河南省鄭州一〇六中學(xué)2025屆高三壓軸卷生物試卷考生須知：1．全卷分選擇題和非選擇題兩部分，全部在答題紙上作答。選擇題必須用2B鉛筆填涂；非選擇題的答案必須用黑色字跡的鋼筆或答字筆寫(xiě)在“答題紙”相應(yīng)位置上。2．請(qǐng)用黑色字跡的鋼筆或答字筆在“答題紙”上先填寫(xiě)姓名和準(zhǔn)考證號(hào)。3．保持卡面清潔，不要折疊，不要弄破、弄皺，在草稿紙、試題卷上答題無(wú)效。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求）1．研究人員對(duì)某植物進(jìn)行不同程度的遮光處理，一段時(shí)間后測(cè)定葉片的各項(xiàng)生理特征，結(jié)果如下表所示。下列相關(guān)敘述正確的是（）A．用層析液提取葉片光合色素時(shí)，加入碳酸鈣能保護(hù)葉綠素B．遮光處理后，該植物的根系細(xì)胞從土壤中吸收的Mg2+減少C．與75%遮光組植株相比，90%遮光組植株葉肉細(xì)胞內(nèi)C5的生成速率較高D．若要探究溫度對(duì)該植物光合速率的影響，適宜在遮光75%的條件下進(jìn)行2．細(xì)胞是生物體結(jié)構(gòu)與功能的基本單位。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A．抗體的合成和分泌需要多種細(xì)胞結(jié)構(gòu)參與 B．核膜與細(xì)胞膜可以通過(guò)高爾基體直接相連C．垂體細(xì)胞膜表面具有結(jié)合甲狀腺激素的受體 D．真核細(xì)胞具有由蛋白質(zhì)纖維組成的網(wǎng)架結(jié)構(gòu)3．下列與蛋白質(zhì)合成相關(guān)的敘述，正確的是（）A．一個(gè)DNA分子轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生兩個(gè)RNA分子B．一個(gè)核糖體與mRNA的結(jié)合部位會(huì)形成兩個(gè)tRNA的結(jié)合位點(diǎn)C．一個(gè)mRNA分子可以結(jié)合多個(gè)核糖體產(chǎn)生多種多肽鏈D．一個(gè)核糖體上可以同時(shí)合成多條多肽鏈4．下列關(guān)于“α?淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的檢測(cè)”實(shí)驗(yàn)的敘述，錯(cuò)誤的是（）A．淀粉溶液過(guò)柱時(shí)控制流速，是為了使底物在反應(yīng)柱中反應(yīng)充分B．洗滌反應(yīng)柱時(shí)控制流速，是為了防止洗去已固定的α?淀粉酶C．本實(shí)驗(yàn)中的α?淀粉酶從枯草桿菌中提取且相對(duì)較耐高溫D．洗滌后的反應(yīng)柱應(yīng)高溫滅菌后保存，避免微生物分解反應(yīng)柱中的酶5．下列有關(guān)遺傳與育種的敘述，正確的是（）A．基因工程的原理是基因重組，通過(guò)轉(zhuǎn)基因技術(shù)可以培育出新物種B．常規(guī)育種都需要通過(guò)雜交、選擇、純合化等過(guò)程C．花藥離體培養(yǎng)法需要用適宜的激素處理才能獲得單倍體幼苗D．秋水仙素處理萌發(fā)的種子或幼苗能使染色體組加倍，一定能得到純合子6．圖1為某森林生態(tài)系統(tǒng)部分生物關(guān)系示意圖，圖2為該生態(tài)系統(tǒng)中第二營(yíng)養(yǎng)級(jí)(甲)和第三營(yíng)養(yǎng)級(jí)(乙)的能量流動(dòng)示意圖，其中a～e表示能量值，下列有關(guān)敘述正確的是（）A．該生態(tài)系統(tǒng)的分解者主要是大型真菌B．雜食性鳥(niǎo)位于第三和第四營(yíng)養(yǎng)級(jí)C．乙糞便中的能量屬于c中能量的一部分D．a(chǎn)+e表示甲生長(zhǎng)發(fā)育和繁殖的能量二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）如圖表示某自然生態(tài)系統(tǒng)一年中能量的輸入和散失的狀況。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：（1）生態(tài)系統(tǒng)的能量流動(dòng)是指______，流經(jīng)該生態(tài)系統(tǒng)的總能量是_____________（用數(shù)字表示）。（2）該生態(tài)系統(tǒng)中用于生產(chǎn)者生長(zhǎng)、發(fā)育和繁殖的能量為_(kāi)____________,該生態(tài)系統(tǒng)積累在有機(jī)物中的能量為_(kāi)______。（均用數(shù)字表示）（3）分解者呼吸釋放的能量主要來(lái)自于_____________中的有機(jī)物。8．（10分）隨著糧食需求量的增加和氣候變化影響的不斷加大，水稻的干旱脆弱性日益受到關(guān)注。據(jù)媒體報(bào)道，現(xiàn)在某理化研究所可持續(xù)資源科學(xué)中心正在開(kāi)發(fā)一種全新的轉(zhuǎn)基因水稻，其中導(dǎo)入了來(lái)自雜草擬南芥的GOLS2基因，使其更耐旱。GOLS2基因表達(dá)可提高植物細(xì)胞內(nèi)糖類(lèi)含量，降低植物葉片氣孔開(kāi)度?？蒲腥藛T將擬南芥GOLS2基因?qū)氩⒄系剿救旧w上。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：（1）從cDNA文庫(kù)中獲得的目的基因__________（填“含有”或“不含有”）啟動(dòng)子和終止子。通過(guò)PCR技術(shù)獲取GOLS2基因的原理是________________，需設(shè)計(jì)____________種引物。（2）GOLS2基因可以整合到水稻染色體上的遺傳學(xué)物質(zhì)基礎(chǔ)是______________。需將GOLS2基因拼接在運(yùn)載體上才能成功轉(zhuǎn)化，轉(zhuǎn)化指___________________。