玉環(huán)縣人民醫(yī)院檢驗科文件編號：JYK-3-SH-030版本/修訂號：C/0主題內容生化室作業(yè)指導書生效日期：20110701第6頁共6頁編寫制定日期審核審核日期：核準執(zhí)行日期李永臣2010-09-15李永臣2011-07-01章林華2011-07-01血清載脂蛋白B測定標準操作規(guī)程1檢驗申請單獨檢驗項目申請：血清載脂蛋白B(縮寫apoB)測定；組合項目申請：血脂測定，血載脂蛋白測定。臨床醫(yī)生根據需要提出檢驗申請。2標本采集與處理2.1標本采集2.1.1常規(guī)靜脈采血約2ml，不抗凝，置普通試管中?；虿捎煤蛛x膠的真空采血管。2.1.2檢驗申請單和血標本試管標上統(tǒng)一且唯一的標識符。2.1.3急診標本采集后，在檢驗申請單上填寫標本采集時間。2.1.4標本采集后與檢驗申請單一起及時運送至檢驗科。專人負責標本的接收并記錄標本的狀態(tài)，對不合格標本予以拒收。2.1.5下列標本為不合格標本2.1.5.1標本量不足：少于0.3ml的全血標本，或少于0.1ml的血清或血漿。2.1.5.2對反應吸光度有干擾的標本，包括嚴重溶血、嚴重渾濁的標本。2.1.5.3無法確認標本與申請單對應關系的。2.1.5.4其他如標識涂改、標本試管破裂等。2.2標本保存2.2.1接收標本后在30min內將標本離心分離出血清。2.2.2標本保存時間：室溫（15～25℃）下可穩(wěn)定1天，普通冰箱中（2～8℃）穩(wěn)定7天。-20℃可保存數月；-70℃至少可保存半年；應避免標本反復凍溶。為避免標本中水分揮發(fā)使血清濃縮，對保存時間超過1天的標本均加塞密閉或覆蓋濕巾。2.2.3已完成測試的標本保持完整的識別號，置4～8℃冰箱內保存7天。2.3標本采集的注意事項2.3.1采血前使受檢者保持平靜、松弛和空腹狀態(tài)。抽血前3天內避免高脂飲食，24小時內不飲酒。2.3.2不建議采集抗凝血標本，如果必須使用血漿，推薦的抗凝劑是肝素。EDTANa2(1mg／mL)抗凝。2.1.5抽血前最好停用影響血脂的藥物（如調脂藥、避孕藥、某些降壓藥、激素等）數天或數周，否則應記錄用藥情況。3方法原理透射免疫濁度法。APOB與特異的抗血清反應形成不溶性的復合物，可在340nm測定該不溶性復合物的濁度。通過測定標準品，建立一個吸光度對APOB濃度的標準曲線就可以測定出樣品中的APOB濃度。4試劑及其他用品4.1試劑：血清載脂蛋白B（APOB）免疫濁度法測定試劑盒，由北京利德曼生化技術有限公司出品。4.2試劑盒保存：未啟封試劑盒在2～8℃保存，可儲存至失效期。啟封使用的試劑置儀器試劑倉冰箱內穩(wěn)定14天。開蓋后避免污染。當試劑變混濁，或空白吸光率>0.1時，表明試劑已變質，不能繼續(xù)使用。4.3試劑盒準備：液態(tài)雙試劑型，即開即用，無特殊準備。4.4試劑盒主要成分：組成混合后的濃度R1:聚乙二醇<4%氯化鈉106mmol/LTris/HCL緩沖液15mmol/LR2:抗人APOB抗體表面活性劑5校準品與校準模式5.1校準品：與試劑盒配套的北京利德曼生化技術有限公司校準液。5.2校準類型和校準點數目：非線性模式，5個校準點。5.3校準周期：校準間隔時間不限。但在：①更換試劑或出現質控漂移時；②儀器進行全面保養(yǎng)后；③儀器的重要零件更換后，進行一次校準。5.4校準液重建方法：校準液為干粉，加入1.0ml生理鹽水，室溫放置30分鐘，混勻后倍比稀釋成5個濃度（其中最后一管為生理鹽水空白管）即可使用。6質控品與室內質控規(guī)則6.1質控品采用由上海申峰生物試劑有限公司公司提供的兩個不同水平定值質控血清。6.2質控液重建方法：液態(tài)質控血清，即開即用，無需特殊準備。6.3質控品測定：在每一批標本中測定兩個水平質控血清各一次。6.4質控規(guī)則：采用Westgard多規(guī)則質控規(guī)則，由計算機程序進行檢索與判斷。6.5如出現失控情況，按室內質控標準操作程序采取各種有效的糾正措施及時糾正，并在確認重新回復到控制狀態(tài)后開始標本檢測。7適用儀器適用AEROSET和C16000全自動生化分析儀器全自動生化分析儀器。8標本檢測步驟裝載試劑→進行校準→進行質控→輸入標本檢測項目→加載標本→標本測定→結果復核→報告。主要分析參數參見說明書。10結果計算儀器根據非線性校準曲線自動給出每個標本測定結果。11檢驗結果的報告及范圍11.1結果的報告11.1.1結果經審核后，確認準確無誤后發(fā)出報告。11.1.2報告單上標明結果的計量單位、參考區(qū)間、報告日期、時間、操作者和審核者簽名，并有與申請單相同的醫(yī)學信息。11.1.3如收到標本的質量可能對測定結果有影響的也在報告單上指出。11.2報告范圍：0.00～2.4g/L，超過此范圍的結果報告時必須附有證明該結果準確可靠的文字說明，例如：系根據標本稀釋后重復測定的結果。12操作性能12.1精密度：批內CV<5.0％，批間CV<6.0％；12.2靈敏度：載脂蛋白B濃度為：1g/L時，濁度吸光度A340nm約0.372~0.454。12.3線性范圍：0.00～2.4g/L。12.4方法的有限性及干擾因素：內源性干擾物溶血為1000mg/ml、脂血2000mg/ml、黃疸30mg/ml、抗壞血酸300mg/ml對測試結果無明顯影響。13參考范圍及醫(yī)學決定水平參考范圍；0.49-1.03g/L。14臨床意義14.1血清中的APOB絕大部分存在于低密度脂蛋白LDL中，在IDL、VLDL和脂蛋白(a)中也各含有一分子APOB，故血清APOB水平主要反映LDL水平，與LDL-C呈明顯的正相關。14.2流行病學與臨床研究結果已確認，高濃度APOB是冠心病的危險因素，且APOB是各項血脂指標中較好的動脈粥樣硬化標志物。14.3冠心病高APOB血癥的藥物干預實驗結果表明，降低APOB水平可以減少冠心病發(fā)病及促進粥樣斑塊的消退。15結果審核以及分析與相關項目的聯(lián)系15.1由資深專業(yè)人員負責檢驗結果的審核。15.2認真審核每一個測定結果，審核者對發(fā)出報告結果的準確性和可靠性負責，并在報告單的審核者處簽名。15.3相關項目：審核與血脂其他指標和與載脂蛋白等的關系，apoB一般與LDL-C濃度呈正相關。如出現與臨床不符甚至相悖的情況，應分析與查找原因。16威脅生命的“緊急值”及報告規(guī)定通常無威脅生命的“緊急值”。17、有關引用程序與文件17.1Abbott自動生化分析儀儀器標準操作規(guī)程。17.2生化檢驗室內質控標準操作程序。17.3檢驗結果審核程序。1