PAGE7-第2課時(shí)動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)與單克隆抗體(建議用時(shí)：40分鐘)題組一動(dòng)物細(xì)胞融合1．下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞融合的說(shuō)法，不正確的是()A．細(xì)胞融合前要用酶解法分散成單個(gè)細(xì)胞B．細(xì)胞融合的原理是細(xì)胞膜的流淌性C．融合后得到的雜交細(xì)胞能表現(xiàn)出兩個(gè)親本細(xì)胞的特點(diǎn)D．融合后得到的雜交細(xì)胞具有兩個(gè)細(xì)胞核D[動(dòng)物細(xì)胞融合前需用胰蛋白酶處理將組織細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞，A正確；動(dòng)物細(xì)胞融合的原理是細(xì)胞膜具有流淌性，B正確；融合后得到的雜交細(xì)胞獲得了兩個(gè)親本的遺傳物質(zhì)，能表現(xiàn)出兩個(gè)親本細(xì)胞的特點(diǎn)，C正確；融合后得到的雜交細(xì)胞是單核細(xì)胞，D錯(cuò)誤。]2．下列不屬于細(xì)胞融合技術(shù)應(yīng)用的是()A．細(xì)胞遺傳與細(xì)胞免疫的探討B(tài)．生物新品種的培育C．單克隆抗體的制備D．瀕危動(dòng)物的克隆D[克隆瀕危動(dòng)物是體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用，不屬于細(xì)胞融合技術(shù)的應(yīng)用。]3．無(wú)論是植物細(xì)胞，還是動(dòng)物細(xì)胞，都可以利用肯定的方法誘導(dǎo)融合，可用模型圖表示細(xì)胞融合技術(shù)的一些過(guò)程，下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A．若該過(guò)程表示植物原生質(zhì)體的融合，則甲、乙細(xì)胞可用酶解法獲得B．若該過(guò)程表示動(dòng)物細(xì)胞融合，可用滅活的病毒誘導(dǎo)C．若該過(guò)程表示制備單克隆抗體，則丙細(xì)胞是雜交瘤細(xì)胞D．以上三個(gè)過(guò)程體現(xiàn)了細(xì)胞的全能性D[植物細(xì)胞融合需先用酶除去細(xì)胞壁，制備原生質(zhì)體，再誘導(dǎo)細(xì)胞融合，A正確；若該過(guò)程表示動(dòng)物細(xì)胞融合，則可用物理、化學(xué)和生物的方法誘導(dǎo)，生物方法即用滅活的病毒誘導(dǎo)，B正確；若該過(guò)程表示制備單克隆抗體，則丙細(xì)胞是雜交瘤細(xì)胞，C正確；以上三個(gè)過(guò)程都體現(xiàn)了細(xì)胞膜的流淌性，D錯(cuò)誤。]題組二單克隆抗體的制備過(guò)程4．單克隆抗體制備過(guò)程中，涉及的生物學(xué)原理是()①動(dòng)物細(xì)胞核具有全能性②細(xì)胞膜具有肯定的流淌性③腫瘤細(xì)胞能無(wú)限增殖④一個(gè)漿細(xì)胞產(chǎn)生一種抗體A．①③ B．②③④C．④ D．①②④B[利用核移植技術(shù)克隆動(dòng)物證明白高度分化的動(dòng)物細(xì)胞核具有全能性，但單克隆抗體的制備過(guò)程中未體現(xiàn)該原理，①錯(cuò)誤；單克隆抗體的制備過(guò)程涉及動(dòng)物細(xì)胞融合，其原理是細(xì)胞膜具有肯定的流淌性，②正確；單克隆抗體的制備過(guò)程涉及體外細(xì)胞培育，利用了腫瘤細(xì)胞在體外培育時(shí)可以無(wú)限增殖的原理，③正確；一個(gè)漿細(xì)胞只能產(chǎn)生一種抗體，故可以讓B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合生產(chǎn)大量單一的抗體，④正確。]5．關(guān)于單克隆抗體制備過(guò)程的敘述，正確的是()A．可干脆從動(dòng)物體內(nèi)獲得B淋巴細(xì)胞進(jìn)行培育B．雜交瘤細(xì)胞具有B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞的雙重特點(diǎn)C．