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《動物微生物專項技能訓(xùn)練》革蘭氏染色原理革蘭氏染色原理革蘭氏染色法不僅能觀察到細菌的形態(tài)而且還可將所有細菌區(qū)分為兩大類:染色反應(yīng)呈藍紫色的稱為革蘭氏陽性細菌,用G+表示;染色反應(yīng)呈紅色(復(fù)染顏色)的稱為革蘭氏陰性細菌,用G-表示。細菌對于革蘭氏染色的不同反應(yīng),是由于它們細胞壁的成分和結(jié)構(gòu)不同而造成的。革蘭氏陽性細菌的細胞壁主要是由膚聚糖形成的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)組成的,在染色過程中,當(dāng)用乙醇處理時,由于脫水而引起網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)中的孔徑變小,通透性降低,使結(jié)晶紫一碘復(fù)合物被保留在細胞內(nèi)而不易脫色,因此,呈現(xiàn)藍紫色;革蘭氏陰性細菌的細胞壁中膚聚糖含量低,而脂類物質(zhì)含量高,當(dāng)用乙醇處理時,脂類物質(zhì)溶解,細胞壁的通透性增加,使結(jié)晶紫-碘復(fù)合物易被乙醇抽出而脫色,然后又被染上了復(fù)染液(番紅)的顏色,因此呈現(xiàn)紅色。

細胞膜膜磷壁酸壁磷壁酸肽聚糖細胞壁磷脂蛋白質(zhì)細胞膜脂多糖(LPS)孔蛋白脂質(zhì)雙層脂蛋白營養(yǎng)結(jié)合蛋白肽聚糖載體蛋白周質(zhì)間隙外膜革蘭陽性菌細胞壁結(jié)構(gòu)模式圖革蘭陰性菌細胞壁結(jié)構(gòu)模式圖細胞壁結(jié)構(gòu)革蘭氏陽性菌革蘭氏陰性菌肽聚糖組成聚糖,側(cè)鏈,交聯(lián)橋聚糖,側(cè)鏈交聯(lián)方式側(cè)鏈間以肽橋交聯(lián)側(cè)鏈間以肽鍵交聯(lián)交聯(lián)率75%-100%25%以下結(jié)構(gòu)類型三維空間結(jié)構(gòu)二維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)厚度20-80nm10-15nm層數(shù)15-50層1-3層含量胞壁干重40%-80%胞壁干重5%-20%機械強度高差磷壁酸+-外膜-+脂蛋白-+脂多糖-+間周隙-+細菌細胞壁結(jié)構(gòu)比較革蘭氏染色步驟涂片結(jié)晶紫染色1min,水洗碘液媒染1min,水洗酒精脫色30s,水洗復(fù)紅復(fù)染30s,水洗革蘭陽性菌

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