（3）基因表達(dá)載體的組成除了GOLS2因外，還必須有___________________等；在構(gòu)建基因表達(dá)載體過(guò)程中，常把兩個(gè)啟動(dòng)子串聯(lián)在一起形成雙啟動(dòng)子，加在GOLS2因上游，雙啟動(dòng)子的作用可能是__________________________，進(jìn)一步提高細(xì)胞內(nèi)糖類(lèi)含量。9．（10分）ACC合成酶是乙烯合成過(guò)程中的關(guān)鍵酶，由ACC合成酶基因（簡(jiǎn)稱(chēng)A基因）控制合成。將A基因反向連接在啟動(dòng)子和終止子間可構(gòu)成反義ACC合成酶基因（A1基因），轉(zhuǎn)A1基因番茄的后熟過(guò)程變慢，利于番茄的儲(chǔ)藏和運(yùn)輸。請(qǐng)回答：（1）從番茄的果肉細(xì)胞中提取RNA，利用RT－PCR獲取A基因，即利用RNA和PCR技術(shù)獲取目的基因。利用RT－PCR獲取A基因所需要的酶主要有___________。在A基因擴(kuò)增過(guò)程中需要特定的引物，該引物的作用是_____________________________。（2）S1和S2為A基因和A1基因的特異性啟動(dòng)子，S2在番茄果肉細(xì)胞內(nèi)起作用，S1在除果肉細(xì)胞外的其他細(xì)胞內(nèi)起作用。在構(gòu)建轉(zhuǎn)A1基因表達(dá)載體時(shí)，啟動(dòng)子應(yīng)選擇____________，不選另一個(gè)的理由是___________________。A1基因的表達(dá)元件包括啟動(dòng)子、終止子以及反向連接在兩者之間的A基因，若用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將此元件整合到番茄細(xì)胞的染色體DNA上，則應(yīng)將此元件應(yīng)構(gòu)建在Ti質(zhì)粒的____________中。（3）在檢測(cè)番茄細(xì)胞的染色體DNA上是否插入了A1基因時(shí)，__________（填“能”“不能”）用放射性物質(zhì)標(biāo)記的A基因做探針進(jìn)行檢測(cè)，理由是________________________。檢測(cè)表明，與非轉(zhuǎn)基因番茄相比，轉(zhuǎn)A1基因蕃茄的果肉細(xì)胞內(nèi)乙烯含量下降，機(jī)理是______________________________。10．（10分）微生物在自然界中無(wú)處不在，隨人類(lèi)對(duì)微生物認(rèn)識(shí)的加深，對(duì)其利用越來(lái)越廣泛。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：（1）生活中人們利用酵母菌、醋酸菌分別釀制果酒、果醋，與酵母菌相比，醋酸菌在結(jié)構(gòu)上最明顯的特點(diǎn)是____________。給予適宜的條件，即使沒(méi)有經(jīng)過(guò)產(chǎn)格的滅菌過(guò)程，也能夠獲得果酒、果醋，這是因?yàn)開(kāi)___________________________。（2）在制作腐乳時(shí)，需將長(zhǎng)滿(mǎn)毛霉的豆腐用鹽腌制，其作用是___________和____________。（3）在工業(yè)生產(chǎn)中，可從被石油污染的土壤中分離出能分解石油的細(xì)菌。在分離時(shí)需用_______做唯一碳源的培養(yǎng)基培養(yǎng)土壤中提取的細(xì)菌，可采用的接種方法是___________。（4）經(jīng)分離得到的菌種，通常再進(jìn)行_______處理才可能得到更高效分解石油的微生物。為了篩選出高效菌株，可比較單菌落周?chē)纸馊Φ拇笮。纸馊Υ笳f(shuō)明該菌株的降解能力_________________。11．（15分）以一個(gè)有正常葉舌的小麥純系種子為材料，進(jìn)行輻射處理。處理后將種子單獨(dú)隔離種植，發(fā)現(xiàn)其中有兩株(甲、乙)的后代分離出無(wú)葉舌突變株，且正常株與突變株的分離比例均接近3∶1，這些葉舌突變型都能真實(shí)遺傳。請(qǐng)回答：（1）輻射處理正常葉舌的小麥純系種子，其后代分離出無(wú)葉舌突變株，該育種方式是____________。該過(guò)程需要用到大量的種子，其原因是基因突變具有__________和低頻性。甲和乙的后代均出現(xiàn)3∶1的分離比，表明輻射處理最可能導(dǎo)致甲、乙中各有_______（填“一”“二”或“多”）個(gè)基因發(fā)生突變。（2）無(wú)葉舌突變基因在表達(dá)時(shí)，與基因啟動(dòng)部位結(jié)合的酶是______________。如圖是正常葉舌基因中的部分堿基序列，其編碼的蛋白質(zhì)中部分氨基酸序列為“……甲硫氨酸—絲氨酸—谷氨酸—丙氨酸—天冬氨酸—酪氨酸……”（甲硫氨酸的密碼子是AUG，絲氨酸的密碼子是UCU、UCC、UCA、UCG，酪氨酸的密碼子是UAC、UAU，終止密碼子是UAA、UAG、UGA）。研究發(fā)現(xiàn)，某突變株的形成是由于該片段方框2處的C∥G替換成了A∥T，結(jié)果導(dǎo)致基因表達(dá)時(shí)________。（3）將甲株的后代種植在一起，讓其隨機(jī)傳粉，只收獲正常株上所結(jié)的種子，若每株的授粉率和結(jié)籽率相同，則其中無(wú)葉舌突變類(lèi)型的比例為_(kāi)__________。（4）現(xiàn)要研究甲、乙兩株葉舌突變是發(fā)生在一對(duì)基因上，還是分別發(fā)生在獨(dú)立遺傳的兩對(duì)基因上，可選甲、乙后代的無(wú)葉舌突變株進(jìn)行單株雜交，統(tǒng)計(jì)F1的表現(xiàn)型及比例進(jìn)行判斷：①若___________________________________，則甲乙兩株葉舌突變是發(fā)生在一對(duì)基因上；②若___________________________________，則甲乙兩株葉舌突變是發(fā)生在兩對(duì)基因上。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求）1、D【解析】

