Q/LB.□XXXXX-XXXX目次TOC\o"1-1"\h前言 II1范圍 12規(guī)范性引用文件 13術(shù)語和定義 14方法原理 15試劑與材料 16儀器與設(shè)備 27樣品 28測(cè)定步驟 29結(jié)果計(jì)算和表述 410檢測(cè)方法的靈敏度、準(zhǔn)確度和精密度 5附錄A（資料性）草銨膦和草甘膦及其代謝物的中英文通用名稱、化學(xué)分子式和CAS號(hào) 6附錄B（資料性）標(biāo)準(zhǔn)溶液特征離子質(zhì)量色譜圖 7前言本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別專利的責(zé)任。本文件由湖南省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳提出。本文件由湖南省農(nóng)業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)歸口。本文件起草單位：湖南省水產(chǎn)科學(xué)研究所、農(nóng)業(yè)農(nóng)村部漁業(yè)產(chǎn)品質(zhì)量檢驗(yàn)測(cè)試中心（長沙）、澧縣農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測(cè)中心。本文件主要起草人：萬譯文，楊霄、李小玲、索紋紋、曾春芳、崔先鋒、雷琴、劉伶俐、陳湘藝、謝玉昆、何詠、尹升福、黃華偉、洪波。漁業(yè)水體中草銨膦和草甘膦及其代謝物的測(cè)定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法范圍本文件描述了漁業(yè)水體中草銨膦和草甘膦及其代謝物的液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測(cè)定方法。本文件適用于漁業(yè)水體中草銨膦、草甘膦、3-甲基磷酸亞基丙酸、氨甲基膦酸、N-乙酰氨甲基膦酸的測(cè)定。規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法SC/T9102.3漁業(yè)生態(tài)環(huán)境監(jiān)測(cè)規(guī)范第3部分：淡水術(shù)語和定義本文件沒有需要界定的術(shù)語和定義。方法原理水試樣中的草銨膦和草甘膦及其代謝物經(jīng)通過式反相混合型親水親脂固相萃取柱凈化，液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀測(cè)定，外標(biāo)法定量。試劑與材料試劑水：GB/T6682規(guī)定的一級(jí)水。碳酸氫銨（NH4HCO3）：分析純。氨水（NH3?H2O）：分析純，濃度為25%～28%。溶液配制200mmol/L碳酸氫銨-0.05%氨水水溶液：稱取15.8g碳酸氫銨，用水溶解，加入0.5mL氨水，用水稀釋至1000mL，混勻。標(biāo)準(zhǔn)品草銨膦和草甘膦及其代謝物：草銨膦、草甘膦、3-甲基磷酸亞基丙酸、氨甲基膦酸、N-乙酰氨甲基膦酸，純度均大于等于95.0%，具體內(nèi)容見附錄A。標(biāo)準(zhǔn)溶液配制混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液（1000μg/mL）：取草銨膦、草甘膦及其代謝物標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)準(zhǔn)品各約50mg，精密稱定，用水溶解并定容于50mL聚丙烯容量瓶，配制成濃度為1000μg/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液。4℃以下避光保存，有效期6個(gè)月?；旌蠘?biāo)準(zhǔn)中間液（10.0μg/mL）：準(zhǔn)確移取1mL混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，于100mL聚丙烯容量瓶中，用水稀釋并定容，配制成濃度為10.0μg/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)中間液。4℃以下避光保存，有效期2個(gè)月。混合標(biāo)準(zhǔn)工作液（1.0μg/mL、0.1μg/mL）：準(zhǔn)確移取5mL、0.5mL混合標(biāo)準(zhǔn)中間液，于各自的50mL聚丙烯容量瓶中，用水稀釋并定容，分別配制成濃度為1.0μg/mL和0.1μg/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)工作液。4℃以下避光保存，有效期1個(gè)月。材料通過式反相混合型親水親脂固相萃取柱：60mg/3mL，或相當(dāng)者。聚醚砜濾膜：0.22μm。容量瓶：100mL，聚丙烯材質(zhì)。樣品瓶：500mL，聚丙烯材質(zhì)。離心管：10mL，聚丙烯材質(zhì)。進(jìn)樣瓶：2mL，聚丙烯材質(zhì)。儀器與設(shè)備液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀：配有電噴霧離子源。分析天平：感量0.01g和0.00001g。高速離心機(jī)：轉(zhuǎn)速不低于10000r/min。固相萃取裝置。樣品樣品采集水樣按照SC/T9102.3規(guī)定的方法進(jìn)行采集。試樣制備水樣采樣量應(yīng)不少于500mL，置于樣品瓶中，0℃～4℃避光保存，一周內(nèi)完成分析。空白試樣制備選取不含草銨膦和草甘膦及其代謝物的同類樣品，按照7.2進(jìn)行制備。