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備案號(hào):DB11DB11/T828.3—2011實(shí)驗(yàn)用小型豬第3部分:遺傳質(zhì)量控制ExperimentalminipigPart3:Geneticqualitycontrol北京市質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布 DB11/T828的本部分規(guī)定了實(shí)驗(yàn)用小型豬的遺傳分類、繁殖方法和經(jīng)人工飼育,對(duì)其攜帶的病原微生物和寄生蟲實(shí)行控制,遺傳背景明確或者來源清楚,122stock)。當(dāng)近交系小型豬生產(chǎn)供應(yīng)數(shù)量不是很大時(shí),一般不設(shè)血緣擴(kuò)大群,僅選擇封閉群實(shí)驗(yàn)用小型豬繁殖方法的原則是保持封閉群小型豬的遺傳異質(zhì)性及基因多態(tài)性,避免封閉群應(yīng)足夠大,以保持封閉群實(shí)驗(yàn)用小型豬的遺傳基因的穩(wěn)定,并盡量避免近親交配。具體繁采用微衛(wèi)星DNA標(biāo)記檢測方法。具體方法執(zhí)行附錄4群體內(nèi)遺傳變異采用平均雜合度指標(biāo)或群體平衡因頻率或基因型頻率發(fā)生變化,該封閉群實(shí)驗(yàn)用小型豬群體判為不合格。具體方法采集近交系實(shí)驗(yàn)用小型豬的血液或耳組織,提取基因組DNA。對(duì)特定的微衛(wèi)星標(biāo)記座位進(jìn)行PCR擴(kuò)增,通過遺傳分析儀檢測各座位基因的峰形和大小,確定各近交系的微衛(wèi)星6PCR產(chǎn)物,以2%的瓊脂糖檢測擴(kuò)增效率。凝膠成像系統(tǒng)),含變性后的PCR產(chǎn)物的96孔板放入遺傳分析儀內(nèi)進(jìn)行分析,原始峰圖用基因分型所有樣品檢測位點(diǎn)的等位基因都符合品系的特征(見表A.2),沒有新的等位基因8表A.2五指山小型豬近交系、廣西巴馬小型豬和貴州小型豬近交系培育過程中,遺傳質(zhì)),擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)過瓊脂糖凝膠電泳檢測確保擴(kuò)增出目的片斷后,選擇分別以FAM、HEX、TAMRA標(biāo)記的三斷從小到大順序排列紀(jì)錄為a,b,c,d等。將所有樣本的每個(gè)微衛(wèi)星位點(diǎn)的基因型以ab,bb等形式輸入群體遺傳分析軟件的數(shù)根據(jù)判定結(jié)果對(duì)被檢測的封閉群實(shí)驗(yàn)用小型豬群體做出表B各微衛(wèi)星座位的引物序列、染色體位置、
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