使用說(shuō)明書(shū)第一部分ATP熒光法微生物（細(xì)菌總數(shù)）快速檢測(cè)系統(tǒng)簡(jiǎn)介1、系統(tǒng)原理………………32、組成部件及相關(guān)功能…………………33、應(yīng)用領(lǐng)域、特點(diǎn)、效益………………44、檢測(cè)注意事項(xiàng)及操作步驟…………….45、ATP快檢系統(tǒng)使用注意事項(xiàng)及故障排除…………….76、對(duì)應(yīng)關(guān)系曲線………….87、有關(guān)食品安全和衛(wèi)生檢測(cè)的問(wèn)答…….9第二部分ATP熒光法微生物（細(xì)菌總數(shù)）快速檢測(cè)系統(tǒng)使用說(shuō)明1、技術(shù)參數(shù)及性能…………………..…..122、儀器操作說(shuō)明……………………..…..132．1開(kāi)機(jī)、初始化…………………....132．2參數(shù)設(shè)置…………………….…...132．2．1選擇RLU方式……………….………...142．2．2選擇其它樣品名方式……………….….142．2．3設(shè)置文件類型………….……………….152．2．4設(shè)置日期時(shí)間…….….……….……….162．2．5設(shè)置檢測(cè)時(shí)間………………….……….162．2．6U盤(pán)格式化……………..162．3測(cè)試……….…….162．4查詢…………………….……….172．4．1查詢測(cè)試結(jié)果………………….……….172．4．1．1刪除測(cè)試結(jié)果…………………182．4．1．2刪除文件……………….……...182．4．2查詢文件信息…….…….192．4．3查詢儀器信息……….….192．4．4查詢電池電量…….…….192．4．5快速查詢……….……….192．5通訊………………213、上位機(jī)軟件………….….223．1軟件安裝…………223．2驅(qū)動(dòng)程序的安裝…………………253．3軟件啟動(dòng)…………273．4軟件運(yùn)行…………283．5樣品及回歸方程設(shè)定……………293．6“文件名”說(shuō)明…………………303．7文件、記錄操作和數(shù)據(jù)庫(kù)………314、電池充電………………..325、保修……………………..32第一部分ATP熒光法微生物（細(xì)菌總數(shù)）快速檢測(cè)系統(tǒng)簡(jiǎn)介1、系統(tǒng)原理螢火蟲(chóng)會(huì)發(fā)光是由于它能合成將化學(xué)物質(zhì)的化學(xué)能轉(zhuǎn)變?yōu)楣饽艿纳锎呋瘎灮鹣x(chóng)熒光素酶（簡(jiǎn)稱蟲(chóng)光素酶，luciferase）、蟲(chóng)熒光素（D-luciferin）以及所有細(xì)胞生物都產(chǎn)生的生物能量物質(zhì)—三磷酸腺苷（ATP）。在有氧的條件下，蟲(chóng)光素酶催化蟲(chóng)熒光素和ATP之間發(fā)生氧化反應(yīng)，形成氧化熒光素并發(fā)出熒光，其生化反應(yīng)式如下：ATP＋D-Luciferin＋O2Mg++AMP＋Oxyluciferin＋PPi＋CO2＋LightLuciferase上式表明，只要具備適當(dāng)條件，不僅螢火蟲(chóng)，即使在試管中也能發(fā)出熒光。當(dāng)反應(yīng)系統(tǒng)中，蟲(chóng)光素酶和蟲(chóng)熒光素處于過(guò)量的情況下，熒光的強(qiáng)弱取決于ATP的數(shù)量。以檢測(cè)含細(xì)菌的樣品為例，細(xì)菌細(xì)胞越多，ATP量越高，發(fā)出的熒光也就越強(qiáng)。由于蟲(chóng)光素酶對(duì)ATP的反應(yīng)非常靈敏，熒光強(qiáng)弱可通過(guò)熒光儀10~15秒內(nèi)計(jì)量。所以，在排除樣品中非細(xì)菌ATP干擾的情況下，通過(guò)熒光值就能確定樣品中細(xì)菌ATP的含量，從而確定細(xì)胞數(shù)量，因此，此系統(tǒng)為半定量快速檢測(cè)系統(tǒng)。2、組成部件及相關(guān)功能2.1試劑組，按檢測(cè)操作順序分為：（1）體細(xì)胞裂解試劑（TRA），能專一而有效地裂解樣品中的非細(xì)菌細(xì)胞（體細(xì)胞）并釋出ATP，然后，通過(guò)過(guò)濾比色杯底部的濾膜將其排除。（2）細(xì)菌細(xì)胞裂解試劑（XRA），能專一而有效地裂解樣品中細(xì)菌細(xì)胞并釋出ATP。（3）熒光反應(yīng)試劑組（LLR），能與樣品中的細(xì)菌ATP相互作用并有效地發(fā)出熒光。2.2微量熒光檢測(cè)儀（也稱微量光度計(jì)），準(zhǔn)確計(jì)量檢樣的熒光值。2.3可供100次測(cè)定的樣品預(yù)處理耗材。（1）放置過(guò)濾比色杯的杯架一個(gè)。（2）加壓器一個(gè)，用于加壓、排出體細(xì)胞ATP和試劑組。（3）帶濾膜熒光反應(yīng)比色杯100個(gè)，為熒光反應(yīng)容器。（4）專用無(wú)菌吸水紙，置于過(guò)濾比色杯架，吸收加壓后流出的液體。（5）帶密封圈專用無(wú)菌濃縮器，用于濃縮樣品。