2024年大學(xué)試題(醫(yī)學(xué))-醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)筆試考試歷年高頻考點(diǎn)試題摘選含答案第1卷一.參考題庫(共75題)1.以下屬于上游啟動(dòng)子元件的是（）。A、CAAT盒B、TATA盒C、poly（A）D、GC盒E、CACA盒2.通過細(xì)胞內(nèi)吞作用脂質(zhì)體可以介導(dǎo)基因轉(zhuǎn)移。3.構(gòu)建cDNA文庫常用的載體是（）。A、黏性質(zhì)粒B、M13噬菌體C、λ噬菌體D、細(xì)菌人工染色體E、酵母人工染色體4.G蛋白偶聯(lián)型受體通常為（）。A、3次跨膜蛋白B、7次跨膜蛋白C、單次跨膜蛋白D、12次跨膜蛋白5.（）通過改變基因特定位點(diǎn)核苷酸序列來改變所編碼的氨基酸序列。6.染色質(zhì)大部分以什么結(jié)構(gòu)形式存在（）。A、DNA與組蛋白復(fù)合物B、核小體C、30nm螺線管纖維D、700nm后環(huán)E、1000nm纖維7.有關(guān)蛋白質(zhì)變性的描述中，正確的是（）。A、蛋白質(zhì)變性增加其溶解度B、蛋白質(zhì)變性由肽鏈斷裂而引起C、蛋白質(zhì)變性是不可逆的D、蛋白質(zhì)變性與溶液pH無關(guān)E、蛋白質(zhì)變性可使其生物活性喪失8.質(zhì)譜技術(shù)是將樣品分子離子化后，根據(jù)什么的差異來確定樣品分子量（）。A、質(zhì)量B、電荷C、序列長(zhǎng)短D、吸光度E、質(zhì)量、電荷比值9.啟動(dòng)子位于（）。A、非結(jié)構(gòu)基因中B、轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)上游C、結(jié)構(gòu)基因下游D、外顯子中E、內(nèi)含子中10.B型雙螺旋是DNA的普遍構(gòu)型，而Z型則被確定為僅存在于某些低等真核細(xì)胞中。11.逆轉(zhuǎn)錄病毒載體的主要缺點(diǎn)在于其隨機(jī)整合。12.什么是移碼突變？簡(jiǎn)述其可能導(dǎo)致的蛋白質(zhì)多肽鏈變化情況。13.有的病毒的基因可以轉(zhuǎn)錄為多順反子mRNA。14.蛋白質(zhì)在等電點(diǎn)時(shí)，其凈電荷為（），所帶電荷最（）。15.代謝組是指生物體內(nèi)源性代謝物質(zhì)的動(dòng)態(tài)整體。代謝組目前只涉及（）。A、相對(duì)分子質(zhì)量大于5000Da的內(nèi)源性分子B、核酸、蛋白質(zhì)、脂質(zhì)等生物大分子C、某一生物或細(xì)胞在特定生理時(shí)期內(nèi)所有的代謝產(chǎn)物D、某一生物或細(xì)胞在特定生理時(shí)期內(nèi)所有的低分子量代謝產(chǎn)物16.等電聚焦是根據(jù)蛋白質(zhì)的核質(zhì)比來對(duì)它們進(jìn)行分離的一種技術(shù)。17.簡(jiǎn)述治療基因的受控表達(dá)原理。18.紫外線照射對(duì)DNA分子的損傷主要是（）。A、堿基替換B、磷酸酯鍵斷裂C、堿基丟失D、形成共價(jià)連接的嘧啶二聚體E、堿基烷基化19.HIV是人類逆轉(zhuǎn)錄病毒，能夠整合入宿主細(xì)胞的基因組，并復(fù)制產(chǎn)生病毒蛋白，最終逃脫宿主細(xì)胞。以下哪種蛋白沒有在HIV基因組中編碼（）。A、逆轉(zhuǎn)錄酶B、包膜蛋白C、RNA聚合酶D、衣殼蛋白20.有關(guān)RNA干擾描述正確的是（）。A、可以增強(qiáng)目標(biāo)基因的表達(dá)B、由雙鏈RNA誘發(fā)的基因沉默現(xiàn)象C、發(fā)揮表達(dá)調(diào)控作用時(shí)需要其它蛋白酶的參與D、siRNA自身具有酶的活性E、目標(biāo)分子是任意基因的mRNA21.蛋白質(zhì)組學(xué)研究哪些主要內(nèi)容？22.在電場(chǎng)中，蛋白質(zhì)泳動(dòng)速度取決于（）。A、蛋白質(zhì)顆粒的大小B、帶凈電荷的多少C、蛋白質(zhì)顆粒的形狀D、（A）+（B）E、（A）+（B）+（C）23.直接基因診斷（）。A、可以在基因序列未知時(shí)進(jìn)行B、是對(duì)致病基因以外的DNA序列分析C、不能針對(duì)致病基因的表達(dá)產(chǎn)物D、可以在基因致病機(jī)理未知時(shí)進(jìn)行E、可以是對(duì)基因突變位點(diǎn)的直接檢測(cè)24.基因診斷的最重要特點(diǎn)是耗時(shí)少。25.轉(zhuǎn)錄組在整個(gè)細(xì)胞中所占含量大約為（）。A、1%B、4%C、8%D、15%26.治療基因的受控表達(dá)其策略包括：基因內(nèi)部調(diào)節(jié)機(jī)制、（）、利用病灶微環(huán)境使治療基因特異性表達(dá)及（）等。27.不屬于真核基因表達(dá)調(diào)控的順式作用元件的是（）。A、啟動(dòng)子B、增強(qiáng)子C、操縱子D、沉默子E、反應(yīng)元件28.烷化鳥嘌呤的糖苷鍵不穩(wěn)定，容易脫落形成DNA鏈上的無堿基位點(diǎn)，復(fù)制時(shí)可以插入任何核苷酸，造成DNA序列改變。29.Klenow片段具有5ˊ→3ˊ聚合酶活性、3ˊ→5ˊ和5ˊ→3ˊ核酸外切酶活性。30.來源不同的酶，但能識(shí)別和切割同一位點(diǎn)，這些酶稱為（）。31.自殺基因治療旁觀者效應(yīng)不能影響到遠(yuǎn)處的腫瘤細(xì)胞。32.嘿吟核昔酸從頭合成途徑首先合成的是（）。A、XMPB、IMPC、GMPD、AMPE、CMP33.有關(guān)反義RNA描述正確的是（）。A、通過與mRNA特異結(jié)合而抑制翻譯B、不易被降解C、具有酶的活性D、可以直接作用一些RNA病毒E、是一種核酶34.人類不能通過光分解酶直接修復(fù)紫外線照射下形成的嘧啶二聚體。35.E.coli核苷酸切除修復(fù)過程中，UvrC的作用是（）。A、識(shí)別損傷部位B、解旋雙鏈C、3ˊ末端內(nèi)切D、5ˊ末端內(nèi)切E、DNA合成36.反向斑點(diǎn)雜交是先固定探針于膜上。37.甲氨蝶嶺可用于治療白血病的原因是它可以直接（）。A、抑制二氫葉酸還原酶B、抑制DNA的合成酶系的活性C、抑制蛋白質(zhì)的分解低謝D、阻斷蛋白質(zhì)的合成代謝E、破壞DNA分子的結(jié)構(gòu)38.PCR的中文全稱是（），英文全稱是（），基本過程包括（）、（）和（）三個(gè)階段。39.逆轉(zhuǎn)錄酶是一種RNA依賴性的DNA聚合酶。