WatersUPLCI-ClassSYNAPTG2-S

操作規(guī)程

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術語說明

UPLCUltraPerformanceLiquidChromatography

超高效液相色譜儀

SourceIonSource

離子源

TOFTimeofFlight

飛行時間質譜

QuadQuadrupole

四級桿

Fullscan

Scan全掃描模式

目錄

1.目的44

2.適用范圍44

3.設備、化學試劑、實驗室備件44

4.儀器操作步驟44

5.維護保養(yǎng)5656

6.記錄5656

WatersUPLCI-ClassSYNAPTG2-S操作規(guī)程

1.目的

規(guī)范WatersUPLCI-ClassSYNAPTG2-S聯(lián)用儀操作管理工作，確保技術人員對該儀器進行安全、

熟練、高效、有序的操作。

2.適用范圍

適用于WatersUPLCI-ClassSYNAPTG2-S的操作管理工作。

3.設備、化學試劑、實驗室備件

3.1設備:

序號設備名稱型號

1安捷倫氣相色譜7890A

2沃特世超高效液相色譜儀WatersUPLCI-Class

3沃特世四級桿-飛行時間質譜WatersSYNAPTG2-S

3.2化學試劑:亮腦啡肽(leucineenkephalin)：CAS:58822-25-6；甲酸鈉(NaFA)：CAS:141-53-7

4.儀器操作步驟

4.1UPLCSYNAPTG2-S聯(lián)用儀的開啟

4.1.1打開電腦，輸入用戶名：waters,密碼：waters?

4.1.2打開液相各個模塊電源（沒有順序）。

4.1.3打開氮氣發(fā)生器的電源，確認壓力指示100psi；打開氨氣減壓閥確認壓力指示在7psi；高分辨

質譜還需打開氨氣減壓閥確認壓力指示在7psi,此時關閉samplecone的isolationvalve。

4.1.4打開質譜電源開關，在質譜背面板右側位置有四個黑色可以上下搬動的開關，按照從下到上的

順序依次將這四個開關搬到向上的位置。

4.1.5等待約5分鐘，待儀器與電腦網(wǎng)絡通訊連接好，雙擊桌面IMasslynxV4.1圖標，打開

Masslynx軟件，等待軟件主窗口狀態(tài)欄中部偏右位置出現(xiàn)NotScanning的信息。

4.1.6打開MSconsoieMSConsole窗口，左邊欄依次選中SynaptG2QTOF/Intellistart,在右側窗口中點擊

operate快捷圖標。（點擊operate圖標后應該能聽到外置真空泵發(fā)出很大噪音，隨后聲音逐漸變小）

4.1.7打開MSTuneMStune窗口，單擊氯氣的控制開關，關閉氮氣。等待右下角紅色方塊變?yōu)榫G色,

表明儀器可以工作了（通常這個過程需要7-8個小時?？梢詮腗Stune/view/vacuum中觀察真空度的變

化，當TOF的真空度小于1.2el（y6時，右下角紅色方塊會變成綠色），此時可打開isolationvalve。

4.2液相系統(tǒng)的灌注

準備流動相，如用到緩沖鹽流動相需用0.22pm的濾膜過濾，所有緩沖鹽流動相和超純水都要新

配置，且使用不得超過兩天；所有樣品都要用初始流動相來溶解，并用0.22pm的濾膜過濾。

在MassLynx軟件主界面點擊MassConsole圖標“”曲”“打開液相控制臺窗口。選擇ACQUITY

UPLCSystem界面下的Control/PrimeA/Bsolvents.分別灌注Al、Bl和A2、B2流路3min；然后選擇

ACQUITYUPLCSystem界面下的Control/PrimeSealWash,灌注SealWash流路，觀察SealWash管

路沒有氣泡后，點擊PrimeSealWash,停止灌注SealWash；選擇ACQUITYUPLCSystem目錄樹的

SampleManager,點擊右側的Control/Primesyringes,灌注進樣針和洗針系統(tǒng)。

UACQUITYUPLCConsole(Local)-[BinarySolventManager]