影響光合速率的外因包括：光照強(qiáng)度、二氧化碳濃度、溫度等；內(nèi)因包括色素含量、酶數(shù)量等。【詳解】A、層析液用于分離色素，無(wú)水乙醇用于色素的提取，A錯(cuò)誤；B、葉綠素的合成需要Mg2+，圖中看出遮光處理后，葉綠素的含量增加，因此植物的根系細(xì)胞從土壤中吸收的Mg2+增加，B錯(cuò)誤；C、與75%遮光組植株相比，90%遮光組植株葉肉細(xì)胞內(nèi)C5的生成速率較低，C錯(cuò)誤；D、圖中顯示75%的遮光條件比較適宜，探究溫度對(duì)該植物光合速率的影響時(shí)，無(wú)關(guān)變量保持相同且適宜，因此光照強(qiáng)度這種無(wú)關(guān)變量應(yīng)在遮光75%的條件下進(jìn)行，D正確。故選D。2、B【解析】

抗體為分泌蛋白，其合成和分泌需要多種細(xì)胞器的協(xié)調(diào)配合；內(nèi)質(zhì)網(wǎng)能有效地增加細(xì)胞內(nèi)的膜面積，其外連細(xì)胞膜，內(nèi)連核膜，將細(xì)胞中的各種結(jié)構(gòu)連成一個(gè)整體，具有承擔(dān)細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)運(yùn)輸?shù)淖饔茫幌虑鹉X分泌的促甲狀腺激素釋放激素能促進(jìn)垂體分泌促甲狀腺激素，垂體分泌促甲狀腺激素能促進(jìn)甲狀腺分泌甲狀腺激素．而甲狀腺激素對(duì)下丘腦和垂體有負(fù)反饋?zhàn)饔?，?dāng)甲狀腺激素分泌過(guò)多時(shí)，會(huì)抑制促甲狀腺激素釋放激素和促甲狀腺激素的分泌，進(jìn)而減少甲狀腺激素的分泌?！驹斀狻緼、抗體屬于分泌蛋白，需要核糖體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體、線(xiàn)粒體等細(xì)胞器分工合作，這些是在細(xì)胞核的控制下完成的，故其合成和分泌需要多種細(xì)胞結(jié)構(gòu)參與，A正確；B、核膜與細(xì)胞膜通過(guò)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜相連，B錯(cuò)誤；C、甲狀腺激素可通過(guò)負(fù)反饋?zhàn)饔脤?duì)垂體進(jìn)行調(diào)節(jié)，故垂體細(xì)胞膜表面有結(jié)合甲狀腺激素的受體，C正確；D、真核細(xì)胞的細(xì)胞骨架是由蛋白質(zhì)纖維組成的網(wǎng)架結(jié)構(gòu)，能保持細(xì)胞形態(tài)，D正確。故選B?！军c(diǎn)睛】本題較為綜合，熟記細(xì)胞的結(jié)構(gòu)及相關(guān)物質(zhì)的功能是解答本題的關(guān)鍵。3、B【解析】

