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文檔簡(jiǎn)介
中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)
《飼料添加劑枯草芽孢桿菌》編制說(shuō)明
(公開(kāi)征求意見(jiàn)稿)
承擔(dān)單位:廣東省科學(xué)院微生物研究所
(廣東省微生物分析檢測(cè)中心)
二○二四年一月
農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)《飼料添加劑》編制說(shuō)明
一、工作簡(jiǎn)況,包括任務(wù)來(lái)源、制定背景、工作過(guò)程等
(一)任務(wù)來(lái)源
本文件修訂任務(wù)由農(nóng)業(yè)農(nóng)村部農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)管司《關(guān)于下達(dá)2023年農(nóng)
業(yè)國(guó)家和行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)制修訂項(xiàng)目計(jì)劃的通知》(農(nóng)質(zhì)標(biāo)函〔2023〕51號(hào)),項(xiàng)目
編號(hào)NYB-23082,由廣東省科學(xué)院微生物研究所(廣東省微生物分析檢測(cè)中心)
羊宋貞主持承擔(dān)《飼料添加劑枯草芽孢桿菌》NY/T2131-2012的修訂工作。
(二)標(biāo)準(zhǔn)制定的背景
近年來(lái)隨著國(guó)家減肥減藥、養(yǎng)殖替抗等政策的大力實(shí)施,微生物在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)
領(lǐng)域的應(yīng)用日趨廣泛深入,農(nóng)業(yè)生態(tài)系統(tǒng)中微生物功能的最大化已經(jīng)成為現(xiàn)代農(nóng)
業(yè)領(lǐng)域展的重要方向。大量研究發(fā)現(xiàn)微生態(tài)制劑對(duì)機(jī)體免疫、繁殖性能、生產(chǎn)性
能等方面有重要促進(jìn)和改善作用,兼具綠色、生態(tài)、無(wú)毒、不產(chǎn)生耐藥性等優(yōu)點(diǎn),
是目前農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中替代抗生素使用的理想材料,在提升動(dòng)物健康水平和養(yǎng)殖生產(chǎn)
效率方面發(fā)揮了至關(guān)重要的作用。由于自然界中微生物種類(lèi)繁多,為規(guī)范和確保
微生物類(lèi)飼料產(chǎn)品的質(zhì)量安全和產(chǎn)業(yè)的健康有序發(fā)展,我國(guó)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部于2013
年制定了《飼料添加劑品種目錄(2013)》(公告第2045號(hào)),并于2021年又
對(duì)其進(jìn)行了修訂(公告第356號(hào)),目錄中允許添加的微生物共有36種,枯草
芽孢桿菌(Bacillussubtilis)是其中允許添加的最為常見(jiàn)且應(yīng)用最為廣泛的菌種
之一??莶菅挎邨U菌具有調(diào)節(jié)和改善動(dòng)物腸道菌群平衡、提高動(dòng)物機(jī)體免疫力、
提高飼料轉(zhuǎn)化率和利用率、促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)發(fā)育等重要功能,已經(jīng)成為微生態(tài)制劑
生產(chǎn)中應(yīng)用最為廣泛的重要功能菌種。盡管如此,由于芽孢桿菌屬(Bacillus)
內(nèi)的種類(lèi)多達(dá)100多個(gè),高度同源的一些類(lèi)群采用常規(guī)技術(shù)區(qū)分難度較大,這也
直接或間接導(dǎo)致市場(chǎng)上急劇增加的該類(lèi)型微生物制劑產(chǎn)品質(zhì)量參差不齊,一些產(chǎn)
品中實(shí)際標(biāo)注和使用的“枯草芽孢桿菌”存在近緣種混用、誤用,超出國(guó)家允許
