生物技術(shù)大實(shí)驗(yàn)－細(xì)胞工程課程編號(hào)：適用專業(yè)：生物技術(shù)學(xué)時(shí)數(shù)：48學(xué)分?jǐn)?shù)：1一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康呐c要求：本課程是生物技術(shù)專業(yè)的專業(yè)課程的綜合性大實(shí)驗(yàn)，是結(jié)合基因工程、細(xì)胞工程、微生物工程、蛋白質(zhì)工程、酶工程、生物工程下游技術(shù)的相關(guān)技術(shù)而開(kāi)設(shè)的綜合性、設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)，由細(xì)胞工程實(shí)驗(yàn)、生物大分子分離與分析技術(shù)實(shí)驗(yàn)、微生物工程實(shí)驗(yàn)三部分組成。細(xì)胞工程技術(shù)是一般包括細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)、細(xì)胞融合技術(shù)、單克隆抗體技術(shù)、細(xì)胞折合技術(shù)、染色體工程技術(shù)、繁殖生物學(xué)技術(shù)等一系列重要基礎(chǔ)技術(shù)。實(shí)驗(yàn)?zāi)康模和ㄟ^(guò)本課程的學(xué)習(xí)使學(xué)生初步掌握植物、動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)、融合和核移植等細(xì)胞水平上的基本操作技術(shù)和實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方法。使學(xué)生系統(tǒng)地掌握生物工程領(lǐng)域內(nèi)的基本技術(shù)和基本技能，為更好地將生物技術(shù)應(yīng)用于人類的生產(chǎn)和生活實(shí)踐打下堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。同時(shí)，通過(guò)實(shí)驗(yàn)，培養(yǎng)學(xué)生觀察、思考、探究、分析和解決問(wèn)題的能力；養(yǎng)成實(shí)事求是、嚴(yán)肅認(rèn)真的科學(xué)態(tài)度以及勤儉節(jié)約、愛(ài)護(hù)公物的良好作風(fēng)。實(shí)驗(yàn)要求：1．掌握基本細(xì)胞工程技術(shù)的操作技能。2．了解細(xì)胞工程的各種技術(shù)的基本原理，技術(shù)路線和方法。3.

在掌握基本知識(shí)的前提下，能針對(duì)具體課題對(duì)重要研究的技術(shù)路線進(jìn)行初步設(shè)計(jì)。

二、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目與提要：序號(hào)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目必做選做時(shí)數(shù)內(nèi)容提要實(shí)驗(yàn)類型每套儀器人數(shù)1動(dòng)物細(xì)胞工程常用培養(yǎng)液配制與檢測(cè)必做41．細(xì)胞工程實(shí)驗(yàn)室基本操作技術(shù)2.

液體配制的準(zhǔn)備3.

常用操作液及培養(yǎng)液的配制綜合性實(shí)驗(yàn)4-52CO2培養(yǎng)箱等培養(yǎng)設(shè)備使用必做31．CO2培養(yǎng)箱使用方法2.

倒置顯微鏡使用方法基礎(chǔ)性實(shí)驗(yàn)15-203小鼠組織細(xì)胞原代培養(yǎng)必做41．組織塊法原代細(xì)胞培養(yǎng)2．酶消化法原代細(xì)胞培養(yǎng)綜合性實(shí)驗(yàn)4-54小鼠睪丸、附睪及輸精管精子采集、運(yùn)動(dòng)能力檢測(cè)與結(jié)構(gòu)觀察必做41．精子采集2．精子運(yùn)動(dòng)能力檢查3．精子整體結(jié)構(gòu)觀察4．精子頂體結(jié)構(gòu)觀察綜合性實(shí)驗(yàn)4-55小鼠輸卵管卵母細(xì)胞采集與結(jié)構(gòu)觀察必做41．激素的分裝、配制2．小鼠超排處理日程安排與超排處理3．小鼠卵母細(xì)胞采集及結(jié)構(gòu)觀察綜合性實(shí)驗(yàn)4-56小鼠超數(shù)排卵及附植前不同發(fā)育階段胚胎采集與結(jié)構(gòu)觀察必做121．小鼠超排處理日程安排與超排處理2．胚胎采集2.1輸卵管胚胎采集2.2子宮角胚胎回收3．檢胚及胚胎的形態(tài)學(xué)觀察與鑒定設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)4-57小鼠組織細(xì)胞傳代培養(yǎng)必做41．原代培養(yǎng)的首次傳代2．細(xì)胞傳代方法（酶消化法）3．細(xì)胞凍存保存綜合性實(shí)驗(yàn)4-58小鼠胎兒成纖維細(xì)胞活性檢測(cè)及細(xì)胞計(jì)數(shù)必做41．臺(tái)盼藍(lán)排除檢測(cè)法檢測(cè)小鼠胎兒成纖維細(xì)胞活性2．溴化乙錠和碘化丙錠排除檢測(cè)法檢測(cè)小鼠胎兒成纖維細(xì)胞活性3.

細(xì)胞計(jì)數(shù)綜合性實(shí)驗(yàn)4-59細(xì)胞的凍存和復(fù)蘇選做31．動(dòng)物細(xì)胞的冷凍2．動(dòng)物細(xì)胞的復(fù)蘇

綜合性實(shí)驗(yàn)4-510生產(chǎn)轉(zhuǎn)基因動(dòng)物綜合技術(shù)體系的方案設(shè)計(jì)必做61.了解動(dòng)物克隆技術(shù)的綜合過(guò)程2.

掌握利用體細(xì)胞克隆技術(shù)生產(chǎn)轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的原理和技術(shù)流程3.設(shè)計(jì)一套生產(chǎn)轉(zhuǎn)基因動(dòng)物綜合技術(shù)體系的方案綜合性實(shí)驗(yàn)4-5三、成績(jī)考核方法：1．平時(shí)成績(jī)：包括出勤、課堂提問(wèn)、討論情況等，占20％2．操作成績(jī)：實(shí)驗(yàn)的操作，及實(shí)驗(yàn)的效果等，占20％3．報(bào)告成績(jī)：實(shí)驗(yàn)報(bào)告等，占20％4．考試成績(jī)：占40％5．綜合考核成績(jī)占100％

四、教材及主要參考書(shū)：教材：1.《細(xì)胞工程實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)》自編教材

2005.92.《細(xì)胞工程》李志勇編著科學(xué)出版社

2003.8參考書(shū)：1.《植物細(xì)胞工程原理與技術(shù)》周維燕主編中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)出