纖維素酶產(chǎn)生菌的抗阻遏選育及其產(chǎn)酶條件優(yōu)化的中期報(bào)告摘要本報(bào)告介紹了纖維素酶產(chǎn)生菌的抗阻遏選育及其產(chǎn)酶條件優(yōu)化的中期研究進(jìn)展。經(jīng)過初步篩選和遺傳改良，得到了一株能夠在高濃度產(chǎn)酶的株系，并進(jìn)一步優(yōu)化了其產(chǎn)酶條件。結(jié)果表明，在溫度為40℃，初始pH值為6.0，發(fā)酵時(shí)間為48小時(shí)，纖維素酶活力最高，為0.454U/mL。同時(shí)，通過研究該株菌株對不同纖維素基質(zhì)的降解能力，發(fā)現(xiàn)該菌株最適合在熱可溶性纖維素中產(chǎn)酶。關(guān)鍵詞：纖維素酶，產(chǎn)酶，抗阻遏選育，優(yōu)化1.引言纖維素是植物細(xì)胞壁的主要成分之一，具有高度的結(jié)晶度和耐酸堿、熱等特性，是一種難以降解的高分子材料。纖維素的降解需要大量的纖維素酶參與，其中包括纖維素酶、內(nèi)切酶和β-葡聚糖酶等。由于其具有廣泛的應(yīng)用前景，纖維素酶的研究已成為當(dāng)前生物技術(shù)領(lǐng)域的熱門課題之一。盡管已經(jīng)有許多微生物被證明能夠產(chǎn)生纖維素酶，但是由于其在自然界中只是低水平的表達(dá)，所以其產(chǎn)酶能力和活力都比較低。因此，開展對纖維素酶產(chǎn)生菌的抗阻遏選育和產(chǎn)酶條件優(yōu)化十分必要。本研究選用了一株能夠在高濃度產(chǎn)酶的菌株，并通過初步篩選和遺傳改良，進(jìn)一步優(yōu)化其產(chǎn)酶條件。本報(bào)告介紹了這些研究的詳細(xì)內(nèi)容和中期進(jìn)展。2.材料和方法2.1菌株選育和篩選從自然界中分離得到了多株可能產(chǎn)生纖維素酶的菌株，并進(jìn)行篩選和初步鑒定。其中，一株表現(xiàn)出較高產(chǎn)酶能力的菌株被選中進(jìn)行抗阻遏選育和產(chǎn)酶條件優(yōu)化。2.2遺傳改良采用化學(xué)誘變和UV誘變等方法進(jìn)行遺傳改良，篩選得到了能夠在高濃度產(chǎn)酶的株系。2.3產(chǎn)酶條件優(yōu)化對該株菌株的產(chǎn)酶條件進(jìn)行優(yōu)化。在不同溫度、初始pH值和發(fā)酵時(shí)間下，測試其纖維素酶活力。2.4基質(zhì)降解實(shí)驗(yàn)對該株菌株在不同纖維素基質(zhì)中的降解能力進(jìn)行研究。3.結(jié)果與討論3.1菌株選育和篩選經(jīng)初步篩選和鑒定后，選擇了一株能夠產(chǎn)生纖維素酶的菌株進(jìn)行研究。3.2遺傳改良通過化學(xué)誘變和UV誘變等方法，篩選得到了一株能夠在高濃度產(chǎn)酶的株系。3.3產(chǎn)酶條件優(yōu)化在溫度、初始pH值和發(fā)酵時(shí)間等條件下測試?yán)w維素酶活力。結(jié)果表明，在溫度為40℃，初始pH值為6.0，發(fā)酵時(shí)間為48小時(shí)時(shí)，纖維素酶活力最高，為0.454U/mL。3.4基質(zhì)降解實(shí)驗(yàn)通過研究該株菌株對不同纖維素基質(zhì)的降解能力，發(fā)現(xiàn)該菌株最適合在熱可溶性纖維素中產(chǎn)酶。4.結(jié)論通過初步篩選和遺傳改良，得到了一株能夠在高濃度產(chǎn)酶的纖維素酶產(chǎn)生菌，同時(shí)對其產(chǎn)酶條件進(jìn)行了優(yōu)化和基質(zhì)降解實(shí)驗(yàn)。優(yōu)化結(jié)果表明，在溫度為40℃，初始pH值為6.0，發(fā)酵時(shí)間為48小時(shí)時(shí)，纖維素酶活力最高。