添加使用的安全菌種范圍,實(shí)際數(shù)量與產(chǎn)品標(biāo)識(shí)不符等系列問(wèn)題,造成的潛在生
物安全風(fēng)險(xiǎn)不斷增加,嚴(yán)重阻礙了我國(guó)微生物飼料產(chǎn)業(yè)的健康可持續(xù)發(fā)展。
國(guó)內(nèi)生產(chǎn)廠家大多采用液體深層發(fā)酵工藝生產(chǎn)枯草芽孢桿菌,產(chǎn)品以固態(tài)為
主。生產(chǎn)工藝流程如下:斜面培養(yǎng)→搖瓶培養(yǎng)→種子罐→發(fā)酵罐→載體吸附→噴
—1—
霧干燥→成品包裝。枯草芽孢桿菌菌種經(jīng)過(guò)斜面活化培養(yǎng)、搖瓶增菌培養(yǎng)后轉(zhuǎn)至
種子罐培養(yǎng),在種子罐培養(yǎng)至適宜階段轉(zhuǎn)移到發(fā)酵罐中,發(fā)酵過(guò)程嚴(yán)格控制發(fā)酵
溫度、pH值、溶解氧、攪拌轉(zhuǎn)速、泡沫、罐壓等指標(biāo),待發(fā)酵罐中菌體生長(zhǎng)至
芽孢生成率達(dá)到一定比例停止發(fā)酵。發(fā)酵液經(jīng)一定處理后添加載體后進(jìn)行噴霧干
燥處理,按要求計(jì)量、包裝。
國(guó)家農(nóng)業(yè)農(nóng)村部于2012年發(fā)布的農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)NY/T2131-2012《飼料添
加劑枯草芽孢桿菌》,在過(guò)去10年中為飼料添加劑產(chǎn)品的質(zhì)量控制提供了重要
的指導(dǎo)。隨著近年來(lái)農(nóng)業(yè)微生物制劑產(chǎn)品種類(lèi)的快速增加,以及枯草芽孢桿菌近
緣物種的不斷被發(fā)現(xiàn),如Bacillusnakamurai(2016)、Bacillushalotolerans(2017)、
Bacillusinaquosorum(2020)、Bacilluscabrialesii(2019)、Bacillusstercoris(2020)、
Bacillusspizizenii(2020)等,與已有的近緣種如解淀粉芽孢桿菌(Bacillus
amyloliquefaciens)、貝萊斯芽孢桿菌(Bacillusvelezensis)、暹羅芽孢桿菌(Bacillus
siamensis)等類(lèi)群相交織,使得近緣類(lèi)群日趨龐大復(fù)雜,現(xiàn)有行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)中主成分
項(xiàng)目“枯草芽孢桿菌活菌數(shù)檢測(cè)”的檢測(cè)方法引用了國(guó)標(biāo)GB/T26428-2010《飼
用微生物制劑中枯草芽孢桿菌的檢測(cè)》,該方法現(xiàn)已無(wú)法實(shí)現(xiàn)高效的區(qū)分。國(guó)外
尚沒(méi)有關(guān)于飼料添加劑枯草芽孢桿菌的具體標(biāo)準(zhǔn)可以查詢(xún),只有關(guān)于飼料添加劑
芽孢桿菌的檢測(cè)和計(jì)數(shù)的歐洲標(biāo)準(zhǔn)BSEN15784-2021(Animalfeedingstuffs:Methodsof
samplingandanalysis-DetectionandenumerationofBacillusspp.usedasfeedadditive)。因此,
急需針對(duì)標(biāo)準(zhǔn)NY/T2131-2012《飼料添加劑枯草芽孢桿菌》中5.5/枯草芽孢桿
菌檢測(cè)的方法作出修訂。
(三)主要工作過(guò)程
1確定標(biāo)準(zhǔn)修訂小組,搜集樣品、模式菌株及資料。
2023年4月~5月:查閱枯草芽孢桿菌相關(guān)的國(guó)內(nèi)外標(biāo)準(zhǔn)、搜集枯草芽孢桿
菌飼料添加劑樣品及枯草芽孢桿菌與相近菌種模式菌株。
2確定技術(shù)路線(xiàn),進(jìn)行實(shí)驗(yàn)
2023年6月~8月:確定技術(shù)路線(xiàn),進(jìn)一步進(jìn)行相關(guān)試驗(yàn)后對(duì)標(biāo)準(zhǔn)草案擬修