40.Western印跡技術(shù)能從多克隆抗體中檢測(cè)出單克隆抗體。41.DNA雙脫氧末端終止法中，DNA鏈延伸-終止反應(yīng)的關(guān)鍵是（）。A、DNA模板變成單鏈B、加入某一種帶有標(biāo)記的dNTPC、加入一對(duì)引物D、有ddNTP底物的存在E、加入EDTA終止酶活性42.基因突變及其主要類型？43.作為克隆載體的質(zhì)粒應(yīng)具有一個(gè)以上的（），便于對(duì)宿主細(xì)胞進(jìn)行選擇。44.有關(guān)PCR引物描述錯(cuò)誤的是（）。A、為一段核酸序列B、限定了產(chǎn)物的長(zhǎng)度C、與反應(yīng)的特異性無關(guān)D、不能太長(zhǎng)E、引物之間不應(yīng)有互補(bǔ)45.乙肝病毒基因組雙鏈DNA通過半保留方式進(jìn)行復(fù)制。46.抑制性消減雜交技術(shù)47.點(diǎn)突變中同種類型堿基之間的取代，即嘧啶-嘧啶、嘌呤-嘌呤之間的取代被稱為（）。A、同義突變B、錯(cuò)義突變C、無義突變D、顛換E、轉(zhuǎn)換48.第一個(gè)分離到的抑癌基因是（）。49.轉(zhuǎn)染真核細(xì)胞的主要方法有（）。A、磷酸鈣共沉淀法B、電穿孔法C、DEAE-葡聚糖法D、脂質(zhì)體介導(dǎo)E、顯微注射50.關(guān)于增強(qiáng)子的描述錯(cuò)誤的是（）。A、沒有方向性B、可以在內(nèi)含子中C、有基因特異性D、調(diào)控鄰近基因的轉(zhuǎn)錄E、有的含有負(fù)調(diào)控序列51.隨機(jī)引物標(biāo)記探針時(shí)，不需要用DNaseI預(yù)處理。52.造血干細(xì)胞不能用于基因治療研究。53.用熒光染料哇叮因氮芥對(duì)染色體進(jìn)行染色使染色體顯帶，稱為（）。A、C顯帶B、D顯帶C、G顯帶D、Q顯帶E、T顯帶54.以DNA為模板按堿基配對(duì)原則進(jìn)行DNA復(fù)制是一個(gè)嚴(yán)格而精確事件，但也不是完全不發(fā)生錯(cuò)誤的。55.有關(guān)腺病毒治療載體的描述正確的是（）。A、感染的靶細(xì)胞可以是分裂或非分裂細(xì)胞B、安全高效C、不能整合D、外源基因可以持續(xù)穩(wěn)定表達(dá)E、外源基因容量很小56.同型半朧氨酸和N5一甲基四氫葉酸反應(yīng)生成蛋氨酸時(shí)所必需的維生素為（）。A、葉酸B、二氫葉酸C、四氫葉酸D、維生素BitE、5一甲基四氫葉酸57.以下屬于目前蛋白質(zhì)組研究中最有效的分離技術(shù)的是（）。A、二維凝膠電泳B、圖像分析技術(shù)C、質(zhì)譜技術(shù)D、蛋白質(zhì)芯片技術(shù)E、噬菌體顯示技術(shù)58.在cDNA的合成中要用到S1核酸酶，其作用是（）。59.簡(jiǎn)述大腸桿菌重組修復(fù)機(jī)制。60.比較逆轉(zhuǎn)錄病毒、腺病毒及腺相關(guān)病毒基因治療載體特點(diǎn)的異同。61.E.coli核苷酸切除修復(fù)過程中，UvrA的作用是（）。A、識(shí)別損傷部位B、解旋雙鏈C、3ˊ末端內(nèi)切D、5ˊ末端內(nèi)切E、DNA合成62.常用核酸分子雜交技術(shù)不包括（）。A、Southern印跡雜交B、Northern印跡雜交C、Western印跡雜交D、菌落原位雜交E、反向斑點(diǎn)雜交63.SDS時(shí)，不同大小蛋白質(zhì)分子的電荷/質(zhì)量比值趨近于相同。64.以下哪些是病毒基因組的特點(diǎn)（）。A、基因重疊B、大部分是非編碼區(qū)C、分段基因組D、由雙鏈環(huán)狀DNA組成E、單倍體基因組65.在多基因病的發(fā)生中，遺傳因素和環(huán)境因素共同作用并決定一個(gè)個(gè)體是否易患某種遺傳病的可能性稱為（）。A、易患性B、遺傳率C、閾值D、易感性66.結(jié)構(gòu)基因中的編碼序列是指（）。A、內(nèi)含子B、外顯子C、增強(qiáng)子D、沉寂子E、TATA盒67.Sanger法用以鑒定多肽羧基端得氨基酸，而Edman法用以鑒定氨基端氨基酸。68.大腸桿菌堿基錯(cuò)配修復(fù)系統(tǒng)中Dam甲基化酶能將核苷酸序列（）中的堿基甲基化。69.高氨血癥導(dǎo)致昏迷的生化基礎(chǔ)是什么？70.基因克隆中能特異切割DNA的酶是（）。A、限制性核酸內(nèi)切酶B、DNA聚合酶ⅠC、DNA聚合酶Ⅰ大片段D、DNA連接酶E、堿性磷酸酶71.簡(jiǎn)述DNA分子的自發(fā)性損傷。72.與TK-細(xì)胞突變株篩選轉(zhuǎn)染細(xì)胞有關(guān)的有（）。A、次黃嘌呤B、氨基喋呤C、胸苷D、TKE、X-gal73.基因干預(yù)的方法有哪些？74.目前用于蛋白質(zhì)鑒定的質(zhì)譜主要有（）和（）。75.什么是噬菌體表面顯示技術(shù)？第2卷一.參考題庫(共75題)1.DNA損傷修復(fù)機(jī)制中，主要針對(duì)DNA單鏈斷裂和小的堿基改變而進(jìn)行修復(fù)的是（）。A、錯(cuò)配修復(fù)B、直接修復(fù)C、核苷酸切除修復(fù)D、堿基切除修復(fù)E、重組修復(fù)2.核酸雜交技術(shù)可分為（）和（）兩種類型；后者又可分為（）和（）。3.體內(nèi)氨主要在（）合成（）而解毒。4.在多基因家族中某些與正常功能基因在核苷酸序列上相似，但不能轉(zhuǎn)錄或轉(zhuǎn)錄后生成無功能基因產(chǎn)物的DNA序列被稱為（）。5.丙型肝炎病毒基因組是（）。A、環(huán)狀雙鏈RNA分子B、單鏈RNA病毒C、逆轉(zhuǎn)錄病毒D、單鏈正股RNA病毒E、單負(fù)鏈雙體RNA6.根據(jù)突變所導(dǎo)致遺傳學(xué)效應(yīng)的不同，可將基因突變區(qū)分為（）等不同類型。A、錯(cuò)義突變B、無義突變C、同義突變D、移碼突變E、動(dòng)態(tài)突變7.四環(huán)素操縱子中的抗性基因的轉(zhuǎn)錄受（）的負(fù)調(diào)控，而阻遏蛋白的活性受到（）的（）調(diào)控，其在四環(huán)素存在時(shí)會(huì)優(yōu)先結(jié)合藥物而無法與轉(zhuǎn)錄調(diào)控元件結(jié)合，即不能發(fā)揮阻遏轉(zhuǎn)錄的作用。8.簡(jiǎn)述乳糖操縱子的結(jié)構(gòu)。9.基因突變導(dǎo)致蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)改變和合成量的變化均能導(dǎo)致特定疾病發(fā)生，各舉一例說明之。