———2— 4 4 5 一、申請(qǐng)人名稱杭州杰毅生物技術(shù)有限公司二、申請(qǐng)人住所浙江省杭州市余杭區(qū)良渚街道金昌路2073號(hào)3幢4號(hào)樓401室三、生產(chǎn)地址浙江省杭州市余杭區(qū)良渚街道金昌路2073號(hào)3幢3號(hào)樓—4—一、產(chǎn)品概述（一）產(chǎn)品主要組成成分本試劑盒主要組成成分包括Cps-PCR反應(yīng)液A、Cps-PCR反應(yīng)液B、Cps-陽(yáng)性對(duì)照、Cps-陰性對(duì)照。（二）產(chǎn)品預(yù)期用途本試劑盒適用于體外定性檢測(cè)人肺泡灌洗液中鸚鵡熱衣原鸚鵡熱衣原體主要通過接觸患病鳥類、禽類或吸入患病鳥類鼻腔分泌物的氣溶膠和糞便或者羽毛的粉塵傳播給人類。由鸚鵡熱衣原體感染引起的疾病稱為鸚鵡熱，潛伏期通常為5-14嚴(yán)重者可出現(xiàn)重癥肺炎、心內(nèi)膜炎、黃疸和神經(jīng)系統(tǒng)等并發(fā)癥。本產(chǎn)品用于鸚鵡熱衣原體肺炎的輔助診斷，不作確診使用。建議結(jié)合患者臨床表現(xiàn)和其他實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)對(duì)病情進(jìn)行綜合分析。（三）產(chǎn)品包裝規(guī)格48人份/盒。（四）產(chǎn)品檢驗(yàn)原理本試劑盒基于熒光定量PCR技術(shù)，采用熒光定量PCR探針法，針對(duì)鸚鵡熱衣原體外膜蛋白的ompA基因保守區(qū)域設(shè)計(jì)特異性引物和熒光探針用于鸚鵡熱衣原體核酸的檢測(cè)；本試劑盒同時(shí)包括內(nèi)源性內(nèi)標(biāo)檢測(cè)系統(tǒng)，用于對(duì)標(biāo)本采集、核酸提取過程及PCR擴(kuò)增過程的監(jiān)控，可減少假陰性結(jié)果的出現(xiàn)。二、臨床前研究概述（一）主要原材料1.主要原材料的選擇本產(chǎn)品主要原材料包括多重TaqMan探針法qPCR預(yù)混液、引物、探針、陽(yáng)性對(duì)照和陰性對(duì)照，多重TaqMan探針法qPCR預(yù)混液和引物、探針原材料均為外購(gòu)，陽(yáng)性對(duì)照和陰性對(duì)照為申請(qǐng)人選擇有資質(zhì)的供應(yīng)商提供的原料，通過功能性試驗(yàn)，篩選出最佳原材料和供應(yīng)商，制定了各主要原材料質(zhì)量要求并2.企業(yè)參考品和對(duì)照品設(shè)置情況本產(chǎn)品企業(yè)參考品包括陽(yáng)性參考品、陰性參考品、檢測(cè)限參考品和精密度參考品。參考品組成如下：陽(yáng)性參考品9份：由不同濃度及不同基因型臨床樣本組成；陰性參考品5份：由與鸚鵡熱衣原體引起癥狀相似的交叉反應(yīng)病原體樣本組成；檢測(cè)限參考品3份：由不同基因型臨床樣本組成；精密度參考品3份：由1例臨床陰性樣本、1例低濃度樣本和1例中濃度樣本組成。陰性對(duì)照，用于檢測(cè)過程中試劑盒和儀器的質(zhì)量控制。此外，PCR檢測(cè)體系還含有內(nèi)源性內(nèi)標(biāo)檢測(cè)系統(tǒng)，通過檢測(cè)內(nèi)標(biāo)基因用于對(duì)標(biāo)本采集、核酸提取過程及PCR擴(kuò)增過程的監(jiān)控，可減少假陰性結(jié)果的出現(xiàn)。