訂內(nèi)容進(jìn)行完善并按照GB/T1.1-2020形成標(biāo)準(zhǔn)初稿。
3實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證
2023年9月:由國(guó)家飼料質(zhì)量檢驗(yàn)檢測(cè)中心(北京)、中國(guó)廣州分析測(cè)試
—2—
中心、廣電計(jì)量檢測(cè)集團(tuán)股份有限公司對(duì)修訂的枯草芽孢桿菌檢測(cè)方法進(jìn)行不同
實(shí)驗(yàn)室間方法驗(yàn)證,根據(jù)方法驗(yàn)證結(jié)果確定標(biāo)準(zhǔn)征求意見(jiàn)稿。
4定向征求意見(jiàn)
2023年10月8日~10月25日,本標(biāo)準(zhǔn)定向征求意見(jiàn)發(fā)函單位35個(gè),回函
單位21個(gè),其中來(lái)自科研院所和高校的11份、第三方檢測(cè)機(jī)構(gòu)的6份、飼料添
加劑生產(chǎn)使用企業(yè)的回函4份。共收到意見(jiàn)130條,采納93條,部分采納9條,
不采納28條,對(duì)未采納意見(jiàn)進(jìn)行了說(shuō)明,詳情見(jiàn)《征求意見(jiàn)匯總處理表》。
5依據(jù)反饋意見(jiàn)對(duì)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行完善
2023年11月~12月:根據(jù)反饋意見(jiàn),對(duì)定向征求意見(jiàn)進(jìn)行修改,完善標(biāo)準(zhǔn)
正文和編制說(shuō)明。
6申請(qǐng)預(yù)審
根據(jù)反饋意見(jiàn)修改形成送審稿后,上報(bào)全國(guó)飼料工業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì),申
請(qǐng)預(yù)審。
7通過(guò)預(yù)審
2024年1月23日,通過(guò)預(yù)審,預(yù)審會(huì)共邀請(qǐng)8位專(zhuān)家對(duì)本標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行了審查,
提出3項(xiàng)修改意見(jiàn)。根據(jù)意見(jiàn)對(duì)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行了修改,形成公開(kāi)征求意見(jiàn)稿,送全國(guó)
飼料工業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)。
二、標(biāo)準(zhǔn)編制原則、修訂前后技術(shù)內(nèi)容的對(duì)比、主要內(nèi)容及其確定依
據(jù)
(一)標(biāo)準(zhǔn)修訂原則
本文件遵循市場(chǎng)相關(guān)性原則、協(xié)商一致性和普遍適用性原則,依據(jù)GB/T
1.1-2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分:標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》、GB/T
20001.10-2014《標(biāo)準(zhǔn)編寫(xiě)規(guī)則第10部分:產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)》的規(guī)定進(jìn)行修訂。
(二)主要修訂內(nèi)容(修訂前后技術(shù)內(nèi)容的對(duì)比)
本文件代替NY/T2131-2012《飼料添加劑枯草芽孢桿菌》,與NY/T
2131-2012相比,除結(jié)構(gòu)調(diào)整和編輯性改動(dòng)外,主要技術(shù)變化如表1所示。
表1新舊標(biāo)準(zhǔn)主要技術(shù)變化
序號(hào)更改內(nèi)容原章節(jié)現(xiàn)章節(jié)
—3—
1增加了對(duì)原料的要求4.1
2將衛(wèi)生指標(biāo)中的“金黃色葡萄球菌”更改為“凝固酶陽(yáng)性4.6表24.5表2
葡萄球菌”
3更改了衛(wèi)生指標(biāo)“黃曲霉毒素”的適用產(chǎn)品4.6表24.6表2