10.DNA序列測(cè)定可以發(fā)現(xiàn)基因的變異。11.E.coli中Dam甲基化酶可將回文序列5ˊ-GATC-3ˊ中腺苷酸的N6位甲基化。12.以下哪項(xiàng)可以做PCR擴(kuò)增中的模板（）。A、dNTPB、DNA片段C、RNA片段D、蛋白質(zhì)E、肽核酸13.簡(jiǎn)述真核生物在翻譯水平上的調(diào)控。14.腺病毒基因治療載體的特點(diǎn)有哪些？15.E.coli錯(cuò)配修復(fù)過程中，在切除MutH的切口和錯(cuò)配核苷酸之間的單鏈DNA時(shí)，如果切口位于錯(cuò)配位點(diǎn)5ˊ側(cè)，按5ˊ→3ˊ方向降解DNA的是（）。A、外切酶ⅦB、RecJC、外切酶ΙD、外切酶XE、SSB16.Southern印跡雜交是（）。A、分析RNA的技術(shù)B、用于DNA的定性或定量研究C、只能用于基因突變分析D、利用了DNA聚合酶ⅠE、不需要電泳分離17.免疫沉淀法一般用于分離（）。A、DNAB、RNAC、蛋白質(zhì)D、脂類E、糖類18.菌落原位雜交的過程。19.采用直接基因診斷途徑的必要條件是（）。A、被檢基因的正常分子結(jié)構(gòu)已被確定B、被檢基因突變類型與疾病發(fā)病有直接的因果關(guān)系C、被檢基因突變位點(diǎn)固定而且已知D、被檢個(gè)體無其他基因異常E、被檢基因僅發(fā)生基因結(jié)構(gòu)改變20.DNA損傷的后果包括點(diǎn)突變、缺失、插入、倒位或轉(zhuǎn)位、DNA斷裂。21.E.coli錯(cuò)配修復(fù)過程中，識(shí)別錯(cuò)配核苷酸的是（）。A、HelicaseB、RecJC、mutLD、mutHE、mutS22.蛋白質(zhì)溶液出現(xiàn)沉淀與蛋白質(zhì)變性存在必然的關(guān)系。23.真核細(xì)胞中有同源重組、非同源末端連接來修復(fù)雙鏈DNA損傷。24.人體膽固醇的來源有（）、（）。25.下列有關(guān)嘧啶二聚體哪項(xiàng)不正確（）。A、由紫外線照射引起B(yǎng)、由相鄰的兩個(gè)核苷酸組成C、不是一種點(diǎn)突變D、若不能修復(fù)，易引起著色性干皮病E、這種突變不能修復(fù)26.世界上第一個(gè)蛋白質(zhì)組研究中心于1996年建立在（）。A、英國(guó)B、美國(guó)C、瑞士D、澳大利亞E、瑞典27.真核mRNA選擇性剪接的方式有哪些？舉例說明其基本生物學(xué)意義是什么？28.有關(guān)基因診斷的特點(diǎn)，不正確的是（）。A、診斷早期性B、有很高的特異性C、診斷靈敏度高D、適用性強(qiáng)，診斷范圍廣E、技術(shù)單一，對(duì)操作人員要求低29.當(dāng)點(diǎn)突變沒引起任何限制性酶切位點(diǎn)的改變時(shí)，可采用的基因診斷技術(shù)是（）。A、PCR-ASOB、AS-PCRC、PCR-SSCPD、測(cè)序E、PCR-RFLP30.在蛋白質(zhì)序列測(cè)定中必須先用（）對(duì)蛋白質(zhì)的多肽鏈進(jìn)行部分水解成較小的肽段，才能進(jìn)一步采用（）法進(jìn)行肽段的序列測(cè)定。31.PCR產(chǎn)物的產(chǎn)量只與初始模板數(shù)有關(guān)。32.下列哪種組合不可以用于親和層析（）。A、酶與底物及輔助因子B、酶與競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑C、酶與非競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑D、酶與抗酶抗體E、生物素與抗生物素33.外源基因表達(dá)的基本流程是（）。 ①重組表達(dá)載體導(dǎo)入宿主細(xì)胞； ②目的基因的獲得； ③重組表達(dá)載體的篩選與認(rèn)； ④目的基因與載體的重組； ⑤目的基因的表達(dá)。A、②④①③⑤B、①②④③⑤C、②④③①⑤D、④②①③⑤34.無義突變導(dǎo)致（）。A、產(chǎn)生氨基酸排列順序完全不同的蛋白質(zhì)B、產(chǎn)生縮短的多肽鏈C、產(chǎn)生一種氨基酸排列順序相同的蛋白質(zhì)D、不產(chǎn)生異常蛋白質(zhì)E、突變位點(diǎn)后氨基酸功能喪失35.結(jié)合一種基因治療策略及治療基因的受控表達(dá)原理，設(shè)計(jì)一套乳腺癌基因治療的方案。36.簡(jiǎn)述蛋白質(zhì)免疫印跡法的基本原理和主要操作步驟。37.SDS上樣緩沖液成分有哪些？各有何作用？若無此成分電泳會(huì)出現(xiàn)什么問題？38.在細(xì)胞周期中，DNA的復(fù)制發(fā)生在（）。A、G期B、G1期C、G2期D、S期E、M期39.PCR引物設(shè)計(jì)的原則主要有哪些？40.在（）的小分子化合物稱為第二信使。41.痛風(fēng)癥是因?yàn)檠心撤N物質(zhì)在關(guān)節(jié)、軟組織處沉積，其成分為（）。A、尿酸B、尿素C、膽固醇D、黃喋吟E、次黃嗓吟42.比較真核生物基因組與原核生物基因組的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。43.逆轉(zhuǎn)錄病毒基因組RNA在5′端有（）結(jié)構(gòu)，在3′端有（）。44.簡(jiǎn)述真核和原核基因表達(dá)調(diào)控共同的要素。45.識(shí)別堿基改變的感應(yīng)因子是（）。A、ATMB、ATRC、Chk1D、Chk2E、Cdc25A46.SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳可以測(cè)定蛋白質(zhì)的分子質(zhì)量，其原理是什么？47.回文序列是一種沒有間隔序列的反向重復(fù)序列。48.在RNA的制備過程中，（）是RNA制備成功與否的關(guān)鍵因素。49.Southern印跡雜交、Northern印跡雜交及Western免疫印跡彼此之間有哪些不同？50.檢測(cè)的靶序列是RNA的技術(shù)是（）。A、Southern雜交B、Western雜交C、Northern雜交D、Eastern雜交E、雜交淋巴瘤51.下列哪一條在分子印跡技術(shù)中不適用（）。A、DNA向NC膜轉(zhuǎn)移B、蛋白質(zhì)向PVDF膜轉(zhuǎn)移C、DNA向尼龍膜轉(zhuǎn)移D、RNA向NC膜轉(zhuǎn)移E、蛋白質(zhì)向一號(hào)濾紙轉(zhuǎn)移52.