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山東大學(xué)齊魯醫(yī)院宋欣燕孔北華研究背景腫瘤的發(fā)展也與周圍微環(huán)境有關(guān),二者相互作用影響腫瘤的生長(zhǎng)、侵襲;因而,我們?cè)O(shè)想這種能支持正常發(fā)育過(guò)程的全能干細(xì)胞及其微環(huán)境能否逆轉(zhuǎn)異常的腫瘤細(xì)胞表型。Nature,2007,448:1015-21StemCells,2006,24:501-505
JSurRes,2004,121:342
方法與路線
5-7周流產(chǎn)胎兒生殖嵴分離原始生殖細(xì)胞接種培養(yǎng)傳代鑒定(AP,SSEA-1、3、4,OCT-4,TRA-1-60,TRA-1-81等)直接共培養(yǎng)EGcells與SKOV3cells研究EG細(xì)胞在體內(nèi)對(duì)卵巢癌細(xì)胞生長(zhǎng)的作用培養(yǎng)的EG細(xì)胞呈克隆樣生長(zhǎng),邊界清楚,似鳥巢狀,AP染色陽(yáng)性。HEG細(xì)胞鑒定結(jié)果A:SSEA-1B:SSEA-3C:SSEA-4D:TRA-1-60E:TRA-1-81結(jié)果HEG細(xì)胞的鑒定HEG自發(fā)分化共培養(yǎng)48h計(jì)數(shù)SKOV3cells實(shí)驗(yàn)組:(7.8±2.4)×104
對(duì)照組:(11.5±2.3)×104(p=0.0258)
結(jié)果TUNEL凋亡檢測(cè)A、C:實(shí)驗(yàn)組B、D:對(duì)照組免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)Caspase9的表達(dá)RealtimePCR檢測(cè)AKTmRNA表達(dá)結(jié)果Westernblot檢測(cè)p-akt、akt蛋白的表達(dá)結(jié)果
腫瘤生長(zhǎng)曲線同期觀察測(cè)量實(shí)驗(yàn)組腫瘤生長(zhǎng)慢于對(duì)照組石蠟組織切片TUNEL凋亡檢測(cè)結(jié)論與生殖干細(xì)胞體外共培養(yǎng)后,卵巢癌SKOV3細(xì)胞的生長(zhǎng)顯著受到抑制;體內(nèi)注射實(shí)驗(yàn)也表明能夠抑制腫瘤生長(zhǎng)。Tunel結(jié)果初步表明:
此抑制現(xiàn)象可能是通過(guò)誘導(dǎo)凋亡途徑發(fā)生。PI3Ks/Akt信號(hào)通路與腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān),在人類腫瘤譜中廣泛失調(diào),
p-AKT可以通過(guò)激活或抑制下游的受體蛋白BAD、Caspase9等,進(jìn)而調(diào)節(jié)細(xì)胞的增殖、分化、凋亡以及遷移等;本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示AKT信號(hào)通路參與了此誘導(dǎo)凋亡過(guò)程,表現(xiàn)為:
p-AKT表達(dá)減少,使凋亡抑制被解除;caspase-9被激活,引起SKOV3細(xì)胞的凋亡。干細(xì)胞對(duì)癌細(xì)胞的影響是通過(guò)胞外分泌形式還是細(xì)胞接觸途徑?需進(jìn)一步驗(yàn)證。干細(xì)胞表達(dá)的產(chǎn)物多種多樣,具體是哪些蛋白或蛋白多糖發(fā)揮了作用還需要進(jìn)一步研究
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