…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請(qǐng)※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁(yè)，總=sectionpages22頁(yè)第=page11頁(yè)，總=sectionpages11頁(yè)2025年北師大版選擇性必修3生物下冊(cè)月考試卷216考試試卷考試范圍：全部知識(shí)點(diǎn)；考試時(shí)間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級(jí)：______考號(hào)：______總分欄題號(hào)一二三四五總分得分評(píng)卷人得分一、選擇題(共7題，共14分)1、下列關(guān)于發(fā)酵工程及其應(yīng)用的說(shuō)法，正確的是（）A.黑曲霉可以用于醬油、檸檬酸、凝乳酶的工業(yè)生產(chǎn)B.接種是發(fā)酵工程的中心環(huán)節(jié)C.用于發(fā)酵工程的菌種，可以從自然界中篩選，也可以通過(guò)基因工程育種或單倍體育種獲得D.可以通過(guò)蒸餾、萃取等方法對(duì)單細(xì)胞蛋白進(jìn)行分離、提純2、以下說(shuō)法正確的是（）A.胚胎早期培養(yǎng)培養(yǎng)液的成分是水、無(wú)機(jī)鹽、蔗糖、氨基酸、核苷酸、血清等B.體外受精前可以用一定濃度的肝素或鈣離子載體A23187溶液進(jìn)行誘導(dǎo)C.沖卵指的是將卵子從卵巢中沖洗出來(lái)D.收集到的胚胎一定要直接向受體移植，無(wú)法長(zhǎng)期保存3、甲胺磷是一種有機(jī)磷化合物，可有效殺死害蟲，但對(duì)環(huán)境的危害大。某興趣小組打算通過(guò)微生物降解的方法來(lái)解除甲胺磷的危害。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A.可從被甲胺磷污染的農(nóng)田土壤中篩選所需菌株B.配制以甲胺磷作為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選C.利用平板劃線法可以對(duì)初步篩選出的目的菌進(jìn)行純化D.將土壤稀釋液滅菌后接種到選擇性培養(yǎng)基上4、CRISPR基因編輯技術(shù)；是利用CRISPR工具特異性對(duì)DNA分子進(jìn)行編輯的技術(shù)。如圖所示，利用定制的RNA序列特異性識(shí)別目標(biāo)DNA，再由Cas9蛋白將目標(biāo)DNA進(jìn)行剪切。這樣便可以對(duì)其進(jìn)行拼接與編輯。下列有關(guān)CRISPR基因編輯技術(shù)的敘述錯(cuò)誤的是（）

A.該技術(shù)利用了堿基互補(bǔ)配對(duì)的原理B.定制RNA序列可識(shí)別、切割DNA上的目標(biāo)位點(diǎn)C.Cas9蛋白相當(dāng)于--種限制性核酸內(nèi)切酶D.運(yùn)用該技術(shù)也可以使基因沉默（不再表達(dá)）5、CD47是一種跨膜糖蛋白，它可與巨噬細(xì)胞表面的信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白結(jié)合，從而抑制巨噬細(xì)胞的吞噬作用。肺癌、結(jié)腸癌等多種腫瘤細(xì)胞表面的CD47含量比正常細(xì)胞高1.6-5倍，導(dǎo)致吞噬細(xì)胞對(duì)腫瘤細(xì)胞的清除效果減弱?？茖W(xué)家推測(cè)，抗CD47的單克隆抗體可以解除CD47對(duì)巨噬細(xì)胞的抑制作用，為此他們按照如下流程進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)。下列說(shuō)法不正確的是（）

A.多次進(jìn)行步驟①的目的是獲取更多能產(chǎn)生抗CD47的抗體的B細(xì)胞B.對(duì)照組應(yīng)設(shè)置為：巨噬細(xì)胞+正常細(xì)胞共培養(yǎng)體系+單克隆抗體C.利用該單克隆抗體可以診斷包括肺癌、結(jié)腸癌在內(nèi)的多種癌癥D.實(shí)驗(yàn)組中吞噬細(xì)胞的吞噬指數(shù)顯著高于對(duì)照組可驗(yàn)證上述推測(cè)6、下列關(guān)于DNA片斷擴(kuò)增及其鑒定的說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）A.在凝膠中DNA分子的遷移速率主要和DNA分子的大小、構(gòu)象等有關(guān)B.凝膠中DNA分子通過(guò)染色，可以在波長(zhǎng)300nm的紫外燈下被檢測(cè)出來(lái)C.該實(shí)驗(yàn)用到的緩沖液和酶，從冰箱取出直接水浴加熱D.電泳技術(shù)可以用于人類親子鑒定、生物間親緣關(guān)系的鑒定7、如圖是將人的生長(zhǎng)激素基因?qū)爰?xì)菌B細(xì)胞內(nèi)制造“工程菌”的示意圖。已知細(xì)菌B細(xì)胞內(nèi)不含質(zhì)粒A，也不含質(zhì)粒A上的基因。判斷下列說(shuō)法正確的是（）

A.將重組質(zhì)粒導(dǎo)入細(xì)菌B常用的方法是顯微注射法B.將完成導(dǎo)入后的細(xì)菌涂布在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上，能生長(zhǎng)的是導(dǎo)入了重組質(zhì)粒的細(xì)菌C.將完成導(dǎo)入過(guò)程后的細(xì)菌涂布在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上，能生長(zhǎng)的是導(dǎo)入了質(zhì)粒A的細(xì)菌和導(dǎo)入了重組質(zhì)粒的細(xì)菌D.目的基因成功表達(dá)的標(biāo)志是受體細(xì)胞能在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)評(píng)卷人得分二、多選題(共6題，共12分)8、下列關(guān)于生物技術(shù)與倫理問(wèn)題的觀點(diǎn)，正確的是（）A.利用體外受精技術(shù)篩選早期胚胎的性別，設(shè)計(jì)試管嬰兒B.基于科學(xué)和理性討論轉(zhuǎn)基因作物的安全性問(wèn)題C.運(yùn)用試管嬰兒技術(shù)解決不孕問(wèn)題D.大量引入國(guó)外轉(zhuǎn)基因作物與本地近緣作物品種雜交9、下圖為科學(xué)家在實(shí)驗(yàn)室中培養(yǎng)“人造牛肉”的簡(jiǎn)要過(guò)程；下列相關(guān)敘述正確的是（）

A.用胰蛋白酶處理牛肌肉組織，獲得分裂能力強(qiáng)的肌肉母細(xì)胞B.生物反應(yīng)器內(nèi)應(yīng)控制好適宜的溫度，并沖入純氧保證細(xì)胞呼吸C.培養(yǎng)液中的支架提供了更多的細(xì)胞吸附面積，有利于細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)D.“人造牛肉”的培養(yǎng)有利于牛肉的工廠化生產(chǎn)，減少環(huán)境污染10、地球上的植物每年產(chǎn)生的纖維素超過(guò)70億噸，其中40%~60%能被土壤中的某些微生物分解利用，這是因?yàn)樗麄兡軌虍a(chǎn)生纖維素酶。研究者從牛的瘤胃中篩選產(chǎn)生纖維酶的纖維素分解菌，其篩選過(guò)程如圖1所示。將丙中的菌懸液轉(zhuǎn)接于含有稻草作碳源的固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)，得到若干菌落后用剛果紅處理，看到如圖2所示情況，下列有關(guān)敘述，錯(cuò)誤的是（）

