第二十四章

超敏反應(yīng)性疾病免疫學檢驗知識目標掌握：激發(fā)試驗的概念、類型與臨床；血清IgE的檢測方法、臨床意義與應(yīng)用評價熟悉：藥物過敏篩選實驗技術(shù)類型及應(yīng)用了解：循環(huán)免疫復(fù)合物檢測技術(shù)能力目標1.解釋激發(fā)試驗的原理及正確結(jié)果判讀2.運用ELISA和IBT檢測SIgE。思政-素質(zhì)目標耐心、責任心、質(zhì)控意識和生物安全意識教學目標1.激發(fā)試驗的概念、類型與臨床應(yīng)用

2.血清IgE的檢測方法、臨床意義與應(yīng)用評價3.藥物過敏篩選實驗技術(shù)類型及應(yīng)用4.循環(huán)免疫復(fù)合物檢測技術(shù)本章要點血清IgE檢測三目錄一超敏反應(yīng)概述二激發(fā)試驗四免疫復(fù)合物檢測技術(shù)五藥物過敏篩選實驗一、基本概念五、其他激發(fā)試驗四、食物激發(fā)試驗三、支氣管激發(fā)試驗二、皮膚激發(fā)試驗二激發(fā)試驗激發(fā)試驗（provocationtest）模擬自然發(fā)病條件，用少量變應(yīng)原引起一次較輕的超敏反應(yīng)發(fā)作，達到確定或排除變應(yīng)原的一種體內(nèi)試驗。一、基本概念非特異性激發(fā)：用組胺等刺激物做霧化吸入，觀察患者敏感性，分析病因或評估療效特異性激發(fā)：用特異性抗原作刺激物，觀察是否誘發(fā)相應(yīng)反應(yīng)，有助于明確變應(yīng)原二、皮膚激發(fā)試驗（一）試驗類型及方法皮內(nèi)試驗（intradermaltest）點刺試驗（pricktest）斑貼試驗（patchtest）相同超敏原不同稀釋度

速發(fā)型：15～30min內(nèi)觀察

遲發(fā)型：48～72h內(nèi)觀察0.01～0.03ml/針4cm/針方法結(jié)果皮內(nèi)試驗前臂屈側(cè)

比皮內(nèi)試驗敏感性稍低，但假陽性較少；皮試液濃度要比皮內(nèi)試驗高10～100倍。將試驗抗原與對照液分別滴于試驗部位的皮膚上用針尖透過液滴輕挑一下以刺破皮膚而不出血為度1min后拭（吸）去試驗抗原液點刺試驗主要用于檢測I型超敏反應(yīng)第一次讀：48小時打開斑試器,間隔30min待斑試器壓痕消失后判定結(jié)果。第二次讀：第3天或第4天。如懷疑光過敏，在斑貼試驗的基礎(chǔ)上給予紫外線照射，操作過程相似。斑貼試驗主要用于檢測IV型超敏反應(yīng)前臂屈側(cè)或背部速發(fā)型皮膚試驗結(jié)果判定：陽性反應(yīng)以風團為主；點刺試驗的陽性反應(yīng)以紅暈為主遲發(fā)型皮膚試驗結(jié)果判定陽性結(jié)果以紅腫和硬結(jié)為主。（二）結(jié)果判斷與分級標準分級皮內(nèi)試驗點刺試驗—無風團反應(yīng)或小于陰性對照無風團反應(yīng)或小于陰性對照+風團3mm～5mm、紅暈＜20mm無風團，陰性對照＜紅暈≤20mm++風團6mm～9mm、伴紅暈無風團，紅暈＞20mm+++風團10mm～15mm、伴紅暈風團伴紅暈++++風團＞15mm伴紅暈且有偽足風團伴紅暈且有偽足

