關(guān)于化學(xué)發(fā)光原理及應(yīng)用主要內(nèi)容化學(xué)發(fā)光基本原理化學(xué)發(fā)光的分類化學(xué)發(fā)光法的臨床應(yīng)用化學(xué)發(fā)光免疫測定的特點第2頁,共36頁，2024年2月25日，星期天PartI.化學(xué)發(fā)光基本原理一、化學(xué)發(fā)光原理：伴隨化學(xué)反應(yīng)的光發(fā)射現(xiàn)象

某些物質(zhì)在進行化學(xué)反應(yīng)過程中，由于吸收了反應(yīng)產(chǎn)生的化學(xué)能而被激發(fā)，從激發(fā)態(tài)返回基態(tài)時，發(fā)射出一定波長的光，這種吸收化學(xué)能使分子發(fā)光的過程稱為化學(xué)發(fā)光(chemiluminescence)

。

化學(xué)發(fā)光反應(yīng)存在于生物體(螢火蟲、海洋發(fā)光生物)中，稱生物發(fā)光(bioluminescence)。生物發(fā)光的本質(zhì)是化學(xué)發(fā)光第3頁,共36頁，2024年2月25日，星期天1877年洛粉堿CL1905年洛粉堿類似物1928年魯米諾1935年光澤精發(fā)現(xiàn)許多有機反應(yīng)可產(chǎn)生CL生物體化學(xué)發(fā)光現(xiàn)象的研究起源于古代，但是，直到十九世紀末，這種現(xiàn)象與簡單的有機反應(yīng)相聯(lián)系才得到解釋。第4頁,共36頁，2024年2月25日，星期天二、化學(xué)發(fā)光反應(yīng)發(fā)生的條件化學(xué)反應(yīng)是放熱反應(yīng)。必須存在形成電子激發(fā)態(tài)的通道。激發(fā)態(tài)分子必須以輻射光子的形式回到基態(tài),或?qū)⒛芰總鬟f給熒光分子。能量，通道，熒光物質(zhì)第5頁,共36頁，2024年2月25日，星期天北京源德化學(xué)發(fā)光分析儀第6頁,共36頁，2024年2月25日，星期天MAGLUMI化學(xué)發(fā)光分析儀第7頁,共36頁，2024年2月25日，星期天PartⅡ.化學(xué)發(fā)光的分類按化學(xué)反應(yīng)類型可分為：酶促化學(xué)發(fā)光和非酶促化學(xué)發(fā)光兩類按發(fā)光持續(xù)時間可分為：閃光和輝光兩類第8頁,共36頁，2024年2月25日，星期天PartIII.化學(xué)發(fā)光法的臨床應(yīng)用甲狀腺功能的免疫分析糖代謝紊亂的免疫分析常見腫瘤標志物及其免疫分析常見傳染性疾病的免疫檢測病毒性肝炎HIV感染嚴重急性呼吸綜合征（SARS)其他免疫檢測項目第9頁,共36頁，2024年2月25日，星期天甲狀腺功能的免疫分析甲狀腺機能的常見評價指標及其臨床意義

1.甲狀腺機能亢進

2.甲狀腺功能減退

3.低T3和低T3、T4綜合征

第10頁,共36頁，2024年2月25日，星期天一、甲狀腺機能亢進

1972年提出T3型甲亢的診斷標準：

1.甲亢的癥狀和體征，常無突眼征，但心血管癥狀較明顯；

2.血清TT4、FT4值正常；

3.TT3、FT3值升高；

T3型甲亢在臨床上并非罕見，特別是缺碘地區(qū)患功能自主性腺瘤的部分患者，或用T3治療后出現(xiàn)的碘甲亢，目前認為T3型甲亢不能算作一種獨立疾病，因為發(fā)現(xiàn)T3型甲亢病人中有一部分雖然TT3升高但FT3正常或低于正常，因此改稱高T3綜合征為妥。