（6）自備微生物學(xué)無(wú)菌操作所需常規(guī)用具、器皿，樣品采集無(wú)菌、無(wú)ATP的容器、塑料袋、手套、鑷子等。3、應(yīng)用領(lǐng)域、特點(diǎn)、效益使用ATP熒光法細(xì)菌快檢儀實(shí)施食品、飲料、乳品加工等全程衛(wèi)生學(xué)監(jiān)測(cè)生產(chǎn)程序監(jiān)測(cè)內(nèi)容加工生產(chǎn)前生產(chǎn)設(shè)施清潔、消毒效果檢測(cè)，原、輔料細(xì)菌總數(shù)檢測(cè)，以保障原料質(zhì)量或明確原料品質(zhì)級(jí)別。加工生產(chǎn)過(guò)程中加工生產(chǎn)后廢棄物排放、環(huán)境、人員生產(chǎn)設(shè)備關(guān)鍵控制點(diǎn)（例如供水、通風(fēng)閥門(mén)）衛(wèi)生學(xué)監(jiān)測(cè)，影響乳品發(fā)酵飲料、酒類特殊微生物總數(shù)檢測(cè)。制成品污染細(xì)菌總數(shù)檢測(cè)。衛(wèi)生學(xué)及細(xì)菌總數(shù)檢測(cè)。4、檢測(cè)注意事項(xiàng)及操作步驟4.1試劑的準(zhǔn)備和注意事項(xiàng)：本公司提供的“ATP熒光法細(xì)菌總數(shù)快檢系統(tǒng)”所含試劑組和微量熒光檢測(cè)儀需匹配使用，不可用其它試劑替代。LLR試劑（含螢火蟲(chóng)熒光素酶和D-熒光素）應(yīng)在冰箱冷凍室-20℃中貯存，有效期6個(gè)月。LLR試劑組易變質(zhì)，室溫下不得超過(guò)8小時(shí)，在0-4℃有效期為3天。4.1.3試劑（LLR）在用于檢測(cè)前按規(guī)定低溫存放，檢測(cè)前20分鐘取出平衡到室溫方可應(yīng)用。如果超過(guò)有效期，應(yīng)棄用，重新購(gòu)置。體細(xì)胞裂解試劑（TRA）及細(xì)菌細(xì)胞裂解試劑（XRA）4℃保存。4.1.4檢測(cè)應(yīng)按微生物學(xué)常規(guī)無(wú)菌操作程序進(jìn)行，并切實(shí)注意螢火蟲(chóng)熒光素酶對(duì)ATP極其敏感，生物材料容易引起ATP交叉污染的特性，才能取得準(zhǔn)確、真實(shí)的檢測(cè)數(shù)據(jù)。4.2檢測(cè)樣品的預(yù)處理：（操作過(guò)程中需配戴一次性無(wú)菌手套）4.2.1固體樣品處理：無(wú)菌操作稱取25g被檢固體樣品溶于225mlPBS溶液（磷酸鹽緩沖液，GB/T4789.28-2003中3.22規(guī)定）中，混勻后抽取液體部分進(jìn)行測(cè)試。（注：溶于PBS后所測(cè)結(jié)果為每克樣品稀釋10倍后所得光值）4.2.2物表及操作臺(tái)面處理：取無(wú)菌棉簽,在棉簽頭部滴加4滴體細(xì)胞裂解試劑(TRA)，用此棉簽在被測(cè)處橫豎往返均勻涂擦,并隨之轉(zhuǎn)動(dòng)棉簽，采樣總面積100cm2。將棉簽置于1mlPBS溶液中搖勻，備用。4.2.3液體樣品處理：過(guò)分粘稠或顏色深重的樣品必須用PBS溶液做適當(dāng)稀釋后進(jìn)行檢測(cè)。液體樣品或以上樣品前處理后光值太小，可視需要適當(dāng)濃縮。液體被檢樣品含細(xì)菌細(xì)胞數(shù)若高于1000cfu/ml時(shí)可直接抽取50μl被檢樣品進(jìn)行測(cè)試。如果液體被檢樣品含細(xì)菌細(xì)胞數(shù)低于1000cfu/ml時(shí)應(yīng)進(jìn)行濃縮處理，濃縮方法如下：打開(kāi)專用濃縮器，用無(wú)菌鑷子取無(wú)菌過(guò)濾比色杯放入專用濃縮器內(nèi)，注意上下膠圈放好，以免濃縮樣品時(shí)發(fā)生泄露，擰緊濃縮器。用一次性無(wú)菌醫(yī)用針管抽取10ml或其整倍數(shù)的被檢樣品，接到專用濃縮器上進(jìn)行濃縮，用適當(dāng)?shù)膲毫従彽赝峦谱⑸淦鞯闹ù藭r(shí)被檢液體樣品中的細(xì)菌被過(guò)濾比色杯的微孔濾膜截留，液體部分通過(guò)濾膜被排出）直到注射器與濃縮器中的液體部分完全被推出，擰開(kāi)濃縮器，用消毒過(guò)的鑷子從濃縮器中取出過(guò)濾比色杯備用。4.3樣品檢測(cè)步驟：4.3.1.1打開(kāi)儀器電源前，拉開(kāi)儀器抽屜，確保抽屜小槽內(nèi)清潔無(wú)異物，關(guān)閉抽屜。打開(kāi)電源，進(jìn)行初始化及參數(shù)設(shè)置。（詳見(jiàn)第二部分之2“儀器操作說(shuō)明”）測(cè)試查詢參數(shù)設(shè)置通訊4.3.1.3準(zhǔn)備測(cè)試時(shí)，返回到主菜單界面（如下圖），光標(biāo)移動(dòng)到測(cè)試查詢參數(shù)設(shè)置通訊試劑組本底的測(cè)定4.3.2.1取出比色杯架，中間墊放5張專用吸水紙，將未放置樣品的過(guò)濾比色杯放入架孔內(nèi)。試劑，向杯中滴加4滴，再用加壓器置杯頂加壓，排出杯中所有液體，由吸水紙吸凈。再次重復(fù)滴加4滴TRA體細(xì)胞裂解試劑，加壓排出杯中所有液體，由吸水紙吸凈。4.3.準(zhǔn)備測(cè)試2.3拉開(kāi)抽屜后，屏幕顯示準(zhǔn)備測(cè)試狀態(tài)（如下圖）。從杯架上取下過(guò)濾比色杯置于儀器可拉動(dòng)抽屜小孔內(nèi)。