A.②過(guò)程是涂布器取乙中的菌液均勻的涂布在Ⅰ號(hào)培養(yǎng)表面B.甲、乙試管中的液體都屬于液體培養(yǎng)基，主要作用是稀釋菌種C.Ⅰ號(hào)、Ⅱ號(hào)培養(yǎng)基都屬于固體培養(yǎng)基，配置時(shí)先滅菌后調(diào)節(jié)pHD.可挑取圖2中周圍出現(xiàn)透明圈的菌落，用平板劃線法繼續(xù)純化11、如圖為利用酵母菌釀制葡萄酒的實(shí)驗(yàn)裝置示意圖。下列關(guān)于傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的敘述，正確的是（）

A.果酒發(fā)酵時(shí)，圖中裝置應(yīng)用70%的乙醇消毒和用洗潔精洗滌B.用該裝置進(jìn)行果酒發(fā)酵時(shí)，需要維持閥a、b的開放狀態(tài)C.利用該裝置進(jìn)行果醋發(fā)酵，發(fā)酵溫度需要維持在30～35℃D.果酒、果醋發(fā)酵所用的菌種細(xì)胞內(nèi)均含有多種細(xì)胞器12、植物利用硝酸鹽需要硝酸還原酶，現(xiàn)有兩種煙草硝酸還原酶缺失突變體，為探究?jī)煞N突變體的突變是否在同一基因位點(diǎn)上，研究人員將兩種突變體進(jìn)行植物體細(xì)胞雜交。下列分析正確的是A.誘導(dǎo)兩種突變體進(jìn)行植物體細(xì)胞雜交時(shí)應(yīng)先用纖維素酶和果膠酶酶解得到原生質(zhì)體B.可用高Ca2+-高pH誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合，細(xì)胞膜融合是細(xì)胞融合完成的標(biāo)志C.若雜種細(xì)胞能在硝酸鹽培養(yǎng)基上正常生長(zhǎng)，說(shuō)明兩種突變體的突變位點(diǎn)相同D.兩種突變體均不能在以硝酸鹽作為唯一氮源的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)13、自生固氮菌是土壤中能獨(dú)立固定空氣中N2的細(xì)菌，將玉米種子用自身固氮菌拌種后播種，可顯著提高產(chǎn)量并降低化肥的使用量?？蒲腥藛T進(jìn)行了土壤中自生固氮菌的分離和固氮能力測(cè)定的研究，部分實(shí)驗(yàn)流程如圖。以下敘述正確的是（）

A.步驟①土樣應(yīng)取自當(dāng)?shù)乇韺油寥溃徊襟E③將土壤懸浮液稀釋了1000倍B.自生固氮菌是自養(yǎng)型生物，不可用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板來(lái)計(jì)數(shù)土壤懸浮液中的菌體數(shù)C.步驟②需充分振蕩20min，主要目的是使土壤中的微生物充分釋放到無(wú)菌水中D.步驟④所用的接種工具是涂布器，該選擇培養(yǎng)基的特點(diǎn)是不添加氮源評(píng)卷人得分三、填空題(共9題，共18分)14、人們按照微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長(zhǎng)繁殖的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)一一培養(yǎng)基。其中，配制成的_______________的基質(zhì)稱為液體培養(yǎng)基，配制成的固體狀態(tài)的基質(zhì)稱為________________________。在液體培養(yǎng)基中加入凝固劑_______________________后，制成瓊脂固體培養(yǎng)基，它是實(shí)驗(yàn)室中最常用的培養(yǎng)基之一。微生物在_________________培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)，可以形成肉眼可見(jiàn)的菌落。（瓊脂是一種從紅藻中提取的____________________。瓊脂在98℃以上熔化，在44℃以下凝固，在常規(guī)培養(yǎng)條件下呈現(xiàn)固態(tài)。）15、功能：能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列，并且使每一條鏈中______部位的兩個(gè)核苷酸之間的______斷開，因此具有______。16、基因工程操作一般經(jīng)歷如下四個(gè)步驟：_____。17、結(jié)果：經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端通常有兩種形式：______和______。18、在____________的溫度范圍內(nèi)，DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)解體，雙鏈分開，這過(guò)程成為__________。19、DNA的粗提取實(shí)驗(yàn)中，如果實(shí)驗(yàn)材料是非哺乳動(dòng)物如雞血細(xì)胞，需要在雞血細(xì)胞中加入一定量的____________，如果實(shí)驗(yàn)材料是植物細(xì)胞，需要先使用_______________溶解細(xì)胞膜。20、植物繁殖的新途徑。

微型繁殖：可以高效快速地實(shí)現(xiàn)種苗的大量繁殖。

作物脫毒：采用______組織培養(yǎng)來(lái)除去病毒（因?yàn)橹参锓稚鷧^(qū)附近的病毒______）

人工種子：以植物組織培養(yǎng)得到的______、不定芽、頂芽和腋芽等為材料，經(jīng)_____包裝得到的種子。優(yōu)點(diǎn)：完全保持優(yōu)良品種的遺傳特性，______；方便儲(chǔ)藏和運(yùn)輸。

人工種子的結(jié)構(gòu)包括：______、_____和______。21、某種微生物合成的一種蛋白酶與人體消化液中某種蛋白酶的結(jié)構(gòu)和功能很相似，只是前者熱穩(wěn)定性較差，進(jìn)入人體后容易失效。嘗試根據(jù)本節(jié)課所學(xué)知識(shí)提出改造該種微生物蛋白酶的思路_________。22、第四步：_____評(píng)卷人得分四、實(shí)驗(yàn)題(共3題，共12分)23、甘蔗是華南地區(qū)一種重要的經(jīng)濟(jì)作物。某研究團(tuán)隊(duì)從甘蔗根際土壤中分離出了幾種固氮菌；實(shí)驗(yàn)方案如下。

回答下列問(wèn)題：

（1）Ashby培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)成分主要包括水、無(wú)機(jī)鹽_________等。實(shí)驗(yàn)中第一次在Ashby培養(yǎng)基上接種的方法是________，在Ashy平板上進(jìn)行多次接種的目的是_________________________

（2）固氮菌能產(chǎn)生固氮酶。為評(píng)估固氮酶的活性，可以檢測(cè)____________．

（3）研究發(fā)現(xiàn)，上述固氮菌還能產(chǎn)生IAA。取一定體積的固氮菌菌液離心，獲得上清液，現(xiàn)欲測(cè)定上清液中IAA的含量，請(qǐng)利用以下試劑，寫出實(shí)驗(yàn)思路。_______

供選試劑：標(biāo)準(zhǔn)的1g/L的IAA母液，蒸餾水，S試劑(與IAA反應(yīng)顯紅色，且顏色深淺與IAA濃度成正相關(guān)）24、多發(fā)性硬化癥是一種由纖維蛋白滲入大腦引發(fā)的神經(jīng)系統(tǒng)疾病?？蒲腥藛T欲應(yīng)用生物工程技術(shù)治療該病。請(qǐng)回答下面有關(guān)問(wèn)題。

（1）研究人員將纖維蛋白作為_________注射到小鼠體內(nèi)，激活了小鼠的________免疫，進(jìn)而制備出抗纖維蛋白的單克隆抗體（5B8）。該項(xiàng)技術(shù)屬于_______范疇（填寫下面正確選項(xiàng)）。