T4型甲亢，即T4毒癥患者血清T3、FT3濃度正常；而T4、FT4濃度升高。TSH值為正常低值或低于正常，并伴甲亢臨床癥狀。第11頁,共36頁，2024年2月25日，星期天二、甲狀腺功能減退甲減為甲狀腺激素分泌不足引起的代謝性疾病。臨床上分為原發(fā)性甲減，又稱魏甲狀腺性甲減；以及繼發(fā)性甲減，又稱垂體-下丘腦甲減兩類。血循環(huán)中甲狀腺激素濃度的測定在診斷甲減方面，TSH和FT3、FT4是靈敏的診斷指標，明顯優(yōu)于總甲狀腺激素，如TT3、TT4等。其價值依次為TSH=FT4>TT4>FT3>TT3.第12頁,共36頁，2024年2月25日，星期天

三、低T3和低T3、T4綜合征

低T3綜合征是一種由于非甲狀腺疾病造成的甲狀腺激素異常，其發(fā)生與機體的代謝狀態(tài)，基礎(chǔ)疾病的性質(zhì)和嚴重程度以及外來因素，如用藥等有關(guān)。代謝狀態(tài)差、基礎(chǔ)病情加重時其發(fā)生率隨之增高；當病情好轉(zhuǎn)、機體健康狀況趨于正常時，低T3狀態(tài)可自行消失。第13頁,共36頁，2024年2月25日，星期天四、其他與甲狀腺疾病有關(guān)的免疫學(xué)指標抗甲狀腺球蛋白抗體（TGAb）多見于橋本氏甲狀腺炎、自身免疫性甲狀腺疾病、原發(fā)性甲狀腺功能減退、甲狀腺功能亢進患者等?？辜谞钕傥⒘ｓw抗體（TMAb）多見于橋本氏甲狀腺炎、自身免疫性甲狀腺疾病、原發(fā)性甲狀腺功能亢進、原發(fā)性甲狀腺功能減退。第14頁,共36頁，2024年2月25日，星期天小結(jié)綜上所述，若對甲狀腺功能指標進行全面評價，則上述各項指標對甲亢的診斷價值依次為FT3>FT4>TT3>TT4；各項指標對甲減的診斷價值依次為FT4=TSH>TT4>FT3>TT3第15頁,共36頁，2024年2月25日，星期天二、糖尿病的免疫學(xué)檢測以下是臨床上常見的有關(guān)糖代謝紊亂的免疫分析指標：

1.C肽

2.胰島素

3.胰島素抗體

4.谷氨酸脫羧酶抗體（GAD-Ab）

5.胰高血糖素第16頁,共36頁，2024年2月25日，星期天C肽

C肽測定用于了解II型糖尿病人是否需要胰島素治療，如果C肽水平較低，葡萄糖刺激反應(yīng)差，則表示表明立即或最終需要胰島素治療，也可用于評價糖尿病酮癥酸中毒病人的胰島功能。C肽的另一個重要的臨床用途是各種低血糖病因的鑒別。C肽水平升高科見于輕型糖尿病患者，常見空腹血糖升高不多者C肽大多高于正常。胰島素瘤患者，如血中存在胰島素抗體，血清C肽大都增高。胰腺腫瘤患者行胰腺切除后，如血清C肽仍可測出，提示手術(shù)未能全部切除胰腺組織。如果手術(shù)后一度陰性，后又稱為陽性，提示腫瘤復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移。在肝硬化時，血漿胰島素有升高趨勢，其原因在于肝臟攝取和降解胰島素減少；但空腹血糖正常。