準(zhǔn)備測(cè)試試劑，垂直滴加2滴于杯中。試劑瓶吸取熒光反應(yīng)試劑50μl加入杯底，緩和地吸擠三次混勻。關(guān)閉抽屜，開(kāi)始測(cè)試。（注意：加入LLR試劑后，反應(yīng)已經(jīng)開(kāi)始，所以操作應(yīng)該迅速，務(wù)求操作時(shí)間一致，對(duì)樣品測(cè)試達(dá)到平行數(shù)據(jù)十分關(guān)鍵。測(cè)量完畢前不可再拉動(dòng)抽屜。）空白R(shí)LU讀數(shù)應(yīng)低于200，如讀數(shù)過(guò)高，則提示過(guò)濾比色杯或試劑有污染。4.3.3.1取出比色杯架，中間墊放5張專用吸水紙，將含濃縮后樣品的過(guò)濾比色杯放入架孔內(nèi)（不需濃縮的液體樣品用移液器直接吸取被檢樣50μl注入過(guò)濾比色杯內(nèi)進(jìn)行測(cè)試）。試劑，向杯中滴加4滴，再用加壓器置杯頂加壓，排出杯中所有液體，由吸水紙吸凈。再次重復(fù)滴加4滴TRA體細(xì)胞裂解試劑，加壓排出杯中所有液體，由吸水紙吸凈。4.3.3.3拉開(kāi)抽屜后，屏幕顯示準(zhǔn)備測(cè)試狀態(tài)（如下圖）。從杯架上取下過(guò)濾比色杯置于儀器可拉動(dòng)抽屜小孔內(nèi)。準(zhǔn)備測(cè)試準(zhǔn)備測(cè)試試劑，垂直滴加2滴于杯中。中吸取熒光反應(yīng)試劑50μl加入杯底，緩和地吸擠三次混勻。關(guān)閉抽屜，開(kāi)始測(cè)試。（注意：加入LLR試劑后，反應(yīng)已經(jīng)開(kāi)始，所以操作應(yīng)該迅速，務(wù)求操作時(shí)間一致，對(duì)樣品測(cè)試達(dá)到平行數(shù)據(jù)十分關(guān)鍵）“參數(shù)設(shè)置”所選測(cè)定模式，屏幕顯示相應(yīng)的測(cè)試結(jié)果。5、ATP快檢系統(tǒng)使用注意事項(xiàng)、故障排除5.1ATP快檢系統(tǒng)使用注意事項(xiàng)：5.1.1檢測(cè)完畢后，須將微量熒光檢測(cè)儀做適當(dāng)清潔以免下次使用時(shí)交叉污染。儀表外部可用干凈的微濕布巾擦拭，可拉動(dòng)抽屜可用沾有少許異丙醇或酒精的棉簽擦拭。5.1.2為保持檢測(cè)工作臺(tái)不受污染，可用75%醫(yī)用酒精擦拭桌面，或在超凈臺(tái)內(nèi)操作。無(wú)菌手套，或用75%醫(yī)用酒精擦拭雙手以免試劑、臺(tái)面污染。無(wú)菌移液管尖，使用移液器吸取或轉(zhuǎn)移試劑、樣品時(shí)務(wù)求準(zhǔn)確，避免移液器與樣品或試劑交叉污染。5.1.5完成檢測(cè)后，立即取下過(guò)濾比色杯。未取出前，避免晃動(dòng)或倒置微量熒光檢測(cè)儀以免杯內(nèi)試劑濺出污染光學(xué)部件。5.1.6冷藏或冷凍樣品將導(dǎo)致其中微生物（細(xì)菌）細(xì)胞ATP量明顯變化，應(yīng)于避免，或待完全解凍平衡至室溫后再做檢測(cè)并設(shè)置對(duì)照。5.1.7高鹽、高離子、高糖或高油脂組份將干擾ATP檢測(cè)，重復(fù)加入體細(xì)胞裂解試劑（TRA）可改善。5.2故障排除：故障可能原因排除方法在無(wú)過(guò)濾比色杯或樣品情況下，可拉動(dòng)抽屜推入后，仍顯示高背景讀數(shù)1、抽屜被樣品污染2、光敏部件有誤1、用酒精擦抽屜去除污染2、更換或檢修測(cè)光儀有樣品的可拉動(dòng)抽屜推入后無(wú)讀數(shù)1、電池電量不足2、斷電3、可拉動(dòng)抽屜關(guān)閉不嚴(yán)1、如顯示電池電量不足，需充電2、查對(duì)供電情況3、重新關(guān)閉抽屜給出的讀數(shù)顯著低于應(yīng)有讀數(shù)1、試劑過(guò)期，失效2、加入LLR試劑后沒(méi)有立即關(guān)閉抽屜讀數(shù)3、樣品經(jīng)冷凍或冷藏后使其中的細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)ATP量顯著降低1、及時(shí)更換試劑2、更換樣品，重新試驗(yàn)讀數(shù)3、待樣品及試劑恢復(fù)到室溫后再測(cè)定6、對(duì)應(yīng)關(guān)系曲線6.1ATP濃度和相應(yīng)熒光值（RLU）關(guān)系曲線■與◆分別表示采用本公司提供的微量熒光檢測(cè)儀及美國(guó)NewHorizons公司PROFILE-1-3560微量熒光檢測(cè)儀所得結(jié)果。分別以log相對(duì)熒光值（RLU）、logATP濃度（attomol）值為縱坐標(biāo)和橫坐標(biāo)作圖（，R2）。上圖表明，在ATP濃度為1pmol—1nmol范圍內(nèi)，ATP濃度與RLU呈線性關(guān)系。6.2不同濃度多種細(xì)菌混合物熒光值和相應(yīng)細(xì)胞數(shù)關(guān)系曲線圖◆、■、▲分別表示三批次不同濃度大腸桿菌、枯草桿菌和金黃色葡萄球菌培養(yǎng)物的混合物，進(jìn)行平皿計(jì)數(shù)和相對(duì)熒光值檢測(cè)（本公司微量熒光檢測(cè)儀），并分別以log相對(duì)熒光值（RLU）和log平皿計(jì)數(shù)值（cfu/ml）為縱坐標(biāo)和橫坐標(biāo)作圖。