4增加微生物采樣標(biāo)準(zhǔn)5.15
5更改了枯草芽孢桿菌活菌數(shù)檢測(cè)的檢測(cè)方法5.56.2
6更改了黃曲霉毒素B1檢測(cè)方法5.6.16.9
7增加了組批要求7.1
8更改了需要型式檢驗(yàn)時(shí)的情況6.27.3
9增加了除微生物之外各指標(biāo)的極限數(shù)值判定執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)7.4.3
10更改了保質(zhì)期要求8.58.5
(三)主要技術(shù)內(nèi)容及其確定依據(jù)
本文件主要技術(shù)內(nèi)容說(shuō)明如下:
1.國(guó)內(nèi)外標(biāo)準(zhǔn)情況
目前國(guó)內(nèi)在國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中,尚無(wú)枯草芽孢桿菌的產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)。針對(duì)飼料添加
劑枯草芽孢桿菌的只有農(nóng)業(yè)行業(yè)產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)NY/T2131-2012《飼料添加劑枯
草芽孢桿菌》及國(guó)家檢測(cè)方法標(biāo)準(zhǔn)GB/T26428-2010《飼用微生物制劑中枯
草芽孢桿菌的檢測(cè)》。其他產(chǎn)品的標(biāo)準(zhǔn)有生物產(chǎn)品國(guó)家檢測(cè)方法標(biāo)準(zhǔn)GB/T
34224-2017《生物產(chǎn)品中功能性微生物檢測(cè)》,細(xì)菌微生物農(nóng)藥的農(nóng)業(yè)行業(yè)
產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)NY/T2293.1-2012《細(xì)菌微生物農(nóng)藥枯草芽孢桿菌第1部分枯草芽孢桿
菌母藥》、農(nóng)用微生物菌劑產(chǎn)品的農(nóng)業(yè)檢測(cè)方法標(biāo)準(zhǔn)NY/T3264-2018《農(nóng)用微生物菌劑
中芽孢桿菌的測(cè)定》,進(jìn)出口標(biāo)準(zhǔn)SN/T2728-2010《枯草芽孢桿菌檢測(cè)鑒定方法》及地
方標(biāo)準(zhǔn)DB32/T2583-2013《飼料中飼用芽孢桿菌的測(cè)定》;國(guó)外標(biāo)準(zhǔn)有歐洲標(biāo)準(zhǔn)BSEN
15784-2021《Animalfeedingstuffs:Methodsofsamplingandanalysis-Detectionand
enumerationofBacillusspp.usedasfeedadditive》(表2)。
表2國(guó)內(nèi)外相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)情況
序號(hào)標(biāo)準(zhǔn)號(hào)名稱(chēng)
1GB/T26428-2010飼用微生物制劑中枯草芽孢桿菌的檢測(cè)
2GB/T34224-2017生物產(chǎn)品中功能性微生物檢測(cè)
3NY/T2293.1-2012細(xì)菌微生物農(nóng)藥枯草芽孢桿菌第1部分枯草芽孢桿菌母藥
4NY/T3264-2018農(nóng)用微生物菌劑中芽孢桿菌的測(cè)定
—4—
5SN/T2728-2010枯草芽孢桿菌檢測(cè)鑒定方法
6DB32/T2583-2013飼料中飼用芽孢桿菌的測(cè)定
7BSEN15784-2021Animalfeedingstuffs:Methodsofsamplingandanalysis-Detection
andenumerationofBacillusspp.usedasfeedadditive
2.企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)情況
目前現(xiàn)行有效的企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)有50多項(xiàng),由生產(chǎn)企業(yè)起草制定(表3)