甲基甲烷碘酸、氮芥、環(huán)磷酰胺、二乙基亞硝胺屬于雙功能基烷化劑，可同時(shí)使DNA分子中兩個(gè)位點(diǎn)烷基化。53.什么是基因突變？它有哪些主要類型？54.PCR反應(yīng)平臺(tái)期的影響因素有（）。A、引物及dNTP底物濃度降低B、產(chǎn)物過多C、酶與模板比例下降D、dNTP用完E、反應(yīng)時(shí)間過長(zhǎng)55.可以打開蛋白質(zhì)分子中二硫鍵的方法是（）。A、用β-巰基乙醇處理B、用8mol/L尿素處理C、用蛋白水解酶處理D、用溴化氰處理E、用胰蛋白酶處理56.DNA損傷可能造成的后果有（）、（）、（）、（）、（）。57.LPL主要是分解脂蛋白中的TG。58.在研究mRNA所包含的功能基因信息時(shí)，一般將其反轉(zhuǎn)錄成的cDNA，再插入到可以自我復(fù)制的載體中。59.DNA連接酶能催化DNA中相鄰的5ˊ磷酸基和3ˊ羥基末端之間形成磷酸二酯鍵。60.基因突變是生物變異的主要來源，其原因是（）。A、導(dǎo)致新基因產(chǎn)生B、發(fā)生頻率高C、產(chǎn)生大量有益性狀D、改變了生物表型E、產(chǎn)生有害性狀61.細(xì)菌基因組有些是可移動(dòng)的轉(zhuǎn)座子。62.基因表達(dá)序列標(biāo)簽是長(zhǎng)度大約為（）的cDNA部分序列。A、200~800bpB、100~200bpC、10~100bpD、100~500bp63.關(guān)于突變，錯(cuò)誤的說法是（）。A、顛換是點(diǎn)突變的一種形式B、插入1個(gè)堿基對(duì)可引起框移突變C、重排屬于鏈內(nèi)重組D、缺失5個(gè)堿基對(duì)可引起框移突變E、轉(zhuǎn)換屬于重排的一種形式64.腺病毒載體具有定點(diǎn)整合的特點(diǎn)。65.病毒基因組中編碼序列（）非編碼序列，非編碼序列通常是基因表達(dá)的調(diào)控序列。66.整個(gè)雜交反應(yīng)主要以下哪些步驟組成（）。A、預(yù)固定B、雜交C、洗脫D、固定E、轉(zhuǎn)移67.簡(jiǎn)述生物芯片的技術(shù)過程？68.乙肝病毒基因組是開環(huán)部分雙鏈DNA，基因組DNA復(fù)制是以（）為模板，在（）作用下合成DNA。69.堿性磷酸酶可在載體和待克隆的片段上形成同聚物尾，以便于進(jìn)行克隆。70.基因診斷不可能實(shí)現(xiàn)（）。A、對(duì)某種遺傳疾病發(fā)生的預(yù)知B、改變基因的原有表達(dá)方式C、對(duì)個(gè)體身份的鑒定D、對(duì)病毒的亞型準(zhǔn)確判斷E、判定某種腫瘤疾病的易感性71.蛋白質(zhì)降解的泛素-蛋白酶體途徑主要內(nèi)容有哪些？請(qǐng)舉例說明蛋白質(zhì)降解異常引發(fā)特定疾病。72.雙鏈DNA分子中GC含量越高，Tm值就越大。73.SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳74.關(guān)于核酸探針的描述下列何項(xiàng)不正確（）。A、可以是DNAB、可以是RNAC、可用放射性標(biāo)記D、可用非放射性標(biāo)記E、必須是單鏈核酸75.與DNA修復(fù)過程缺陷有關(guān)的疾病是（）。A、卟啉癥B、著色性干皮病C、痛風(fēng)癥D、苯酮酸尿癥E、黃疸第1卷參考答案一.參考題庫1.參考答案：A,D,E2.參考答案：正確3.參考答案：C4.參考答案：B5.參考答案：定點(diǎn)突變6.參考答案：C7.參考答案：E8.參考答案：E9.參考答案：A,B10.參考答案：錯(cuò)誤11.參考答案：錯(cuò)誤12.參考答案：移碼突變是指基因的堿基序列中發(fā)生了單個(gè)堿基、數(shù)個(gè)堿基或堿基序列片段的缺失或插入，導(dǎo)致突變之后的三聯(lián)密碼閱讀框發(fā)生改變，突變點(diǎn)以后的堿基序列所編碼的多肽鏈氨基酸序列與突變前不同。如果插入或缺失的堿基數(shù)目恰好是3或3的整數(shù)倍，多肽鏈有一個(gè)或數(shù)個(gè)氨基酸的增加或減少，突變區(qū)域以后的氨基酸序列不會(huì)發(fā)生改變；如果變化堿基為非3的整數(shù)倍，就會(huì)使三聯(lián)密碼的閱讀向左或右移動(dòng)，突變區(qū)域以后的氨基酸序列全部發(fā)生改變。13.參考答案：正確14.參考答案：0；多15.參考答案：D16.參考答案：錯(cuò)誤17.參考答案：治療基因的受控表達(dá)包括控制治療基因表達(dá)的時(shí)間、空間和水平三個(gè)方面。要實(shí)現(xiàn)治療基因的受控表達(dá)，必須建立完善的基因表達(dá)調(diào)控體系。基因調(diào)控策略大致有以下幾種：基因內(nèi)部調(diào)節(jié)機(jī)制、基因外部調(diào)節(jié)機(jī)制、利用病灶微環(huán)境使治療基因特異性表達(dá)以及治療基因的誘導(dǎo)表達(dá)等。基因內(nèi)部的調(diào)節(jié)機(jī)制是利用使用正常細(xì)胞或病變的組織特異性啟動(dòng)子、增強(qiáng)子元件調(diào)控基因的表達(dá)。除利用基因內(nèi)部的調(diào)節(jié)機(jī)制以外，還可通過施加外部刺激，促進(jìn)治療基因在特定細(xì)胞或組織中表達(dá)。病灶微環(huán)境與正常時(shí)往往不同，因此可利用這些變化控制治療基因的表達(dá)。采用組織特異性啟動(dòng)子控制治療基因的表達(dá)，可能造成這些基因在靶細(xì)胞中表達(dá)，不再受外界控制。為了避免這種情況發(fā)生，研究人員正在開發(fā)和完善一些可誘導(dǎo)性基因表達(dá)系統(tǒng)。這種系統(tǒng)的必要成分：一種是轉(zhuǎn)錄激活劑，它只在誘導(dǎo)藥物存在時(shí)才能與DNA結(jié)合；另一種則是特異性基因表達(dá)調(diào)控元件，僅對(duì)這種轉(zhuǎn)錄激活劑有所響應(yīng)。18.參考答案：D19.參考答案：C20.參考答案：B,C21.參考答案： 蛋白質(zhì)組學(xué)的研究?jī)?nèi)容不僅包括對(duì)各種蛋白質(zhì)的識(shí)別和定量化，還包括確定它們?cè)诩?xì)胞內(nèi)外的定位、修飾、相互反應(yīng)、活性和最終確定它們的功能，如蛋白質(zhì)與疾病的關(guān)聯(lián)性。隨著學(xué)科的發(fā)展，蛋白質(zhì)組學(xué)的研究?jī)?nèi)容也在不斷完善和擴(kuò)充。 