限時規(guī)范特訓一、選擇題1．下列關于對微生物篩選的敘述中不正確的是()A．利用高溫培養(yǎng)條件篩選耐熱的Taq細菌B．用不含碳源的培養(yǎng)基篩選出自養(yǎng)微生物C．用含酚紅的培養(yǎng)基篩選出能分解尿素的菌株D．用高濃度NaCl的培養(yǎng)基篩選耐鹽突變菌株答案C解析Taq耐熱菌需要利用高溫來篩選，A正確；自養(yǎng)型微生物可以利用大氣中CO2作為碳源，所以在不含碳源的培養(yǎng)基上自養(yǎng)微生物可以存活，B正確；用以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基篩選分解尿素的菌株，可以用含酚紅的培養(yǎng)基進行鑒別，C錯誤；耐鹽突變株應用含高鹽的培養(yǎng)基篩選，D正確。2．甲、乙、丙是三種微生物，下表Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ是用來培養(yǎng)微生物的三種培養(yǎng)基。甲、乙、丙都能在Ⅲ中正常生長繁殖；甲能在Ⅰ中正常生長繁殖，而乙和丙都不能；乙能在Ⅱ中正常生長繁殖，甲、丙都不能。下列說法正確的是()A．甲、乙、丙都是異養(yǎng)微生物B．甲、乙都是自養(yǎng)微生物、丙是異養(yǎng)微生物C．甲是異養(yǎng)微生物、乙是固氮微生物、丙是自養(yǎng)微生物D．甲是固氮微生物、乙是自養(yǎng)微生物、丙是異養(yǎng)微生物答案D解析Ⅰ培養(yǎng)基中缺少氮源，而甲能在此培養(yǎng)基中生長，說明甲能固氮，屬于固氮微生物；Ⅱ培養(yǎng)基中缺少碳源，而乙能在此培養(yǎng)基中生長，說明乙能合成有機物，屬于自養(yǎng)微生物；Ⅲ是完全培養(yǎng)基，但丙只能在此培養(yǎng)基上生存，說明丙是異養(yǎng)微生物。3．某學者欲研究被石油污染過的土壤中細菌的數(shù)量，并從中篩選出能分解石油的細菌。下列操作錯誤的是()A．利用平板劃線法對細菌進行計數(shù)B．用以石油為唯一碳源的培養(yǎng)基篩選C．采用稀釋涂布平板法分離菌種D．稱取和稀釋土壤樣品時應在酒精燈火焰旁答案A解析分離細菌常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法，但平板劃線法不能用來計數(shù)，A錯誤，C正確；篩選能分解石油的細菌，要以石油作為培養(yǎng)基中唯一的碳源，B正確；篩選細菌的整個操作過程都需要在無菌條件下進行，所以在稱取和稀釋土壤樣品時應在酒精燈火焰旁進行，D正確。4．分離出的微生物還要進行鑒定，而微生物的鑒定需要鑒別培養(yǎng)基，下列不屬于鑒別培養(yǎng)基的是()A．加入酚紅的培養(yǎng)基B．加入剛果紅的培養(yǎng)基C．加入伊紅—美藍(能使大腸桿菌有特殊的金屬光澤)的培養(yǎng)基D．加入纖維素粉的培養(yǎng)基答案D解析鑒別培養(yǎng)基是根據(jù)微生物的代謝特點在培養(yǎng)基中加入一些指示劑配制而成的，如酚紅、伊紅—美藍、剛果紅等，而纖維素粉不能起到鑒別的作用。5．下列關于“檢測土壤中細菌總數(shù)”的實驗操作的敘述，錯誤的是()A．用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，高溫、高壓滅菌后倒平板B．取稀釋倍數(shù)為104、105、106的土壤稀釋液和無菌水各0.1mL涂布于不同的平板上C．將實驗組和對照組平板倒置，37℃D．確定對照組無菌后，選擇菌落數(shù)在300個以上的平板進行計數(shù)答案D解析檢測土壤中細菌總數(shù)時，要先用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，經(jīng)高溫、高壓滅菌后倒平板，然后取稀釋倍數(shù)為104、105、106的土壤稀釋液和無菌水各0.1mL，分別涂布于各組平板上，將實驗組和對照組平板倒置，37℃二、非選擇題6．[2017·豫南九校聯(lián)考]如表所示為某微生物培養(yǎng)基的配方，請回答：(1)依物理性質(zhì)劃分，該培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基；依用途劃分，則屬于________培養(yǎng)基。