抗菌活性的定性與定量測定_第1頁
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檢查抗菌劑抗菌活性的目的》殺菌劑/殺菌劑/Totalcellcount\ViablecellcountBacteriostatic/TotalcellcountViable/cellcountTime殺死99.9%(Δlog10CFU≥3)的供試該濃度具有殺菌作用該濃度只有抑菌作用E-test?E-test?宏量肉湯稀釋法微量肉湯稀釋法瓊脂稀釋法這些方法均可檢索到具體詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)步驟:B站l紙片擴(kuò)散法操作簡便,不過易受多種因素的影響;》《》《Bauer,A.W.,W.M.M.Kirby,J.C.SherrisAm.J.Clin.Pathol.36:493-496.?StaphylococcusaureusATCC25923?EnterococcusfaecalisATCC29212?StreptococcuspneumoniaeATCC49619?Escherichia?Klepsiella也可根據(jù)抗菌物質(zhì)應(yīng)用場景,選擇合適菌株作為指示菌,但需標(biāo)注具體“身份“:培養(yǎng)基選擇與平板制作Mueller-Hinton是一種通用型培養(yǎng)基(水解酪蛋白),主要培養(yǎng)非厭氧型微生物。初始接種物制備M-H液體培養(yǎng)基初始接種物制備M-H液體培養(yǎng)基方法1:方法1:挑選4~5個(gè)正常表型菌落,直接用培養(yǎng)液或生理鹽水重懸,調(diào)至預(yù)定濃度30min內(nèi)使用方法2:液體培養(yǎng)基振蕩培養(yǎng)振蕩培養(yǎng)2~6h),一定濃度范圍內(nèi),光密度與菌體濃度成正比一定濃度范圍內(nèi),光密度與菌體濃度成正比 R2=0.9982每張以吸入20μL藥液為標(biāo)準(zhǔn),如紙片薄,藥物原液需作調(diào)整。根據(jù)紙片內(nèi)各種抗菌藥物的不用無菌操作法將待測的抗菌藥物溶液1mL(含藥量按表所列計(jì)算,例如,慶大),植物精油或其組分Essentialoilsortheircomponents抑菌圈直徑(mm)InhibitoryzoneB.thermosphactaLC-R1溫和氣單胞菌A.sobriaLC-S2腐敗希瓦氏菌S.putrefaciensLC-Q622.8±2.9檸檬草Cymbopogoncitratus2.7±2.2陳皮Citripericarpiumreticulatae薄荷Menthahaplocalyx2.7±1.30.4±0.6檸檬香茅Cymbopogonnardus大蒜Alliumsativum2.3±2.3八角茴香Illiciumverum2.6±0.94.5±2.42.0±0.4注意:注意:紙片擴(kuò)散法的前提是抗菌物質(zhì)能夠從紙片釋放,并在瓊脂基質(zhì)中擴(kuò)散,這對抗生素、精油瓊脂稀釋法(瓊脂稀釋法(特別適用于霉菌)--------------?振蕩培養(yǎng)2~6h--------------?振蕩培養(yǎng)2~6hM-H液體培養(yǎng)基肉湯稀釋法肉湯稀釋法》》BCDG5BCDG5689IOl1223BCDG23BCDG23456I8go2 --------------?板孔中最終接種濃度:5*105CFU/mL方法1:挑選4~5個(gè)正常表型菌落,直接用培養(yǎng)液或生理鹽水重懸,調(diào)至預(yù)定濃度方法2:液體培養(yǎng)基振蕩培養(yǎng)M-H液體培養(yǎng)基振蕩培養(yǎng)2~6h除終點(diǎn)判斷外,也可以制作殺菌曲線(time-kill濃度梯度升高):

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