目前涉及如下幾個(gè)方面： （1）蛋白質(zhì)：如蛋白質(zhì)組作圖、蛋白質(zhì)組成分鑒定、蛋白質(zhì)差異顯示、同工體比較、新型蛋白質(zhì)發(fā)掘和蛋白質(zhì)組數(shù)據(jù)庫構(gòu)建等； （2）基因：如完善功能基因組計(jì)劃，可進(jìn)行基因產(chǎn)物（蛋白質(zhì)）識(shí)別、進(jìn)一步進(jìn)行基因功能鑒定、基因調(diào)控機(jī)制分析； （3）重要生命活動(dòng)的分子機(jī)制：包括細(xì)胞周期、細(xì)胞分化與發(fā)育、腫瘤發(fā)生與發(fā)展、環(huán)境反應(yīng)與調(diào)節(jié)、物種進(jìn)化等； （4）醫(yī)藥靶分子尋找與分析：靶分子類型包括新型藥物靶分子、腫瘤惡性標(biāo)志，人體病理介導(dǎo)分子、病原菌毒性成分。22.參考答案：E23.參考答案：E24.參考答案：錯(cuò)誤25.參考答案：B26.參考答案：基因外部調(diào)節(jié)機(jī)制；治療基因的誘導(dǎo)表達(dá)27.參考答案：C28.參考答案：正確29.參考答案：錯(cuò)誤30.參考答案：同工異源酶31.參考答案：錯(cuò)誤32.參考答案：B33.參考答案：A,D34.參考答案：正確35.參考答案：D36.參考答案：正確37.參考答案：A38.參考答案：聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)；PolymeraseChainReaction；變性；退火；延伸39.參考答案：正確40.參考答案：正確41.參考答案：D42.參考答案： 在基因特定DNA序列中，堿基組成及排列順序可因機(jī)體內(nèi)外因素的作用發(fā)生改變，導(dǎo)致DNA一級(jí)結(jié)構(gòu)的變化，形成基因突變（genemutation）。它可以是單個(gè)核苷酸改變，也可以是多個(gè)核苷酸甚至一段核苷酸序列的改變；其分子機(jī)制可以是替換、插入或缺失等，其主要類型分為： （1）點(diǎn)突變（pointmutation），在DNA序列某個(gè)位點(diǎn)上，一種堿基（核苷酸）被另一種取代所產(chǎn)生的改變。又分為轉(zhuǎn)換（transition）和顛換（transversion）兩種，前者指同類型堿基（核苷酸）即嘧啶與嘧啶、嘌呤與嘌呤之間的取代，后者指不同類型堿基即嘧啶與嘌呤之間的相互取代； （2）缺失（deletion），因一個(gè)堿基或一段堿基序列丟失造成基因結(jié)構(gòu)的改變； （3）插入（insertion），某個(gè)位置增加一個(gè)堿基或一段堿基序列的基因結(jié)構(gòu)改變； （4）重排（rearrangement），常見有反置或遷移倒位，即基因DNA序列內(nèi)部重組，導(dǎo)致一段DNA片段方向反置，由原來的5’-3’方向排列整段變?yōu)?’-5’方向排列，或一段DNA序列遷移到他處，故同時(shí)在原位置和插入位置表現(xiàn)為缺失和插入突變，其自身還可發(fā)生反置； （5）根據(jù)基因突變發(fā)生載體不同區(qū)分為配子突變和體細(xì)胞突變； （6）動(dòng)態(tài)突變（dynamicmutation），微衛(wèi)星序列串聯(lián)重復(fù)拷貝數(shù)隨著世代傳遞而不斷增加的現(xiàn)象，是迄今只見于人類的基因突變，與數(shù)種遺傳病和腫瘤發(fā)生有關(guān)。43.參考答案：遺傳標(biāo)志44.參考答案：C45.參考答案：錯(cuò)誤46.參考答案：是一種鑒定、分離組織細(xì)胞中選擇性表達(dá)基因的技術(shù)，其原理是以抑制性多聚酶鏈反應(yīng)（PCR）反應(yīng)為基礎(chǔ)的cDNA消減雜交技術(shù)。通過合成兩個(gè)不同的接頭，連接于測(cè)試cDNA片段的5′末端，達(dá)到選擇性擴(kuò)增差異性表達(dá)的cDNA片段，抑制非目的cDNA的擴(kuò)增。該技術(shù)是Diatchenko等1996年在抑制性PCR的基礎(chǔ)上建立起來的cDNA消減雜交方法，它克服了DD法的假陽性較高和RDA法消減雜交輪次較多的缺點(diǎn)，十分適用于克隆分析造成某種特殊表型的目的基因及其功能。47.參考答案：A,E48.參考答案：視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤基因49.參考答案：A,B,C,D,E50.參考答案：C51.參考答案：正確52.參考答案：錯(cuò)誤53.參考答案：D54.參考答案：正確55.參考答案：A,C56.參考答案：D57.參考答案：A58.參考答案：切除在第二鏈合成時(shí)形成的發(fā)夾環(huán)59.參考答案： E.coli的rec基因編碼的幾種酶（recA、recB、recC和recD）參與重組修復(fù)。recB、recC、recD酶復(fù)合物兼有解旋酶和核酸酶活性，它利用ATP水解提供能量沿著DNA移動(dòng)。其中，recB和recD是兩種解旋酶，recB沿DNA鏈5’端解旋，運(yùn)動(dòng)速度較慢；而recD沿DNA鏈3’端解旋，運(yùn)動(dòng)速度較快，導(dǎo)致單鏈DNA環(huán)狀結(jié)構(gòu)逐漸累積。當(dāng)recB、recC、recD遇到chi序列5’-GCTGGTCC-3’時(shí)，它就在附近將單鏈DNA切斷，從而使DNA重組成為可能。 E.coli的recA蛋白在DNA重組中起關(guān)鍵作用。recA蛋白緊緊結(jié)合于單鏈DNA，每圈結(jié)合六個(gè)recA分子。DNA單鏈區(qū)產(chǎn)生于recB、recC、recD酶的作用或DNA缺口。recA蛋白結(jié)合DNA具有正協(xié)同效應(yīng)。E.coli的RuvA蛋白識(shí)別Holliday結(jié)構(gòu)連接處，而RuvB蛋白具有解旋酶和ATPase活性，能驅(qū)動(dòng)分支移動(dòng)。最后由內(nèi)切核酸酶RuvC特異識(shí)別Holliday結(jié)構(gòu)中的ATTG序列并切割DNA，使Holliday結(jié)構(gòu)分離，從而完成DNA重組。60.參考答案： 逆轉(zhuǎn)錄病毒載體：可隨機(jī)整合，效率高；可能致??；主要感染分裂細(xì)胞?？寺∪萘啃∮?kb。 腺病毒載體：不整合，可能丟失；安全性較高；感染分裂或非分裂細(xì)胞?？寺∪萘啃∮?.5kb。 