A．基因工程B．細(xì)胞工程C．胚胎工程D．蛋白質(zhì)工程。

（2）制備5B8的基本流程如下：從注射了纖維蛋白的小鼠脾臟中獲取________，與小鼠的骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合。然后用特定的__________篩選符合要求的雜交瘤細(xì)胞后；再通過(guò)克??；檢測(cè)、篩選、培養(yǎng)等環(huán)節(jié)，最終從小鼠腹水中提取到5B8。

（3）活性氧（ROS）是氧分子正常代謝的副產(chǎn)物；當(dāng)吞噬細(xì)胞中大量產(chǎn)生ROS并釋放時(shí)，會(huì)毒害周圍神經(jīng)元。NADPH氧化酶是催化細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生ROS的主要酶。為研究5B8的作用機(jī)制，研究者檢測(cè)了經(jīng)5B8處理后吞噬細(xì)胞中NADPH氧化酶和ROS的含量，結(jié)果如圖一；圖二。

①作為標(biāo)準(zhǔn)參照的GADPH蛋白表達(dá)量穩(wěn)定且含量豐富，可排除_________對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響。

②綜合兩幅圖的檢測(cè)結(jié)果，通過(guò)對(duì)比_______組可知，纖維蛋白可以______________，使其對(duì)神經(jīng)元產(chǎn)生毒害；而通過(guò)對(duì)比______組結(jié)果發(fā)現(xiàn):5B8能_________。

③經(jīng)臨床實(shí)驗(yàn)證實(shí)，單克隆抗體5B8確實(shí)對(duì)多發(fā)性硬化癥有明顯療效。請(qǐng)根據(jù)上述結(jié)果分析其具有療效的原因____________________。25、霍山石斛多糖具有顯著的免疫調(diào)節(jié)效應(yīng)。為探究引起該免疫調(diào)節(jié)效應(yīng)的物質(zhì)是大分子霍山石斛多糖還是多糖小分子片段；某科研小組進(jìn)行了如下實(shí)驗(yàn)：將霍山石斛的某種多糖與牛血清蛋白偶聯(lián)制作成抗原；并生產(chǎn)出單克隆抗體，利用該抗體探究霍山石斛多糖引起的免疫調(diào)節(jié)效應(yīng)。制備單克隆抗體的流程如圖所示。請(qǐng)回答：

（1）圖中細(xì)胞a是免疫后小鼠體內(nèi)的___________，通常情況下該細(xì)胞不能進(jìn)行增殖，原因是___________。

（2）與植物原生質(zhì)體融合相比，①過(guò)程特有的誘導(dǎo)因素是___________。若只存在細(xì)胞的兩兩融合，融合體系中除未融合的細(xì)胞外，還可能有__________和__________。篩選時(shí)，需用特定的____________培養(yǎng)基才能把實(shí)驗(yàn)所需細(xì)胞選擇出來(lái)。

（3）在篩選過(guò)程中需進(jìn)行__________和__________，以便獲得足夠數(shù)量的能分泌特異性抗體的細(xì)胞，還需用___________作為檢測(cè)特異性抗體的物質(zhì)。

（4）將篩選出的細(xì)胞注射到小鼠腹腔內(nèi)，可從小鼠____________中提取單克隆抗體。

（5）研究發(fā)現(xiàn)，霍山石斛多糖可降解產(chǎn)生小分子片段，這些片段不能與獲得的單克隆抗體結(jié)合。科研小組用霍山石斛多糖給小鼠灌胃后，取出小腸、肝、脾、腎和肺進(jìn)行抗原-抗體雜交實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)除腸腔外其他組織均未檢測(cè)到霍山石斛多糖。該實(shí)驗(yàn)____________（填“能”或“不能”）說(shuō)明引起免疫調(diào)節(jié)效應(yīng)的是大分子霍山石斛多糖，理由是___________。評(píng)卷人得分五、綜合題(共4題，共16分)26、近日；中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院深圳農(nóng)業(yè)基因組研究所黃三文團(tuán)隊(duì)用馬鈴薯二倍體替代四倍體育種，用雜交種子替代薯塊繁殖。這一研究成果，突破了百年來(lái)馬鈴薯育種的難題，為馬鈴薯雜交育種提供了全新的技術(shù)體系。請(qǐng)回答以下問(wèn)題：

(1)目前大田種植的馬鈴薯一般為四倍體，依靠薯塊無(wú)性繁殖。該繁殖方法的優(yōu)點(diǎn)是_____；缺點(diǎn)是通過(guò)塊莖進(jìn)行無(wú)性繁殖的做法，使得它所積累的病毒難以去除，科學(xué)家們發(fā)明了脫毒技術(shù)，即選用_______；經(jīng)脫分化與再分化形成脫毒苗來(lái)保障生產(chǎn)。但不論是塊莖繁殖，還是脫毒技術(shù)，都會(huì)造成馬鈴薯生產(chǎn)成本的提高。

(2)2021年6月；該研究團(tuán)隊(duì)已培育出二倍體自交系和雜交優(yōu)勢(shì)顯著的雜交馬鈴薯品系“優(yōu)薯1號(hào)”?！皟?yōu)薯1號(hào)”的培育成功，基因編輯技術(shù)功不可沒(méi)。自然界存在的二倍體馬鈴薯往往是自交不親和的，使得它不能產(chǎn)生種子。下圖是科學(xué)家用CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)定點(diǎn)敲除二倍體馬鈴薯的自交不親和基因的示意圖。

其原理是由一條單鏈向?qū)NA引導(dǎo)Cas9蛋白到一個(gè)特定的基因位點(diǎn)進(jìn)行切割。通過(guò)設(shè)計(jì)向?qū)NA中20個(gè)堿基的識(shí)別序列；可人為選擇DNA上的目標(biāo)位點(diǎn)進(jìn)行切割。

①Cas9和向?qū)NA結(jié)合形成的復(fù)合物能切割DNA，從功能上來(lái)看，其相當(dāng)于基因工程中的____________酶；CRISPR/Cas9系統(tǒng)廣泛存在于細(xì)菌中，推測(cè)該系統(tǒng)在細(xì)菌中的作用是______________。

②很顯然向?qū)NA的設(shè)計(jì)非常關(guān)鍵。其中的識(shí)別序列必須根據(jù)________來(lái)設(shè)計(jì)，并通過(guò)________________的方式與目標(biāo)位置結(jié)合；從而引導(dǎo)與其結(jié)合的Cas9蛋白對(duì)目標(biāo)位置基因行使切割（?除）功能；

③通過(guò)基因編輯技術(shù)對(duì)該基因進(jìn)行編輯后需要檢測(cè)其作用效果，簡(jiǎn)便的方法是___________。27、由致病疫霉引起的晚疫病是造成馬鈴薯嚴(yán)重減產(chǎn)的毀滅性病害。馬鈴薯野生種中含有抗晚疫病基因；但由于存在生殖隔離，難以通過(guò)常規(guī)雜交育種方法將其導(dǎo)入栽培種中?？蒲腥藛T利用抗病的二倍體馬鈴薯野生種（2n=24）和易感病的四倍體馬鈴薯栽培種（4n=48）進(jìn)行體細(xì)胞雜交，培育抗晚疫病馬鈴薯。

(1)將馬鈴薯野生種和栽培種的葉片用______酶處理，獲得有活力的原生質(zhì)體，加入______試劑誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合。將融合細(xì)胞形成的愈傷組織接種到含有______和營(yíng)養(yǎng)的培養(yǎng)基上，發(fā)育形成完整的再生植株。該技術(shù)涉及的原理包括______。

