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文檔簡介
兔瘟的實驗室診斷實訓目標學會兔瘟的實驗室診斷程序和方法主要儀器設備與場地設備材料:病料(發(fā)病死亡兔的肝、脾或腎臟)、3%人O型紅細胞懸液、1%人O型紅細胞懸液、兔瘟陽性血清、白瓷板或玻璃板、棉簽、紅鉛筆、96孔V型板、微量稀釋器、微型振蕩器等。場地:傳染病實驗室。平板快速血凝和血凝抑制試驗1、死亡兔的肝、脾制成1:5的懸液,離心后取上清備用。2、在白瓷板上劃好4×4cm的小方格。在一個方格內(nèi)滴加1:5脾、肝懸液2滴,生理鹽水1滴,3%人O型紅細胞懸液一滴,立即攪勻。另一個方格除將生理鹽水換成兔瘟陽性血清外,其它與第一個方格操作相同。3、加樣完畢并攪勻后,輕輕晃動瓷板,2~5min判定結(jié)果。4、結(jié)果判定:如果第一個格內(nèi)出現(xiàn)明顯的紅細胞凝集現(xiàn)象,而第二格不出現(xiàn),則可診斷為兔瘟。微量血凝試驗1、死亡兔的肝、脾制成1:5的懸液,離心后取上清備用。2、在96孔V型滴定板上每孔加0.05ML生理鹽水,再吸取0.05ML1:5稀釋的待測肝懸液加入第一孔,充分混合吸出0.05ML加入第二孔,于第二孔充分混勻后吸出0.05ML加入第3孔,依次倍比稀釋至第11孔,棄去0.05ML。3、每孔均加0.05ML%人O型紅細胞懸液,在微型振蕩器上震蕩半分鐘,37℃反應45min觀察結(jié)果。微量血凝抑制試驗按上述方法將病毒倍比稀釋后,每孔加入兔瘟陽性血清一滴,震蕩后37℃反應10min,再每孔加1%人O型紅細胞懸液0.05ML,振蕩后37℃反應45min,觀察結(jié)果。若血凝價比未加
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