腺相關(guān)病毒載體：定點(diǎn)整合；安全性高；感染分裂或非分裂細(xì)胞。克隆容量小于5kb。61.參考答案：A62.參考答案：C63.參考答案：正確64.參考答案：A,C,E65.參考答案：A66.參考答案：B67.參考答案：錯(cuò)誤68.參考答案：5/GATC3/A69.參考答案：高氨血癥時(shí)，腦中的反應(yīng)為；氨+a一酮戊二酸一谷氨酸，氨＋谷氨酸～谷氨酞胺，腦內(nèi)a-酮戊二酸減少導(dǎo)致了三梭酸循環(huán)減慢，從而使ATP生成減少，腦組織供能缺乏而表現(xiàn)為昏迷。70.參考答案：A71.參考答案：DNA分子的自發(fā)性損傷包括兩大類：（1）DNA復(fù)制產(chǎn)生的誤差；（2）DNA的自發(fā)性化學(xué)變化包括堿基的異構(gòu)互變、堿基的脫氨基作用、脫嘌呤與脫嘧啶、堿基修飾與鏈斷裂。72.參考答案：A,B,C,D73.參考答案：基因干預(yù)的方法有：反義RNA指能與特定基因mRNA互補(bǔ)結(jié)合的一類RNA，可抑制一些有害基因的翻譯。RNA干擾是指由雙鏈RNA誘發(fā)的基因沉默現(xiàn)象：與其有同源序列的mRNA被降解，從而抑制了該基因的表達(dá)。核酶是具有酶活性的RNA，可降解特異的mRNA序列。74.參考答案：基質(zhì)輔助激光解吸/電離飛行時(shí)間質(zhì)譜；電噴霧質(zhì)譜75.參考答案：噬菌體表面顯示技術(shù)是將基因表達(dá)產(chǎn)物與親和選擇相結(jié)合的技術(shù)，其基本原理是將編碼“誘餌”蛋白的DNA片段插入噬菌體基因組，并使之與噬菌體外殼蛋白編碼基因相融合。該重組噬菌體浸染宿主細(xì)菌后，復(fù)制形成大量帶有雜合外殼蛋白的噬菌體顆粒，直接用于捕獲靶蛋白庫中與“誘餌”相互作用的蛋白質(zhì)。基于生物分子與藥物靶分子（抗體、受體、抗原、酶的底物等）的親和力，應(yīng)用噬菌體表面顯示技術(shù)可以從多肽庫中進(jìn)行快速篩選，從而成為藥物開發(fā)的強(qiáng)有力工具。第2卷參考答案一.參考題庫1.參考答案：D2.參考答案：液相雜交；固相雜交；膜上印跡雜交；細(xì)胞原位雜交3.參考答案：肝臟；尿素4.參考答案：假基因5.參考答案：D6.參考答案：A,B,C,D7.參考答案：Tet阻遏蛋白；四環(huán)素；抗性操縱子8.參考答案：編碼β-半乳糖苷酶、半乳糖苷通透酶和硫代半乳糖苷轉(zhuǎn)乙酰基酶的基因Z、Y、A稱為結(jié)構(gòu)基因，結(jié)構(gòu)基因加上調(diào)控元件：?jiǎn)?dòng)子和操縱基因，即構(gòu)成乳糖操縱子。9.參考答案： 基因分類中的結(jié)構(gòu)基因發(fā)生改變會(huì)改變其所編碼蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu)，進(jìn)而改變蛋白質(zhì)的理化性質(zhì)，如果這些改變?cè)斐闪说鞍踪|(zhì)生物學(xué)功能的紊亂直至完全喪失，就會(huì)引起疾病。 如血紅蛋白（hemoglobin，Hb）是紅細(xì)胞中運(yùn)輸氧O2和二氧化碳（CO2）的一種重要功能蛋白，是由α和β兩種珠蛋白肽鏈各兩分子構(gòu)成的四聚體復(fù)合蛋白，每個(gè)亞基結(jié)合1分子血紅素。血紅蛋白結(jié)構(gòu)異?？蓪?dǎo)致其功能變化，影響紅細(xì)胞運(yùn)輸O2和CO2的能力，從而產(chǎn)生多種癥狀，形成所謂異常血紅蛋白血癥（abnormalhemoglobinsyndrome）。當(dāng)α或（和）β珠蛋白基因突變、使得珠蛋白肽鏈的氨基酸組成或排列順序發(fā)生變化時(shí)，其理化性質(zhì)也發(fā)生相應(yīng)改變，導(dǎo)致血紅蛋白分子不穩(wěn)定，形成不穩(wěn)定血紅蛋白病。以鐮狀紅細(xì)胞貧血癥為例，其分子病因在于β珠蛋白基因第六位密碼子發(fā)生一點(diǎn)突變，使密碼子GAG（谷氨酸）突變?yōu)镚TG（纈氨酸），引起血紅蛋白結(jié)構(gòu)和功能的根本性改變，大大降低其穩(wěn)定性及結(jié)合O2和CO2的能力，并導(dǎo)致紅細(xì)胞由正常雙面凹狀圓盤形變成扁平的鐮刀形。 結(jié)構(gòu)基因的突變還能使基因表達(dá)水平發(fā)生改變，改變蛋白質(zhì)合成數(shù)量，造成功能紊亂和疾病發(fā)生。仍然以血紅蛋白為例，具有完整功能的血紅蛋白要求α和β珠蛋白的量保持平衡，任何一種蛋白合成受到抑制直至完全缺失時(shí)，會(huì)使兩種蛋白之間的量失去平衡，引起珠蛋白生成障礙性貧血，又稱地中海貧血（thalassemia），根據(jù)表達(dá)受抑制或缺失種類分別為α-地貧和β-地貧，多種α和β珠蛋白結(jié)構(gòu)基因突變都能抑制相應(yīng)蛋白合成。在我國(guó)南方多個(gè)省區(qū)常見β地貧。如β鏈第17位賴氨酸密碼子AAG（Lys）發(fā)生無義突變，產(chǎn)生新的終止密碼子TAG；β珠蛋白基因開放閱讀框內(nèi)插入或缺失1、2、4或7個(gè)核苷酸，導(dǎo)致突變點(diǎn)后移碼突變等，使β珠蛋白鏈合成提前終止、正常β珠蛋白含量減少甚至完全消失，引發(fā)β地貧。10.參考答案：正確11.參考答案：正確12.參考答案：B13.參考答案： （1）翻譯起始的調(diào)控： ①翻譯起始因子的功能調(diào)控：eIF-2是蛋白質(zhì)合成過程中重要的起始因子。有些物質(zhì)可以影響eIF-2的活性，調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)合成的速度。培養(yǎng)的真核細(xì)胞處于營(yíng)養(yǎng)不足（“饑餓”）時(shí)，eIF-2失活，最終導(dǎo)致肽鏈合成起始效率降低。 ②阻遏蛋白的調(diào)節(jié)作用：所有進(jìn)入胞漿的mRNA分子并不是都可以立即與核糖體結(jié)合翻譯成蛋白質(zhì)。由于存在一些特定的翻譯抑制蛋白可以與一些mRNA的5′端結(jié)合，從而抑制了蛋白質(zhì)翻譯。 ③5′AUG對(duì)翻譯的調(diào)節(jié)作用：以真核mRNA為模板的翻譯開始于最靠近其5′端的第一個(gè)AUG。90%以上的真核mRNA符合第一AUG規(guī)律。但在有些mRNA中，在起始密碼子AUG的上游（5′端）非編碼區(qū)有一個(gè)或數(shù)個(gè)AUG，稱為5′AUG。5′AUG的閱讀框通常與正常編碼區(qū)的閱讀框不一致，不是正常的開放閱讀框。