(2)依培養(yǎng)基的成分，所培養(yǎng)微生物的同化作用類型是________。(3)如要鑒定自來水中的大腸桿菌是否超標，至少要加入________、________和________，除去________。答案(1)液體選擇(2)異養(yǎng)型(3)瓊脂伊紅美藍青霉素解析(1)該培養(yǎng)基中無凝固劑瓊脂，屬于液體培養(yǎng)基。該培養(yǎng)基含有抗生素(青霉素)，屬于選擇培養(yǎng)基。(2)該培養(yǎng)基中含有有機碳源，可見所培養(yǎng)的微生物是異養(yǎng)型生物。(3)微生物的鑒定常用固體培養(yǎng)基，故應向此培養(yǎng)基中加入凝固劑瓊脂；由于大腸桿菌不能在含青霉素的培養(yǎng)基中生存，還應該除去青霉素，伊紅美藍培養(yǎng)基上生長的大腸桿菌菌落呈紫黑色并帶有綠色金屬光澤。7．高溫淀粉酶在大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)中有很大的實用性。研究者從熱泉中篩選出了能高效生產(chǎn)高溫淀粉酶的嗜熱菌，其篩選過程如圖所示。請據(jù)圖回答：(1)Ⅰ號培養(yǎng)基從物理狀態(tài)來看，屬于固體培養(yǎng)基，配制時要加入________作為凝固劑，從用途來看屬于選擇培養(yǎng)基，應以________作為唯一碳源。(2)配制固體培養(yǎng)基的基本步驟是()A．計算、稱量、倒平板、溶化、滅菌B．計算、稱量、溶化、倒平板、滅菌C．計算、稱量、溶化、滅菌、倒平板D．計算、稱量、滅菌、溶化、倒平板(3)溶化時，燒杯中加入瓊脂后要不停地________，防止瓊脂糊底引起燒杯破裂。對培養(yǎng)基滅菌的方法一般為________________。(4)①過程是________，②過程所使用的接種方法是________________法。(5)部分嗜熱菌在Ⅰ號培養(yǎng)基上生長時可釋放________分解培養(yǎng)基中的淀粉，在菌落周圍形成透明圈，挑選相應的菌落，接種到Ⅱ號培養(yǎng)基進一步分離純化后，再對菌種進行________培養(yǎng)。答案(1)瓊脂淀粉(2)C(3)攪拌高壓蒸汽滅菌(4)稀釋稀釋涂布平板(5)淀粉酶擴大解析固體培養(yǎng)基通常加入瓊脂作為凝固劑。本實驗的目的是獲得產(chǎn)生高溫淀粉酶的嗜熱菌，故其選擇培養(yǎng)基中應以淀粉作為唯一碳源。配制固體培養(yǎng)基的基本步驟是計算、稱量、溶化、滅菌、倒平板。配制培養(yǎng)基加熱溶化時，要注意加入瓊脂后要不斷攪拌，防止瓊脂糊底和溢出。對培養(yǎng)基的滅菌一般采用高壓蒸汽滅菌。仔細觀察題圖可知，過程①是菌液稀釋過程，②是采用稀釋涂布平板法接種。能產(chǎn)生淀粉酶的部分細菌能分解利用淀粉，其菌落周圍會出現(xiàn)透明圈，取這樣的菌落再分離純化可獲得相應菌種，以后可以擴大培養(yǎng)用于生產(chǎn)。8．[2017·石家莊質(zhì)檢]為了分離和純化高效分解石油的細菌，科研人員利用被石油污染過的土壤進行如圖A所示的實驗。(1)配制好的培養(yǎng)基通常使用________________法滅菌。步驟③與步驟②中培養(yǎng)基成分相比，最大的區(qū)別是________________。(2)同學甲進行步驟④的操作，其中一個平板經(jīng)培養(yǎng)后的菌落分布如圖B所示。該同學的接種方法是____________，出現(xiàn)圖B結果可能的操作失誤是______________________________。(3)同學乙也按照同學甲的接種方法進行了步驟④的操作：將1mL樣品稀釋100倍，在3個平板上分別接入0.1mL稀釋液；經(jīng)適當培養(yǎng)后，3個平板上的菌落數(shù)分別為56、58和57。據(jù)此可得出每升樣品中的活菌數(shù)為________個。(4)步驟⑤需要振蕩培養(yǎng)，原因是________________________。(5)步驟⑤后取樣測定石油含量的目的是__________________。