分子生物學(xué)生物信息的傳遞上轉(zhuǎn)錄通論一、RNA轉(zhuǎn)錄得一般過程

1、模板識(shí)別

2、轉(zhuǎn)錄起始

3、通過啟動(dòng)子

4、轉(zhuǎn)錄得延伸

5、終止二、轉(zhuǎn)錄得原料:1、RNA聚合酶;2、雙鏈DNA模板;3、NTPs;4、輔助因子三、轉(zhuǎn)錄得方向:5’3’四、轉(zhuǎn)錄中模板上得信號(hào):(保守序列)啟動(dòng)子(promotor),終止子(terminator)調(diào)控序列(操縱子operator,增強(qiáng)子enhancer)五、不對稱轉(zhuǎn)錄一、原核生物轉(zhuǎn)錄得特點(diǎn)

RNA聚合酶(

2’):全酶=核心酶+

提高酶與啟動(dòng)子序列得親和力(103),降低與非特異序列得親和力(104),注意點(diǎn)1、原核生物mRNA,tRNA,rRNA都由同一種RNA聚合酶轉(zhuǎn)錄(真核生物就是3種);2、

提高酶與啟動(dòng)子序列得親和力(103),降低與非特異序列得親和力(104),就是核心酶得別構(gòu)效應(yīng)物、3、不同得

識(shí)別不同得啟動(dòng)子序列;4、

參與模板識(shí)別和轉(zhuǎn)錄起始;5、核心酶負(fù)責(zé)轉(zhuǎn)錄得延伸、啟動(dòng)子(promoter)堿基定位::轉(zhuǎn)錄得起點(diǎn)為+1,下游方向依次為+2,+3----;上游方向依次-1,-2,-3-+1一般為A(mRNA轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn))兩段保守序列:-10box(Pribnowbox),-35box-10box與-35box得最佳距離為17

1bp越接近保守序列,起動(dòng)子越強(qiáng)(下調(diào)突變,上調(diào)突變)、強(qiáng)啟動(dòng)子還有一些額外得元件,如E、coli編碼rRNA得rrngene中得UPelement(上游元件),可提高表達(dá)數(shù)十倍延伸(elongation)核心酶起極其重要得作用,

亞基參與轉(zhuǎn)錄出得RNA得磷酸二酯鍵得形成、9大家應(yīng)該也有點(diǎn)累了，稍作休息大家有疑問的，可以詢問和交流轉(zhuǎn)錄終止(終止子)(1)不依賴于因子得終止強(qiáng)終止子=“一段反向互補(bǔ)序列“+“一段富含T得區(qū)域”(2)依賴于因子得終止、;弱終止子=“一段反向互補(bǔ)序列“不依賴于因子得終止依賴于因子得終止二、真核生物mRNA轉(zhuǎn)錄RNA聚合酶IIII類啟動(dòng)子:增強(qiáng)子(沉默子)無方向,位置,距離得限制具有組織特異性有時(shí)兩者可相互轉(zhuǎn)換、不屬于啟動(dòng)子能調(diào)節(jié)基因得轉(zhuǎn)錄起動(dòng)子,增強(qiáng)子與沉默子都屬于順式作用元件、SV40virusearlycontrolregionEnhancerGCboxes真核生物得轉(zhuǎn)錄因子起始,延伸,終止都需要因子得幫助、(與原核轉(zhuǎn)錄得區(qū)別)分為:(1)通用轉(zhuǎn)錄因子-------都需要(2)基因特異轉(zhuǎn)錄因子-----調(diào)控轉(zhuǎn)錄起始轉(zhuǎn)錄終止沒有明確得終止子,但有終止信號(hào)轉(zhuǎn)錄會(huì)在AATAAA下游0、5-2kb處終止(AATAAA下游15-30bp加PolyA)前體mRNA得加工(時(shí)序性)(1)5′加帽(轉(zhuǎn)錄早期進(jìn)行30nt)(2)3′加尾(前體mRNA加polyA)(3)切除內(nèi)含子(4)編輯和修飾

5’cap得特殊結(jié)構(gòu)和功能3’m7GpppNmNm-----3’

(G得方向與N得方向相反,通過5’-5’相連)功能:

(1)

保護(hù)mRNA(2)提高翻譯能力(效率)(3)有利于mRNA在細(xì)胞內(nèi)得運(yùn)輸(運(yùn)出細(xì)胞核)(4)使mRNA前體得能正確剪接(第一個(gè)內(nèi)含子)poly(A)得功能(1)保護(hù)mRNA:延長其壽命(半衰期)(2)提高mRNA得翻譯能力:能與poly(A)結(jié)合蛋白結(jié)合,促進(jìn)翻譯,促進(jìn)mRNA與核糖體結(jié)合(3)poly(A)能促進(jìn)最后一個(gè)內(nèi)含子得剪接(3)RNA剪接(RNAsplicing)剪接信號(hào)(屬于內(nèi)含子得邊界)

主要:GU---AG(剪切體)次要:AU---AC//自我剪切得I,II內(nèi)含子剪接體:snRNAs(核小分子RNA)參與特殊剪接方式選擇性剪接:

一個(gè)基因轉(zhuǎn)錄出來得RNA前體,通過不同得剪接方式(選擇不同得外顯子)而形成不同得成熟mRNA,產(chǎn)生不同得蛋白質(zhì)[組成型剪接-----非特異得、默認(rèn)得、唯一得剪接方式]反式剪接:

參與剪接得外顯子并不在同一個(gè)基因中(即在不同得RNA分子中)[順式剪接-----所有參與剪接得外顯子都在同一個(gè)基因中(同一個(gè)RNA分子中)]123456AATAAAATAA1234456321Calcitonin(thyoidcell甲狀腺)CGRP(