如果從5′AUG開始翻譯，很快就會(huì)遇到終止密碼子。因此，若從5′AUG開始翻譯，就會(huì)翻譯出無活性的短肽。 ④mRNA5′端非編碼區(qū)長(zhǎng)度對(duì)翻譯的影響：起始密碼AUG上游非編碼區(qū)的長(zhǎng)度可以影響翻譯水平。當(dāng)?shù)谝粋€(gè)AUG密碼子離5′端帽子的位置太近時(shí)，不容易被40S亞基識(shí)別。當(dāng)?shù)谝粋€(gè)AUG密碼子距5′端帽子結(jié)構(gòu)的距離在12個(gè)核苷酸以內(nèi)時(shí)，有一半以上的核糖體40S亞基會(huì)滑過第一個(gè)AUG。當(dāng)5′端非編碼區(qū)的長(zhǎng)度在17～80核苷酸之間時(shí)，體外翻譯效率與其長(zhǎng)度成正比。所以，第一個(gè)AUG至5′端之間的長(zhǎng)度同樣影響翻譯起始效率和翻譯起始的準(zhǔn)確性。 （2）mRNA穩(wěn)定性調(diào)節(jié)：mRNA的穩(wěn)定性是翻譯水平調(diào)控的重要因素，是由于mRNA是翻譯蛋白質(zhì)的模板，其量的多少直接影響蛋白質(zhì)合成的量。mRNA半衰期越長(zhǎng)，翻譯效率越高，在細(xì)胞內(nèi)合成蛋白質(zhì)的量愈多。 （3）小分子RNA對(duì)翻譯的調(diào)控作用：如lin-4RNA由lin-4基因編碼，可阻抑lin-14蛋白質(zhì)（一種核蛋白），從而調(diào)控生長(zhǎng)發(fā)育的時(shí)間選擇。14.參考答案：腺病毒是一種大分子（36kb）雙鏈無包膜DNA病毒。它通過受體介導(dǎo)的內(nèi)吞作用進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，然后腺病毒基因組轉(zhuǎn)移至細(xì)胞核內(nèi)，保持在染色體外，不整合進(jìn)入宿主細(xì)胞基因組中。腺病毒載體的優(yōu)點(diǎn)是基因?qū)胄矢?；宿主范圍廣；基因轉(zhuǎn)導(dǎo)與細(xì)胞分裂無關(guān)；重組腺病毒可通過口服經(jīng)腸道吸收、或噴霧吸入或氣管內(nèi)滴注；腺病毒載體容量較大，可插入7.5kb外源基因。其缺點(diǎn)是不能整合到靶細(xì)胞的基因組DNA中。治療基因表達(dá)時(shí)間相對(duì)較短。宿主的免疫反應(yīng)導(dǎo)致腺病毒載體表達(dá)短暫。部分環(huán)節(jié)可能產(chǎn)生復(fù)制型腺病毒。靶向性差。15.參考答案：A,B16.參考答案：B17.參考答案：C18.參考答案： 對(duì)菌斑或菌落進(jìn)行原位分子雜交是從基因組文庫、cDNA文庫或重組質(zhì)粒中篩選目的基因的最有效的方法之一，而且這種篩選不取決于目的基因是否表達(dá)。 進(jìn)行原位雜交時(shí)，先將含重組質(zhì)粒或重組噬菌體的細(xì)菌生長(zhǎng)在瓊脂平板上，形成單菌落或噬菌斑，再把圓型硝酸纖維膜或尼龍膜覆蓋于長(zhǎng)有菌落或噬菌斑的瓊脂平板的表面，定好位，把膜輕輕揭起，這樣就有部分細(xì)菌或噬菌體吸附于膜上，再用堿處理膜上的DNA，使之變性。烘干固定DNA，然后用32P或其它標(biāo)記物標(biāo)記的DNA或RNA探針雜交、洗膜、用X光片曝光。凡是含有與探針DNA互補(bǔ)序列的菌落或噬菌斑，在顯影后，會(huì)在X光片上產(chǎn)生陽性斑點(diǎn)。然后根據(jù)斑點(diǎn)在平板上的相應(yīng)位置，找出陽性克隆。19.參考答案：A,B,C20.參考答案：正確21.參考答案：E22.參考答案：錯(cuò)誤23.參考答案：正確24.參考答案：從食物中攝??；機(jī)體細(xì)胞自身合成25.參考答案：E26.參考答案：D27.參考答案： （1）選擇性剪接的方式有：①外顯子遺漏；②3ˊ端剪切位點(diǎn)的變化；③5ˊ端剪切位點(diǎn)的變化；④內(nèi)含子保留。 （2）轉(zhuǎn)錄后選擇性剪接在高等生物細(xì)胞的高度異質(zhì)性中起重要作用。由于選擇性剪接的多樣化，一個(gè)基因在轉(zhuǎn)錄后通過mRNA前體（hnRNA）的剪接加工而產(chǎn)生兩個(gè)或更多的蛋白質(zhì)，不同的蛋白可能發(fā)揮著不同的生物學(xué)效應(yīng)。 （3）如bax基因的編碼產(chǎn)物是與細(xì)胞凋亡有關(guān)的分子。該基因的原始轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物經(jīng)過選擇性剪接形成幾種（α、β、γ等）不同類型的蛋白質(zhì)，其結(jié)構(gòu)上的差異主要源于mRNA前體的選擇性剪接。28.參考答案：E29.參考答案：A,B,C,D30.參考答案：蛋白酶或化學(xué)試劑；Edman降解31.參考答案：錯(cuò)誤32.參考答案：C33.參考答案：A34.參考答案：B35.參考答案：自殺基因治療是惡性腫瘤基因治療的一種基因治療策略。其原理是將“自殺”基因?qū)胨拗骷?xì)胞中，這種基因編碼的酶能使無毒性的藥物前體轉(zhuǎn)化為細(xì)胞毒性代謝物，誘導(dǎo)靶細(xì)胞產(chǎn)生“自殺”效應(yīng)，從而達(dá)到清除腫瘤細(xì)胞的目的。四環(huán)素抗性操縱子系統(tǒng)是調(diào)節(jié)基因表達(dá)的系統(tǒng)，其原理是四環(huán)素抗性基因的轉(zhuǎn)錄受Tet阻遏蛋白的負(fù)調(diào)控。無四環(huán)素存在時(shí)，阻遏蛋白與四環(huán)素抗性操縱子序列結(jié)合阻斷四環(huán)素抗性基因的表達(dá)。四環(huán)素存在時(shí)，阻遏蛋白與四環(huán)素具有極高的親和性，造成阻遏蛋白對(duì)四環(huán)素抗性操縱子阻遏解除，使四環(huán)素抗性基因的轉(zhuǎn)錄得以進(jìn)行。四環(huán)素誘導(dǎo)的Tet-On系統(tǒng)：轉(zhuǎn)錄激活物改造了原阻遏蛋白的四環(huán)素結(jié)合特性，即與四環(huán)素結(jié)合時(shí)才能與對(duì)應(yīng)的表達(dá)調(diào)控元件結(jié)合，而發(fā)揮轉(zhuǎn)錄激活作用。TK/GCV單純皰疹病毒（herpssimplexvirus，HSV）Ⅰ型胸苷激酶（thymidinekinase，tk）基因編碼胸苷激酶，特異性地將無毒的核苷類似物丙氧鳥苷（ganciclovir，GCV）轉(zhuǎn)變成毒性GCV三磷酸核苷，后者能抑制DNA聚合酶活性，導(dǎo)致細(xì)胞死亡。