表3枯草芽孢桿菌部分企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)號(hào)
序號(hào)起草單位標(biāo)準(zhǔn)號(hào)
1安琪酵母股份有限公司Q/YB.J02.62-2022
2中糧生物科技股份有限公司Q/ZSHA006-2023
3云南博仕奧生物技術(shù)有限公司Q/YBS010-2023
4安琪酶制劑(宜昌)有限公司Q/AQMZJ0030-2023
5山西晟禾生物科技有限公司Q/YSH1.1-2023
6山西大禹生物工程股份有限公司Q/DYSW025-2023
7山東澤生生物科技有限公司Q/370923DZS008-2023
8山東蔚藍(lán)生物科技有限公司Q/371621SLH010-2022
9青島尚德生物技術(shù)有限公司Q/370214SDS001-2021
10昆明愛(ài)科特生物科技有限公司Q/KAK25-2022
11濟(jì)南百斯杰生物工程有限公司Q/370126BSJ058-2022
12北京華美源生物科技有限公司Q/BHMY029-2022
13朝陽(yáng)華星生物工程有限公司Q/CYHX045-2020
14高唐華農(nóng)生物工程有限公司Q/371526GHS001-2022
15廣東碧德生物科技有限公司Q/BD17-2019
16廣東海納川生物科技股份有限公司Q/(GD)HNC12-2021
17海南天合祥農(nóng)生態(tài)生物科技有限公司文昌分公司Q/XNSW05-2022
18河南德鄰生物制品有限公司Q/HDS010-2016
19河南炎黃生物工程有限公司Q/HYHT006-2021
20河南億萬(wàn)中元生物技術(shù)有限公司Q/HYS005-2023
—5—
表4飼料添加劑枯草芽孢桿菌產(chǎn)品企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)及現(xiàn)有標(biāo)準(zhǔn)中各技術(shù)指標(biāo)要求匯總分析
序號(hào)標(biāo)準(zhǔn)號(hào)外觀與性狀粒度水分總砷鉛汞鎘黃曲霉毒素霉菌總數(shù)大腸菌群沙門(mén)氏志賀氏凝固酶陽(yáng)性葡保質(zhì)期
(%)(mg/kg)(mg/kg)(mg/kg)(mg/kg)B1(μg/kg)(CFU/g)(MPN/100g)菌(25g)菌(25g)萄球菌(25g)(月)
1Q/YB.J02.62粉狀,淡棕黃色-≤8.0≤10.0≤40.0-----不得檢--24
或暗白色,略帶出
-2022腥味,無(wú)肉眼可
見(jiàn)外來(lái)雜質(zhì)
2Q/ZSHA粉末或顆粒狀,-≤12.0≤2.0≤5.0≤0.1≤0.5≤30.0<4.0×104-不得檢--12
白色至黃色、黃出
006-2023褐色,無(wú)發(fā)霉、
結(jié)塊及異物、異
臭
3Q/YBS粉末或顆粒狀,通過(guò)0.85mm孔≤10.0≤2.0≤5.0-≤0.5<2.0×104≤1.0×104不得檢-12
白色至黃褐色,徑篩≥95.0出
010-2023無(wú)結(jié)塊、潮解現(xiàn)
象、無(wú)異味,有
特殊發(fā)酵氣味
4Q/AQMZJ粉末或顆粒,黃1.19mm分析篩≤10.0≤2.0≤5.0≤0.1≤0.5≤10.0<2.0×104≤1.0×104不得檢不得檢不得檢出12
色至黃褐色,無(wú)全部通過(guò),出出
0030-2023
霉變潮解、結(jié)塊,0.59mm篩上物
無(wú)異味不大于10%
5Q/YSH1.1-2符合固有形態(tài)、粉劑應(yīng)通過(guò)≤9.0≤2.0≤5.0≤0.1≤0.5≤10<2.0×104≤1.0×104不得檢不得檢不得檢出12
色澤、氣味、均SSW0.400/0.25出出
023勻度和雜質(zhì)等要0mm試驗(yàn)篩
求,無(wú)異臭味、
無(wú)異物
6Q/DYSW粉末狀,無(wú)變質(zhì)、全部通過(guò)≤12.0≤10.0≤40.0≤0.1≤0.5≤10<2.0×104≤1.0×104不得檢不得檢不得檢出12
結(jié)塊及異味、異0.90mm分析出出
025-2023
嗅篩,0.60mm分
析篩上物不大
于20%