1、基因控制蛋白質(zhì)的合成，包括轉(zhuǎn)錄和翻譯兩個(gè)階段。轉(zhuǎn)錄是以DNA的一條鏈為模板，利用四種游離的核糖核苷酸，在RNA聚合酶的作用下合成RNA的過(guò)程。翻譯的模板是mRNA，原料是氨基酸，產(chǎn)物為蛋白質(zhì)。2、mRNA在細(xì)胞核內(nèi)通過(guò)轉(zhuǎn)錄過(guò)程形成，由核孔進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)，與核糖體結(jié)合，進(jìn)行翻譯過(guò)程。人教版教材中，mRNA與核糖體結(jié)合的部位是2個(gè)密碼子，tRNA上有反密碼子，與密碼子互補(bǔ)配對(duì)，核糖體因此與mRNA的結(jié)合部位會(huì)形成兩個(gè)tRNA的結(jié)合位點(diǎn)?！驹斀狻緼、一個(gè)DNA分子含有多個(gè)基因，因此能轉(zhuǎn)錄出多種RNA，A錯(cuò)誤；B、由分析可知，核糖體與mRNA結(jié)合部位有2個(gè)密碼子，核糖體與mRNA的結(jié)合部位會(huì)形成2個(gè)tRNA結(jié)合位點(diǎn)，B正確；C、一個(gè)mRNA分子上可以相繼結(jié)合多個(gè)核糖體，合成多條相同的多肽鏈，C錯(cuò)誤；D、一個(gè)核糖體上一次只能合成一條多肽鏈，D錯(cuò)誤。故選B?！军c(diǎn)睛】本題主要考查遺傳信息的轉(zhuǎn)錄和翻譯，要求考生熟記相關(guān)知識(shí)點(diǎn)，掌握基因表達(dá)過(guò)程，能準(zhǔn)確識(shí)記和理解相關(guān)內(nèi)容，再結(jié)合選項(xiàng)作出準(zhǔn)確的判斷。4、D【解析】

