貴州省昆明裂腹魚種質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)貴州省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布I前言 I 12規(guī)范性引用文件 13術(shù)語與定義 14符號與縮略語 15主要形態(tài)構(gòu)造 16生長與繁殖 47遺傳學(xué)特性 4附錄A(規(guī)范性附錄)檢測方法與同工酶各種試劑的配制 8附錄B(規(guī)范性附錄)染色體各種試劑的配制 本標(biāo)準(zhǔn)按GB/T1.1-2009《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)的結(jié)構(gòu)和編寫》給出的規(guī)則起草。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：詹會祥、晏宏、周禮敬、安苗、劉朝琴、王朝榮、楊林、劉桂蘭、周訓(xùn)才。1b)A.iii-5:指昆明裂腹魚臀鰭的不分枝鰭條3條和5條軟條；c)P.i-18~20:指昆明裂腹魚胸鰭的不分d)V.i-9~10:指昆明裂腹魚腹鰭的不分枝鰭條1條和23圖1昆明裂腹魚的外形圖5.2.2可數(shù)性狀按照GB/T18654.1和GB/T18654.3——側(cè)線鱗——第一鰓弓鰓耙數(shù)：外側(cè)17~20,內(nèi)側(cè)20~25。5.2.3可量性狀按照GB/T18654.1和GB/T18654.3的規(guī)定執(zhí)行，獲得體長17.0cm~31.0cm,體重101.0g~510.0g的個體實測性狀比值見表1。表1實測可量性狀比例值頭長/吻長頭長/吻須5.3內(nèi)部構(gòu)造鰾2室，其后室為前室長的2.0倍~2.5倍。5.3.2脊椎骨脊椎骨總數(shù)為48。5.3.3下咽骨4下咽齒3行，2.3.5~5.3.2;細(xì)圓，頂端尖而稍鉤曲，咀嚼面凹入呈匙狀；內(nèi)行第一枚齒細(xì)小。表2昆明裂腹魚全長與體重實測值6.2繁殖6.2.1性成熟年齡：雄魚3齡，雌魚4齡；最佳繁殖年齡：雄魚4齡~8齡，雌魚5齡~9齡。6.2.2產(chǎn)卵類型：沉性卵。6.2.4懷卵量：不同齡性成熟個體的懷卵量見表3。表3昆明裂腹魚個體懷卵量567相對懷卵量(粒/g體重)7遺傳學(xué)特性7.1生化遺傳特性7.1.1乳酸脫氫酶(LDH)圖譜昆明裂腹魚尾鰭和性腺組織中乳酸脫氫酶(LDH)同工酶電泳圖譜見圖2,呈典型5條酶帶。5十昆明裂腹魚肌肉組織中蘋果酸脫氫酶(MDH)同工十十6ES-288&X入)8AA人07圖7引物P04在昆明裂腹魚12尾個體中的擴(kuò)增圖譜引物編碼序列(5°-3°)735242646283537342537362562516352855364合計(Total)47.11%見(表5)。8——主要儀器：FA1004型號的電子天平(上海良平儀器儀表有限公司，精度為0.1mg)、型電泳槽(北京市六一儀器廠生產(chǎn))、凝膠成像系統(tǒng)(SYNGNE);肝臟和性腺按1:4加入緩沖液，肌肉和尾鰭則按1:3加入緩沖液；2次為30min;肝臟和性腺離心3次，第1次離心時間為20min,第2次為30min,第3次為9另2種酶為5%。濃縮膠濃度都為3%(pH=6.7)。電極緩沖液為Tris-甘氨酸(0.1M,pH丙烯酰胺單分離膠緩沖18.16gTris溶解在60ml雙蒸水中，用1N的鹽酸調(diào)pH至8.9,再用雙蒸水稀釋至100ml,在4℃保存?zhèn)溆?。濃縮膠緩沖3.03gTris溶解在60ml雙蒸水中，用1N的鹽酸調(diào)pH至6.8,再用雙蒸水稀釋至100ml,在4℃保存?zhèn)溆?。電極緩沖液稱0.6gTris和2.88g甘氨酸溶于雙蒸水中，調(diào)節(jié)pH至8.3,定容到名稱分離膠系統(tǒng)(5%)分離膠系統(tǒng)(7.5%)用量(ml)加雙蒸水到100ml加雙蒸水到100ml濃縮膠系統(tǒng)(3%)名稱用量(ml)加雙蒸水到100ml加水到100ml酶名稱染色配方酯酶(EST)乳酸脫氫酶(LDH)1MDL-乳酸鈉溶液(pH7.0)10ml,0.1MNaCl溶液5ml,0.5MTris-HCl(pH7.4)15ml,NAD+50mg,NBT30mg,PMS蘋果酸脫氫酶(MDH)PMS(1%)10.5mg,