第17頁,共36頁，2024年2月25日，星期天胰島素胰島素在糖尿病的分型和診斷中意義重大，其中I型又稱胰島素依賴型糖尿?。↖DDM），空腹血漿胰島素較低，口服葡糖糖試驗（OGTT)或饅頭餐后上升及下降極緩慢，甚至無任何變化，說明其胰島β細胞功能極差。II型又稱非胰島素依賴型糖尿病（NIDDM），包括需胰島素治療和不需胰島素治療兩類，其特點為空腹高胰島素血癥；OGTT后胰島素釋放延遲，高峰后移，但總釋放量不低，約12%的病人呈低反應(yīng)或延遲反應(yīng)說明II型糖尿病和I型糖尿病有本質(zhì)的區(qū)別。另外胰島素對肝病、胰島素瘤、甲狀腺功能亢進的診斷也有一定的意義。第18頁,共36頁，2024年2月25日，星期天常見腫瘤標志物及其檢測胚胎性腫瘤標志物含糖物質(zhì)類標志物酶類標志物激素類標志物第19頁,共36頁，2024年2月25日，星期天胚胎性腫瘤標志物這一類腫瘤標志物是指那些原本只能在胎盤期出現(xiàn)，但在機體發(fā)生腫瘤時，其基因表達被再度激活，從而重新再成年個體出現(xiàn)的蛋白，其常見的檢測標志如下：第20頁,共36頁，2024年2月25日，星期天CEA原發(fā)性結(jié)腸癌，患者CEA升高者占45-90%.胰腺癌、膽管癌、胃癌、食道癌、肺癌、乳腺癌和泌尿系腫瘤，陽性率50-70%。結(jié)腸癌患者手術(shù)切除后1-3周內(nèi)血中CEA水平可降至正常水平。如術(shù)后CEA持續(xù)陽性，說明手術(shù)切除不完全或癌腫發(fā)生轉(zhuǎn)移，提示病人預(yù)后較差或者有復(fù)發(fā)的可能。良性腫瘤、炎癥和退行性疾病，如結(jié)腸息肉、潰瘍性結(jié)腸炎、胰腺炎盒酒精性肝硬變病人CEA也有部分升高，但遠遠低于惡性腫瘤，一般小于20μg/L.所以測定CEA可作為良性與惡性腫瘤的鑒別診斷依據(jù)。吸煙也可能導(dǎo)致CEA升高。第21頁,共36頁，2024年2月25日，星期天AFP原發(fā)性肝癌：AFP作為原發(fā)性肝癌重要指標之一，特異性強，靈敏度高。因此AFP為十分有價值的臨床檢查及普查項目，陽性率達90%。血清含量大于400μg/L作為原發(fā)性肝癌的診斷閾值。孕婦血清AFP與胎兒狀態(tài)當胎兒患低氧癥、宮內(nèi)死亡、遺傳缺陷、先天性神經(jīng)管畸形、無腦兒、脊柱裂等，母體血清AFP異常增高。其他腫瘤有報道指出，68%-92%卵黃囊腫瘤患者血清AFP上升第22頁,共36頁，2024年2月25日，星期天含糖物質(zhì)類標志物CA125是上皮性卵巢癌和子宮內(nèi)膜癌的標志物CA153存在于多種腺癌內(nèi)，如乳腺癌、肺癌、肺胰癌及卵巢癌等，是檢測乳腺癌比較重要的抗原CA199通常作為胰腺癌和結(jié)、直腸癌的標志物CA50是胰腺和結(jié)、直腸癌的標志物CA72-4其檢測結(jié)果與CEA有互補作用，可用于檢測原發(fā)性乳癌、胃癌、直結(jié)腸癌以及卵巢癌患者殘余腫瘤細胞，可與CA-125聯(lián)合用于卵巢腫瘤的診斷及復(fù)發(fā)檢測，可與CA-199聯(lián)合應(yīng)用于胃癌的診斷以提高陽性率，也可用于胃癌術(shù)后監(jiān)測早期復(fù)發(fā)。CA242可用于胃腸道惡性腫瘤病人的治療監(jiān)控和復(fù)發(fā)檢測。第23頁,共36頁，2024年2月25日，星期天酶類標志物前列腺特異性抗原PSA是前列腺癌的特異性標志物，也是目前少數(shù)幾個器官特異性腫瘤標志物之一。前列腺癌是男性泌尿系統(tǒng)的主要囊性腫瘤，血清PSA定量測定的陽性臨界值大于10μg/L,此時前列腺癌的診斷特異性達90-97%。神經(jīng)元特異性烯醇化酶（NSE）對小細胞肺癌的診斷，鑒別診斷、病情判斷及療效的估計都有實際的意義。第24頁,共36頁，2024年2月25日，星期天激素類標志物降鈣素：（1）甲狀腺髓樣癌此種癌起源于甲狀腺濾泡旁細胞，可產(chǎn)生多種生物活性物質(zhì)，其中以降鈣素為主，患者血清降鈣素水平高于正常數(shù)十到數(shù)百倍。（2）肺小細胞癌人絨毛膜促性腺激素（HCG）

