2%~0.3%的磷酸二氫鉀溶液，每7d噴施1次，連噴2次~3次。適時(shí)進(jìn)行松土、除草、灌水，速生期（6月中旬~7月中旬）追施氮磷復(fù)合肥1次，用量60g·m-2。4.2.2嫩枝扦插苗床準(zhǔn)備a)苗床長度隨地形設(shè)計(jì)、寬1.0m~1.2m，在圃地上起高床，設(shè)置好排水溝，床面鋪一層10cm厚的鮮細(xì)河沙。b)消毒：扦插前1d~2d用0.2%~0.3%高錳酸鉀水溶液噴淋床面，噴藥量3g·m-2，24h后用清水充分淋洗，淋洗3h~4h后扦插。插穗制作在陰天全天或晴天早晚時(shí)，剪取半木質(zhì)化枝條。剪取插穗應(yīng)避免陽光直射，剪口要平滑，上口平剪，下口馬耳形，除去下部葉片，保留上部2個(gè)~3個(gè)葉片，穗長10cm~15cm。按每捆100根~150根，立放在陰涼處噴水或水池里，上端覆蓋濕麻袋遮陰，下端浸水保濕。生根處理a)生根方法：采用木本植物速蘸發(fā)根劑（專利號：ZL200510045674.4）10g溶入1L水中，配制成生根劑原液，速蘸10s處理。b)處理部位：插穗基部。c)蘸藥深度：2cm~3cm。扦插a)扦插前將插床噴透水。b)扦插時(shí)間：在傍晚或早晨進(jìn)行。c)扦插密度：株行距為5cm×5cm或4cm×5cm。d)扦插深度：2cm~3cm。e)插后立即噴水。撫育管理4a)水分管理：少量多次噴水，使插穗葉片表面有一層水膜。待大部分插穗生根后(約15d)，逐漸減少噴霧。井水水溫較低，不利于插穗生根，可通過修建曬水池實(shí)現(xiàn)對水溫的自然調(diào)節(jié)。b)后期管理：扦插后可噴施營養(yǎng)液（0.3%尿素+0.2%磷酸二氫鉀混合液），用量0.25kg·m-2，每7d噴施1次，連噴2次~3次；扦插后30d，追施氮磷復(fù)合肥1次，用肥量60g·m-2，施肥后立即噴水，適時(shí)松土、除草、灌水。越冬管理在上凍前挖好儲藏溝，溝寬1.2m，深40cm，長度視苗木數(shù)量而定。采用沙藏層積法進(jìn)行防寒，完成后灌透水。歸圃育苗選擇地勢平坦、背風(fēng)向陽、排水良好、土層深厚50cm以上、土質(zhì)肥沃、有灌溉條件的沙壤土或壤土為苗圃地。深翻20cm~25cm，經(jīng)整平耙細(xì)后，進(jìn)行栽植。行距15cm~20cm，株距8cm~10cm，栽植后灌水。后期適時(shí)進(jìn)行除草、松土。6月上旬和7月上旬，分別追施1次磷酸二銨，施肥量為0.03kg·m-2。4.3壓條繁殖技術(shù)4.3.1繁殖時(shí)期在早春芽萌動前進(jìn)行。4.3.2繁殖材料選擇紅醋栗1a~2a生枝條。4.3.3繁殖方法a)枝條處理：生根部位剝開5mm×5mm的枝皮，環(huán)割皮層，深達(dá)木質(zhì)部。b)生根劑處理：用棉簽蘸生根劑（木本植物速蘸發(fā)根劑，專利號：ZL200510045674.4，2.5g溶入1L水中）涂抹在處理口上。c)彎曲枝條埋入挖好的溝中，溝深15cm~20cm，近母株一側(cè)為斜面，以使枝條與土壤密切接觸，相對的外側(cè)為垂直面，以引導(dǎo)新梢垂直向上生長，頂端露出地面，用彎成“U”形的鐵絲（12#鐵線）反扣將其固定、覆土。d)新生植株生長健壯后，再與母株割離。4.3.4撫育管理a)中耕除草：松土深度10cm~15cm，在一個(gè)生長季中，除草3次~4次。b)施肥：一般1a中進(jìn)行2次追肥。第1次在5月中旬左右，追施以氮、磷為主的化肥，每株施50g~100g；第2次在6月中旬至下旬，以磷、鉀化肥為主，每株施50g~100g；追肥采用溝施或結(jié)合中耕進(jìn)行，施肥后進(jìn)行灌水。