本題考查α?淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的檢測(cè)實(shí)驗(yàn)的相關(guān)知識(shí)點(diǎn)，回憶固定α?淀粉酶的實(shí)驗(yàn)原理、過(guò)程等，注意幾個(gè)流速控制的目的，據(jù)此答題。【詳解】A、淀粉溶液過(guò)柱時(shí)控制流速，是為了使底物在反應(yīng)柱中反應(yīng)充分，使后面檢測(cè)效果明顯，A正確；B、洗滌反應(yīng)柱時(shí)控制流速，是為了讓塑料管中的溶液流出并防止洗去已固定的α?淀粉酶，B正確；C、本實(shí)驗(yàn)中的α?淀粉酶從枯草桿菌中提取且相對(duì)較耐高溫，C正確；D、洗滌后的反應(yīng)柱高溫滅菌的話(huà)，會(huì)使反應(yīng)柱中的酶喪失活性，D錯(cuò)誤。故選D。5、C【解析】

幾種常考的育種方法：雜交育種誘變育種單倍體育種多倍體育種方法

（1）雜交→自交→選優(yōu)（2）雜交

輻射誘變、激光誘變、化學(xué)藥劑處理花藥離體培養(yǎng)、秋水仙素誘導(dǎo)加倍

秋水仙素處理萌發(fā)的種子或幼苗原

理

基因重組基因突變

染色體變異（染色體組先成倍減少，再加倍，得到純種）

染色體變異（染色體組成倍增加）優(yōu)

點(diǎn)不同個(gè)體的優(yōu)良性狀可集中于同一個(gè)體上提高變異頻率，出現(xiàn)新性狀，大幅度改良某些性狀，加速育種進(jìn)程明顯縮短育種年限營(yíng)養(yǎng)器官增大、提高產(chǎn)量與營(yíng)養(yǎng)成分缺

點(diǎn)

時(shí)間長(zhǎng)，需要及時(shí)發(fā)現(xiàn)優(yōu)良性狀

有利變異少，需要處理大量實(shí)驗(yàn)材料，具有不確定性

技術(shù)復(fù)雜，成本高

技術(shù)復(fù)雜，且需要與雜交育種配合；在動(dòng)物中難以實(shí)現(xiàn)舉例高桿抗病與矮桿抗病小麥雜產(chǎn)生矮桿抗病品種高產(chǎn)量青霉素菌株的育成抗病植株的育成三倍體西瓜、八倍體小黑麥【詳解】A、基因工程的原理是基因重組，通過(guò)轉(zhuǎn)基因技術(shù)可以培育出具有優(yōu)良性狀的作物新品種，但仍屬于同一物種，A錯(cuò)誤；B、雜交育種不都要通過(guò)雜交、選擇、純合化等手段培養(yǎng)出新品種，如所需優(yōu)良品種為隱性性狀，一旦該性狀出現(xiàn)后選出即可，B錯(cuò)誤；C、花藥離體培養(yǎng)過(guò)程中，需要用適宜的植物激素處理才能誘導(dǎo)花藥脫分化、再分化過(guò)程，進(jìn)而獲得單倍體幼苗，C正確；D、秋水仙素處理萌發(fā)的種子或幼苗能使染色體組加倍，不一定能得到純合子，如處理材料為Aa，則AAaa仍為雜合子，D錯(cuò)誤。故選C。6、C【解析】

