DeepSeek愿你的學(xué)習(xí)像有絲分裂一樣，有序進(jìn)行，收獲滿滿！祝你新的一年里，像線粒體一樣，充滿能量，活力四射！祝你新的一年里，像種群增長(zhǎng)一樣，不斷壯大，實(shí)現(xiàn)夢(mèng)想！愿你的2025年像群落演替一樣，不斷進(jìn)步，走向成功！祝你新的一年里，像自然選擇一樣，成為最優(yōu)秀的自己！2.2動(dòng)物細(xì)胞工程動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)（第一課時(shí)）在治療大面積燒傷時(shí)，通常采用的方法是取燒傷病人的健康皮膚進(jìn)行自體移植。但對(duì)這樣的病人來說，自體健康皮膚非常有限，使用他人皮膚來源又不足，而且會(huì)產(chǎn)生免疫排斥反應(yīng)。那么，怎樣才能獲得大量的自體健康皮膚？能不能用自體皮膚的單個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)出可供移植的皮膚？可以從病人身上取少量正常、健康的皮膚在體外進(jìn)行培養(yǎng)、擴(kuò)增；人造皮膚目前，科學(xué)家還在研究對(duì)皮膚干細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，以獲得適合臨床上使用的人造皮膚。從社會(huì)中來動(dòng)物細(xì)胞工程常用的技術(shù)：——?jiǎng)游锛?xì)胞工程的基礎(chǔ)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞融合動(dòng)物細(xì)胞核移植01動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件從動(dòng)物體中取出相關(guān)組織，將它們分散成單個(gè)細(xì)胞，然后在適宜的培養(yǎng)條件下，讓這些細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖的技術(shù)。原理：細(xì)胞增殖動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)概念：（有絲分裂）將細(xì)胞所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)（糖類、氨基酸、無機(jī)鹽、維生素等）按種類和所需量嚴(yán)格配制的培養(yǎng)基。（1）培養(yǎng)基構(gòu)成：合成培養(yǎng)基血清等一些天然成分＋合成培養(yǎng)基：血清等一些天然成分：含有尚未全部研究清楚的細(xì)胞所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)（2）培養(yǎng)基類型（根據(jù)物理性質(zhì)）：液體培養(yǎng)基（培養(yǎng)液）血清一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件1.營(yíng)養(yǎng)（1）對(duì)培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進(jìn)行滅菌處理。（2）在無菌環(huán)境下進(jìn)行操作。（3）培養(yǎng)液需要定期更換：清除代謝物，防止細(xì)胞代謝物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害。另外：可根據(jù)實(shí)際情況適量添加抗生素。無菌無毒一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件2.無菌、無毒的環(huán)境3.溫度、pH和滲透壓（1）適宜的溫度：哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的溫度多以

為宜；36.5±0.5℃（2）適宜的pH：多數(shù)動(dòng)物細(xì)胞生存的適宜pH為

；7.2-7.4（3）適宜的滲透壓：目的

。維持細(xì)胞正常的形態(tài)和功能與相應(yīng)動(dòng)物內(nèi)環(huán)境的理化性質(zhì)保持一致。一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件4.氣體環(huán)境（1）氣體組成及作用：O2CO2細(xì)胞代謝所必需維持培養(yǎng)液的pH（2）具體操作：通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶。置于含有95%空氣和5%CO2的混合氣體的CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。CO2培養(yǎng)箱1.取動(dòng)物組織（1）取材：一般取材于動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的組織、器官。（2）取材原因：細(xì)胞分化程度低，增殖能力強(qiáng)，容易培養(yǎng)二、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程2.動(dòng)物組織處理——制成細(xì)胞懸液（1）將組織分散成單個(gè)細(xì)胞①方法：機(jī)械法用胰蛋白酶、膠原蛋白酶等處理一段時(shí)間②原因：成塊組織中，細(xì)胞與細(xì)胞靠在一起，彼此限制了生長(zhǎng)和增殖一是能使細(xì)胞與培養(yǎng)液充分接觸，保證細(xì)胞所需要的營(yíng)養(yǎng)供應(yīng)；（2）用培養(yǎng)液將細(xì)胞制成細(xì)胞懸液。二是能保證細(xì)胞內(nèi)有害代謝物的及時(shí)排出。將細(xì)胞懸液放入培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，置于適宜環(huán)境中進(jìn)行原代培養(yǎng)。二、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程思考1：進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)常用胰蛋白酶分散細(xì)胞，這說明