-MQUlTYUPLCSXemControl|ConfigureMaintain.TroutfeshoaHelp

igEESSESES?Power?Row

?Sam(>ieManaderFTNS?flow

_tSYNAPTG2-SStopB

￡；ColumnManager

PrimeABsolvents

Betsperformance

MantenanceCounlenPrimesealwash

BSMTotalvolumepumped電

LogsA1100.0%

ResetBSM

0,000mtjminB10.0%

pressureripple(bar,1min)高

Degasser:VentValve:MmmumMaximumDefta

0.03*x?da]-5-50

System曲

益

BSMSystemPressure

5""二

111V福

38BSMPnm?ryA

-MM00—

2

“88

BSMAccvmuiatofA

47ooq

2

-?8K-

BSMAnnuryB

?19.00-

21MMifl

■25.00-1l

BSMAcowniMatCHB

2

Minutes

ACQUITYUPLCSyttw

Conirol|ConfigurePowe-

'BnwySciv?ntManager

<.；EE3CSE3inPrime..

qSYNAPTG2-SWashneedle

ColumnManager

ResdSM

Ptt#

MartenanceCourten

Current:

0

Injection*

InjectorVake:

Off

4.3新項目的建立

注：如在已有的項目下進行試驗，此步驟可以不做。

4.3.1在MassLynx主窗口選擇File/ProjectWizardo

MassLynx-Default-untitled

43.2當出現(xiàn)以下窗口時，點擊Yes。

4.3.3輸入項目名稱，點擊Next。

4.3.4選擇Createusingexistingprojectastemplate,點擊Browse,選擇新建項目的模板，點擊Next。

〔CreateProjectX

CCreatenewgroject

「Createusinacjrtentoroiectastemplate

^MassLynx-Default-untitled

RieViewRunHelp

Shortcut-13)Queue侈Status

ProjectWizard...

QueueIsEmpty

E雙

r

4.4.質譜質量數(shù)粗校

在MassLynx主界面點擊MassTune圖標MSTune進入MassTune界面，LockSprayFlowControl下

閨停止進樣、

的三個按鈕功能從左至右依次為:按設定流速進樣、灌注管路。將實時校

正液放在設置瓶號位置，點擊灌注管路，排除氣泡。點擊SprayerPosition設定擋板位置在LockSpray；

設定Reservoir為實時校正液瓶號位置（B）；設定FlowState為Infusion模式；設定InfusionFlowRate,

通常為5nL/min；點擊按鈕，進樣，如圖

JSYNAPTG2-SHDMS-d：\dat<?'profiJepro\?cqudb\20130924ip<(MODIFIED)^

FHeViewSourceAcqModeGasVacuumSetupAcquireHelp

石至痼（回畫國畫面

ES-IInstrunert,RudesVacuum

MassRen9s|DaJ

117900

SampteFlowCcnlrolLowMAXX50Mats1200

ScanCoraitiom(sec)

回回國Sc4nTme1.00a?aTypeCotnuim.

Statu?|Ide-11.37mm

InfusionFlowRale|2G0pL/rrm

FbwStateInlution▼]

FJlVdime|徵此

Reseivor|C▼

LockSprayBowControl

回回回

Statu?ldte9880mm

Spi哥《Position

E吧.▼/廠

:一：：..

ILockSp<w

I2S-J240-F

LockSptej*TrapCoKaonEnergy

?Off

OnaPU

4.4.1實時校正液（LE）進樣，信號穩(wěn)定后觀察主峰的質量數(shù),ES+時,（LE+H）+的準確質量數(shù)為556.2771,

ES-時，（LE-H）-的準確質量數(shù)為554.2615,觀察實測質量數(shù)與理論準確質量數(shù)的差別，如果其差值

在±0.1則可省去粗校步驟；如果差值較大，進行粗校。

4.4.2點擊MSTune主界面上部菜單的Setup,彈出下拉菜單，點擊SystemView,在彈出的窗口輸入

密碼：access,點擊OK,進入systemview模式。

3SYNAPTG2-SHDMS-dpdata：\agudb\20130924.ipr(MO而匪向

FileViewSourceAcqModeGasVacuumAcquireHelp

1合HHS囪國回的螞QuadProfile.