(2)如圖是對(duì)雙親及再生植株的基因組DNA特異性片段進(jìn)行體外擴(kuò)增后的電泳結(jié)果。圖中泳道______代表再生植株，判斷依據(jù)是______。

(3)科研人員借助流式細(xì)胞儀測(cè)定馬鈴薯野生種、馬鈴薯栽培種和再生植株的DNA相對(duì)含量，由結(jié)果推測(cè)再生植株為______倍體，理由是______。

(4)為確定該再生植株是否符合育種要求，還需對(duì)其進(jìn)行______鑒定。28、科學(xué)家通過(guò)植物體細(xì)胞雜交的方法；培育出第一個(gè)雜種植物：番茄—馬鈴薯（番茄2N＝24，馬鈴薯4N＝48）。雖然這種植株并沒(méi)有像科學(xué)家預(yù)料的那樣，地上結(jié)番茄，地下結(jié)馬鈴薯，但卻為植物體細(xì)胞雜交在生產(chǎn)實(shí)踐中的應(yīng)用拉開了帷幕。以下為番茄和馬鈴薯體細(xì)胞雜交的步驟：

回答下列問(wèn)題：

(1)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)的原理是______和______，從雜交細(xì)胞到番茄—馬鈴薯植株是利用______技術(shù)來(lái)實(shí)現(xiàn)的。

(2)過(guò)程①利用酶解法得到的結(jié)構(gòu)是______，過(guò)程②中常用的試劑是______。

(3)植物體細(xì)胞融合完成的標(biāo)志是______；過(guò)程②得到的融合細(xì)胞有______種。過(guò)程④是脫分化過(guò)程形成______。

(4)啟動(dòng)⑤過(guò)程的關(guān)鍵性激素是______。經(jīng)過(guò)程⑤產(chǎn)生的胚狀體中出現(xiàn)形態(tài)結(jié)構(gòu)不同的細(xì)胞，其根本原因是______。29、野生黑芥具有黑腐病的抗性基因；花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病。利用相關(guān)工程技術(shù)可以獲得抗黑腐病的黑芥一花椰菜雜種植株。用一定劑量的紫外線處理黑芥原生質(zhì)體可使其染色體片段化，并喪失再生能力，再利用此原生質(zhì)體作為部分遺傳物質(zhì)的供體與完整的花椰菜原生質(zhì)體融合，流程如下圖。據(jù)圖回答下列問(wèn)題：

(1)該過(guò)程用到的細(xì)胞工程技術(shù)有_______________（兩個(gè)名稱）.

(2)過(guò)程①所需的酶是___________，過(guò)程②中PEG的作用是________，經(jīng)過(guò)過(guò)程②操作后，需篩選出融合的雜種細(xì)胞，顯微鏡下觀察融合的活細(xì)胞中有黑芥葉肉細(xì)胞的_____________（填寫細(xì)胞器名稱）存在可作為初步篩選雜種細(xì)胞的標(biāo)志。

(3)原生質(zhì)體經(jīng)過(guò)細(xì)胞壁再生，再經(jīng)過(guò)__________過(guò)程；最終形成雜種植株。

(4)將雜種植株栽培在含有________________的環(huán)境中，可篩選出具有高抗性的雜種植株。參考答案一、選擇題(共7題，共14分)1、A【分析】【分析】

發(fā)酵工程是指采用現(xiàn)代工程技術(shù)手段；利用微生物的某些特定功能，為人類生產(chǎn)有用的產(chǎn)品，或直接把微生物應(yīng)用于工業(yè)生產(chǎn)過(guò)程的一種技術(shù)。發(fā)酵工程的內(nèi)容包括菌種選育；培養(yǎng)基的配置、滅菌、種子擴(kuò)大培養(yǎng)和接種、發(fā)酵過(guò)程和產(chǎn)品的分離提純（生物分離工程）等方面。

【詳解】

A；黑曲霉廣泛分布于世界各地的糧食、植物性產(chǎn)品和土壤中；是重要的發(fā)酵工業(yè)菌種，黑曲霉可以用于醬油、檸檬酸、凝乳酶的工業(yè)生產(chǎn)，A正確；

B；發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵是發(fā)酵工程的中心環(huán)節(jié)；B錯(cuò)誤；

C；發(fā)酵工程的優(yōu)良性狀的菌種可以從自然界中篩選出來(lái)；也可以通過(guò)誘變育種和基因工程育種獲得，C錯(cuò)誤；

D；單細(xì)胞蛋白是微生物菌體；可采用沉淀、過(guò)濾等方法分離，而代謝產(chǎn)物則采用蒸餾、萃取、離子交換等方法，D錯(cuò)誤。

故選A。2、B【分析】【分析】

1；精子與卵子在體外受精后；應(yīng)將受精卵移入發(fā)育培養(yǎng)基中繼續(xù)培養(yǎng)。發(fā)育培養(yǎng)基的成分：無(wú)機(jī)鹽和有機(jī)鹽，還需添加維生素、激素、氨基酸、核苷酸等營(yíng)養(yǎng)成分，以及血清等物質(zhì)。

2；對(duì)精子進(jìn)行獲能處理：包括培養(yǎng)法和化學(xué)誘導(dǎo)法。對(duì)于嚙齒動(dòng)物、家兔和豬等動(dòng)物的精子；一般采用培養(yǎng)法，即將取自附睪的精子，放入人工配制的獲能液中，培養(yǎng)一段時(shí)間后，精子就可獲能；對(duì)于牛、羊等家畜的精子常采用化學(xué)法，即將精子放在一定濃度的肝素或鈣離子載體A23187溶液。

【詳解】

A；蔗糖不屬于胚胎早期培養(yǎng)中培養(yǎng)液的成分；屬于植物組織培養(yǎng)的營(yíng)養(yǎng)成分，A錯(cuò)誤；

B；體外受精前常用一定濃度的肝素或鈣離子載體A23187溶液對(duì)精子進(jìn)行誘導(dǎo)；使其具備受精的能力，B正確；

C；沖卵中的“卵”是指胚胎；C錯(cuò)誤；

D；收集到胚胎后還要對(duì)胚胎進(jìn)行質(zhì)量檢查；如果不直接向受體移植，還要放入-196℃液氮中保存，D錯(cuò)誤。

故選B。

【點(diǎn)睛】3、D【分析】【分析】

由于生物與生活環(huán)境相適應(yīng)；故應(yīng)從被甲胺磷污染的農(nóng)田中篩選出高效降解甲胺磷的菌株，可采用逐步提高甲胺磷濃度逐步篩選，培養(yǎng)出的目的菌經(jīng)稀釋涂布分離后得到單一菌落為純化的細(xì)菌，可用做鑒定。測(cè)定菌株降解甲胺磷能力時(shí)，可用將分離得到的菌株接種到經(jīng)滅菌后的含甲胺磷液體培養(yǎng)基中，培養(yǎng)一定時(shí)間后，測(cè)定殘余甲胺磷的濃度。