HCG測定對葡萄胎、絨癌的診斷和化療后的療效觀察，以及葡萄胎終止后的隨訪有重大意義，一般而言，良性葡萄胎、惡性葡萄胎、絨癌治療前HCG均增高，其升高順序為：絨癌>惡性葡萄胎>良性葡萄胎。第25頁,共36頁，2024年2月25日，星期天常見傳染性疾病的免疫檢測病毒性肝炎HIV感染及艾滋?。ˋIDS）嚴重急性呼吸綜合征第26頁,共36頁，2024年2月25日，星期天病毒性肝炎甲型病毒性肝炎通過糞-口途徑傳播引起的急性傳染性肝炎，目前尚未發(fā)現(xiàn)有慢性病例。乙型病毒性肝炎是由乙型肝炎病毒（HBV）引起的肝臟炎性損害，是我國當前流行最廣泛、危害最嚴重的一種轉(zhuǎn)染病。乙肝常見免疫學(xué)指標有：A、潛伏期,HBsAg陽性或伴有乙肝病毒脫氧核糖核酸聚合酶(HBVDNAP)和HBsAg陽性。B、急性期，HBsAg，HBeAg,HBcAg,HBV-DNA,HBVDNAP，前S蛋白均可陽性。第27頁,共36頁，2024年2月25日，星期天乙肝定量檢測的方法及其優(yōu)點

a.檢測方法：目前有時間分辨，熒光定量PCR定量檢測，化學(xué)發(fā)光法。由于乙肝病毒容易發(fā)生變異，再加上乙肝定性實驗的局限性，會出現(xiàn)假陰性結(jié)果，導(dǎo)致不能及時發(fā)現(xiàn)乙肝的感染，也就不能及時的得到治療，對醫(yī)護人員和其他的患者也存在被傳染的威脅。乙肝五項定量檢測目前最先進的化學(xué)發(fā)光法，避免了假陰性和漏檢的問題，而且準確，尤其對乙肝病人的療效觀察提供了依據(jù)，這是檢驗發(fā)展的趨勢。乙肝五項定量檢測的獨特優(yōu)點：一、對于乙肝患者而言：1、通過定量檢測乙肝標志物，能直觀地顯示體內(nèi)五項指標的具體情況，不再是簡單的“陰性”和“陽性”，有利于動態(tài)觀察病情，為選擇治療方案提供重要依據(jù)；2、定量檢測方法更靈敏，能測出低水平復(fù)制的樣本，特別是“窗口期”的感染者，定量檢測法可以有效檢出，能減少漏診；3、定量檢測的測定范圍更寬，定性檢測時候，高濃度的乙肝表面抗原樣本需要稀釋，否則會有假陰性出現(xiàn)，但是，定量檢測能有效檢出高濃度的乙肝表面抗原樣本。二、對正常體檢者而言：1、可反映HBV-抗體的濃度變化，有利于對機體免疫狀況進行評估，對注射乙肝疫苗有指導(dǎo)意義。第28頁,共36頁，2024年2月25日，星期天幾種常見的乙肝模式第29頁,共36頁，2024年2月25日，星期天幾種少見模式第30頁,共36頁，2024年2月25日，星期天病毒性肝炎丙型病毒性肝炎是由丙型肝炎即HCV感染所致。其傳播途徑與乙肝類似，主要包括血液傳播、性接觸傳播、母嬰傳播、日常生活接觸等。第31頁,共36頁，2024年2月25日，星期天其他檢測項目臨床常見藥物的濃度檢測

1.抗心甙類：西地蘭、地高辛、洋地黃毒等；

2.抗癲癇藥：苯妥英、苯巴比妥、酰胺咪嗪、乙琥胺等；

3.三環(huán)類抗抑郁藥：丙咪嗪、去甲丙咪嗪、去甲替林、阿米替林、多慮平等；

4.茶堿：氨茶堿；

5.抗心律失常藥；

6.氨基甙類抗生素：鏈霉素、慶大霉素、卡那霉素、丁胺卡那霉素；

7.環(huán)孢素A。腎上腺激素：兒茶酚胺類激素