由上述關(guān)系圖推演的RLU--CFU（相對(duì)熒光值對(duì)應(yīng)細(xì)菌菌落總數(shù)）可供參考。7、有關(guān)食品安全和衛(wèi)生檢測(cè)的問(wèn)答一問(wèn)：哪些因素可能影響食品安全和衛(wèi)生？生物（如細(xì)菌總數(shù)超標(biāo)、致病菌污染等）、化學(xué)（農(nóng)藥殘留、有毒添加劑等）、物理（放射污染等）及轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品（有害遺傳效應(yīng)等）四大因素。其中，以細(xì)菌污染食物、飲用水引發(fā)食源性中毒最為常見(jiàn)，其危害的范圍最廣。二問(wèn)：國(guó)內(nèi)外通常采用什么方法進(jìn)行食品細(xì)菌總數(shù)和衛(wèi)生、防疫檢測(cè)？“常規(guī)法”和“ATP熒光快檢法”。常規(guī)法是我國(guó)衛(wèi)生部規(guī)定至今仍然沿用的方法，因此，又稱“國(guó)標(biāo)法”，即（細(xì)菌）活細(xì)胞平皿計(jì)數(shù)法。三問(wèn)：“常規(guī)法”和“ATP熒光快檢法”的共同點(diǎn)和主要差別是什么？?jī)煞N方法都能用于檢測(cè)樣品中的細(xì)菌總數(shù)，提供有關(guān)衛(wèi)生防疫數(shù)據(jù)。主要差別在“時(shí)效性”，常規(guī)法至少要1—2天才能得到結(jié)果，快檢法能在1—5分鐘內(nèi)得到實(shí)時(shí)檢測(cè)數(shù)據(jù)。四問(wèn)：為什么兩種方法在“時(shí)效性”上有這樣大的差異呢？因?yàn)樗鼈兯罁?jù)的基本原理各不相同?！俺Ｒ?guī)法”是讓檢樣中原先看不見(jiàn)的細(xì)菌細(xì)胞，在稀釋涂布后通過(guò)在營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上37℃，48小時(shí)的保溫培育，這樣，一個(gè)活的細(xì)菌細(xì)胞經(jīng)多次分裂繁殖形成數(shù)以億計(jì)，肉眼可見(jiàn)的細(xì)菌集群（菌落），然后通過(guò)計(jì)數(shù)得到結(jié)果，即菌落形成單位/毫升（克）[CFU/ml（g）]?！癆TP熒光快檢法”則基于蟲(chóng)光素酶能催化細(xì)菌細(xì)胞的ATP發(fā)出熒光，熒光檢測(cè)儀能快速、準(zhǔn)確計(jì)量熒光值的原理。因此，檢樣中細(xì)菌細(xì)胞越多，ATP量就越大，發(fā)出的熒光就越強(qiáng)。這樣，在排除檢樣中非細(xì)菌ATP干擾的情況下，檢測(cè)熒光值（RLU）就能確定細(xì)菌的細(xì)胞數(shù)[CFU/ml（g）]。五問(wèn)：兩種檢測(cè)方法哪一種更準(zhǔn)確？?jī)煞N檢測(cè)方法得到的數(shù)據(jù)一致嗎？在回答這一問(wèn)題前，讓我們重溫微生物學(xué)的兩個(gè)基本概念：細(xì)菌或微生物對(duì)人類生活，生產(chǎn)造成的有利（如用于抗菌素生產(chǎn)）或有害影響（如污染食品、引發(fā)疾病）都非單一或少數(shù)細(xì)菌細(xì)胞的作用，而是單位體積內(nèi)數(shù)以十萬(wàn)、百萬(wàn)細(xì)胞群體的效應(yīng)。其次在適宜條件下，細(xì)菌每20—30分鐘就能分裂繁殖一代。以大腸桿菌為例，10萬(wàn)個(gè)細(xì)胞/毫升二小時(shí)后就成了640萬(wàn)細(xì)胞/毫升。因此，正確的回答是，兩種方法都能滿足特定時(shí)期細(xì)菌總數(shù)檢測(cè)和衛(wèi)生監(jiān)測(cè)的需求，但時(shí)效性有重大差異。快檢方法更有利于保障食品安全水平的全面提高。通過(guò)常規(guī)法和ATP熒光快檢法實(shí)際檢測(cè)建立一個(gè)兩者之間可以互相參照，符合食品安全衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)的有效范圍（如合格、警告、不合格）是發(fā)達(dá)國(guó)家的通用做法。六問(wèn)：在食品安全方面國(guó)外有哪些值得借鑒的經(jīng)驗(yàn)和措施？上世紀(jì)90年代后，美、英、日等國(guó)就已依據(jù)螢火蟲(chóng)發(fā)光原理，研制并推廣使用ATP熒光法快檢設(shè)備用于檢測(cè)食品細(xì)菌總數(shù)或衛(wèi)生防疫監(jiān)測(cè)。這些設(shè)備既能提供實(shí)時(shí)的檢測(cè)數(shù)據(jù)，又有準(zhǔn)確、便攜、使用容易等特點(diǎn)。不僅彌補(bǔ)了“常規(guī)法”時(shí)效性差的不足，又能發(fā)揮防患于未然的預(yù)警作用。有效地保障了食品安全總體水平的提高，也促進(jìn)了如HACCP等食品衛(wèi)生理念的誕生。七問(wèn)：HACCP認(rèn)證體系的主要涵義和作用是什么？