7Q/370923DZ黃色或深棕色粉粉劑通過(guò)≤≤2.0≤5.0≤0.1≤0.5≤10.0<2.0×104≤3.0×103不得檢不得檢不得檢出12
末,無(wú)變質(zhì)、結(jié)SSW0.400/0.258.0出出
S008-2023塊及異味,無(wú)味0mm試驗(yàn)篩
或稍有酸澀味
8Q/371621SL灰白色至黃褐色全部通過(guò)≤12.0≤2.0≤5.0≤0.1≤0.5≤10.0<2.0×104≤1.0×104不得檢不得檢不得檢出12
粉末,無(wú)變質(zhì)、0.90mm分析出出
H010-2022
結(jié)塊及異味、導(dǎo)篩,0.60mm分
嗅。析篩上物不大
于10%
—6—
9Q/370214SD黃色粉末,無(wú)變?nèi)客ㄟ^(guò)≤10.0≤2.0≤5.0≤0.1≤0.5≤10.0≤2.0×≤100不得檢不得檢不得檢出12
質(zhì)、結(jié)塊及異味、2.5mm分析篩,104出出
S001-2021
異嗅1.25mm分析篩
篩上物不大于
10%
10Q/KAK白色至淺黃色粉20目標(biāo)準(zhǔn)篩通≤10.0≤2.0≤5.0≤0.1≤0.5≤10.0≤2.0×≤1.0×104不得檢不得檢不得檢出12
末,細(xì)度均勻,過(guò)率100%,40104出出
25-2022流散性好,無(wú)異目標(biāo)準(zhǔn)篩通過(guò)
物、有特有氣味、率≥90.0
無(wú)異臭味
11Q/370126BS淺棕色至棕色粉-≤≤2.0≤5.0≤0.1≤0.5≤10.0≤2.0×≤1.0×104不不得不得檢出12
末,無(wú)變質(zhì)、結(jié)10.104得檢出
J058-2022
塊,無(wú)異味,無(wú)0檢
潮解現(xiàn)象,具有出
特殊發(fā)酵氣味
12Q/BHMY色澤均勻一致,通過(guò)W≤10.0≤2.0≤5.0-----不得檢--12
無(wú)結(jié)塊、霉變、=0.4mm孔徑試出
029-2022
異味及異臭驗(yàn)篩
13Q/CYHX045黃色至黃褐色粉90%以上的產(chǎn)品≤10.0≤2.0≤5.0≤0.1≤0.5≤10.0-≤1.0×106不得檢不得檢不得檢出12
末,色澤均勻,通過(guò)篩孔內(nèi)徑出出
-2020無(wú)發(fā)霉變質(zhì)、結(jié)為0.8mm的標(biāo)
塊有異味異嗅準(zhǔn)篩
14Q/371526GH淡黃色粉狀物,全部通過(guò)≤12.0≤2.0≤5.0≤0.1≤0.5≤10.0≤2.0×≤1.0×104不得檢不得檢不得檢出24
無(wú)變質(zhì)、結(jié)塊,0.6mm分析篩,104出出
S001-2022
具有正常發(fā)酵香0.45mm分析篩
味篩上物不大于
10%
15Q/BD黃褐色至淺黃通過(guò)≤9.0≤2.0≤5.0≤0.1≤0.5≤10.0≤2.0×≤1.0×104不得檢--12
色,有發(fā)酵香味SSW0.400/0.25104出
17-2019
的粉末0mm的試驗(yàn)篩
16Q/(GD)HNC類(lèi)白色至黃色粉應(yīng)通過(guò)≤9.0≤2.0≤5.0--------12
末0.600mm的試
12-2021
驗(yàn)篩
17Q/XNSW呈粉狀和顆粒狀全部通過(guò)≤12.0≤2.0≤5.0≤0.1≤0.5≤10.0≤2.0×≤1.0×104不得檢不得不得檢出18
均勻混合物,色2.5mm分析篩,104出檢出
05-2022
澤一致,無(wú)異物,1.25mm分析篩
無(wú)霉變、結(jié)塊及篩上物不大于
異味10%
18Q/HDS粉狀,白色至黃全部通過(guò)3.0分≤12.0≤5.0≤20.0--≤10.0-≤1.0×104不得檢不得檢不得檢出12
褐色,色澤一致,析篩出出
010-2016無(wú)發(fā)霉變質(zhì)、結(jié)
塊
—7—
19Q/HYH粉狀,色澤一致,全部通過(guò)≤13.0≤2.0≤5.0≤0.1≤0.5≤10.0≤2.0×≤1.0×104不得檢不得檢不得檢出18
無(wú)發(fā)霉變質(zhì)、異2.0mm的分析104出出
T006-2021
味篩
20Q/HYS淺黃色至淺灰色100%通過(guò)≤10.0≤5.0≤20.0-≤1.0≤10.0-----24
粉末,具有發(fā)酵0.90mm分析篩
005-2023臭味,無(wú)霉變、
無(wú)結(jié)塊