細(xì)胞間的物質(zhì)主要是什么成分？用胃蛋白酶行嗎？用胰蛋白酶分散細(xì)胞，說明細(xì)胞間的物質(zhì)主要是蛋白質(zhì)。胃蛋白酶作用的適宜pH約為2，當(dāng)pH大于6時(shí)，胃蛋白酶就會(huì)失去活性。多數(shù)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的適宜pH為7.2～7.4，胃蛋白酶在此環(huán)境中沒有活性，所以用胃蛋白酶不行。思考2：胰蛋白酶會(huì)把細(xì)胞膜蛋白分解掉嗎？可能會(huì)控制好作用時(shí)間二、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程3.體外培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞類型①懸浮生長(zhǎng)類：②貼壁生長(zhǎng)類：懸浮培養(yǎng)瓶能夠懸浮在培養(yǎng)液中生長(zhǎng)增殖。需要貼附于某些基質(zhì)表面才能生長(zhǎng)增殖。大多數(shù)細(xì)胞屬于這種類型。表面的要求：光滑、無毒、易于貼附。二、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程①細(xì)胞貼壁：大多數(shù)細(xì)胞需要貼附于某些基質(zhì)表面才能增殖，這類細(xì)胞往往貼附在培養(yǎng)瓶的瓶壁上，這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞貼壁。一方面會(huì)因細(xì)胞密度過大、有害代謝物積累和培養(yǎng)液中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)缺乏等因素而分裂受阻。影響貼壁類細(xì)胞生長(zhǎng)分裂的因素：另一方面還會(huì)發(fā)生接觸抑制現(xiàn)象。②接觸抑制：當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到表面相互接觸時(shí)，細(xì)胞通常會(huì)停止分裂增殖的現(xiàn)象。腫瘤細(xì)胞二、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程二、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程4.分瓶、進(jìn)行傳代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)（1）收集細(xì)胞①懸浮生長(zhǎng)類：直接用離心法收集②貼壁生長(zhǎng)類：重新用胰蛋白酶等處理，使之分散成單個(gè)細(xì)胞，然后再用離心法收集（2）將收集的細(xì)胞制成細(xì)胞懸液，分瓶培養(yǎng)①原代培養(yǎng)：通常將分瓶之前的細(xì)胞培養(yǎng)，即動(dòng)物組織經(jīng)處理后的初次培養(yǎng)。②傳代培養(yǎng)：將分瓶后的細(xì)胞培養(yǎng)成為傳代培養(yǎng)。二、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程取動(dòng)物組織制成細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液進(jìn)行原代培養(yǎng)分瓶進(jìn)行傳代培養(yǎng)取動(dòng)物組織制成細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液進(jìn)行原代培養(yǎng)放入CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)傳代培養(yǎng)放入CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)細(xì)胞貼壁接觸抑制機(jī)械法

或用胰蛋白酶、膠原蛋

白酶等處理分散成單個(gè)細(xì)胞二、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程植物組織培養(yǎng)與動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的比較比較項(xiàng)目植物組織培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)原理（及是否體現(xiàn)細(xì)胞全能性）

（

全能性）

（

全能性）培養(yǎng)基

培養(yǎng)基

培養(yǎng)基結(jié)果

相同點(diǎn)植物細(xì)胞的全能性體現(xiàn)細(xì)胞增殖未體現(xiàn)固體液體新的植物體新的細(xì)胞群①都進(jìn)行有絲分裂，都不涉及減數(shù)分裂；②均需要無菌操作、適宜的溫度、pH等條件（1）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)體現(xiàn)了動(dòng)物細(xì)胞的全能性

（

）（2）培養(yǎng)保留接觸抑制的細(xì)胞在培養(yǎng)瓶壁上可形成多層細(xì)胞

（

）（3）懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞直接用離心法收集，貼壁細(xì)胞需要用胰蛋白酶等處理后再用離心法收集

（

）

（4）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，O2是細(xì)胞代謝所必需的，CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH（