HACCP是“危害分析關(guān)鍵控制點(diǎn)”一詞的英語(yǔ)縮寫(xiě)，源于上世紀(jì)70年代美國(guó)太空總署提出的有關(guān)食品安全基本理念，即（1）危害食品安全的可能因素包括生物（轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品）、化學(xué)、物理四個(gè)方面；（2）從原料到食品通常經(jīng)歷加工生產(chǎn)—產(chǎn)品包裝、儲(chǔ)存、運(yùn)輸—配發(fā)銷售等環(huán)節(jié)；（3）食品原料的品質(zhì)、生產(chǎn)環(huán)境、設(shè)施、操作人員的衛(wèi)生水平都將影響終產(chǎn)品—食品的安全衛(wèi)生水平。因此，只有將所有可能影響食品安全的危害因子全部納入監(jiān)控范圍，采用快檢方法實(shí)施監(jiān)控才能從源頭開(kāi)始，從而有效地保障食品，并留有補(bǔ)救時(shí)間防患于未然。美、日、歐盟等國(guó)已將實(shí)施HACCP認(rèn)證體系列為法定措施。我國(guó)衛(wèi)生部已于2002年頒發(fā)《食品加工企業(yè)的HACCP實(shí)施指南》[衛(wèi)法監(jiān)發(fā)174號(hào)]。八問(wèn)：“ATP熒光快檢法”和實(shí)施食品安全的HACCP預(yù)警、溯源管理制度有何關(guān)系？在建立和推廣使用ATP熒光法快檢技術(shù)前，只能靠目測(cè)或平皿計(jì)數(shù)法評(píng)估產(chǎn)前或清潔消毒后生產(chǎn)線、食品接觸表面的衛(wèi)生水平。這兩種方法要不是靈敏度不夠，就是取得結(jié)果的時(shí)間太長(zhǎng)，無(wú)法滿足生產(chǎn)的實(shí)際需要。換一句話說(shuō)，只有采用ATP熒光法快檢一類方法才能實(shí)施HACCP和食品安全的溯源和預(yù)警制度。九問(wèn)：美、日、歐盟各國(guó)如何評(píng)價(jià)ATP熒光快檢法和建立相關(guān)檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)？通過(guò)ATP熒光快檢法得到的是來(lái)自食物殘?jiān)臀⑸锛?xì)胞兩個(gè)部分ATP的總值。多數(shù)情況下，來(lái)自微生物細(xì)胞的比例較小。但是，由于食物殘?jiān)仁俏⑸锷L(zhǎng)的培養(yǎng)基，又起抵消滅菌效果的作用。因此，關(guān)鍵在確定避免重新污染的ATP臨界值，而非單純依據(jù)細(xì)菌細(xì)胞ATP值折算的細(xì)菌菌落數(shù)（cfu）。這就是多數(shù)衛(wèi)生監(jiān)測(cè)試劑盒不設(shè)置通用ATP標(biāo)準(zhǔn)，也不必期望ATP與CFU之間有確定相關(guān)關(guān)系，容易引起初用者疑慮的原因。統(tǒng)計(jì)結(jié)果證實(shí)，凡ATP熒光法顯示衛(wèi)生水平改善，則平皿計(jì)數(shù)結(jié)果也一定改善。如果檢測(cè)點(diǎn)ATP水平高，即便是無(wú)菌的，次日早上必然大量滋生細(xì)菌導(dǎo)致食品污染。因此，發(fā)達(dá)國(guó)家的普遍做法是：首先通過(guò)ATP快檢步驟對(duì)食品原料及經(jīng)過(guò)清潔、消毒后食品原料接觸表面是否達(dá)到衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)作出有數(shù)字依據(jù)的評(píng)價(jià)。其次，對(duì)易于引發(fā)微生物污染的關(guān)系部位實(shí)施重點(diǎn)監(jiān)控。最后，制訂出符合本單位情況，又符合衛(wèi)生要求的ATP數(shù)值范圍。十問(wèn)：具備什么條件有利于在我國(guó)普遍實(shí)施HACCP認(rèn)證體系？（1）發(fā)展擁有我國(guó)自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的食品安全關(guān)鍵技術(shù)，提供準(zhǔn)確、有效、便攜、操作容易、價(jià)格能為國(guó)內(nèi)廣大用戶接受的食品安全檢測(cè)設(shè)備和試劑系統(tǒng)。（2）建立與快檢技術(shù)相匹配的國(guó)家、企業(yè)檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)。（3）普及與快檢技術(shù)相關(guān)的衛(wèi)生學(xué)和衛(wèi)生監(jiān)督指導(dǎo)新理念、新知識(shí)。第二部分ATP熒光法微生物（細(xì)菌總數(shù)）快速檢測(cè)系統(tǒng)使用說(shuō)明1、技術(shù)參數(shù)及性能檢測(cè)時(shí)間1秒---99秒自由設(shè)定靈敏度5×10-18mol/L（標(biāo)準(zhǔn)ATP）檢測(cè)范圍0-1010cfu/ml或10-13mol/ml-10-9mol/ml（ATP）重復(fù)誤差（批間差）≤±5%數(shù)據(jù)輸出RLU（細(xì)菌細(xì)胞ATP含量）、菌落總數(shù)存儲(chǔ)媒體FLASHROM64KB數(shù)據(jù)存儲(chǔ)數(shù)據(jù)以文件方式分類儲(chǔ)存數(shù)據(jù)內(nèi)容包括RLU（數(shù)值）、菌落總數(shù)、樣品名稱、文件名、記錄號(hào)、日期、時(shí)間、檢測(cè)時(shí)間長(zhǎng)度等菌落總數(shù)換算公式可自由設(shè)定儲(chǔ)藏空間1000個(gè)數(shù)據(jù)記錄顯示方式4行漢字LCD液晶顯示數(shù)據(jù)查詢以文件記錄方式查詢連續(xù)工作時(shí)間連續(xù)工作時(shí)間大于10小時(shí)計(jì)算機(jī)連接USB接口電源充電鋰電池供電與PC連接可實(shí)時(shí)檢測(cè)并傳輸檢測(cè)結(jié)果PC機(jī)軟件數(shù)據(jù)存入ACCESS數(shù)據(jù)庫(kù)可以多種方式查詢、統(tǒng)計(jì)、匯總等；可直接將檢測(cè)數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換EXCEL文件儀器尺寸165x90x55mm儀器重量操作溫度5℃－60℃相對(duì)濕度20－80%2、儀器操作說(shuō)明2．1開(kāi)機(jī)、初始化開(kāi)機(jī)后，儀器進(jìn)行系統(tǒng)初始化，如果日期、時(shí)間沒(méi)有設(shè)置，屏幕會(huì)提示（如圖1.1），進(jìn)入主菜單工作界面。圖1圖1.1請(qǐng)輸入日期、時(shí)間特別提示：日期和時(shí)間是很重要的數(shù)據(jù)。請(qǐng)參照2．2．4主菜單工作界面(如圖1.2)圖1圖1.2測(cè)試查詢參數(shù)設(shè)置通訊確定利用或鍵可以選擇菜單項(xiàng)，然后按鍵選擇“測(cè)試”，儀器進(jìn)行初始化。確定圖1圖1.3初始化...xx初始化的時(shí)間長(zhǎng)度設(shè)定請(qǐng)參照2.2.5說(shuō)明，工作方式為倒計(jì)時(shí)。2．2參數(shù)設(shè)置確定將圖1.2的光標(biāo)移到第3行，“參數(shù)設(shè)置”，按鍵后顯示（如圖2.1）。確定圖2圖2.1設(shè)置樣品設(shè)置文件名類型設(shè)置日期時(shí)間設(shè)置檢測(cè)時(shí)間U盤(pán)格式化U盤(pán)格式化“設(shè)置樣品”的功能是將被測(cè)試的樣品以名字或符號(hào)的方式存儲(chǔ)在儀器中，以方便查詢測(cè)試結(jié)果?！皹悠访庇缮衔粰C(jī)軟件設(shè)定并傳輸給儀器，儀器中最多可以設(shè)定8個(gè)“樣品名”，詳細(xì)說(shuō)明見(jiàn)上位機(jī)軟件。2．2．1選擇RLU方式圖2圖2.2RLU方式水A牛奶SY樣品名樣品名由上位機(jī)建立RLU方式是指儀器只將檢測(cè)結(jié)果以RLU數(shù)值顯示輸出，而無(wú)任何判定結(jié)果。確定圖2.2按顯示信息如下：確定樣品名：RLU樣品名：RLU合格值：無(wú)污染值：無(wú)K=無(wú)b=無(wú)2．2．2選擇其它樣品名方式圖2圖2.4RLU方式水A牛奶SY確定利用或鍵，選擇“樣品名”，按鍵。確定圖圖2.5樣品名：牛奶SY合格值：400污染值：800該樣品的名稱為“牛奶SY”，當(dāng)RLU數(shù)值小于400時(shí)顯示“合格”，大于400而小于800時(shí)顯示“報(bào)警”，大于800時(shí)顯示“污染”，詳細(xì)說(shuō)明見(jiàn)上位機(jī)軟件說(shuō)明。2．2．3設(shè)置文件類型確定將圖2.1的光標(biāo)移到第2行，“設(shè)置文件名類型”，按鍵。確定圖2圖2.6設(shè)置文件類型日期單位、地點(diǎn)如選擇“日期”，則儀器自動(dòng)以當(dāng)前“年月日”數(shù)據(jù)為文件名。例如：07年3月26日，則文件名為070326；07年3月27日，則文件名將自動(dòng)生成070327，以此類推。圖2圖2.7文件名類型《日期型》文件名：070326確定選擇“單位、地點(diǎn)”，則所有“單位、地點(diǎn)”文件名將列表于屏幕中，用和鍵選擇所需要的文件名。確定例如：圖2圖2.8靚馬1中科3靚馬2鐵西區(qū)文件名確定按鍵，選擇“靚馬2”為當(dāng)前文件名。確定圖2圖2.9文件名類型《單位、地點(diǎn)型》文件名：靚馬2按任意鍵退出。特別提示：“單位、地點(diǎn)”文件名是由PC上位機(jī)傳輸過(guò)來(lái)的，詳細(xì)內(nèi)容請(qǐng)參閱上位機(jī)軟件說(shuō)明。2．2．4設(shè)置日期時(shí)間設(shè)置日期時(shí)間設(shè)置日期時(shí)間年:06時(shí):13月:11分:08日:09秒:12利用鍵可分別調(diào)整“年月日時(shí)分秒”的數(shù)據(jù)，輸入完成后，確定按鍵保存數(shù)據(jù)于儀器中并退出。確定取消特別提示：按鍵不保存數(shù)據(jù)而退出。取消2．2．5設(shè)置檢測(cè)時(shí)間確定將圖2.1的光標(biāo)移到第4行，“設(shè)置檢測(cè)時(shí)間”，按鍵。確定設(shè)置檢測(cè)時(shí)間設(shè)置檢測(cè)時(shí)間檢測(cè)10秒Max=99Min=1利用鍵設(shè)置數(shù)據(jù)，設(shè)置的檢測(cè)時(shí)間最小1秒，最大99秒。確定按鍵保存于儀器中并退出。確定取消特別提示：按鍵不保存設(shè)置結(jié)果而退出。取消2．2．