【詳解】

A；能降解甲胺磷微生物應(yīng)生活在被甲胺磷污染的環(huán)境周圍；故可從被甲胺磷污染的農(nóng)田土壤中篩選所需菌株，A正確；

B；培養(yǎng)基中應(yīng)用甲胺磷為唯一的碳源；作為選擇培養(yǎng)基，分離出降解甲胺磷的菌株，B正確；

C；平板劃線法可以用來(lái)分離和純化微生物；利用平板劃線法可以對(duì)目的菌進(jìn)行純化，C正確；

D；在無(wú)菌環(huán)境下；將土壤稀釋液接種到選擇培養(yǎng)上，將土壤稀釋液滅菌后會(huì)殺死原有菌種，D錯(cuò)誤。

故選D。

【點(diǎn)睛】4、B【分析】【分析】

限制性核酸內(nèi)切酶是可以識(shí)別并附著特定的核苷酸序列；并對(duì)每條鏈中特定部位的兩個(gè)脫氧核糖核苷酸之間的磷酸二酯鍵進(jìn)行切割的一類酶，簡(jiǎn)稱限制酶。

【詳解】

A、該技術(shù)能利用RNA與目標(biāo)DNA相互識(shí)別，利用了RNA與DNA的堿基互補(bǔ)配對(duì)，A正確；

B、利用定制的RNA序列特異性識(shí)別目標(biāo)DNA，再由Cas9蛋白將目標(biāo)DNA進(jìn)行剪切，B錯(cuò)誤；

C、Cas9蛋白能對(duì)目標(biāo)DNA進(jìn)行剪切，相當(dāng)于一種限制性核酸內(nèi)切酶，C正確；

D、如果對(duì)目標(biāo)基因的啟動(dòng)子序列進(jìn)行編輯，當(dāng)然有可能使其無(wú)法轉(zhuǎn)錄表達(dá)，D正確。

故選B。5、B【分析】【分析】

單克隆抗體的制備的流程：

（1）制備產(chǎn)生特異性抗體的B淋巴細(xì)胞：向免疫小鼠體內(nèi)注射特定的抗原；然后從小鼠脾內(nèi)獲得相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞。

（2）獲得雜交瘤細(xì)胞：①將鼠的骨髓瘤細(xì)胞與脾細(xì)胞中形成的B淋巴細(xì)胞融合；②用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；該雜種細(xì)胞既能夠增殖又能產(chǎn)生抗體。

（3）克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)。

（4）將雜交瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖。

（5）提取單克隆抗體：從細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠的腹水中提取。

【詳解】

A；步驟①是向免疫小鼠體內(nèi)注射特定的抗原；多次進(jìn)行步驟①可獲得更多符合要求的漿細(xì)胞（產(chǎn)生抗CD47的抗體的B細(xì)胞），A正確；

B；根據(jù)單一變量原則可知；對(duì)照組的設(shè)置應(yīng)為不加單克隆抗體的巨噬細(xì)胞+腫瘤細(xì)胞的共培養(yǎng)體系，B錯(cuò)誤；

C；結(jié)合題意可知；單克隆抗體特異性強(qiáng)、靈敏度高，利用該單克隆抗體可以診斷包括肺癌、結(jié)腸癌在內(nèi)的多種癌癥，C正確；

D；實(shí)驗(yàn)組中加入了單克隆抗體；抗體與腫瘤細(xì)胞表面的CD47發(fā)生特異性結(jié)合，從而解除CD47對(duì)巨噬細(xì)胞的抑制作用，而對(duì)照組中沒(méi)有加入單克隆抗體，不能與腫瘤細(xì)胞表面的CD47結(jié)合，因而無(wú)法解除CD47對(duì)巨噬細(xì)胞的抑制作用，因此，實(shí)驗(yàn)組中吞噬細(xì)胞的吞噬指數(shù)顯著高于對(duì)照組可驗(yàn)證上述推測(cè)，D正確。

故選B。6、C【分析】【分析】

DNA分子具有可解離的基團(tuán)；在一定的PH下，這些基團(tuán)可以帶上正電荷或負(fù)電荷。在電場(chǎng)的作用下，這些帶電分子會(huì)向著與它所帶電荷相反方向的電極移動(dòng)，這個(gè)過(guò)程就是電泳。PCR的產(chǎn)物一般通過(guò)瓊脂凝膠電泳來(lái)鑒定。

【詳解】

A；在凝膠中DNA分子的遷移速率與凝膠濃度、DNA分子的大小和構(gòu)象等有關(guān)；A正確；

B；凝膠中的DNA分子通過(guò)染色、可以在波長(zhǎng)為300nm的紫外線下被檢測(cè)出來(lái)；B正確；

C；該實(shí)驗(yàn)所需材料可以直接從公司購(gòu)買；緩沖液和酶應(yīng)分裝成小份，并在-20℃儲(chǔ)存。使用前，將所需試劑從冰箱拿出，放在冰塊上緩慢融化，C錯(cuò)誤；

D；電泳技術(shù)可以用于人類親子鑒定、生物間親緣關(guān)系的鑒定；D正確。

故選C。7、C【分析】【分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫(kù)中獲?。焕肞CR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成；

（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達(dá)載體包括目的基因；啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等；

（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同；導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法；

（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：

①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；

②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；

③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定；抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

A；將重組質(zhì)粒導(dǎo)入細(xì)菌B常用的方法是感受態(tài)細(xì)胞法；A錯(cuò)誤；

B；由于氨芐青霉素抗性基因被破壞；所以在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上能生長(zhǎng)的是導(dǎo)入普通質(zhì)粒A的細(xì)菌，B錯(cuò)誤；

C；由于四環(huán)素抗性基因未被破壞；所以能在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的是導(dǎo)入普通質(zhì)粒A的細(xì)菌和導(dǎo)入重組質(zhì)粒的細(xì)菌，C正確；

D；目的基因成功表達(dá)的標(biāo)志是工程菌生產(chǎn)出人的生長(zhǎng)激素；D錯(cuò)誤。

故選C。二、多選題(共6題，共12分)8、B:C【分析】【分析】

轉(zhuǎn)基因生物的安全性問(wèn)題：食物安全(滯后效應(yīng)；過(guò)敏源、營(yíng)養(yǎng)成分改變)、生物安全(對(duì)生物多樣性的影響)、環(huán)境安全(對(duì)生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響)。

【詳解】

A；設(shè)計(jì)試管嬰兒；會(huì)引起性別失調(diào)，違背倫理道德，我國(guó)不允許利用體外受精技術(shù)篩選早期胚胎的性別，A錯(cuò)誤；

B；應(yīng)基于科學(xué)和理性討論轉(zhuǎn)基因作物的安全性問(wèn)題；B正確；

C；運(yùn)用試管嬰兒技術(shù)可以解決不孕問(wèn)題；C正確；

D；大量引入國(guó)外轉(zhuǎn)基因作物與本地近緣作物品種雜交；可能造成基因污染和環(huán)境安全，D錯(cuò)誤。

故選BC。9、A:C:D【分析】【分析】

用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中懸液中的細(xì)胞會(huì)很快貼附在瓶壁上。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的氣體環(huán)境：95%空氣（細(xì)胞代謝必需的）和5%CO2?！叭嗽炫Ｈ狻钡呐囵B(yǎng)不僅產(chǎn)量高；并可以減少成本和降低環(huán)境污染。

【詳解】

A；胰蛋白酶處理動(dòng)物組織；可以使組織分散成單個(gè)細(xì)胞，利于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)，A正確。

B、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的氣體環(huán)境：95%空氣（細(xì)胞代謝必需的）和5%CO2；B錯(cuò)誤。