（二）生產(chǎn)工藝及反應(yīng)體系研究申請(qǐng)人通過企業(yè)內(nèi)部試驗(yàn)確定最佳的生產(chǎn)工藝及反應(yīng)體系，包括反應(yīng)液、陰陽(yáng)性對(duì)照的配液工序、分裝工序、組裝工同時(shí)對(duì)試劑、引物探針用量、PCR反應(yīng)條件等進(jìn)行研究，還包括對(duì)樣本用量的研究。（三）分析性能評(píng)估申請(qǐng)人提交了質(zhì)量管理體系下生產(chǎn)的六批產(chǎn)品在適用機(jī)型上的1.適用的樣本類型針對(duì)產(chǎn)品適用樣本類型，申請(qǐng)人采用三批試劑盒對(duì)肺泡灌洗液樣本進(jìn)行研究，檢測(cè)結(jié)果均與臨床結(jié)果一致。2.準(zhǔn)確度在準(zhǔn)確度研究中，申請(qǐng)人采用六批試劑盒對(duì)企業(yè)參考品及臨床樣本在適用機(jī)型上進(jìn)行準(zhǔn)確度評(píng)價(jià)。結(jié)果表明檢測(cè)企業(yè)參陰性符合率100%，陽(yáng)性符合率100%，與Sanger測(cè)序檢測(cè)結(jié)果全部一致。3.精密度精密度研究中，申請(qǐng)人使用不同批試劑采用20×2×2的方案對(duì)試劑盒的重復(fù)性、中間精密度及總不精密度等進(jìn)行研究。申請(qǐng)人使用六批試劑對(duì)陰性臨床樣本、不同基因型臨床弱陽(yáng)性樣本和不同基因型臨床中陽(yáng)性樣本進(jìn)行精密度研究。對(duì)試劑盒重復(fù)性、中間精密度及總不精密度進(jìn)行評(píng)價(jià)，結(jié)果顯示試劑盒重復(fù)性、中間精密度及總不精密度CV值符合精密度的性4.分析特異性分析特異性研究包括交叉反應(yīng)研究、競(jìng)爭(zhēng)性干擾研究和內(nèi)在交叉反應(yīng)研究中，申請(qǐng)人使用三批試劑盒對(duì)試劑盒檢測(cè)鮑曼不動(dòng)桿菌、金黃色葡萄球菌、肺炎支原體、肺炎鏈球菌、肺炎克雷伯菌、銅綠假單胞菌、流感嗜血桿菌病進(jìn)行交叉驗(yàn)證，結(jié)果顯示均為陰性。同時(shí)通過生信分析確認(rèn)試劑盒內(nèi)靶標(biāo)引物/探針序列與多種交叉病原體序列無交叉。在競(jìng)爭(zhēng)性干擾中，向臨床弱陽(yáng)樣本中投入高濃度種屬相近或者引起相似癥狀的病原菌作為競(jìng)爭(zhēng)干擾物，使用三批試劑盒進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果顯示樣本中存在高濃度其他病原體不影響靶標(biāo)病原體檢測(cè)結(jié)果。在干擾研究中，申請(qǐng)人使用三批試劑盒對(duì)各種可能的干擾物質(zhì)進(jìn)行評(píng)價(jià)。結(jié)果顯示試劑盒不受30%血液、10mg/mL粘蛋物的影響。5.最低檢出限在檢出限研究中，申請(qǐng)人使用六批試劑，分別檢測(cè)不同基因型、不同濃度梯度的臨床陽(yáng)性樣本，將具有95%陽(yáng)性檢出率的最低濃度水平作為確定的檢出限，并進(jìn)行檢出限驗(yàn)證。研究結(jié)果表明：試劑盒的檢出限濃度為400copies/mL。6.包容性研究在包容性研究中，申請(qǐng)人使用四批試劑，對(duì)不同來源不同基因型（包括A、B、E三種基因型）的鸚鵡熱衣原體樣本進(jìn)行了包容性研究，結(jié)果符合要求；同時(shí)經(jīng)生物信息學(xué)分析不同基因型（包括A-F、E/B、M56、WC九種基因型）鸚鵡熱衣原體序列，結(jié)果表明不同基因型鸚鵡熱衣原體均不會(huì)影響檢測(cè)。