6U盤(pán)格式化確定將圖2.1的光標(biāo)移到第5行，“U盤(pán)格式化”，按鍵。確定圖2圖2.12確定要格式化？是否選擇“是”則格式化U盤(pán)，結(jié)果數(shù)據(jù)將全部丟失，包括上位機(jī)建立的文件名，儀器自動(dòng)以當(dāng)前日期建立文件名存儲(chǔ)檢測(cè)結(jié)果。特別提示：此項(xiàng)操作不刪除樣品名，但要慎重。2．3測(cè)試測(cè)試查詢參數(shù)設(shè)置通訊測(cè)試之前，應(yīng)準(zhǔn)備好被測(cè)樣品，。準(zhǔn)備測(cè)試準(zhǔn)備測(cè)試。xx秒鐘檢測(cè)xx秒鐘檢測(cè)合格RLUxxxxx菌數(shù)xxxxxx特別提示：①測(cè)量過(guò)程中應(yīng)保持抽屜處于關(guān)閉狀態(tài)，測(cè)量完畢后再取出樣品。②“合格、警告、污染”的提示和“菌落總數(shù)”與儀器的參數(shù)設(shè)定有關(guān)系。檢測(cè)結(jié)果將自動(dòng)存入儀器中，以備日后查看。拉開(kāi)抽屜后，準(zhǔn)備進(jìn)行下一次測(cè)試。取消按鍵，退出測(cè)試狀態(tài)，返回主菜單（如圖1.2）。取消2．4查詢確定將圖1.2的光標(biāo)移到第2行，“查詢”，按鍵，進(jìn)入查詢界面（如圖4.1）。確定圖4圖4.1測(cè)試結(jié)果文件信息儀器信息電池電量2．4．1查詢測(cè)試結(jié)果圖4圖4.2中科靚馬070502北京1沈陽(yáng)23文件名確定利用或鍵選擇文件名，然后按鍵，顯示信息如下：確定時(shí)間樣品種類時(shí)間樣品種類年月日年月日結(jié)果提示圖4.3結(jié)果提示圖4.307/02/1317:2312水警告RLU5185菌落總數(shù)62083記錄號(hào)記錄號(hào)RLU記RLU記數(shù)值菌落總數(shù)菌落總數(shù)利用或鍵可選擇查看該文件的每一個(gè)記錄的測(cè)試結(jié)果。2．4．1．1刪除測(cè)試結(jié)果DelDel在圖4.3狀態(tài)下，按鍵可刪除該記錄。文件名記錄號(hào)文件名記錄號(hào)圖4.4圖4.408021282確定要?jiǎng)h除？是否選擇“是”，則刪除該記錄。2．4．1．2刪除文件Del在圖4.2的狀態(tài)下，按鍵可刪除文件。Del文件名圖4.文件名圖4.5文件：071225確定要?jiǎng)h除？是否選擇“是”，則刪除該文件，但該文件的記錄必須為空，否則會(huì)顯示圖4.6狀態(tài)。圖4圖4.6該文件還有記錄不能刪除特別提示:只有將該文件的記錄全部刪除后，該文件才能被刪除。2．4．2查詢文件信息確定將圖4.1的光標(biāo)移到第2行，“文件信息”，按鍵。確定圖4圖4.7文件名：北京1記錄數(shù)：68文件總數(shù)：16剩余空間：782當(dāng)前文件名該文件的記錄總數(shù)U盤(pán)中的總文件數(shù)最大255U盤(pán)還可以存儲(chǔ)782個(gè)記錄1—99秒可調(diào)按任意鍵退出。2．4．3查詢儀器信息確定將圖4.1的光標(biāo)移到第3行，“儀器信息”，按鍵。確定圖4圖4.8微量光度計(jì)型號(hào)：BLW0401編號(hào)：089版本號(hào)：WD012按任意鍵退出。2．4．4查詢電池電量確定將圖4.1的光標(biāo)移到第4行，“電池電量”，按鍵。確定電池電量電池電量85.62%特別提示：此數(shù)值只是一個(gè)參考值，如果電量較低時(shí)，請(qǐng)及時(shí)充電，否則測(cè)定結(jié)果將會(huì)波動(dòng)。2．4．5快速查詢可以快速查詢4種狀態(tài)信息：查詢文件信息查詢?nèi)掌跁r(shí)間查詢樣品名信息④查詢電池剩余電量在主菜單狀態(tài)下圖4圖4.10測(cè)試查詢參數(shù)設(shè)置通訊光標(biāo)在第一行時(shí)，按鍵查詢文件信息，屏幕顯示當(dāng)前文件名、該文件的記錄總數(shù)、儀器中現(xiàn)存的文件總數(shù)和U盤(pán)的剩余空間。圖4圖4.11文件名：xxxxx記錄數(shù)：42文件總數(shù)：16剩余空間：912光標(biāo)在第一行，按鍵，屏幕顯示當(dāng)前的日期、時(shí)間和檢測(cè)時(shí)間長(zhǎng)度（秒）。圖4圖4.12日期：07/05/28時(shí)間：16:35:42檢測(cè)時(shí)間：10秒光標(biāo)在第二行時(shí)，按鍵，屏幕顯示當(dāng)前樣品名、合格值、污染值、K值和b值。樣品名：牛奶A樣品名：牛奶A合格值：300污染值：800光標(biāo)在第二行時(shí)，按鍵，屏幕顯示當(dāng)前電池剩余電量。電池電量電池電量80.78%2．5通訊確定將圖1.2光標(biāo)移到第4行，“通訊”，按鍵。確定圖5圖5.1通訊···取消儀器進(jìn)入與上位機(jī)通訊狀態(tài)，按鍵退出。取消特別提示：先將USB通訊電纜與上位機(jī)連接好后，再將儀器電源打開(kāi)，同時(shí)先將儀器設(shè)置成通訊狀態(tài)再運(yùn)行上位機(jī)軟件。3、上位機(jī)軟件3．1軟件安裝運(yùn)行盤(pán)中的Install.exe安裝程序，將上位機(jī)通訊程序安裝在合適的目錄中開(kāi)始安裝，圖6圖6.1點(diǎn)擊“我同意該許可協(xié)議的條款”，圖6圖6.2輸入程序和公司名稱，圖6圖6.3可以更改安裝目錄，圖6.