據(jù)圖分析：圖1中：草本植物、喬木等為生產(chǎn)者，蝗蟲(chóng)、蜘蛛、雜食性鳥(niǎo)等為消費(fèi)者。圖2中：甲表示第二營(yíng)養(yǎng)級(jí)的同化量，e表示第二營(yíng)養(yǎng)級(jí)用于呼吸散失的能量，a表示流向第三營(yíng)養(yǎng)級(jí)的能量，b表示第三營(yíng)養(yǎng)級(jí)用于呼吸散失的能量?！驹斀狻緼、該生態(tài)系統(tǒng)的分解者有大型真菌和跳蟲(chóng)等，A錯(cuò)誤；B、雜食性鳥(niǎo)分別位于第二、第三和第四營(yíng)養(yǎng)級(jí)，B錯(cuò)誤；C、乙糞便中的能量沒(méi)有被乙同化，屬于甲同化進(jìn)入分解者部分，即c中能量的一部分，C正確；D、a+c表示甲生長(zhǎng)發(fā)育和繁殖的能量，D錯(cuò)誤。故選C。二、綜合題：本大題共4小題7、生態(tài)系統(tǒng)中能量的輸入、傳遞、轉(zhuǎn)化和散失的過(guò)程④④﹣①④﹣①﹣②﹣③動(dòng)植物的遺體和動(dòng)物的排遺物【解析】

1、能量流動(dòng)的概念：生態(tài)系統(tǒng)中能量的輸入、傳遞、轉(zhuǎn)化和散失的過(guò)程。

2、一個(gè)營(yíng)養(yǎng)級(jí)的能量的來(lái)源和去路：

（1）來(lái)源：生產(chǎn)者的能量主要來(lái)自太陽(yáng)能，其余各營(yíng)養(yǎng)級(jí)的能量來(lái)自上一營(yíng)養(yǎng)級(jí)所同化的能量

（2）去路：自身呼吸消耗，轉(zhuǎn)化為其他形式的能量和熱量；流向下一營(yíng)養(yǎng)級(jí)；遺體、殘骸、糞便等中的能量被分解者利用；未被利用：包括生物每年的積累量，也包括動(dòng)植物遺體、殘骸以化學(xué)燃料形式被存儲(chǔ)起來(lái)的能量?！驹斀狻浚?）根據(jù)能量流動(dòng)的概念可知，能量流動(dòng)是指生態(tài)系統(tǒng)中能量的輸入、傳遞、轉(zhuǎn)化和散失的過(guò)程。流經(jīng)該生態(tài)系統(tǒng)的總能量是指生產(chǎn)者通過(guò)光合作用固定的總能量，即④。（2）生產(chǎn)者的同化量=自身呼吸散失的能量+用于自身生長(zhǎng)、發(fā)育和繁殖的能量。所以該生態(tài)系統(tǒng)中用于生產(chǎn)者生長(zhǎng)、發(fā)育和繁殖的能量為④﹣①,該生態(tài)系統(tǒng)積累在有機(jī)物中的能量為生產(chǎn)者的同化量-各種生物呼吸散失的能量=④﹣①﹣②﹣③。（3）分解者分解利用的是動(dòng)植物遺體殘骸以及動(dòng)物排遺物中的能量，所以分解者呼吸釋放的能量主要來(lái)自于動(dòng)植物的遺體和動(dòng)物的排遺物中的有機(jī)物。【點(diǎn)睛】本題考查能量流動(dòng)的相關(guān)過(guò)程，對(duì)能量流動(dòng)過(guò)程中的各環(huán)節(jié)能量去向的理解是解題的關(guān)鍵。8、不含有DNA雙鏈復(fù)制2不同生物DNA分子的基本結(jié)構(gòu)相同目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過(guò)程標(biāo)記基因、啟動(dòng)子、終止子保證目的基因的高效轉(zhuǎn)錄（表達(dá)）【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。