C；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中懸液中的細(xì)胞會(huì)很快貼附在瓶壁上。所以細(xì)胞貼附瓶壁的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿的內(nèi)表面光滑；無(wú)毒，易于貼附，如果想得到大量的產(chǎn)物，可以增大細(xì)胞吸附面積，有利于細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)，C正確。

D；人造牛肉”的培養(yǎng)有利于牛肉的工廠化生產(chǎn)；同時(shí)也可減少對(duì)土地、飲用水和飼料的需求，且溫室氣體等其他環(huán)境污染物也會(huì)減少，D正確。

故選ACD。10、A:B:C【分析】分解纖維素的微生物的分離實(shí)驗(yàn)的原理：①土壤中存在著大量纖維素分解酶；包括真菌；細(xì)菌和放線菌等，它們可以產(chǎn)生纖維素酶。纖維素酶是一種復(fù)合酶，可以把纖維素分解為纖維二糖，進(jìn)一步分解為葡萄糖使微生物加以利用，故在用纖維素作為唯一碳源的培養(yǎng)基中，纖維素分解菌能夠很好地生長(zhǎng)，其他微生物則不能生長(zhǎng)。②在培養(yǎng)基中加入剛果紅，可與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素被分解后，紅色復(fù)合物不能形成，培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，從而可篩選纖維素分解菌。

【詳解】

A；根據(jù)Ⅰ號(hào)培養(yǎng)基上菌落分布均勻可知；②過(guò)程是用涂布器取乙中的樣品稀釋液均勻的涂布在Ⅰ號(hào)培養(yǎng)表面，即乙中是分解纖維素菌的樣品稀釋液，不是菌液，A錯(cuò)誤；

B；液體培養(yǎng)基的作用是讓菌體增殖；而不是稀釋菌種，甲、乙試管中的液體都是樣品稀釋液，捕食液體培養(yǎng)基，B錯(cuò)誤；

C；配置固體培養(yǎng)基的基本步驟是計(jì)算、稱量、溶化、調(diào)pH、滅菌、倒平板；故需要先調(diào)pH，再滅菌，C錯(cuò)誤；

D；剛果紅能與纖維素形成紅色復(fù)合物；若菌落周圍出現(xiàn)透明圈，說(shuō)明纖維素分解菌將纖維素進(jìn)行了分解，可挑取該菌落用平板劃線法繼續(xù)純化該菌體，D正確。

故選ABC。11、A:C【分析】【分析】

1.果酒的制作離不開酵母菌；酵母菌是兼性厭氧型生物，在有氧條件下，酵母菌進(jìn)行有氧呼吸，大量繁殖，在無(wú)氧條件下，酵母菌進(jìn)行酒精發(fā)酵。溫度是酵母菌生長(zhǎng)和發(fā)酵的重要條件，20℃左右，酒精發(fā)酵時(shí)，一般將溫度控制在18~25℃，在葡萄酒自然發(fā)酵過(guò)程當(dāng)中，其主要作用的是附著在葡萄皮上的野生酵母菌。

2.醋酸菌是一種好氧細(xì)菌；只有當(dāng)氧氣充足時(shí)，才能進(jìn)行旺盛的生理活動(dòng)。醋酸菌對(duì)氧氣的含量特別敏感，當(dāng)進(jìn)行深層發(fā)酵時(shí)，即使只是短時(shí)間中斷通入氧氣，也會(huì)引起醋酸菌死亡。當(dāng)氧氣；糖源都充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸；當(dāng)缺少糖源時(shí)，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿?。醋酸菌的最適生長(zhǎng)溫度為30~35℃。

【詳解】

A；果酒發(fā)酵時(shí)；為了避免雜菌污染，圖中裝置應(yīng)用70%的乙醇消毒和用洗潔精洗滌，A正確；

B、用該裝置進(jìn)行果酒發(fā)酵時(shí)，需要先維持閥a，b的開放狀態(tài)，此后閥a、閥b，發(fā)酵過(guò)程中定時(shí)打開閥b排氣；B錯(cuò)誤；

C；利用該裝置進(jìn)行果醋發(fā)酵；發(fā)酵溫度需要維持在30～35℃，因?yàn)榇姿峋m宜的發(fā)酵溫度是30～35℃，另外還需要通入無(wú)菌空氣，保證醋酸菌代謝的需要，C正確；

D；果酒發(fā)酵的就菌種是酵母菌；酵母菌是真核生物，細(xì)胞中含有多種細(xì)胞器，果醋發(fā)酵的菌種是醋酸菌，醋酸菌是原核生物，細(xì)胞中只有核糖體這一種細(xì)胞器，D錯(cuò)誤。

故選AC。12、A:D【分析】【分析】

植物體細(xì)胞雜交過(guò)程：1；酶解法去壁獲取原生質(zhì)體；2、人工誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合；3、再生出新細(xì)胞壁；標(biāo)志著原生質(zhì)體融合完成；4、經(jīng)脫分化和再分化過(guò)程，通過(guò)組織培養(yǎng)把雜種細(xì)胞培育成雜種植株。

【詳解】

A；植物細(xì)胞壁的主要成分是纖維素和果膠；因此先用纖維素酶和果膠酶酶解得到原生質(zhì)體，A正確；

B；植物細(xì)胞融合完成的標(biāo)志是再生形成新的細(xì)胞壁；B錯(cuò)誤；

C；若雜種細(xì)胞能在硝酸鹽培養(yǎng)基上正常生長(zhǎng)；說(shuō)明兩種突變體的植物體細(xì)胞雜交后代能夠合成硝酸還原酶，即兩種突變體的突變基因位點(diǎn)不同，雜交后未突變的基因重新組合在一起，控制了硝酸還原酶的合成，C錯(cuò)誤；

D；據(jù)題可知；植物利用硝酸鹽需要硝酸還原酶，兩種突變體煙草硝酸還原酶都缺失，因此均不能在以硝酸鹽作為唯一氮源的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，D正確。

故選AD。13、A:C:D【分析】【分析】

微生物常見(jiàn)的接種的方法。

（1）平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落。

（2）稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過(guò)大量稀釋后；均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。

【詳解】

A；自生固氮菌是需氧型生物；步驟①土樣應(yīng)取自表層的土壤，步驟③中的稀釋梯度分別為10，100，1000倍，所以土壤懸浮液稀釋了1000倍，A正確；

B；自生固氮菌是異養(yǎng)型生物；可用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板或稀釋涂布平板法來(lái)計(jì)數(shù)土壤懸浮液中的菌體數(shù)，B錯(cuò)誤；

C；步驟②需充分振蕩20min；主要目的是使土壤中的微生物充分釋放到無(wú)菌水中，C正確；

D；步驟④為稀釋涂布平板法接種；所用的接種工具是涂布器，該選擇培養(yǎng)基的特點(diǎn)是不添加氮源，利用的是空氣中的氮?dú)?，D正確。

故選ACD。三、填空題(共9題，共18分)14、略

【解析】①.液體狀態(tài)②.固體培養(yǎng)基③.瓊脂④.固體⑤.多糖15、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】特定磷酸二酯鍵特異性16、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】提取目的基因、目的基因與運(yùn)載體結(jié)合、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞、目的基因的檢測(cè)與鑒定。17、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】黏性末端平末端。18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】80—100℃變性19、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】蒸餾水洗滌劑和食鹽20、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】莖尖極少或沒(méi)有）胚狀體人工薄膜不受季節(jié)的限制人工種皮；胚狀體和人工胚乳。