c)灌水：4月初第1次灌水，有利于樹木的生長發(fā)育；5月中旬第2次灌水，有利于新梢生長；6月中旬第3次灌水，對促進(jìn)根系迅速生長有明顯的作用；第4次封凍水，在土壤封凍前進(jìn)行，防止因生理干旱造成樹木的干枯和死亡。4.4組織培養(yǎng)技術(shù)4.4.1取材時(shí)期4月初，在芽尚未萌動前。4.4.2外植體采集5在晴天或露水干后剪取母株當(dāng)年生長健壯木質(zhì)化或半木質(zhì)化枝條作為外植體。4.4.3外植體修剪去除枝條上葉片，剪成具1個(gè)～2個(gè)飽滿健壯腋芽的4cm～5cm小段。4.4.4外植體清洗修剪好的莖段按木質(zhì)化程度放置于不同的燒杯中，加入洗潔精進(jìn)行表面沖洗，洗好后沖洗掉泡沫，放在水龍頭下沖洗。沖洗1h～2h后，置于超凈工作臺（已開機(jī)、滅菌20min以上）備用。4.4.5外植體消毒滅菌用75%酒精浸泡30s，無菌水沖洗2次～3次，然后按材料的木質(zhì)化程度，分別用0.1%升汞浸泡6min～8min，最后用無菌水沖洗5次～6次后放入超凈工作臺中備用。4.4.6不定芽誘導(dǎo)外植體接種將沖洗干凈、瀝干水分的外植體按無菌操作的要求，切成長約1cm，具1個(gè)~2個(gè)腋芽的莖段，插入配方為MS+6-BA0.6mg·L-1+IBA0.04mg·L-1+AC1.0g·L-1+白糖35mg·L-1+瓊脂8mg·L-1固體培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)，每瓶接種一個(gè)芽。培養(yǎng)條件培養(yǎng)室溫度控制在23±2℃,光照度為1500lX-2000lX，光照時(shí)間為14h~16h/d。4.4.7繼代培養(yǎng)叢生芽接種當(dāng)初代誘導(dǎo)的不定芽長到1.5cm或以上時(shí)，將萌發(fā)的幼芽從基部切下，去掉莖尖，切成高1.5cm左右接種到配方為MS+6-BA0.6mg·L-1+IBA0.04mg·L-1+AC1.0g·L-1繼代培養(yǎng)基中進(jìn)行不定芽的增殖培養(yǎng)。培養(yǎng)條件培養(yǎng)條件同。4.4.8生根培養(yǎng)生根苗接種將生長健壯的不定芽切成1.5cm單芽接種在1/2MS+IBA0.4+白糖30mgL-1的生根培養(yǎng)基中。待每株苗生根2條~4條時(shí)，即可進(jìn)行組培苗移栽煉苗。培養(yǎng)條件培養(yǎng)室溫度25℃~28℃,光照強(qiáng)度為3000lx~4000lx，每天光照14h~16h。4.4.9組培苗移栽煉苗煉苗a)煉苗時(shí)期：5月中旬。b)閉瓶鍛煉：將瓶裝試管苗移至日光溫室或大棚，溫度控制在35℃以下，按照循序漸進(jìn)原則利用遮陽網(wǎng)控制棚內(nèi)光照強(qiáng)度由50%逐漸增加至全光照，逐漸增加自然光照，在清早、傍晚和陰雨天光線較弱的時(shí)進(jìn)行全光照。保留瓶蓋培養(yǎng)10d左右。6c)開瓶鍛煉：閉瓶鍛煉結(jié)束后，除去瓶蓋繼續(xù)鍛煉2d～5d，培養(yǎng)基表面未出現(xiàn)大量雜菌前進(jìn)行移栽。移栽馴化a)設(shè)施條件：塑料大棚上蓋50%透光率的遮陽網(wǎng)控光、降溫。b)移栽基質(zhì)：尾沙：草炭土：熟表土=5:3:2。c)基質(zhì)處理：基質(zhì)過篩后混勻，混勻過程中噴灑0.2%代森錳鋅和速滅殺丁水溶液消毒，混勻后堆漚覆膜、壓嚴(yán)，3d后裝杯。d)移栽容器：7cm×11cm營養(yǎng)缽。