（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。

（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。

（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因-DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA-分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲(chóng)鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。【詳解】（1）cDNA基因文庫(kù)中的DNA是通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的，所以從cDNA文庫(kù)中獲得的目的基因不含有啟動(dòng)子和終止子。通過(guò)PCR技術(shù)獲取GOLS2基因的原理是DNA雙鏈復(fù)制，需設(shè)計(jì)2種引物。（2）由于不同生物DNA分子的基本結(jié)構(gòu)相同，所以GOLS2基因可以整合到水稻染色體上?；蚬こ讨械霓D(zhuǎn)化指的是目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過(guò)程。（3）基因表達(dá)載體的組成除了GOLS2基因外，還必須有標(biāo)記基因、啟動(dòng)子、終止子等；在構(gòu)建基因表達(dá)載體過(guò)程中，常把兩個(gè)啟動(dòng)子串聯(lián)在一起形成雙啟動(dòng)子，加在GOLS2基因上游，雙啟動(dòng)子的作用可能是保證目的基因的高效轉(zhuǎn)錄（表達(dá)），進(jìn)一步提高細(xì)胞內(nèi)糖類(lèi)含量?！军c(diǎn)睛】本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理、基本步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題。9、逆轉(zhuǎn)錄酶和Taq酶定位A基因的位置，與模板鏈結(jié)合并為子鏈的延伸提供起點(diǎn)S2S1不在果肉細(xì)胞內(nèi)起作用，番茄果實(shí)不會(huì)后熟；S1在番茄植株細(xì)胞內(nèi)起作用后會(huì)導(dǎo)致番茄植株的乙烯合減少，影響番茄植株的正常生理活動(dòng)T-DNA不能蕃茄細(xì)胞內(nèi)本身有A基因，無(wú)論是否插了A1基因都能與探針雜交形成雜交帶轉(zhuǎn)基因番茄細(xì)胞中存有A基因與A1基因，二者轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的mRA能雜交形成雙鏈，導(dǎo)致ACC合成酶的合成受阻，從而使乙烯的合成量降低【解析】

基因工程的操作步驟：1.提取目的基因、2.構(gòu)建基因表達(dá)載體、3.將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞、4.目的基因的檢測(cè)和鑒定。PCR技術(shù)可擴(kuò)增目的基因，該技術(shù)需要耐高溫的DNA聚合酶和引物，其中引物的作用是定位要擴(kuò)增DNA的區(qū)段，與模板鏈結(jié)合并為子鏈的延伸提供起點(diǎn)?！驹斀狻浚?）由RNA經(jīng)RT-PCR技術(shù)獲取了cDNA，進(jìn)而獲得A因，故RT-PCR技術(shù)包含了逆轉(zhuǎn)錄和PCR兩個(gè)過(guò)程，因此需要逆轉(zhuǎn)錄酶和Taq酶。引物和模板結(jié)合后，定位了要擴(kuò)增DNA的區(qū)段，即定位A基因。由于Taq酶只能從單鏈的3′端延伸，因此引物提供了子鏈的延伸起點(diǎn)。（2）S1在番茄的植株細(xì)胞內(nèi)起作用，不在果肉細(xì)胞內(nèi)起作用，番茄果實(shí)不會(huì)后熟，因此啟動(dòng)子應(yīng)選擇S2。同時(shí)也考慮到S1在番茄植株內(nèi)起作用后會(huì)導(dǎo)致番茄植株的乙烯合減少，影響番茄植株的正常生理活動(dòng)。T-DNA是Ti質(zhì)粒的可轉(zhuǎn)移區(qū)段，表達(dá)元件應(yīng)構(gòu)建在Ti質(zhì)粒的T-DNA上。（3）茄細(xì)胞內(nèi)本身有A基因，無(wú)論是否插入了A1基因，A基因A1基因都能與探針雜交形成雜交帶，因此不能用放射性物質(zhì)標(biāo)記的A1基因做探針進(jìn)行檢測(cè)。（4）在轉(zhuǎn)A1基因的番茄果肉內(nèi)，同時(shí)存有A基因和A1基因，二者轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的兩種mRNA的堿基互補(bǔ)，會(huì)通過(guò)核酸分子雜交雜交形成雙鏈，從而導(dǎo)致ACC合成酶的合成受阻，最終使乙烯的合成量與含量下降，使番茄的后熟過(guò)程變慢?！军c(diǎn)睛】本題解題關(guān)鍵是識(shí)記基因工程的操作步驟，比較PCR技術(shù)與體內(nèi)DNA復(fù)制的異同，掌握農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法的原理和特點(diǎn)，結(jié)合教材相關(guān)知識(shí)點(diǎn)，用科學(xué)規(guī)范的語(yǔ)言答題。10、無(wú)核膜包被的細(xì)胞核酵母菌、醋酸菌的發(fā)酵產(chǎn)物會(huì)抑制其他微生物的生長(zhǎng)析出豆腐中的水分防止微生物的生長(zhǎng)石油稀釋涂布平板法和平板劃線(xiàn)法誘變強(qiáng)【解析】