）習(xí)題鞏固動(dòng)物和人體內(nèi)仍保留著少數(shù)具有分裂和分化能力的細(xì)胞，這些細(xì)胞叫做干細(xì)胞。1.干細(xì)胞的概念：2.干細(xì)胞的來源：3.干細(xì)胞的類型：在一定條件下，干細(xì)胞可以分化成其他類型的細(xì)胞。存在于

、

和

等多種組織和器官中。早期胚胎骨髓臍帶血包括胚胎干細(xì)胞和成體干細(xì)胞等。三、干細(xì)胞培養(yǎng)及其應(yīng)用4．胚胎干細(xì)胞（簡(jiǎn)稱ES細(xì)胞）①分布：②特點(diǎn)：③應(yīng)用實(shí)例：④局限性：存在于早期胚胎中具有分化為成年動(dòng)物體內(nèi)的任何一種類型的細(xì)胞，并進(jìn)一步形成機(jī)體的所有組織和器官甚至個(gè)體的潛能。

目前科學(xué)家已分離出了小鼠、兔、牛、猴和人等的ES細(xì)胞，在體外培養(yǎng)可分化成心肌細(xì)胞、神經(jīng)元細(xì)胞和造血干細(xì)胞等細(xì)胞。必須從胚胎中獲取，涉及倫理問題；因而限制了在醫(yī)學(xué)上的應(yīng)用。三、干細(xì)胞培養(yǎng)及其應(yīng)用5．成體干細(xì)胞①分布③特點(diǎn)②常見類型存在于成體組織或器官內(nèi)的干細(xì)胞造血干細(xì)胞（骨髓、外周血和臍帶血中）神經(jīng)干細(xì)胞（神經(jīng)系統(tǒng)中）精原干細(xì)胞（睪丸中）發(fā)現(xiàn)最早研究最多應(yīng)用最成熟具有組織特異性，只能分化成特定的細(xì)胞或組織，不具有發(fā)育成完整個(gè)體的能力。三、干細(xì)胞培養(yǎng)及其應(yīng)用④作用：有著自我更新能力及分化潛能的干細(xì)胞，與組織、器官的發(fā)育、再生和修復(fù)等密切相關(guān)。⑤應(yīng)用實(shí)例治療神經(jīng)組織損傷和神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病（如帕金森病、阿爾茨海默病等）治療白血病及一些惡性腫瘤放療或化療后引起的造血系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)功能障礙等疾病。造血干細(xì)胞神經(jīng)干細(xì)胞干細(xì)胞將在再生醫(yī)學(xué)、藥物安全性與有效性檢測(cè)等領(lǐng)域發(fā)揮大作用。⑥面臨的問題：用于臨床治療存在導(dǎo)致腫瘤發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)⑦應(yīng)用展望：三、干細(xì)胞培養(yǎng)及其應(yīng)用6．誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（1）概念：通過體外誘導(dǎo)小鼠成纖維細(xì)胞，獲得了類似胚胎干細(xì)胞的一種細(xì)胞，稱為誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（簡(jiǎn)稱iPS細(xì)胞）。（2）誘導(dǎo)方法：①借助載體將特定基因或特定蛋白導(dǎo)入細(xì)胞（成纖維細(xì)胞以及已分化的T細(xì)胞、B細(xì)胞均可）；②用小分子化合物誘導(dǎo)形成。（3）誘導(dǎo)多能干細(xì)胞優(yōu)點(diǎn)：①誘導(dǎo)過程無須破壞胚胎；②iPS細(xì)胞可以來源于病人自身的體細(xì)胞，將它移植回病人體內(nèi)后，理論上可以避免免疫排斥反應(yīng)。iPS細(xì)胞三、干細(xì)胞培養(yǎng)及其應(yīng)用移植取成纖維細(xì)胞等iPS細(xì)胞轉(zhuǎn)入相關(guān)因子細(xì)胞發(fā)生轉(zhuǎn)化分化胰島細(xì)胞神經(jīng)元血細(xì)胞腸上皮細(xì)胞心肌細(xì)胞肝細(xì)胞病人iPS細(xì)胞用于治療人類疾病示意圖（4）誘導(dǎo)多能干細(xì)胞的應(yīng)用：可治療鐮狀細(xì)胞貧血癥，在治療阿爾茲海默病、心血管疾病等領(lǐng)域的研究也取得了新進(jìn)展。