答案(1)高壓蒸汽滅菌石油是唯一碳源(2)稀釋涂布平板法涂布不均勻(3)5.7×107(4)提高培養(yǎng)液中(溶解)氧的含量，通過振蕩可使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高營養(yǎng)物質(zhì)的利用率(5)篩選出分解石油能力最強的細菌解析(1)配制好的培養(yǎng)基通常使用高壓蒸汽滅菌法滅菌，步驟③與步驟②中培養(yǎng)基成分相比，最大的區(qū)別是石油是唯一碳源。(2)圖B所示的接種方法是稀釋涂布平板法，出現(xiàn)圖B結果可能的操作失誤是涂布不均勻。(3)每升樣品中的活菌數(shù)為(56＋58＋57)÷3÷0.1×1000×100＝5.7×107個。(4)振蕩培養(yǎng)的目的一是提高培養(yǎng)液中(溶解)氧的含量，二是通過振蕩可使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高營養(yǎng)物質(zhì)的利用率。(5)細菌將石油分解后石油的含量會減少，所以步驟⑤后取樣測定石油含量的目的是篩選出分解石油能力最強的細菌。9．[2017·山西太原一模]玉米秸稈含有大量的纖維素，用纖維素酶分解秸稈后的產(chǎn)物可以生產(chǎn)酒精。研究人員用化合物A、硝酸鹽、磷酸鹽以及微量元素配制培養(yǎng)基，成功地篩選到能產(chǎn)生纖維素酶的微生物。請分析回答：(1)纖維素酶至少包括________、________、__________三種組分，在這三種酶的作用下，纖維素最終被水解成________。(2)培養(yǎng)基中加入的化合物A是________，為微生物的生長提供碳源，這種培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基，對培養(yǎng)基進行滅菌時常用的滅菌法為_______________________________________________。(3)在篩選纖維素分解菌的過程中，通常用________染色法；如果培養(yǎng)基某部位出現(xiàn)________現(xiàn)象，則說明存在纖維素分解菌。(4)用獲得的糖液發(fā)酵生產(chǎn)乙醇，常用的微生物是________，在________________發(fā)酵液中，該菌可以生長繁殖，而絕大多數(shù)其他生物受到抑制。常用________________法對該菌進行計數(shù)，檢測是否產(chǎn)生酒精的常用試劑是________________，會變?yōu)開_______色。(5)實驗結束后，使用過的培養(yǎng)基應該進行________處理后才能倒掉，這樣做的目的是保護環(huán)境。答案(1)C1酶CX酶葡萄糖苷酶葡萄糖(2)纖維素選擇高壓蒸汽滅菌(3)剛果紅透明圈(4)酵母菌酸性且缺氧稀釋涂布平板(其他答案正確也可)酸性重鉻酸鉀灰綠(5)滅菌解析(1)纖維素的單體是葡萄糖，纖維素酶能夠將纖維素水解成葡萄糖。纖維素酶是一種復合酶，包括C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶。(2)根據(jù)題干信息可知，實驗目的是篩選到能產(chǎn)生纖維素酶的微生物，因此培養(yǎng)基應以纖維素作為唯一碳源，這種培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基，對培養(yǎng)基進行滅菌時常用的滅菌法為高壓蒸汽滅菌。(3)剛果紅可以與纖維素形成紅色復合物，當纖維素被纖維素酶分解后，紅色復合物無法形成，出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，我們可以通過是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌。(4)酵母菌無氧呼吸時產(chǎn)生乙醇，所以用獲得的糖液發(fā)酵生產(chǎn)乙醇，常用的微生物是酵母菌，在酸性且缺氧發(fā)酵液中，該菌可以生長繁殖，而絕大多數(shù)其他生物受到抑制，常用稀釋涂布平板法對該菌進行計數(shù)。酒精與酸性的重鉻酸鉀發(fā)生反應，由橙色變?yōu)榛揖G色。(5)實驗結束后，為了保護環(huán)境和防止操作者被感染，對使用過的培養(yǎng)基應進行滅菌處理。10．為了調(diào)查某河流的水質(zhì)狀況，某研究小組測定了該河流水樣中的細菌含量，并進行了細菌分離等工作?