用滅活病毒誘導(dǎo)融合后形成的融合細(xì)胞即可產(chǎn)生單克隆抗體D．經(jīng)選擇培育基篩選出來(lái)的雜交瘤細(xì)胞即可用于單克隆抗體的生產(chǎn)B[將骨髓瘤細(xì)胞與免疫后的B淋巴細(xì)胞融合，經(jīng)過(guò)選擇培育基的篩選得到雜交瘤細(xì)胞，并經(jīng)專(zhuān)一抗體檢測(cè)后，培育能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞，即可得到單克隆抗體。雜交瘤細(xì)胞具有骨髓瘤細(xì)胞無(wú)限增殖的特點(diǎn)和B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生特異性抗體的特點(diǎn)。誘導(dǎo)融合后可能會(huì)形成三種融合細(xì)胞，即同種細(xì)胞融合(B—B融合細(xì)胞、瘤—瘤融合細(xì)胞)、不同種細(xì)胞融合(B—瘤融合細(xì)胞)，故須要進(jìn)一步篩選。]6．下圖是單克隆抗體制備流程的簡(jiǎn)明示意圖。下列有關(guān)敘述正確的是()A．①是從已免疫的小鼠脾臟中獲得的T淋巴細(xì)胞B．②中運(yùn)用胰蛋白酶有利于雜交瘤細(xì)胞的形成C．③同時(shí)具有脾臟細(xì)胞和鼠骨髓瘤細(xì)胞的特性D．④是經(jīng)篩選培育獲得的能分泌特異性抗體的細(xì)胞群D[明確單克隆抗體制備過(guò)程的幾個(gè)關(guān)鍵環(huán)節(jié)是精確解答本題的關(guān)鍵。①是從小鼠脾臟中獲得的能產(chǎn)生抗體的漿細(xì)胞，A項(xiàng)錯(cuò)誤；②中應(yīng)當(dāng)運(yùn)用能促進(jìn)細(xì)胞融合的促融劑，如聚乙二醇等，B項(xiàng)錯(cuò)誤；③同時(shí)具有從脾臟中分別出的漿細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞的特性，C項(xiàng)錯(cuò)誤；④是經(jīng)篩選培育獲得的能產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞群，D項(xiàng)正確。]7．(不定項(xiàng))下圖表示抗人體胃癌的單克隆抗體的制備過(guò)程，有關(guān)敘述正確的是()A．圖中試驗(yàn)小鼠注射的甲是能與抗人體胃癌抗體特異性結(jié)合的抗原B．利用聚乙二醇、滅活的病毒和電激等方法均可誘導(dǎo)細(xì)胞融合獲得乙C．用特定的選擇培育基對(duì)乙篩選，融合細(xì)胞均能生長(zhǎng)，未融合細(xì)胞均不能生長(zhǎng)D．丙須要進(jìn)行克隆化培育和抗體檢測(cè)，經(jīng)多次篩選后可獲得大量能分泌所需抗體的丁ABD[圖中從注射了甲的小鼠中獲得的B淋巴細(xì)胞可以產(chǎn)生特異性抗體，所以甲為相應(yīng)的抗原，A正確；利用聚乙二醇(化學(xué)法)、滅活的病毒(生物法)和電激(物理法)等方法均可誘導(dǎo)細(xì)胞融合獲得雜交細(xì)胞，B正確；用特定的選擇培育基對(duì)乙篩選，同種細(xì)胞的融合細(xì)胞和未融合細(xì)胞均不能生長(zhǎng)，只有融合的雜交細(xì)胞(雜交瘤細(xì)胞)能生長(zhǎng)，C錯(cuò)誤；雜交瘤細(xì)胞經(jīng)過(guò)選擇培育基的篩選并經(jīng)單一抗體檢測(cè)呈陽(yáng)性后，培育能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞，即可制備單克隆抗體，D正確。]8．人絨毛膜促性腺激素(HCG)是女性懷孕后胎盤(pán)滋養(yǎng)層細(xì)胞分泌的一種糖蛋白，制備抗HCG單克隆抗體可用于早孕的診斷。下圖是抗HCG單克隆抗體制備流程示意圖，請(qǐng)分析回答問(wèn)題：(1)制備單克隆抗體過(guò)程中要用到________和________技術(shù)。(2)制備單克隆抗體過(guò)程中，給小鼠注射的HCG相當(dāng)于________，注射后小鼠身體發(fā)生了相應(yīng)的免疫反應(yīng)，生成了________和________等細(xì)胞以及________，此過(guò)程屬于特異性免疫中的________免疫。