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抗體篩選檢查祁新華明確規(guī)定部分病人應(yīng)做“抗體篩選”檢測,第四章第17條:“凡遇以下情況必須按《全國臨床檢驗操作規(guī)程》有關(guān)規(guī)定做抗體篩選試驗:1、交叉配血不合的;2、對有輸血史、妊娠史或短期內(nèi)需接受多次輸血者。為什么要開展輸血前的“抗體篩選”檢查

1、目前已知紅細(xì)胞有26個抗原系統(tǒng)(確認(rèn)21個,如ABO、Rh、MN、LW、MNS、JK等),500多種抗原(確認(rèn)200多種)。紅細(xì)胞抗原的多樣性決定了抗體的多樣性,檢測抗A、抗B、抗D(ABO血型、Rh血型)可確保絕大多數(shù)病人的輸血安全,但仍不能避免因血型不合(ABO、Rh血型以外)而引發(fā)的溶血。2、臨床有的病人出現(xiàn)慢性(遲緩性)溶血反應(yīng),易忽視或引不起臨床醫(yī)師重視。(理論上講,成年人每輸1U的濃縮紅細(xì)胞,在不丟失、不被破壞(溶血)的前提下,應(yīng)能提升Hb5-10g/L(0.5-1g/dl),保持15-30天。如果輸3-4URBC,病人Hb上升不到10g/L,或幾天后(1周內(nèi))Hb仍舊下降到原來水平,甚至更低。這種情況,就要考慮是否有慢性溶血反應(yīng)存在。)3、有利于早期發(fā)現(xiàn)和確認(rèn)具有臨床意義的抗體,獲得充足的時間來選擇相配合的血,避免由于尋找不到相合的血液而造成患者病情的延誤??贵w篩選檢查

一、什么叫“抗體篩選”檢查1、不規(guī)則抗體的含義:通常把抗A、抗B以外的所有紅細(xì)胞血型抗體稱為不規(guī)則抗體。如抗D、抗N、抗M、jk-抗體。2、“抗體篩選”的含義:用具備有臨床意義的血型抗原的O型紅細(xì)胞,檢測病人血清(含多種抗體);如果出現(xiàn)聚集現(xiàn)象,則提示病人有不規(guī)則抗體存在,可判為“抗體篩選”陽性。試劑抗體篩選用紅細(xì)胞懸液(1#、2#、3#)試劑紅細(xì)胞必須含有下列抗原:D,C,E,c,e,M,N,S,s,P1,Lea,Leb,K,k,Fya,Fyb,Jka,和Jkb

LIM液、Polybrene及重懸液抗球蛋白血清受檢者血清受檢者5%紅細(xì)胞懸液鹽水法原理:鹽水介質(zhì)中的紅細(xì)胞膜上的抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合,交叉聯(lián)結(jié)形成肉眼可見的凝集塊。

實驗步驟

取4支小試管,按表標(biāo)記及加入相應(yīng)試劑。1#2#3#自身受檢者血清2滴2滴2滴2滴篩選用紅細(xì)胞懸液1#1滴篩選用紅細(xì)胞懸液2#1滴篩選用紅細(xì)胞懸液3#1滴受檢者5%紅細(xì)胞懸液1滴混勻后3400rpm離心15秒,立即觀察結(jié)果同前注意事項標(biāo)本編號清楚??!試劑紅細(xì)胞是保存在保存液中,一旦用生理鹽水或Liss液洗滌后則應(yīng)該在24小時內(nèi)使用,否則會因污染、抗原丟失導(dǎo)致試驗錯誤。加血清和紅細(xì)胞懸液的量必須準(zhǔn)確不能多加,少加,以免引起前帶和后帶效應(yīng)轉(zhuǎn)速不能太快或太慢、時間不能過長或過短,以免引起假陽性或假陰性。Polybrene法實驗步驟取4支小試管,按表標(biāo)記及加入相應(yīng)試劑。1#2#3#自身

受檢者血清

2滴2滴2滴2滴篩選用紅細(xì)胞懸液1#1滴篩選用紅細(xì)胞懸液2#1滴篩選用紅細(xì)胞懸液3#1滴受檢者5%紅細(xì)胞懸液1滴LIM液(12滴)0.6ml0.6ml0.6ml0.6ml混勻后室溫靜置1分鐘。然后各加入Polybrene試劑1滴,混勻后3400rpm離心15秒,輕扣觀察有無凝集。向試管中各加入重懸液1滴,輕搖觀察凝集是否散開。注意事項抗球蛋白試驗原理:抗體分子和補體成分都是球蛋白,用這些球蛋白免疫動物使之產(chǎn)生抗體即抗人球蛋白,抗球蛋白試劑可以和致敏在紅細(xì)胞上的人球蛋白(抗體分子和補體分子)反應(yīng),通過架橋作用使致敏紅細(xì)胞出現(xiàn)凝集。見圖

抗球蛋白試驗

抗球蛋白實驗步驟1#2#3#自身受檢者血清2滴2滴2滴2滴篩選用紅細(xì)胞懸液1#1滴篩選用紅細(xì)胞懸液2#1滴篩選用紅細(xì)胞懸液3#1滴受檢者5%紅細(xì)胞懸液

1滴混勻后置37℃水浴30分鐘后,用生理鹽水洗滌3次(怎么洗)最后1次用吸水紙吸盡鹽水,然后加1滴抗球蛋白血清,混勻后以3400rpm離心15秒鐘,輕搖,觀察結(jié)果。結(jié)果意義篩選紅細(xì)胞1、2、3自身紅細(xì)胞血清中存在的抗體+—同種抗體++自身抗體,或自身抗體和同種抗體同時存在—+自身抗體注意事項必須進行間接抗人球蛋白試驗。必須同時作自身抗體的檢查,即患者血清與自身紅細(xì)胞的反應(yīng),以識別同種抗體、自身抗體或兩者是否都存在。觀察水浴箱的溫度、血清對細(xì)胞的比例準(zhǔn)確、反應(yīng)時間、轉(zhuǎn)速、。觀察結(jié)果時輕搖試管,以免將弱凝集搖散造成假陰性,引起事故。若抗體篩選時,無論哪一種方法出現(xiàn)陽性反應(yīng)時,都必須進一步進行抗體特異性的鑒定.(以判斷抗體的臨床意義并給予配合型血液輸注,以預(yù)防溶血性輸血反應(yīng)的發(fā)生及預(yù)測新生兒溶血病等疾病)建議:作抗體篩選試驗的時候最好先做抗人球法抗體特異性鑒定(了解)使用譜細(xì)胞確定抗體的特異性,譜細(xì)胞一般由8-16種含有不同抗原的O型紅細(xì)胞配套組成,根據(jù)譜細(xì)胞的反應(yīng)格局一般可以鑒定常見的抗體。實驗方法和抗體篩選實驗相同二實驗原理

血型就是紅細(xì)胞膜上特異抗原的類型。在AB

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