速發(fā)型皮膚試驗的結(jié)果判斷標準反應(yīng)程度遲發(fā)型皮試斑貼試驗—無反應(yīng)或小于陰性對照無反應(yīng)或小于陰性對照+僅有紅腫輕度紅腫、瘙癢++紅腫伴硬結(jié)明顯紅腫、時有紅斑+++紅腫、硬結(jié)、小皰紅腫伴皮疹、水皰++++大皰或（和）潰瘍紅腫、水皰伴潰瘍遲發(fā)型皮試和斑貼試驗結(jié)果判定標準假陰性出現(xiàn)的常見原因：試驗抗原的濃度過低或者抗原失效患者皮膚反應(yīng)差，或者試驗前服用免疫抑制劑或抗組胺藥物操作誤差時間選擇不當（三）結(jié)果分析與注意事項假陽性出現(xiàn)的常見原因：試驗抗原不純試驗溶液非特異性刺激；皮膚反應(yīng)性過強手法過重或操作不當（三）結(jié)果分析與注意事項（四）應(yīng)用與評價1.尋找變應(yīng)原2.預(yù)防藥物過敏3.評估機體細胞免疫功能4.預(yù)防皮膚接觸過敏測定支氣管吸入某種刺激性物質(zhì)后產(chǎn)生收縮反應(yīng)程度的方法，亦稱氣道反應(yīng)性測定吸入一定量的激發(fā)物比較吸入前后肺通氣功能指標判斷氣道高反應(yīng)性程度

(bronchialprovocativetest,BPT)三、支氣管激發(fā)試驗特異性BPT將一定濃度的抗原刺激物裝入霧化器中使受試者口或鼻吸入霧化顆粒，其攜帶激發(fā)物在支氣管樹及肺泡沉積而起作用非特異性BPT將一定濃度的激發(fā)物裝入霧化器中，進行同特異性BPT的操作吸氣流速、霧化顆粒直徑的大小及氣道通暢與否均可影響霧化顆粒在氣道的沉積，從而影響氣道的反應(yīng)性（一）試驗類型及方法支氣管反應(yīng)有三種類型：速發(fā)、遲發(fā)和雙重反應(yīng)。每次觀察不能小于24小時測定指標

FEV1：重復(fù)性好，結(jié)果穩(wěn)定；

PEF：峰流速儀價格低廉、方便、不受場地限制，與FEV1有較好的相關(guān)性，適合流行病學調(diào)查sGaw：敏感性好，但重復(fù)性稍差（二）測定指標及結(jié)果判斷定性判斷：變應(yīng)性的確定常以定性實驗判斷結(jié)果。1.陽性：氣道反應(yīng)性增高FEV1、PEF較基礎(chǔ)下降≥20%或sGaw下降≥35%，有時伴有明顯自覺癥狀或肺部聞及哮鳴音。（二）測定指標及結(jié)果判斷定性判斷2.陰性：氣道反應(yīng)性正常FEV1、PEF或sGsw＜以上標準，正常值為陰性無論激發(fā)試驗陽性或陰性，均應(yīng)排除氣道反應(yīng)性的影響因素。可疑者，間隔2～3周后復(fù)檢或2個月后再測（二）測定指標及結(jié)果判斷禁忌證有心或肺功能不全、高血壓、甲亢、妊娠等嚴重咽喉炎，呼吸道感染或肺炎者一周內(nèi)有呼吸道感染、預(yù)防接種、職業(yè)性過敏因素的接觸等有過敏性休克、嚴重的血管性水腫及嚴重的喉頭水腫病史者呼吸功能嚴重受損，基礎(chǔ)PEF或FEV1值少于預(yù)計值70%者身體極度虛弱,不能耐受本試驗者（三）注意事項及禁忌癥注意事項詳詢病史，排除禁忌癥，避免藥物干擾基礎(chǔ)FEV1占預(yù)計值70%以上才能進行試驗受試者應(yīng)為哮喘患者病情穩(wěn)定時或緩解期吸入激發(fā)物的濃度應(yīng)從小到大，逐漸遞增應(yīng)備有急救器械、藥品和有經(jīng)驗的臨床醫(yī)生在場（三）注意事項及禁忌癥（四）應(yīng)用與評價特異性高與受試者病史、癥狀、體征相關(guān)性較強主要用于確定支氣管哮喘變應(yīng)原可檢測新制劑的抗原性、評價平喘藥療效和脫敏治療效果試驗不足在于存在一定風險每次僅能檢測一種抗原需要專門的設(shè)備和技術(shù)排除性飲食1周后，食物激發(fā)試驗在醫(yī)院內(nèi)進行排除的可疑食物以普通形式從不引起癥狀的小量開始，觀察一段時間(結(jié)合病史確定觀察時間)若無癥狀，則將食物逐漸加至常量，院內(nèi)觀察2小時，監(jiān)測呼吸、心率及皮膚改變無癥狀者回家