(3)此過(guò)程生產(chǎn)的單克隆抗體可以與________特異性結(jié)合，從而診斷早孕。(4)在動(dòng)物細(xì)胞原代培育過(guò)程中，當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到細(xì)胞表面________時(shí)，細(xì)胞會(huì)停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱(chēng)為細(xì)胞的________。此時(shí)，瓶壁上形成的細(xì)胞層數(shù)是________。而在體外培育雜交瘤細(xì)胞時(shí)，瓶壁上形成的細(xì)胞層數(shù)是________。[解析](1)制備單克隆抗體的誘導(dǎo)過(guò)程有：正常小鼠進(jìn)行免疫處理、動(dòng)物細(xì)胞融合、雜交瘤細(xì)胞的篩選與培育、專(zhuān)一抗體檢測(cè)陽(yáng)性細(xì)胞培育、單克隆抗體的提純。因此，該過(guò)程要用到動(dòng)物細(xì)胞培育和動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)。(2)如圖是抗HCG單克隆抗體制備流程示意圖，給小鼠注射的HCG相當(dāng)于抗原，使小鼠產(chǎn)生記憶細(xì)胞和分泌抗HCG抗體的漿細(xì)胞，抗體是參加體液免疫的免疫活性物質(zhì)。(3)抗體與抗原發(fā)生特異性結(jié)合，人絨毛膜促性腺激素(或HCG)相當(dāng)于抗原，可以與抗HCG單克隆抗體發(fā)生特異性結(jié)合。(4)在動(dòng)物細(xì)胞培育過(guò)程中，當(dāng)細(xì)胞表面相互接觸時(shí)，細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱(chēng)為細(xì)胞的接觸抑制。由于接觸抑制，在動(dòng)物細(xì)胞培育時(shí)，瓶壁上只能形成單層細(xì)胞，而在體外培育雜交瘤細(xì)胞時(shí)，具有無(wú)限增殖的特點(diǎn)，瓶壁上形成多層細(xì)胞。[答案](1)動(dòng)物細(xì)胞培育動(dòng)物細(xì)胞融合(2)抗原漿細(xì)胞記憶細(xì)胞抗體體液(3)人絨毛膜促性腺激素(或HCG)(4)相互接觸接觸抑制一層(或單層)多層題組三單克隆抗體的特點(diǎn)及應(yīng)用9．下列有關(guān)利用動(dòng)物細(xì)胞工程生產(chǎn)單克隆抗體的敘述，錯(cuò)誤的是()A．單克隆抗體制備運(yùn)用的主要生物材料是骨髓瘤細(xì)胞和漿細(xì)胞B．單克隆抗體制備的原理之一是一個(gè)漿細(xì)胞可以產(chǎn)生多種特異性抗體C．篩選能分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞運(yùn)用了抗原—抗體特異性反應(yīng)原理D．單克隆抗體具有純度高、產(chǎn)量大、靈敏度高等優(yōu)點(diǎn)B[單克隆抗體制備運(yùn)用的主要生物材料是骨髓瘤細(xì)胞(能在體外培育條件下無(wú)限增殖)和漿細(xì)胞(能產(chǎn)生抗體)，A正確；一個(gè)漿細(xì)胞只能產(chǎn)生一種特異性抗體，B錯(cuò)誤；抗體的本質(zhì)是免疫球蛋白，抗體可以和抗原進(jìn)行特異性結(jié)合，所以篩選抗體時(shí)可以運(yùn)用抗原—抗體特異性反應(yīng)原理，C正確；單克隆抗體的特點(diǎn)是特異性強(qiáng)、靈敏度高，可以大量制備，D正確。]10．利用細(xì)胞工程方法，以SARS病毒核衣殼蛋白為抗原制備出單克隆抗體。下列相關(guān)敘述正確的是()A．將純化的核衣殼蛋白反復(fù)注射到小鼠體內(nèi)，產(chǎn)生的血清抗體為單克隆抗體B．體外培育單個(gè)B淋巴細(xì)胞可以獲得大量針對(duì)SARS病毒的單克隆抗體C．將等量B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞混合，經(jīng)PEG誘導(dǎo)融合后的細(xì)胞均為雜交瘤細(xì)胞D．