7.核酸提取性能在核酸提取性能研究中，申請(qǐng)人比較評(píng)估了手動(dòng)提取和自動(dòng)提取性能研究，包括核酸提取效率、提取純度、提取濃度、提取檢出限、提取精密度和提取抗干擾研究，結(jié)果表明配套使用的核酸提取試劑手動(dòng)提取和自動(dòng)效果均滿足本產(chǎn)品使用需求。（四）陽(yáng)性判斷值或參考區(qū)間研究申請(qǐng)人采用臨床樣本，選擇若干鸚鵡熱衣原體陽(yáng)性樣本和鸚鵡熱衣原體陰性樣本，采用ROC曲線進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，確定試劑盒病原體及內(nèi)標(biāo)的陽(yáng)性判斷值均為Ct值等于40。申請(qǐng)人進(jìn)一步采用臨床樣本進(jìn)行了陽(yáng)性判斷值驗(yàn)證確認(rèn)。（五）穩(wěn)定性研究申請(qǐng)人對(duì)試劑盒的穩(wěn)定性研究包括貨架有效期穩(wěn)定性、使——用穩(wěn)定性、運(yùn)輸穩(wěn)定性和樣本穩(wěn)定性。貨架有效期穩(wěn)定性研究：采用三批試劑盒保存于-20±5℃溫度條件下儲(chǔ)存，于0個(gè)月、6個(gè)月、9個(gè)月、11個(gè)13個(gè)月和14個(gè)月對(duì)試劑盒外觀、陽(yáng)性參考品符合率、陰性參考品符合率、重復(fù)性、檢出限檢測(cè)，確定試劑盒在-20±5℃溫度條件下可穩(wěn)定儲(chǔ)存12個(gè)月。此外，申請(qǐng)人對(duì)本產(chǎn)品的使用穩(wěn)定性、運(yùn)輸穩(wěn)定性和樣定性進(jìn)行了研究，結(jié)果顯示產(chǎn)品的性能均滿足產(chǎn)品說明書聲稱的要求。（六）其他申請(qǐng)人對(duì)配套使用的核酸提取試劑適用的全自動(dòng)核酸提取儀進(jìn)行了攜帶污染研究。攜帶污染研究中，使用全自動(dòng)核酸提取儀進(jìn)行鸚鵡熱衣原體高濃度肺泡灌洗液樣本和鸚鵡熱衣原體陰性肺泡灌洗液樣本提取，重復(fù)5次，提取后的核酸使用本產(chǎn)品進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果表明，按照本產(chǎn)品推薦使用核酸提取試劑盒（磁珠法）和全自動(dòng)核酸提取儀進(jìn)行樣本核酸提取，每次提取后做好提取儀清潔消毒工作能夠避免攜帶污染。三、臨床評(píng)價(jià)概述——華市中心醫(yī)院和麗水市中心醫(yī)院共四家機(jī)構(gòu)完成了臨床試驗(yàn)。臨床試驗(yàn)共分為兩部分：第一部分：采用試驗(yàn)體外診斷試劑與Sanger測(cè)序法進(jìn)行比較研究試驗(yàn)，確認(rèn)本產(chǎn)品的臨床性能。共納入574例肺泡灌洗液樣本，其中陽(yáng)性樣本125例，陰性樣本449例。試驗(yàn)結(jié)果顯示，申報(bào)產(chǎn)品與Sanger測(cè)序法比較的陽(yáng)性符合率為100.0%（95%CI：97.1%，100.0%），陰性符合率為100.0%（95%CI：試驗(yàn)結(jié)果顯示，試驗(yàn)體外診斷試劑與Sanger測(cè)序法一致性良好。第二部分：采用試驗(yàn)體外診斷試劑與臨床參考標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行比較研究試驗(yàn)，確認(rèn)本產(chǎn)品的臨床性能。