e)移栽：用自來水把根系上的培養(yǎng)基沖洗干凈，用0.1%的多菌靈溶液浸泡組培苗根部3s～5s后栽入已準(zhǔn)備好的營養(yǎng)缽中。移栽一個(gè)苗床后搭蓋高50cm×寬1.2m×長6.0m的塑料小拱棚。后期管理a)0d-10d：白天光照強(qiáng)烈的時(shí)間段關(guān)閉小拱棚塑料薄膜；傍晚日落前到早晨日出前放風(fēng)，放風(fēng)口逐漸加大。b)10d~20d：緩苗期過后，組培苗長出了1片~2片新葉，此時(shí)可完全撤掉塑料小拱棚，適時(shí)進(jìn)行澆c)20d~30d：組培苗已經(jīng)完全適應(yīng)了棚內(nèi)環(huán)境，此時(shí)可逐步撤除遮陽網(wǎng)，開始對葉面噴施0.3%的磷酸二氫鉀溶液。d)30d后，施1次磷酸二銨，每棵組培苗施3粒~4粒，每天澆水1次。e)60d后，施1次磷酸二銨，每棵組培苗施5粒~6粒，每2天澆水1次。f)9月中旬：開始撤掉大棚塑料，此后應(yīng)控制澆水，促進(jìn)苗木木質(zhì)化，為安全越冬做準(zhǔn)備。g)11月：封凍前進(jìn)行冬灌，然后就地壓3cm~5cm的防寒土越冬。5苗木出圃5.1調(diào)查為掌握苗圃苗木的質(zhì)量、產(chǎn)量底數(shù)，應(yīng)在每年9月~10月份進(jìn)行苗木調(diào)查。調(diào)查內(nèi)容包括：苗木數(shù)量、苗木高度、地徑、根系及木質(zhì)化程度，并按等級統(tǒng)計(jì)。5.2起苗在秋季落葉后至上凍前，或春季解凍后至樹液流動前進(jìn)行。起苗時(shí)應(yīng)保持苗木有完整的根系，側(cè)根要起全，不傷根。隨起苗隨分級，并及時(shí)進(jìn)行假植或蘸泥漿包裝運(yùn)輸。5.3分級一般根據(jù)苗高、地徑、根系及病蟲害、機(jī)械損傷等情況把苗木分為Ⅱ級：Ⅰ級苗為發(fā)育良好的標(biāo)準(zhǔn)苗，Ⅱ級苗為基本符合造林要求的標(biāo)準(zhǔn)苗。低于Ⅱ級者為不合格苗木，需在圃地移植繼續(xù)培育或作為廢苗。苗木分級標(biāo)準(zhǔn)見附錄A。5.4假植起苗后造林前要對苗木做較短時(shí)間的假植。假植時(shí)，將苗木根系用濕土埋嚴(yán)。5.5包裝和運(yùn)輸7苗木運(yùn)輸時(shí)應(yīng)用蘆席或草簾將根部包起，并保持濕潤；運(yùn)輸途中不得重壓、日曬，注意苗木通氣，以防發(fā)熱。遠(yuǎn)距離運(yùn)輸時(shí)，根部應(yīng)蘸泥漿，中途注意補(bǔ)水。苗木運(yùn)達(dá)后，必須立即造林或置于陰涼處進(jìn)行假植。6育苗檔案紅醋栗無性繁殖育苗的每一步驟和過程都要有詳細(xì)的檔案記載。檔案內(nèi)容見附錄B。8（規(guī)范性附錄）紅醋栗無性繁殖苗苗木質(zhì)量等級表A.1紅醋栗無性繁殖苗苗木質(zhì)量等級/a標(biāo)/cm/cm/cm苗9（資料性附錄）紅醋栗無性繁殖育苗檔案表B.1紅醋栗無性繁殖育苗檔案編號：苗圃名稱：繁殖苗種類（分株苗；硬枝或嫩枝扦插苗；壓條繁成活率：%移栽成活率：%（資料性附錄）紅醋栗特性C.1紅醋栗果實(shí)成串著生在結(jié)果枝上，果實(shí)成熟時(shí)呈鮮紅色，故名紅醋栗。其果實(shí)營養(yǎng)豐富，可做果酒、果醬、飲料等，具有很高的開發(fā)利用價(jià)值。果實(shí)中鐵元素的含量比黑醋栗高出很多，鐵元素的含量是衡量營養(yǎng)價(jià)值的重要標(biāo)志，進(jìn)一步表明了紅醋栗有很高的開發(fā)利用價(jià)值。紅醋栗鮮果含有可溶性固形物12%~16%，糖6%~11%，酸1%~