21NY/T符合包裝上標(biāo)示粉劑應(yīng)通過(guò)≤9.0≤2.0≤5.0≤0.1≤0.5≤10.0≤2.0×≤1.0×104不得檢不得不得檢出12
的產(chǎn)品固有形SSW0.400/0.25104出檢出
2131-2012態(tài)、色澤、氣味、0mm的試驗(yàn)篩
均勻度和雜質(zhì)等
要求,無(wú)異臭味,
無(wú)異物。
≤8-12≤2-10≤5-40≤0.1≤0.5≤10.0-30.0≤2.0×≤1.0×不得檢不得不得檢出12-24
104102~1.0×出檢出
106
—8—
2.枯草芽孢桿菌及相近模式菌株收集情況
收集市場(chǎng)上用于生產(chǎn)的菌株及相近菌種模式菌株,共37株(表5)。預(yù)審會(huì)時(shí)專(zhuān)家提
出各菌株編號(hào)都來(lái)源于同一保藏中心的編號(hào),為了更好顯示菌種來(lái)源的權(quán)威性,進(jìn)一步補(bǔ)充
了各菌株原始來(lái)源的保藏中心編號(hào)。
表5試驗(yàn)枯草芽孢桿菌及相近菌種模式菌株
序號(hào)原始來(lái)源的保藏
菌株編號(hào)來(lái)源
中心編號(hào)
1枯草芽孢桿菌(B.subtilis)GDMCC1.2498T廣東省微生物菌種保藏中心CGMCC1.4255
2枯草芽孢桿菌(B.subtilis)GDMCC1.427廣東省微生物菌種保藏中心廣東省微生物研
究所
3枯草芽孢桿菌(B.subtilis)GDMCC810525廣東省微生物菌種保藏中心廣東省微生物菌
種保藏中心
976-1K
4枯草芽孢桿菌(B.subtilis)GDMCC1.1357廣東省微生物菌種保藏中心廣東省微生物研
究所農(nóng)用生物產(chǎn)
品實(shí)驗(yàn)室
20180327BSU06
5枯草芽孢桿菌(B.subtilis)GDMCC1.2586廣東省微生物菌種保藏中心華南理工大學(xué)
6枯草芽孢桿菌(B.subtilis)GDMCC1.22廣東省微生物菌種保藏中心CGMCC1.421
7枯草芽孢桿菌(B.subtilis)GDMCC1.372廣東省微生物菌種保藏中心ACCC11089
8枯草芽孢桿菌(B.subtilis)GDMCC1.1490廣東省微生物菌種保藏中心廣東省微生物研
究所LB5
9枯草芽孢桿菌(B.subtilis)GDMCC1.131廣東省微生物菌種保藏中心CGMCC1.921
10枯草芽孢桿菌(B.subtilis)廣東省微生物菌種保藏中心廣東省微生物菌
GDMCC810444種保藏中心
H062
11枯草芽孢桿菌(B.subtilis)廣東省微生物菌種保藏中心廣東省微生物研
GDMCC811704
究所
12枯草芽孢桿菌(B.subtilis)廣東省微生物菌種保藏中心廣東省微生物研
79703B
究所
13枯草芽孢桿菌(B.subtilis)廣東省微生物菌種保藏中心廣東省微生物菌
GDMCC800594種保藏中心
RBB115
14枯草芽孢桿菌(B.subtilis)廣東省微生物菌種保藏中心廣東省微生物菌
GDMCC806729種保藏中心
EC142C
15枯草芽孢桿菌(B.subtilis)GDMCC1.258廣東省微生物菌種保藏中心CGMCC1.1390
16枯草芽孢桿菌(B.subtilis)廣東省微生物菌種保藏中心青海省農(nóng)林科學(xué)
GDMCC1.1976
院C30101
17枯草芽孢桿菌(B.subtilis)廣東省微生物菌種保藏中心廣東省微生物菌
GDMCC810496
種保藏中心
—9—
18枯草芽孢桿菌(B.subtilis)廣東省微生物菌種保藏中心廣東省微生物菌
GDMCC803523種保藏中心
699K
19解淀粉芽孢桿菌(B.GDMCC1.3155T廣東省微生物菌種保藏中心ATCC23350
amyloliquefaciens)
20黑棕色芽胞桿菌(B.GDMCC1.4066T廣東省微生物菌種保藏中心LMG16797
atrophaeus)
21醬豆芽孢桿菌(B.GDMCC1.4031T廣東省微生物菌種保藏中心KACC18425
glycinifermentans)
22耐鹽芽孢桿菌(B.GDMCC1.4092T廣東省微生物菌種保藏中心DSM8802
halotolerans)
23海氏芽孢桿菌(B.haynesii)GDMCC1.4074T廣東省微生物菌種保藏中心CCUG70178
