農(nóng)業(yè)部2122號公告-7-2014 轉(zhuǎn)基因植物及其產(chǎn)品成分檢測 耐除草劑苜蓿J101及其衍生品種定性PCR方法_第1頁
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農(nóng)業(yè)部2122號公告一7—2014耐除草劑苜蓿J101及其衍生品種定性I農(nóng)業(yè)部2122號公告一7—20141農(nóng)業(yè)部2122號公告—7—2014耐除草劑苜蓿J101及其衍生品種定性PC本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了轉(zhuǎn)基因耐除草劑苜蓿J101轉(zhuǎn)化體特異性定性PCR檢測方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于轉(zhuǎn)基因耐除草劑苜蓿J101及其衍生品種，以及制品中J101轉(zhuǎn)化體成分的定性PCR農(nóng)業(yè)部1485號公告—4—2010轉(zhuǎn)基因植物及其產(chǎn)品成分檢測DNA提取和純化農(nóng)業(yè)部2031號公告—19-2013轉(zhuǎn)基因植物及其產(chǎn)品成分檢測抽樣NY/T672轉(zhuǎn)基因植物及其產(chǎn)品檢測通用要求根據(jù)耐除草劑苜蓿J101轉(zhuǎn)化體特異性序列設(shè)計(jì)特異性引物，對試樣進(jìn)行PCR擴(kuò)增。依據(jù)是否擴(kuò)增獲得預(yù)期的DNA片段，判斷樣品中是否含有耐除草劑苜2農(nóng)業(yè)部2122號公告—7-2014Acc-F:5'-GATCAGTGAACTTCGCAAAAcc-R:5'-GAGGGATGCTGCTACTTTJ101-F:5'-CACAACTAATTGTGTJ101-R:5'-GCTTTGGACTGAGAATTA3按NY/T672和農(nóng)業(yè)部2031號公告—7.5.1試樣PCR反應(yīng)終濃度水10XPCR緩沖液dNTPs混合溶液(各2.5mmol/L)10pmol/L下游引物總體積“一”表示體積不確定。如果PCR緩沖液中含有氯化鎂，則不加氯化鎂溶液。根據(jù)TaqDNA聚合酶的濃度確定其體積，并相應(yīng)調(diào)整水的體積，使反應(yīng)體系總體積達(dá)注：苜蓿內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)基因PCR檢測反應(yīng)體系中，上、下游引物分別為Acc-F和Acc-R;J101轉(zhuǎn)化體特異性序列PCR檢測反應(yīng)體系中，上、下游引物分別為J101-F和J101-R。7.5.2對照PCR反應(yīng)5農(nóng)業(yè)部2122號公告—7-2014(資料性附錄)61ATGCACTCATGTTGTAGTG61CTTTACAGTGACAATGTATA

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