（2）21、略

【分析】【詳解】

要提高酶的熱穩(wěn)定性，可采用蛋白質(zhì)工程技術(shù)替換少數(shù)氨基酸，改善其功能，需要從改造控制該酶合成的基因著手，具體做法為從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列→獲得所需的蛋白質(zhì)?！窘馕觥坎捎玫鞍踪|(zhì)工程技術(shù)替換少數(shù)氨基酸，提高該酶的熱穩(wěn)定性，從改造控制該酶合成的基因著手，具體做法為從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列→獲得所需的蛋白質(zhì)。22、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】目的基因的檢測(cè)和鑒定四、實(shí)驗(yàn)題(共3題，共12分)23、略

【分析】【分析】

培養(yǎng)基是人們按照微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的不同需求；配制出供其生長(zhǎng)繁殖的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)，培養(yǎng)基中一般含有水；碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽。在提供上述幾種主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的基礎(chǔ)上，培養(yǎng)基還需要滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物種和氧氣的要求。固氮微生物可利用空氣中的氮?dú)猓逝囵B(yǎng)基無(wú)需再加入氮源。純化微生物時(shí)常用的接種方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法。

【詳解】

（1）固氮菌可利用空氣中的氮?dú)庾鳛榈?，所以Ashby培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)成分主要包括水；無(wú)機(jī)鹽、碳源等；不需要額外加入氮源。將土壤稀釋液進(jìn)行梯度稀釋后再接種的方法為稀釋涂布平板法，在Ashy平板上進(jìn)行多次接種的目的是提高固氮菌的純度。

（2）固氮酶的活性越大；單位時(shí)間內(nèi)的固氮量越大，所以為評(píng)估固氮酶的活性，可以檢測(cè)單位時(shí)間內(nèi)的固氮量。

（3）S試劑可與IAA反應(yīng)顯紅色；且顏色深淺與IAA濃度成正相關(guān)，所以可用蒸餾水對(duì)IAA母液進(jìn)行梯度稀釋，加入S試劑制成標(biāo)準(zhǔn)顯色液，往上清液中加入S試劑，與標(biāo)準(zhǔn)顯示液進(jìn)行比色，與上清液顏色相近的標(biāo)準(zhǔn)顯示液中IAA的濃度計(jì)為上清液中IAA的濃度。

【點(diǎn)睛】

本題考查固氮菌的培養(yǎng)和篩選，意在考查考生對(duì)所學(xué)知識(shí)的靈活應(yīng)用能力?！窘馕觥刻荚聪♂屚坎计桨宸ㄌ岣吖痰募兌葐挝粫r(shí)間內(nèi)的固氮量用蒸餾水對(duì)IAA母液進(jìn)行梯度稀釋，加入S試劑制成標(biāo)準(zhǔn)顯色液，往上清液中加入S試劑，與標(biāo)準(zhǔn)顯示液進(jìn)行比色，與上清液顏色相近的標(biāo)準(zhǔn)顯示液中IAA的濃度計(jì)為上清液中IAA的濃度24、略

【分析】【分析】

單克隆抗體的制備：（1）制備產(chǎn)生特異性抗體的B淋巴細(xì)胞：向免疫小鼠體內(nèi)注射特定的抗原；然后從小鼠脾內(nèi)獲得相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞。（2）獲得雜交瘤細(xì)胞。①將鼠的骨髓瘤細(xì)胞與脾細(xì)胞中形成的B淋巴細(xì)胞融合；②用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，該雜種細(xì)胞既能夠增殖又能產(chǎn)生抗體。（3）克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)。（4）將雜交瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖。（5）提取單克隆抗體：從細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠的腹水中提取。（6）單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)：特異性強(qiáng)，靈敏度高，能大量制備。

【詳解】

（1）抗體參與體液免疫；科研人員將纖維蛋白作為抗原注射到小鼠體內(nèi)，激活體液免疫過(guò)程，制備出抗纖維蛋白的單克隆抗體（5B8）。該項(xiàng)技術(shù)為單克隆抗體的制備，屬于細(xì)胞工程范疇，即B正確，ACD錯(cuò)誤。

故選B。

（2）制備抗纖維蛋白的單克隆抗體5B8的基本技術(shù)流程為：先從注射了纖維蛋白的小鼠脾臟中獲取的相應(yīng)的B細(xì)胞（能產(chǎn)生特定的抗體）與小鼠的骨髓瘤細(xì)胞融合獲得雜交細(xì)胞；用特定的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選；獲得雜交瘤細(xì)胞；對(duì)雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行克隆和抗體檢測(cè)，獲得能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞；獲得的雜交瘤細(xì)胞在體外環(huán)境或小鼠腹腔內(nèi)培養(yǎng)；然后從細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠腹水中提取單克隆抗體5B8。

（3）①活性氧（ROS）是氧分子正常代謝的副產(chǎn)物；NADPH氧化酶是催化細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生ROS的主要酶。由于細(xì)胞中GAPDH蛋白表達(dá)量穩(wěn)定且含量豐富，在實(shí)驗(yàn)中可作為標(biāo)準(zhǔn)參照，排除實(shí)驗(yàn)操作等無(wú)關(guān)變量對(duì)結(jié)果的影響。

②對(duì)比1和2組檢測(cè)結(jié)果；細(xì)胞中NADPH氧化酶和ROS的含量升高，說(shuō)明纖維蛋白提高了吞噬細(xì)胞中NADPH氧化酶和ROS的含量，使其對(duì)神經(jīng)元產(chǎn)生毒害。通過(guò)對(duì)比1；2、3組結(jié)果發(fā)現(xiàn)，經(jīng)5B8處理后，NADPH氧化酶和ROS的含量會(huì)下降，說(shuō)明5B8能減輕纖維蛋白對(duì)NADPH氧化酶和ROS的含量的影響，使兩種物質(zhì)含量下降。

③由第②題可知；經(jīng)5B8處理后，NADPH氧化酶和ROS的含量會(huì)下降，說(shuō)明單克隆抗體588與纖維蛋白結(jié)合，可以降低吞噬細(xì)胞NADPH氧化酶的量，進(jìn)而降低ROS產(chǎn)量，從而減小對(duì)神經(jīng)元的傷害，因此單克隆抗體5B8對(duì)多發(fā)性硬化癥有明顯療效。

【點(diǎn)睛】

本題考查單克隆抗體的制備過(guò)程和抗纖維蛋白的單克隆抗體（5B8）的作用機(jī)理，意在考查考生對(duì)所學(xué)知識(shí)的理解和應(yīng)用能力?！窘馕觥靠乖w液B相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞；選擇培養(yǎng)基無(wú)關(guān)變量（如實(shí)驗(yàn)操作等）1和2提高吞噬細(xì)胞中NADPH氧化酶和ROS的含量1、2、3組（2、3組）減輕纖維蛋白對(duì)NADPH氧化酶和ROS含量的影響，使兩種物質(zhì)含量下降單克隆抗體5B8與纖維蛋白結(jié)合，可以降低吞噬細(xì)胞NADPH氧化酶的量，進(jìn)而降低ROS產(chǎn)量，從而減小對(duì)神經(jīng)元的傷害，起到治療多發(fā)性硬化癥的作用。25、略