利用該單克隆抗體與SARS病毒核衣殼蛋白特異性結(jié)合的方法可診斷出病毒感染者D[經(jīng)過(guò)抗原刺激后的B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合，產(chǎn)生雜交瘤細(xì)胞，克隆化培育后的雜交瘤細(xì)胞能產(chǎn)生特異性強(qiáng)、靈敏度高的單克隆抗體。SARS病毒感染者體內(nèi)有SARS病毒核衣殼蛋白，用相應(yīng)的單克隆抗體與之發(fā)生特異性結(jié)合的方法可診斷出病毒感染者，D正確。]11.(不定項(xiàng))右圖為細(xì)胞融合的示意圖，下列敘述正確的是()A．若a細(xì)胞和b細(xì)胞是植物細(xì)胞，需先脫分化再誘導(dǎo)融合B．a(chǎn)細(xì)胞和b細(xì)胞之間的融合須要促融處理后才能實(shí)現(xiàn)C．c細(xì)胞的形成與a、b細(xì)胞膜的流淌性都有關(guān)D．c細(xì)胞將同時(shí)表達(dá)a細(xì)胞和b細(xì)胞中的全部基因BC[若a細(xì)胞和b細(xì)胞是植物細(xì)胞，應(yīng)當(dāng)先用酶解法去掉它們的細(xì)胞壁再誘導(dǎo)融合，A錯(cuò)誤；無(wú)論是動(dòng)物細(xì)胞還是植物細(xì)胞，兩個(gè)細(xì)胞的融合都須要促融處理后才能實(shí)現(xiàn)，B正確；兩個(gè)細(xì)胞融合成一個(gè)細(xì)胞，利用了細(xì)胞膜的流淌性，C正確；c細(xì)胞同時(shí)具備了a細(xì)胞和b細(xì)胞中的全部基因，但是基因是選擇性表達(dá)的，因此c細(xì)胞中基因不肯定都能夠表達(dá)，D錯(cuò)誤。]12．在單克隆抗體制備中，關(guān)于雜交瘤細(xì)胞制備的敘述，正確的是()A．可利用電激等物理方法干脆誘導(dǎo)兩個(gè)細(xì)胞的融合B．可利用細(xì)胞中染色體的數(shù)目和形態(tài)篩選出雜交瘤細(xì)胞C．利用了細(xì)胞膜的流淌性和基因重組等原理D．用選擇培育基篩選得到的雜交瘤細(xì)胞可干脆用于生產(chǎn)單克隆抗體A[誘導(dǎo)細(xì)胞融合通常有物理法、化學(xué)法、生物法等，電激和離心是常用的物理融合法，A正確；雜交瘤細(xì)胞的篩選須要運(yùn)用特定的選擇培育基，視察細(xì)胞染色體數(shù)目和形態(tài)只能推斷細(xì)胞是否融合，B錯(cuò)誤；雜交瘤細(xì)胞的制備利用了細(xì)胞膜的流淌性，但不涉及基因重組，C錯(cuò)誤；經(jīng)選擇培育基篩選出的雜交瘤細(xì)胞還須要進(jìn)行克隆化培育和專(zhuān)一抗體檢測(cè)，才能用于生產(chǎn)單克隆抗體，D錯(cuò)誤。]13．下圖是一種“生物導(dǎo)彈”的作用原理示意圖，沒(méi)有與腫瘤細(xì)胞結(jié)合的“生物導(dǎo)彈”一段時(shí)間后被機(jī)體清除。阿霉素是一種抗腫瘤藥，可抑制DNA和RNA的合成，對(duì)正常細(xì)胞也有肯定毒性。下列說(shuō)法不正確的是()A．單克隆抗體是由雜交瘤細(xì)胞合成和分泌的B．活化阿霉素能抑制細(xì)胞中的DNA復(fù)制和轉(zhuǎn)錄過(guò)程C．在治療中，應(yīng)先注射非活化磷酸阿霉素再注射生物導(dǎo)彈D．單克隆抗體特異性強(qiáng)，能減輕阿霉素對(duì)正常細(xì)胞的損害C[單克隆抗體是由骨髓瘤細(xì)胞和B細(xì)胞融合形成的雜交瘤細(xì)胞合成和分泌的，A正確；活化阿霉素抑制DNA和RNA的合成，DNA合成要經(jīng)過(guò)DNA的復(fù)制，RNA的合成要經(jīng)過(guò)DNA的轉(zhuǎn)錄，B正確；依據(jù)圖中信息可知，阿霉素的活化須要生物導(dǎo)彈攜帶的堿性磷酸酶，所以在治療中，應(yīng)先注射生物導(dǎo)彈再注射非活化磷酸阿霉素，但不能間隔時(shí)間太長(zhǎng)，因?yàn)闆](méi)有與腫瘤細(xì)胞結(jié)合的“生物導(dǎo)彈”一段時(shí)間后被機(jī)體清除，C錯(cuò)誤；單克隆抗體具有特異性強(qiáng)、靈敏度高、可大量制備的特點(diǎn)，依據(jù)特異性強(qiáng)這一特點(diǎn)，在該過(guò)程中是針對(duì)腫瘤細(xì)胞的，所以能減輕阿霉素對(duì)正常細(xì)胞的損害，D正確。]14．