選擇培養(yǎng)基的制作方法(1)在培養(yǎng)基全部營(yíng)養(yǎng)成分具備的前提下，加入物質(zhì)：依據(jù)某些微生物對(duì)某些物質(zhì)的抗性，在培養(yǎng)基中加入某些物質(zhì)，以抑制不需要的微生物，促進(jìn)所需要的微生物生長(zhǎng)，如培養(yǎng)基中加入高濃度食鹽時(shí)可抑制多種細(xì)菌的生長(zhǎng)，但不影響金黃色葡萄球菌的生長(zhǎng)，從而可將該菌分離出來(lái)；而在培養(yǎng)基中加入青霉素時(shí)可抑制細(xì)菌、放線(xiàn)菌的生長(zhǎng)，從而分離得到酵母菌和霉菌。(2)通過(guò)改變培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)成分達(dá)到分離微生物的目的：培養(yǎng)基中缺乏氮源時(shí)，可分離自生固氮微生物，非自生固氮微生物因缺乏氮源而無(wú)法生存；培養(yǎng)基中若缺乏有機(jī)碳源則異養(yǎng)微生物無(wú)法生存，而自養(yǎng)微生物可利用空氣中的CO2制造有機(jī)物生存。(3)利用培養(yǎng)基的特定化學(xué)成分分離特定微生物：如當(dāng)石油是唯一碳源時(shí)，可抑制不能利用石油的微生物的生長(zhǎng)，使能夠利用石油的微生物生存，從而分離出能消除石油污染的微生物。(4)通過(guò)某些特殊環(huán)境分離微生物：如在高鹽環(huán)境中可分離耐鹽菌，其他菌在鹽濃度高時(shí)易失水而不能生存；在高溫環(huán)境中可分離得到耐高溫的微生物，其他微生物在高溫環(huán)境中因酶失活而無(wú)法生存?！驹斀狻浚?）酵母菌為真核生物，醋酸菌為原核生物，醋酸菌在結(jié)構(gòu)上最明顯的特點(diǎn)是無(wú)核膜包被的細(xì)胞核。酵母菌、醋酸菌的發(fā)酵產(chǎn)物會(huì)抑制其他微生物的生長(zhǎng)，因此給予適宜的條件，即使沒(méi)有經(jīng)過(guò)產(chǎn)格的滅菌過(guò)程，也能夠獲得果酒、果醋。（2）將長(zhǎng)滿(mǎn)毛霉的豆腐用鹽腌制，其作用是析出豆腐中的水分和防止微生物的生長(zhǎng)（3）需要分離出能分解石油的細(xì)菌，因此應(yīng)將細(xì)菌培養(yǎng)在以石油為唯一碳源的培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)。接種方法有稀釋涂布平板法和平板劃線(xiàn)法。（4）為了獲得更高效分解石油的微生物，可對(duì)菌種進(jìn)行誘變處理，使其發(fā)生基因突變，然后從眾多的菌種中選擇出能高效分解石油的微生物，篩選過(guò)程中可采用比較單菌落周?chē)纸馊Φ拇笮?，分解圈大說(shuō)明該菌株的降解能力強(qiáng)?！军c(diǎn)睛】