LookUpTables...

ES-InstrumentFhidicsVacuum

>(Da)

SampleFlowControlOperate50

SourceStandby

ions(sec)

Voltageson

回回國1.0

InstrumentStandby

AcquisitionStatus-

CommunicationsStatus...

SystemView

SystemMonitor

WashSampleFluidics

LockSprayFlowControl

4.4.3在systemview模式下點擊上部菜單的System,彈出下拉菜單，點擊AcquisitionSellings,彈出質

量數(shù)粗校窗口，如圖

臚SYNAPTG2-SHbMS-d:\data\\acqudb\20130924.ipr⑤YSTEMVIEW)，

FileViewSourceAcqModeGasVacuumSetupAcquirejSystem]Help

［聲⑤團圓畫園I畫回畫眄AcquisitionSettings...

RFSettings...

QuadrupoleVacuum

FlowSensorDiagnostics...

jSystem1|Sy$t(

InstrumentFluidic-.iMass:1200

AutoValues...

SampleFlowConUd

SourceIlluminationOn

?Type:[Continuum▼]

[3HSHInstrumentIllumination

OverrideSourcePressureTest

StatusIdle-11.37mins叵

IRunSourcePressuretest

InfusionFlowRatenL/min

FlowState

FillVolume

Reservoir

LockSprayFlowControl

[30S

StatusIdle-98.80mins

InfusionFlowRate,5.00nL/min

FlowStateInfusion

ReservoirB▼:

4.4.4在質量數(shù)粗校窗口右側，勾選CalculateandsetVeff,設定計算并設置Veff值；ReferenceMass：

輸入LE（實時校正液）在該模式下的準確質量數(shù)，MeasuredMass：輸入剛觀察到的實際檢測質量數(shù)，

點擊Calculate,然后點擊Update,質量數(shù)粗校完成。點擊Close退出粗校窗口。

4.4.5在SystemView窗口點擊上部菜單的Setup,彈出下拉菜單，點擊SystemView,彈出系統(tǒng)參數(shù)保

存窗口，點擊保存BothTuningParametersandSystemSetting,點擊OK退出SystemView模式。

jSYNAPTG2-SHDMS~d:\data\profile.pro\acqu<lb\20130924.iPr(SYSTEMVIEW)'

FileViewSourceAcqModeGasVacuumSetup]AcquireSystemHelp

口總。緡|酉畫S3周園畫QuadProfile-

LookUpTables...

ADCQuadrupole

(Da)

ES-InstrumentFliidicsOperate50

SourceStandby

SampleFlowConbolions(sec)

Voltageson

1.0

S0S0InstrumentStandby

StatusIdle-11.37minsAcquisitionStatus...

InfusionFlowRate[200pL/minCommunicationsStatus...

FlowStateInfusion仆SystemView

FillVolumeSystemMonitor

ReservoirWashSampleFluidics

LockSprayFlowControln

SystemSave

Someinstrumentparametershavebeenchanged.

Whichparametersdoyouwishtosave?

TuningParameters.(x.ipr)

SystemSettir?gs.

。BothTuningParametefsandSystemSettings.

NeitherTuningParametetsorSystemSettings.

OK][Cancel;

4.5.質譜質量軸校正

4.5.1在MassLynx主界面點擊MassTune圖標，進入MassTune界面。設置擋板位置SprayerPosition

為Sample,設置SampleFlowControl參數(shù)，先將質量軸校正液NaFA放在對應位置,點擊灌注圖標

排除管路氣泡。設定InfusionFlowRate,通常為5-10pL/min,FlowState為Infusion,Reservoir為校

正液所放位置，灌注完成后點擊進樣按鈕包。

4.5.2在MassLynx主界面點擊MassConsole圖標，進入MassConsole界面，點擊左邊的目錄樹SYNAPT

G2?S展開其目錄，選中IntelliStart,點擊右部菜單欄的Configure下拉菜單，單擊ConfigureMode,選

中CreateCalibration,單擊界面右部的Start按鈕，如圖

匕|MassLynx-PROFILE

fileyiewRunHelp

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