動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)突破了有性雜交方法的局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能?，F(xiàn)在已經(jīng)廣泛應(yīng)用于多種學(xué)科的探討工作中，特殊是新發(fā)展起來(lái)的雜交瘤技術(shù)，為制備單克隆抗體開(kāi)拓了新途徑。探討表明DNA合成有兩條途徑：“S途徑”和“D途徑”，淋巴細(xì)胞(漿細(xì)胞)有“S途徑”和“D途徑”，骨髓瘤細(xì)胞只有“D途徑”，HAT培育液中氨基喋呤可以阻斷DNA合成的“D途徑”。下圖是單克隆抗體制備流程階段示意圖。回答下列問(wèn)題：(1)________________________技術(shù)是單克隆抗體技術(shù)的基礎(chǔ)。(2)單克隆細(xì)胞是指_______________________________________________。(3)單克隆抗體與常規(guī)的血清抗體相比，最大的優(yōu)越性是_______________。(4)雜交瘤細(xì)胞既具有骨髓瘤細(xì)胞的________________的特點(diǎn)，又具備淋巴細(xì)胞的________________的特點(diǎn)。(5)圖示過(guò)程，有兩次篩選。第一次是用HAT培育液篩選出雜交瘤細(xì)胞，那么淋巴細(xì)胞(漿細(xì)胞)在HAT培育液中不生長(zhǎng)的緣由是___________________，骨髓瘤細(xì)胞在HAT培育液中不生長(zhǎng)的緣由是______________________________。[解析](1)單克隆抗體技術(shù)的基礎(chǔ)是動(dòng)物細(xì)胞培育和動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)。(2)單個(gè)細(xì)胞增殖形成的細(xì)胞群為單克隆細(xì)胞。(3)與常規(guī)抗體相比，單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)是特異性強(qiáng)、靈敏度高、可大量制備。(4)雜交瘤細(xì)胞具有骨髓瘤細(xì)胞的能在體外無(wú)限增殖和淋巴細(xì)胞的能產(chǎn)生特異性抗體的特點(diǎn)。(5)淋巴細(xì)胞不增殖，而骨髓瘤細(xì)胞的DNA合成途徑被氨基喋呤阻斷而不能進(jìn)行DNA復(fù)制，導(dǎo)致骨髓瘤細(xì)胞不能在HAT培育基中生長(zhǎng)。[答案](1)動(dòng)物細(xì)胞培育、動(dòng)物細(xì)胞融合(2)單個(gè)細(xì)胞增殖形成的細(xì)胞群(3)特異性強(qiáng)、靈敏度高、可大量制備(4)在體外大量增殖(無(wú)限增殖)分泌特異性抗體(5)缺乏在體外培育液中增殖的實(shí)力其DNA合成途徑被氨基喋呤阻斷而不能進(jìn)行DNA復(fù)制不能精確區(qū)分單克隆抗體制備過(guò)程中的兩次篩選15．以下是應(yīng)用動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)獲得單克隆抗X抗體的詳細(xì)操作步驟，其中對(duì)單克隆抗體制備的相關(guān)敘述不正確的是()①?gòu)幕脊撬枇龅男∈篌w內(nèi)獲得骨髓瘤細(xì)胞②將X抗原注入小鼠體內(nèi)，獲得能產(chǎn)生抗X抗體的B淋巴細(xì)胞③將雜交瘤細(xì)胞注入小鼠腹腔培育④篩選出能產(chǎn)生抗X抗體的雜交瘤細(xì)胞⑤利用選擇培育基篩選出雜交瘤細(xì)胞⑥從腹水中提取抗體⑦利用促細(xì)胞融合因子使兩種細(xì)胞發(fā)生融合A．試驗(yàn)依次應(yīng)當(dāng)是①②⑦⑤④③⑥B．③過(guò)程中產(chǎn)生的多個(gè)雜交瘤細(xì)胞稱(chēng)為克隆C．⑦過(guò)程獲得的細(xì)胞均可無(wú)限增殖D．利用細(xì)胞融合生產(chǎn)單克隆抗體過(guò)程中通常要經(jīng)過(guò)兩次篩選C[單克隆抗體制備的試驗(yàn)依次：從患骨髓瘤的小鼠體內(nèi)獲得骨髓瘤細(xì)胞→將X抗原注入小鼠體內(nèi)，獲得能產(chǎn)生抗