ICS67.120.30DB34/T1536—2011水產(chǎn)品中酸性橙和酸性金黃G(皂黃)的測(cè)定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法2011-11-15發(fā)布2011-12-15實(shí)施安徽省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布IDB34/T1536—2011本標(biāo)準(zhǔn)按照GB/T1.1-2009給出的規(guī)則起草。本標(biāo)準(zhǔn)由安徽省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局、安徽省食品質(zhì)量安全檢驗(yàn)方法標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)提出。本標(biāo)準(zhǔn)由安徽省食品質(zhì)量安全檢驗(yàn)方法標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)歸口。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：國(guó)家農(nóng)副加工食品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中心、安徽國(guó)家農(nóng)業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化與監(jiān)測(cè)中心。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：何俊、徐彥輝、顧亮、丁磊、董思恩、沈宏林、程浩、譚煒。1DB34/T1536—2011水產(chǎn)品中酸性橙Ⅱ和酸性金黃G(皂黃)的測(cè)定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。3原理4試劑4.7固相萃取柱平衡溶液：0.5%甲酸水溶液。4.8洗脫溶液：取5mL氨水，用甲醇定容至100mL。4.9樣品稀釋液：稱(chēng)取0.39g乙酸銨用水溶解，加0.50mL甲酸，用水定容至500mL。4.10流動(dòng)相A:稱(chēng)取0.39g乙酸銨用水溶解，加0.20mL氨水，用水定容至1000mL。4.11流動(dòng)相B:乙腈。萃取柱平衡溶液(4.6)活化。4.13標(biāo)準(zhǔn)品：酸性橙Ⅱ和皂黃，純度大于98%。4.14標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液(0.10mg/mL):稱(chēng)取適量酸性橙Ⅱ和皂黃標(biāo)準(zhǔn)品，分別用甲醇配成0.10mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，-18℃保存，保存期為六個(gè)月。2DB34/T1536—20114.15混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液(1μg/mL):吸取酸性橙Ⅱ和皂黃標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液(4.13),用甲醇稀釋成14.16混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液：根據(jù)需要，臨用前吸取一定量的混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液(4.14),用50%甲醇稱(chēng)取5.00g試樣于50mL離心管中，加入5g無(wú)水硫酸鈉和20.0mL丙酮，勻漿2min,超活化，樣品提取液全部過(guò)柱，再依次用0.5%甲酸水溶液，甲醇各3mL淋洗，抽干。用3mL洗脫液 3DB34/T1536—2011時(shí)間(min)流速(μL/min)流動(dòng)相A流動(dòng)相B05a)離子源：電噴霧離子源(ESI);c)檢測(cè)方式：多反應(yīng)監(jiān)測(cè)(MRM);d)霧化氣(NEB)、氣簾氣(CUR)、碰撞氣(CAD)均為高純氮?dú)?；使用前?yīng)調(diào)節(jié)各氣體流量以f)定性離子對(duì)和定量離子對(duì)見(jiàn)表2。名稱(chēng)母離子(m/z)子離子(m/z)碰撞電壓(V)碰撞能量(V)酸性橙Ⅱ352.1皂黃327.1各檢測(cè)目標(biāo)化合物以保留時(shí)間和兩對(duì)離子的(特征離子對(duì)/定量離子對(duì))所對(duì)應(yīng)的LC-MS/MS色譜一致(偏差±0.5%),同時(shí)要求被測(cè)試樣中目標(biāo)化合物的兩對(duì)離子豐度比與標(biāo)準(zhǔn)溶液中目標(biāo)化合物的豐度比一致，相對(duì)豐度>50%、20～50%、10～20%、<10%時(shí)，容許偏差分別為±20%、±25%、±30%和±50%。4測(cè)定結(jié)果按式(1)計(jì)算：.......................................(1)X—樣品中目標(biāo)化合物含量，單位為微克每千克(μg/kg);C——測(cè)定濃度，單位為微克每升(μg/L);V——樣品定容體積，單位為毫升(mL);W樣品稱(chēng)樣量，單位為克(g)。注：測(cè)定結(jié)果保留至小數(shù)點(diǎn)后二位。9方法回收率和精密度9.1回收率本方法在5.0μg/kg～500.0μg/kg添加范圍濃度內(nèi)，用陰性樣品進(jìn)行添加回收試驗(yàn)，酸性橙Ⅱ和皂黃的回收率范圍為70～110%,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于10%。9.2精密度在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值與算術(shù)平均值之比應(yīng)不大于10%。