圖6.4圖6圖6.5單擊[下一步]。圖6圖6.6圖6圖6.73．2驅(qū)動(dòng)程序的安裝當(dāng)ATP測(cè)試儀開(kāi)機(jī)狀態(tài)下通過(guò)USB接口與上位機(jī)連接后，系統(tǒng)會(huì)提示，單擊[下一步]。效果如圖圖6圖6.8將搜索位置定在Driver目錄下圖6圖6.9圖6圖6.10圖6圖6.11圖6圖6.123．3軟件啟動(dòng)本軟件可在Windows9X、XP等環(huán)境下運(yùn)行，操作步驟如下：先將USB電纜連接好，打開(kāi)儀器電源。將儀器設(shè)置為“通訊”狀態(tài)。。3．4軟件運(yùn)行圖圖界面左上顯示有：儀器型號(hào)、儀器編號(hào)、版本號(hào)等信息。界面中間部分有2個(gè)命令鍵，完成對(duì)儀器建立、刪除文件名等工作。界面左下部分有5個(gè)命令鍵：保存數(shù)據(jù)：將所選擇的文件數(shù)據(jù)存入ACCESS數(shù)據(jù)庫(kù)（用戶儀器必須安裝微軟公司ACCESS軟件）。刪除記錄：將某文件的某個(gè)記錄從儀器中刪除。EXCEL文件：將某文件的全部數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換為EXCEL文件（一般性用戶建議保存EXCEL文件形式以便存檔、分析、打?。悠吩O(shè)定：定義樣品名稱和數(shù)據(jù)。退出：運(yùn)行結(jié)束。界面中的表格顯示有儀器中現(xiàn)存的所有測(cè)試結(jié)果數(shù)據(jù)，包括：文件名、記錄數(shù)（該文件）和記錄號(hào)、樣品編碼、樣品名稱、RLU、菌落總數(shù)、日期、時(shí)間和檢測(cè)時(shí)間長(zhǎng)度。點(diǎn)擊左邊表格（文件名、記錄數(shù)），右邊表格立即會(huì)顯示出該文件的所有數(shù)據(jù)項(xiàng)。點(diǎn)擊右邊表格，左下方列表會(huì)顯示該RLU數(shù)據(jù)項(xiàng)的判定結(jié)果“合格，警告，污染”，并且顯示該樣品的“合格，警告，污染”的相應(yīng)數(shù)據(jù)。3．5樣品及回歸方程的設(shè)定編碼：由首位字母和3位數(shù)字組成。名稱：樣品名稱可由漢字和字母、數(shù)字組成，與文件名的格式相同，請(qǐng)參照3.6的說(shuō)明。合格值：當(dāng)RLU結(jié)果小于“合格值”時(shí)，儀器顯示“合格”。污染值：當(dāng)RLU結(jié)果大于“合格值”，而小于“污染值”時(shí)，顯示“警告”提示，大于“污染值”時(shí)，表示樣品已經(jīng)“污染”。儀器出廠前已預(yù)設(shè)部分樣品的合格及污染判定值，用戶可根據(jù)使用經(jīng)驗(yàn)或登陸我公司網(wǎng)站參考最新標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行設(shè)定。特別提示：“合格值”不得大于2,000,000，“污染值”不得大于3,000,000，且必須是大于0的整數(shù)，數(shù)據(jù)均為RLU數(shù)值而非菌落數(shù)。本公司利用研制、生產(chǎn)的“ATP熒光法快檢系統(tǒng)”通過(guò)大量的實(shí)測(cè)，經(jīng)過(guò)統(tǒng)計(jì)分析不同批次檢測(cè)之間可比數(shù)據(jù)穩(wěn)定，與國(guó)標(biāo)平皿計(jì)數(shù)的符合率達(dá)到94%以上，并得到相應(yīng)樣品的線性回歸方程?，F(xiàn)已將線性回歸方程預(yù)置機(jī)器中，儀器可實(shí)現(xiàn)RLU熒光值與細(xì)菌、微生物值的對(duì)應(yīng)換算。由于本系統(tǒng)檢測(cè)方法為非國(guó)標(biāo)方法且ATP熒光反應(yīng)干擾因素較多，所以目前給用戶提供的RLU熒光值與細(xì)菌、微生物對(duì)應(yīng)換算值僅供參考。儀器出廠前已預(yù)設(shè)線性回歸方程的K和b值，但為了便于用戶升級(jí)和獲得最新的RLU熒光值與細(xì)菌、微生物值對(duì)應(yīng)換算關(guān)系，用戶可自行設(shè)定K和b值或登陸我公司網(wǎng)站參考最新標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行設(shè)定。當(dāng)設(shè)定線性回歸方程進(jìn)行RLU熒光值與細(xì)菌、微生物對(duì)應(yīng)換算時(shí)，K和b值必須設(shè)定，2個(gè)點(diǎn)擊任意一個(gè)即可，否則K和b值無(wú)效。建立：點(diǎn)擊“建立”，程序會(huì)自動(dòng)檢驗(yàn)各項(xiàng)數(shù)據(jù)和編碼的合法性，然后將數(shù)據(jù)傳送給儀器保存。修改：修改表格中相應(yīng)的樣品數(shù)據(jù)。刪除：刪除表格中相應(yīng)的樣品數(shù)據(jù)。初始化命令：將表格中各項(xiàng)數(shù)據(jù)刪除，并自動(dòng)將儀器設(shè)置為R