24缺水芽孢桿菌(B.GDMCC1.4078T廣東省微生物菌種保藏中心KCTC13429
inaquosorum)
25地衣芽孢桿菌(B.GDMCC1.362T廣東省微生物菌種保藏中心ACCC10236
licheniformis)
26莫哈維芽孢桿菌(B.GDMCC1.4069T廣東省微生物菌種保藏中心LMG17797
mojavensis)
27中村芽孢桿菌(B.GDMCC1.4073T廣東省微生物菌種保藏中心CCUG68786
nakamurai)
28副地衣芽孢桿菌(B.GDMCC1.4032T廣東省微生物菌種保藏中心KACC18426
paralicheniformis)
29褶皺芽孢桿菌(B.rugosus)GDMCC1.4071T廣東省微生物菌種保藏中心CICC24827
30暹羅芽孢桿菌(B.siamensis)GDMCC1.3633T廣東省微生物菌種保藏中心LMG27594
31索諾拉芽孢桿菌(B.GDMCC1.4093T廣東省微生物菌種保藏中心DSM13779
sonorensis)
32斯氏芽孢桿菌(B.spizizenii)GDMCC1.4067T廣東省微生物菌種保藏中心LMG19156
33堆肥芽孢桿菌(B.stercoris)GDMCC1.4076T廣東省微生物菌種保藏中心KCTC33554
34斯威齊芽孢桿菌(B.swezeyi)GDMCC1.4075T廣東省微生物菌種保藏中心CCUG70177
35特基拉芽孢桿菌(B.GDMCC1.4077T廣東省微生物菌種保藏中心KCTC13622
tequilensis)
36死谷芽孢桿菌(B.GDMCC1.4068T廣東省微生物菌種保藏中心LMG18725
vallismortis)
37貝萊斯芽孢桿菌(B.GDMCC1.4070T廣東省微生物菌種保藏中心LMG22478
velezensis)
三、試驗(yàn)驗(yàn)證的分析、綜述報(bào)告,技術(shù)經(jīng)濟(jì)論證,預(yù)期的經(jīng)濟(jì)效益、
社會(huì)效益及生態(tài)效益。
(一)枯草芽孢桿菌檢測(cè)方法的確定
查找了國(guó)內(nèi)外關(guān)于芽孢桿菌檢測(cè)的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn),主要有國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)《飼用微生物
—10—
制劑中枯草芽孢桿菌的檢測(cè)》GB/T26428-2010、《生物產(chǎn)品中功能性微生物檢
測(cè)》GB/T34224-2017,農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)《細(xì)菌微生物農(nóng)藥枯草芽孢桿菌第1部
分枯草芽孢桿菌母藥》NY/T2293.1-2012、《農(nóng)用微生物菌劑中芽孢桿菌的測(cè)
定》NY/T3264-2018,進(jìn)出口行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)《枯草芽孢桿菌檢測(cè)鑒定方法》SN/T
2728-2010及歐洲標(biāo)準(zhǔn)《Animalfeedingstuffs:Methodsofsamplingand
analysis-DetectionandenumerationofBacillusspp.usedasfeedadditive》BSEN
15784-2021。對(duì)比了國(guó)內(nèi)外有關(guān)芽孢桿菌的檢測(cè)方法,技術(shù)指標(biāo)比較如表6所示。
表6國(guó)內(nèi)外芽孢桿菌檢測(cè)方法技術(shù)指標(biāo)比較
技術(shù)內(nèi)容GB/TGB/TNY/TNY/TSN/TBSEN
26428-201034224-20172293.1-20123264-20182728-201015784-2021
適用產(chǎn)品飼用微生生物產(chǎn)品細(xì)菌微生物農(nóng)用微生通用飼料
物制劑農(nóng)藥物菌劑
檢樣制備25g+22525g+2253g+27mL10g+水定25g+2255g+495mL
取樣量mLmL容至100mL
溫馨提示
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