；卮鹣铝袉栴}：(1)該小組采用稀釋涂布平板法檢測水樣中的細菌含量。在涂布接種前，隨機取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時間，這樣做的目的是________________________________；然后，將1mL水樣稀釋100倍，在3個平板上用涂布法分別接入0.1mL稀釋液；經(jīng)適當培養(yǎng)后，3個平板上的菌落數(shù)分別為39、38和37。據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為________。(2)示意圖A和B中，________表示的是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結果。(3)該小組將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻，一部分進行靜置培養(yǎng)，另一部分進行振蕩培養(yǎng)。結果發(fā)現(xiàn)：振蕩培養(yǎng)的細菌比靜置培養(yǎng)的細菌生長速度快。分析其原因是：振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液中________的含量，同時可使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高________________的利用率。答案(1)檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格'3.8×107(2)B(3)溶解氧'營養(yǎng)物質(zhì)解析(1)取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)一段時間，可依據(jù)是否產(chǎn)生菌落確定培養(yǎng)基的滅菌效果是否理想。由樣品中菌株數(shù)計算公式：(C÷V)×M知：1mL水樣中菌株數(shù)為(38÷0.1)×100＝3.8×104，故每升水樣中的活菌數(shù)為3.8×107。(2)稀釋涂布平板法是用涂布器將菌液均勻涂布在培養(yǎng)基表面，故培養(yǎng)后產(chǎn)生的菌落應隨機分布在培養(yǎng)基表面，即B表示的是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結果。(3)液體培養(yǎng)基通過振蕩可提高溶氧量，同時使菌體與營養(yǎng)物質(zhì)充分接觸，提高營養(yǎng)物質(zhì)的利用率，從而提高細菌的生長速度。11．[2017·寧夏固原一中訓練]某興趣小組欲調(diào)查學校某區(qū)域土壤中微生物的種類，并進行了微生物的分離等工作?；卮鹣铝袉栴}：(1)該小組采用稀釋涂布平板法從土壤中分離分解纖維素的微生物，在涂布接種前，隨機取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時間，這樣做的目的是______________________________；分離得到的純化單菌落屬于________(填“種群”或“群落”)；篩選纖維素分解菌常用________________法，根據(jù)菌落周圍是否出現(xiàn)________來判定。(2)該小組采用平板劃線法分離土壤中的微生物，操作時，接種環(huán)通過________滅菌，在第二次及以后的劃線時，總是從上一次劃線的末端開始劃線，這樣做的目的是_____________________________。(3)鑒定土壤中微生物的種類，可以通過菌落的______________________(至少兩點)等特征。在實驗中小組每隔24小時統(tǒng)計一次菌落數(shù)目，并選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時的記錄作為結果，這樣可以防止________________________。答案(1)檢測培養(yǎng)基滅菌是否合格種群剛果紅染色透明圈(2)灼燒將聚集的菌體逐漸稀釋以便獲得單個菌落(3)形狀、大小、隆起程度及顏色因培養(yǎng)時間不足