【分析】【分析】

1.體液免疫的具體過(guò)程：

(1)感應(yīng)階段：除少數(shù)抗原可以直接刺激B細(xì)胞外；大多數(shù)抗原被吞噬細(xì)胞攝取和處理，并暴露出其抗原決定簇；吞噬細(xì)胞將抗原呈遞給T細(xì)胞，再由T細(xì)胞呈遞給B細(xì)胞；

(2)反應(yīng)階段：B細(xì)胞接受抗原刺激后；開始進(jìn)行一系列的增殖；分化，形成記憶細(xì)胞和漿細(xì)胞；

(3)效應(yīng)階段：漿細(xì)胞分泌抗體與相應(yīng)的抗原特異性結(jié)合；發(fā)揮免疫效應(yīng)。

2.單克隆抗體的制備：

(1)細(xì)胞來(lái)源：B淋巴細(xì)胞：能產(chǎn)生特異性抗體；在體外不能無(wú)限繁殖；骨髓瘤細(xì)胞：不產(chǎn)生專一性抗體，體外能無(wú)限繁殖。

(2)雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)：既能大量增殖；又能產(chǎn)生特異性抗體。

(3)兩次次篩選：①篩選得到雜交瘤細(xì)胞（去掉未雜交細(xì)胞以及自身融合的細(xì)胞）；②篩選出能夠產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞群。

(4)兩次抗體檢測(cè)：專一抗體檢驗(yàn)陽(yáng)性。

(5)提取單克隆抗體：從培養(yǎng)液或小鼠腹水中提取。

(6)單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)：特異性強(qiáng)；靈敏度高；并可能大量制備。

【詳解】

（1）圖為單克隆抗體的制備的流程；圖中細(xì)胞a是免疫后小鼠體內(nèi)的B細(xì)胞（或漿細(xì)胞），該細(xì)胞是高度分化的細(xì)胞，不能進(jìn)行分裂。

（2）與植物原生質(zhì)體融合相比；動(dòng)物細(xì)胞融合特有的誘導(dǎo)因素是滅活的病毒。若只存在細(xì)胞的兩兩融合，融合體系中除未融合的細(xì)胞外，還有兩兩融合的細(xì)胞，由于細(xì)胞的融合是隨機(jī)的，兩兩融合的細(xì)胞包括雜交瘤細(xì)胞和同種細(xì)胞融合成的細(xì)胞。篩選時(shí)，需用特定的選擇性培養(yǎng)基才能從中篩選出雜交瘤細(xì)胞。

（3）要想獲得足夠數(shù)量的能分泌特異性抗體的細(xì)胞；在篩選過(guò)程中需進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)，該過(guò)程是將霍山石斛的某種多糖與牛血清蛋白偶聯(lián)制作成抗原；并生產(chǎn)出單克隆抗體，因此還需用（霍山石斛）多糖與牛血清蛋白偶聯(lián)物作為檢測(cè)特異性抗體的物質(zhì)。

（4）若將篩選出的細(xì)胞注射到小鼠腹腔內(nèi)；則可從小鼠腹水中提取單克隆抗體。

（5）科研小組用霍山石斛多糖給小鼠灌胃后；取出小腸；肝、脾、腎和肺進(jìn)行抗原-抗體雜交實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)除腸腔外其他組織均未檢測(cè)到霍山石斛多糖?；羯绞嗵强山到猱a(chǎn)生小分子片段，該實(shí)驗(yàn)不能證明具有免疫調(diào)節(jié)效應(yīng)的物質(zhì)是多糖還是降解后的小分子片段，因此該實(shí)驗(yàn)不能說(shuō)明引起免疫調(diào)節(jié)效應(yīng)的是大分子霍山石斛多糖。

【點(diǎn)睛】

本題考查免疫調(diào)節(jié)、單克隆抗體的制備等知識(shí)，意在考查考生能理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)，把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系，形成知識(shí)網(wǎng)絡(luò)的能力以及獲取信息、分析問(wèn)題的能力?！窘馕觥緽細(xì)胞（或漿細(xì)胞）該細(xì)胞是高度分化的細(xì)胞，不能進(jìn)行分裂滅活的病毒雜交瘤細(xì)胞同種細(xì)胞融合成的細(xì)胞選擇性克隆化培養(yǎng)抗體檢測(cè)（霍山石斛）多糖與牛血清蛋白偶聯(lián)物腹水不能霍山石斛多糖在腸腔中被降解，產(chǎn)生的多糖小分子片段可能具有免疫調(diào)節(jié)效應(yīng)（或該實(shí)驗(yàn)不能證明具有免疫調(diào)節(jié)效應(yīng)的物質(zhì)是多糖還是降解后的小分子片段）五、綜合題(共4題，共16分)26、略

【分析】【分析】

結(jié)合題干背景分析題圖；CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)可以定點(diǎn)敲除目標(biāo)基因。向?qū)NA是一條單鏈RNA，能夠引導(dǎo)Cas9蛋白到一個(gè)特定的基因位點(diǎn)進(jìn)行切割。而通過(guò)人為設(shè)計(jì)向?qū)NA中20個(gè)堿基的識(shí)別序列，可人為選擇DNA上的目標(biāo)位點(diǎn)進(jìn)行切割。

(1)

無(wú)性繁殖是指不經(jīng)過(guò)有性生殖細(xì)胞融合的繁殖方式；由于其只涉及到有絲分裂，因而該繁殖方法的優(yōu)點(diǎn)是：保持了親本的優(yōu)良性狀。莖尖分生區(qū)附近的細(xì)胞由于剛剛分裂產(chǎn)生，所以還未被病毒感染，可以用來(lái)培育脫毒植株。

(2)

①切割DNA；斷裂的是磷酸二酯鍵，因而Cas9和向?qū)NA結(jié)合形成的復(fù)合物具有類似限制性核酸內(nèi)切酶的作用。根據(jù)題干信息，CRISPR/Cas9系統(tǒng)具有定向切除DNA片段的作用。而細(xì)菌是單細(xì)胞生物，無(wú)免疫系統(tǒng)，其含有CRISPR/Cas9系統(tǒng)，可能是用于切割外源DNA，使之失效，起到保護(hù)自身的目的（或者是抵抗外源DNA的入侵，保護(hù)自身）。

②根據(jù)題圖及題干信息；向?qū)NA的識(shí)別序列是單鏈RNA序列，能夠利用堿基互補(bǔ)配對(duì)原則，進(jìn)行特異性識(shí)別目標(biāo)DNA的作用。因而必須根據(jù)靶（目標(biāo)）基因的序列（自交不親和基因序列）來(lái)設(shè)計(jì)。

③對(duì)目的基因的檢測(cè)；最簡(jiǎn)便的方法是個(gè)體水平的檢測(cè)，即讓該植株自交，觀察是否產(chǎn)生種子[或觀察該植株能否自交靶（目標(biāo)）基因的序列（自交不親和基因序列）來(lái)設(shè)計(jì)結(jié)種子]。

【點(diǎn)睛】

掌握植物組織培養(yǎng)的方法和優(yōu)點(diǎn)，能夠利用植物組培獲取脫毒植株。理解基因工程的原理和過(guò)程，能夠分析題干提供的新技術(shù)，利用有關(guān)原理進(jìn)行答題。【解析】(1)保持親本的優(yōu)良性狀分生區(qū)附近（莖尖）

(2)限制性核酸內(nèi)切切割外源DNA，使之失效，起到保護(hù)自身的目的（抵抗外源DNA的入侵，保護(hù)自身）（2分