因此，可以設(shè)計(jì)TK自殺基因插入到四環(huán)素誘導(dǎo)的Tet-On系統(tǒng)中，使得自殺基因在乳腺癌細(xì)胞中的表達(dá)受Tet阻遏蛋白的負(fù)調(diào)控，加入誘導(dǎo)劑四環(huán)素時(shí)增加自殺基因的轉(zhuǎn)錄與表達(dá)，去除誘導(dǎo)劑時(shí)關(guān)閉或減低自殺基因的表達(dá)，從而控制自殺基因殺傷乳腺癌細(xì)胞。36.參考答案： 蛋白質(zhì)印跡法又稱蛋白質(zhì)免疫印跡法，是20世紀(jì)70年代末80年代初在蛋白質(zhì)凝膠電泳和固相免疫測(cè)定的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的蛋白質(zhì)檢測(cè)技術(shù)，為檢測(cè)樣品中是否存在蛋白質(zhì)抗原提供了一種可靠的方法。該法鑒定蛋白質(zhì)的原理是根據(jù)被測(cè)蛋白能與特定抗體的結(jié)合特性和該蛋白的相對(duì)分子質(zhì)量。 免疫印跡法程序可分為5個(gè)步驟： （1）蛋白樣品的制備； （2）經(jīng)過SDS分離樣品； （3）分離的蛋白轉(zhuǎn)移到膜載體上，轉(zhuǎn)移后首先將膜上未反應(yīng)的位點(diǎn)封閉起來以抑制抗體的非特異性吸附； （4）用固定在膜上的蛋白質(zhì)作為抗原，與對(duì)應(yīng)的非標(biāo)記抗體（一抗）結(jié)合； （5）洗去未結(jié)合的一抗，加入酶耦聯(lián)或放射性同位素標(biāo)記的二抗，通過顯色或放射性自顯影法檢測(cè)凝膠中的蛋白成分。37.參考答案： SDS上樣緩沖液成分有：SDS、還原試劑（二硫蘇糖醇或β-巰基乙醇）、溴酚藍(lán)和甘油。 （1）SDS：是一種陰離子去污劑，作為變性劑和助溶劑。SDS使蛋白質(zhì)本身的電荷變化被屏蔽，氫鍵被斷裂，疏水相互作用被取消，多肽被去折疊（二級(jí)結(jié)構(gòu)被破壞），最后形成橢球形。如果不加，會(huì)使電泳條帶出現(xiàn)拖尾、紋理現(xiàn)象； （2）還原試劑：使半胱氨酸殘基之間的二硫鍵斷裂，蛋白質(zhì)完全去折疊，只根據(jù)亞基分子質(zhì)量分離。如果不加，在高分子質(zhì)量范圍會(huì)產(chǎn)生“鬼帶”； （3）溴酚藍(lán)：指示劑，用于指示樣品的遷移過程，如果不加，則無法看到樣品的遷移過程； （4）甘油：使樣品沉入孔底。如果不加，會(huì)使樣品漂移影響電泳效果。38.參考答案：D39.參考答案： （1）引物長(zhǎng)度：10～30Nt； （2）堿基分布：A、T、G、C隨機(jī)分布； （3）G+C含量：40%～60%Tm=4（G+C）+2（A+T）； （4）引物之間：避免3′端互補(bǔ)； （5）引物自身：不應(yīng)形成二級(jí)結(jié)構(gòu)； （6）引物3′末端堿基：最好選T、C、G，不選A； （7）引物5′末端堿基：可不與模板DNA互補(bǔ)。40.參考答案：細(xì)胞內(nèi)傳遞信息41.參考答案：A42.參考答案：原核基因組由一條環(huán)狀雙鏈DNA組成；只有一個(gè)復(fù)制起始點(diǎn)；大多數(shù)結(jié)構(gòu)基因組成操縱子結(jié)構(gòu)；結(jié)構(gòu)基因無重疊現(xiàn)象；無內(nèi)含子，轉(zhuǎn)錄后不需要剪接；基因組中編碼區(qū)大于非編碼區(qū)；重復(fù)基因少，結(jié)構(gòu)基因一般為單拷貝；有編碼同工酶的等基因；基因組中存在可移動(dòng)的DNA序列；非編碼區(qū)主要是調(diào)控序列。每一種真核生物都有一定的染色體數(shù)目；遠(yuǎn)大于原核基因組，結(jié)構(gòu)復(fù)雜，基因數(shù)龐大；真核生物基因轉(zhuǎn)錄為單順反子；有大量重復(fù)序列；真核基因?yàn)閿嗔鸦颍环蔷幋a序列多于編碼序列；功能相關(guān)基因構(gòu)成各種基因家族。43.參考答案：帽子；ploy（A）尾44.參考答案： （1）DNA元件：具有調(diào)節(jié)功能的DNA序列原核：?jiǎn)?dòng)序列，操縱序列。 真核：順式作用元件，啟動(dòng)子，增強(qiáng)子，抑制子。 （2）調(diào)節(jié)蛋白： 原核：阻遏蛋白：負(fù)性調(diào)節(jié)；激活蛋白：正性調(diào)節(jié)。 真核：轉(zhuǎn)錄因子——基本轉(zhuǎn)錄因子、激活因子、抑制因子。 （3）RNA聚合酶： RNA聚合酶主要是通過識(shí)別與結(jié)合啟動(dòng)子，參與基因轉(zhuǎn)錄起始調(diào)控。45.參考答案：B46.參考答案：SDS是一種陰離子去污劑，作為變性劑和助溶性試劑，它能斷裂分子內(nèi)和分子間的氫鍵，使分子去折疊，破壞蛋白質(zhì)分子的二級(jí)和三級(jí)結(jié)構(gòu)。強(qiáng)還原劑，如β-巰基乙醇和二硫蘇糖醇則能使半胱氨酸殘基之間的二硫鍵斷裂。在樣品和凝膠中加入SDS和還原劑后，分子被解聚為組成它們的多肽鏈。解聚后的氨基酸側(cè)鏈與SDS充分結(jié)合形成帶負(fù)電荷的蛋白質(zhì)-SDS膠束，所帶的負(fù)電荷大大超過了蛋白質(zhì)分子原有的電荷量，這就消除了不同分子之間原有的電荷差異。蛋白質(zhì)-SDS膠束在水溶液中的形狀像一個(gè)長(zhǎng)橢圓棒，橢圓棒的短軸對(duì)不同的蛋白質(zhì)-SDS膠束基本上是相同的。但長(zhǎng)軸的長(zhǎng)度與亞基分子質(zhì)量的大小成正比。因此這種膠束在SDS系統(tǒng)中的電泳遷移率不再受蛋白質(zhì)原有電荷的影響，而主要取決于橢圓棒的長(zhǎng)軸的長(zhǎng)度，即蛋白質(zhì)或亞基分子質(zhì)量的大小。47.參考答案：正確48.參考答案：排除Rnase的污染49.參考答案： （1）檢測(cè)目標(biāo)物質(zhì)不同：Southern印跡雜交檢測(cè)的是DNA，Northern印跡雜交檢測(cè)是RNA，Western免疫印跡雜交檢測(cè)的是蛋白質(zhì)。 （2）所用凝膠不同：Southern印跡雜交和Northern印跡雜交用的是瓊脂糖凝膠，而Western免疫印跡用的是SDS-聚丙烯酰胺凝膠。 （3）是否變性電泳不同：Southern印跡雜交是跑非變性瓊脂糖凝膠電泳，電泳之后在凝膠上用NaOH處理使DNA變性，然后轉(zhuǎn)印；Northern印跡雜交實(shí)在電泳上