第第頁液相色譜常見異常峰問題及維護(hù)和修理保養(yǎng)異常的色譜峰指的是色譜圖中的無峰或顯現(xiàn)負(fù)峰、寬峰、雙峰、肩峰、峰形不對稱等情況。一般來說，異常峰是試驗工作中較為扎手的問題。異常峰的顯現(xiàn)會影響色譜分析的結(jié)果。通常情況下，峰型問題是由分別系統(tǒng)所決議的。在做液相過程中，我們就是要變換不同的條件來改善不好的峰型，對于各種各樣的異常峰，要區(qū)分對待，從緊要問題啟程，一個一個加以解決。

1.色譜圖中未出峰

系統(tǒng)未進(jìn)樣或樣品分解；泵未輸液或流動相使用不正確；檢測器設(shè)置不正確

2.一個峰或幾個峰是負(fù)峰

流動相吸取本底高；進(jìn)樣過程中進(jìn)入空氣；樣品組分的吸取低于流動相。

3.全部峰均為負(fù)峰

信號電纜接反或檢測器輸出極性設(shè)置顛倒；光學(xué)裝置尚未達(dá)到平衡。

4.全部峰均為寬峰

系統(tǒng)未達(dá)到平衡；溶解樣品的溶劑極性比流動相差很多；色譜柱尺寸及類型選擇不正確；色譜柱或保護(hù)柱被污染或柱效降低；溫度變化造成的影響。

5.所出峰比預(yù)想的小

樣品黏度過大；進(jìn)樣品故障或進(jìn)樣體積誤差；檢測器設(shè)置不正確.定量環(huán)體積不正確；檢測池污染；檢測器燈顯現(xiàn)問題。

6.顯現(xiàn)雙峰或肩峰

進(jìn)樣量過大；樣品濃度過高；保護(hù)柱或色譜柱柱頭堵塞；保護(hù)拄或色譜柱污染或失效；柱塌陷或形成短通道。

7.前伸峰

進(jìn)樣量或樣品濃度高，溶解樣品的溶劑較流動相極性強；保護(hù)柱或色譜柱污染或失效。

①柱溫低：上升柱溫；②樣品溶劑選擇不恰當(dāng)：使用流動相作為樣品溶劑；③樣品過載：降低樣品含量；④色譜柱損壞：更換柱子。

8.拖尾峰

柱超載，降低樣品量；加添柱直徑接受較高容量的固定相；峰干擾，對樣品進(jìn)行清潔過濾；調(diào)整流動相；硅羥基作用，加入三乙胺，用堿致鈍化柱加添緩沖液或鹽的濃度降低流動相pH值；柱內(nèi)燒結(jié)不銹鋼失效，更換燒結(jié)不銹鋼；加在線過濾器，對樣品進(jìn)行過濾；死體積或柱外體積過大，將連接點降至谷值；盡可能使用內(nèi)徑較細(xì)的連接管；柱效下降，更換柱子；接受保護(hù)柱，對柱子進(jìn)行再生。

9.顯現(xiàn)平頭峰

檢測器設(shè)置不正確；進(jìn)樣體積太大或樣品濃度太高。

10.顯現(xiàn)鬼峰

進(jìn)樣閥殘余峰，可能為上次樣品的殘余。在每次進(jìn)完樣后用充分的時間來平衡和清洗系統(tǒng)；樣品中存在未知物，改進(jìn)樣品的預(yù)處理；流動相污染，更換新流動相，盡可能現(xiàn)配現(xiàn)用，隔夜的流動相再次使用時要過濾；盡可能使用HPLC級試劑；流路中有小的氣泡，打開Purge閥，加大流速排出。

11.峰分叉

①保護(hù)柱或分析柱污染：取下保護(hù)柱再進(jìn)行分析,假如必要更換保護(hù)柱。假如分析柱堵塞,拆下來清洗。假如問題仍舊存在,可能是柱子被強保留物質(zhì)污染,運用適當(dāng)?shù)脑偕胧?。假如問題仍舊存在,入口可能被堵塞,更換篩板或更換色譜柱。②樣品溶劑不溶于流動相更改樣品溶劑,假如可能實行流動相作為樣品溶劑。

12.峰變形

樣品過載，削減樣品載量。

13.早出的峰變形

樣品溶劑選擇不恰當(dāng)①削減進(jìn)樣體積②運用低極性樣品溶劑

14.早出的峰拖尾程度大于晚出的峰

柱外效應(yīng)①調(diào)整系統(tǒng)連接（使用更短、內(nèi)徑更小的管路）②使用小體積的流通池

15.酸性或堿性化合物的峰拖尾

緩沖不合適①使用濃度50～100mM的緩沖液②使用Pka等于流動相pH值的緩沖液

16.額外的峰

（1）樣品中有其他組分：正?，F(xiàn)象；

（2）前一次進(jìn)樣的洗脫峰：①加添運行時間或梯度斜率②提高流速；

（3）空位或鬼峰：①檢查流動相是否純潔②使用流動相作為樣品溶劑③削減進(jìn)樣體積。液相色譜柱的日常維護(hù)

液相色譜柱是一種用于液體色譜分析儀器。

液相色譜柱的日常維護(hù)：

1、每次開機時，流速和柱壓要漸漸加添，驀地快速加添，會使柱床受到?jīng)_擊，引起紊亂，產(chǎn)生空隙

2、在進(jìn)樣前使色譜系統(tǒng)充分平衡，是否平衡可由基線加以判定

3、在進(jìn)樣前，檢查色譜系統(tǒng)的各個接頭，通常由此能發(fā)覺是否有漏液現(xiàn)象。如有漏液，空氣會從漏縫進(jìn)入系統(tǒng)引起基線漂移，影響峰高和峰面積的重復(fù)性

4、不要把柱接頭上得太緊，否則易損壞接頭螺紋，引起滲漏

5、不要把柱子放在有氣流的地方或直接放到陽光下，氣流和陽光都會使柱子產(chǎn)生溫度梯度造成基線漂移；假如懷疑基線漂移是由溫度梯度引起的，可以設(shè)法使柱子恒溫

6、若儀器用做常規(guī)分析，樣品種類有限，但分析次數(shù)很多，則不妨為每一類常規(guī)分析配置一根專用柱，這樣有助于延長柱壽命

7、假如懷疑樣品會污染色譜柱，可以用合適的溶劑幾百毫升、漸漸沖洗柱子過夜，第二天清晨再用流動相重新平衡柱子約3min、

8、在因裝卸、更換、