測(cè)定步驟試樣前處理移取8mL試樣（精確至0.1mL）于10mL離心管中，10000r/min離心5min，取1mL上清液潤洗固相萃取柱，棄去流出液，再取2mL上清液過柱，控制流速不超過1mL/min，收集流出液，過0.22μm聚醚砜濾膜，濾液裝入聚丙烯進(jìn)樣瓶，供液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀測(cè)定。標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備精密量取混合標(biāo)準(zhǔn)工作液適量，用水配制成質(zhì)量濃度為2.0μg/L、4.0μg/L、10.0μg/L、50.0μg/L、100.0μg/L和200.0μg/L的系列混合標(biāo)準(zhǔn)工作液，供液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀測(cè)定。以待測(cè)物特征離子質(zhì)量色譜峰峰面積為縱坐標(biāo)，對(duì)應(yīng)的待測(cè)物標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算回歸方程和相關(guān)系數(shù)。測(cè)定液相色譜參考條件液相色譜參考條件如下：色譜柱：填料為季銨化聚乙烯醇的陰離子分析柱，柱長150mm，內(nèi)徑4.0mm，粒徑5μm，或性能相當(dāng)者；流動(dòng)相：A為水，B為200mmol/L碳酸氫銨-0.05%氨水水溶液，梯度洗脫條件見表1；進(jìn)樣量：10μL；流速：0.6mL/min；柱溫：40℃。流動(dòng)相梯度洗脫條件時(shí)間minA%B%0.090100.590101.060404.020805.017.582.56.059512.059512.1901015.09010質(zhì)譜參考條件質(zhì)譜參考條件如下：離子源：電噴霧離子源；掃描方式：負(fù)離子掃描；檢測(cè)方式：多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM）；噴霧電壓：-4.5kV；離子源溫度：550℃；氣簾氣壓力：0.24MPa；碰撞氣壓力：0.06MPa；噴霧氣壓力：0.38MPa；輔助加熱氣壓力：0.38MPa；多反應(yīng)監(jiān)測(cè)母離子、子離子、去簇電壓和碰撞能量見表2。多反應(yīng)監(jiān)測(cè)母離子、子離子、去簇電壓和碰撞能量化合物名稱母離子m/z子離子m/z去簇電壓V碰撞能量eV草銨膦180.063.0*-60-6885.0-27草甘膦168.063.0*-40-3779.0-603-甲基磷酸亞基丙酸151.063.0*-50-50133.0-19氨甲基膦酸110.063.0*-60-2679.0-34N-乙酰氨甲基膦酸152.063.0*-50-42110.0-20注：帶*的子離子為定量離子。定性測(cè)定在相同測(cè)試條件下，試樣溶液中待測(cè)物的保留時(shí)間與標(biāo)準(zhǔn)溶液中待測(cè)物的保留時(shí)間一致，偏差在±2.5%以內(nèi)，且試樣溶液中待測(cè)物定性離子的相對(duì)豐度與濃度相當(dāng)?shù)臉?biāo)準(zhǔn)溶液對(duì)應(yīng)的定性離子的相對(duì)豐度一致。其允許偏差應(yīng)符合表3的要求。定性確證時(shí)相對(duì)離子豐度的允許偏差單位為百分號(hào)相對(duì)離子豐度＞50＞20～50＞10～20≤10允許偏差±20±25±30±50定量測(cè)定按8.3.1和8.3.2設(shè)定儀器條件，取標(biāo)準(zhǔn)工作溶液、試樣溶液、空白試樣溶液等體積進(jìn)樣測(cè)定，外標(biāo)法定量。標(biāo)準(zhǔn)工作溶液和試樣溶液中待測(cè)物的響應(yīng)值均應(yīng)在儀器檢測(cè)線性范圍內(nèi)。草銨膦和草甘膦及其代謝物標(biāo)準(zhǔn)溶液特征離子質(zhì)量色譜圖參見附錄B?？瞻讓?shí)驗(yàn)按照8.1～8.3相同的測(cè)定步驟進(jìn)行空白試樣（見7.3）的測(cè)定。結(jié)果計(jì)算和表述水樣中待測(cè)物含量按式（1）計(jì)算。計(jì)算結(jié)果應(yīng)扣除空白值，保留3位有效數(shù)字。 Xi=Ci (式中：X1——試樣中待測(cè)物的含量，單位為微克每升（μg/L）；Ci——從標(biāo)準(zhǔn)工作曲線得到的待測(cè)物溶液濃度，單位為微克每升（μg/L）檢測(cè)方法的靈敏度、準(zhǔn)確度和精密度靈敏度本方法檢出限均為1.00μg/L，定量限均為2.00μg/L。準(zhǔn)確度本方法在2μg/L～20μg/L添加濃度水平上的回收率為70%～120%。精密度本方法的批內(nèi)相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于等于15%，批間相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于等于15%。

（資料性）

草銨膦和草甘膦及其代謝物的中英文通用名稱、化學(xué)分子式和CAS號(hào)草銨膦和草甘膦及其代謝物中英文通用名稱、化學(xué)分子式和CAS號(hào)見表A.1。草銨膦和草甘膦及其代謝物中英文通用名稱、化學(xué)分子式和CAS號(hào)中文通用名稱英文通用名稱化學(xué)分子式CAS號(hào)草銨膦GlufosinateC5H15N2O4P77182-82-2草甘膦GlyphosateC3H8NO5P1071-83-63-甲基磷酸亞基丙酸3-MethylphosphinicopropionicacidC4H9O4P15090-23-0氨甲基膦酸AminomethylphosphonicacidCH6NO3P1066-51-9N-乙酰氨甲基膦酸N-acetylaminomethylphosphonicacidC3H8NO4P5