共納入413例肺泡灌洗液樣本，其中診斷為鸚鵡熱衣原體感染的病例99例，非鸚鵡熱衣原體感染的病例314例。試驗(yàn)結(jié)果顯示，申報(bào)產(chǎn)品與臨床參考標(biāo)準(zhǔn)比較的靈敏度為99.0%（95%CI：94.5%，99.82%），特異度為99.0%（95%CI：97.2%，99.67%）。試驗(yàn)結(jié)果顯示，試驗(yàn)體外診斷試劑與臨床參考標(biāo)準(zhǔn)一致性良好。申報(bào)產(chǎn)品與對(duì)比方法不一致的樣本，均結(jié)合臨床背景信息和其他檢測(cè)結(jié)果等進(jìn)行了綜合分析。綜上所述，申報(bào)產(chǎn)品的臨床試驗(yàn)資料符合技術(shù)審評(píng)要求?！摹a(chǎn)品受益風(fēng)險(xiǎn)判定本試劑盒根據(jù)YY/T0316-2016醫(yī)療器械風(fēng)險(xiǎn)管理對(duì)本產(chǎn)品的安全風(fēng)險(xiǎn)分析方式，對(duì)本試劑盒進(jìn)行產(chǎn)品受益風(fēng)險(xiǎn)判定。適用于體外定性檢測(cè)人肺泡灌洗液中鸚鵡熱衣原體DNA核酸，用于鸚鵡熱衣原體肺炎的輔助診斷，不作確診使用。建議結(jié)合患者臨床表現(xiàn)和其他實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)對(duì)病情進(jìn)行綜合分析。（二）風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估則判斷每個(gè)危險(xiǎn)（源）的風(fēng)險(xiǎn)是否達(dá)到可接受水平，對(duì)合理可行降低的風(fēng)險(xiǎn)、不經(jīng)過風(fēng)險(xiǎn)/收益分析既判定為不可接受的風(fēng)險(xiǎn)采取控制措施，并對(duì)具體措施進(jìn)行實(shí)施驗(yàn)證，同時(shí)重新對(duì)采取措施后的風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)行估計(jì)，確認(rèn)其風(fēng)險(xiǎn)水平是否可接受。但為保證用械安全，基于對(duì)主要剩余風(fēng)險(xiǎn)的規(guī)避，需要在說明書中提示以下信息：1.預(yù)期用途本試劑盒適用于體外定性檢測(cè)人肺泡灌洗液中鸚鵡熱衣原鸚鵡熱衣原體主要通過接觸患病鳥類、禽類或吸入患病鳥類鼻腔分泌物的氣溶膠和糞便或者羽毛的粉塵傳播給人類。由——鸚鵡熱衣原體感染引起的疾病稱為鸚鵡熱，潛伏期通常為5-14嚴(yán)重者可出現(xiàn)重癥肺炎、心內(nèi)膜炎、黃疸和神經(jīng)系統(tǒng)等并發(fā)癥。本產(chǎn)品用于鸚鵡熱衣原體肺炎的輔助診斷，不作確診使用。建議結(jié)合患者臨床表現(xiàn)和其他實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)對(duì)病情進(jìn)行綜合分析。2.警示及注意事項(xiàng)本試劑盒說明書中明確了該試劑盒檢測(cè)方法的局限性及使用中的注意事項(xiàng)?！罁?jù)《醫(yī)療器械監(jiān)督管理?xiàng)l例》（中華人民共和國(guó)國(guó)務(wù)院令第739號(hào)）、《體外診斷試劑注冊(cè)與備案管理辦法》（國(guó)家市場(chǎng)監(jiān)督管理總局令第48號(hào)）等相關(guān)醫(yī)療器械法規(guī)與配套規(guī)章，經(jīng)對(duì)申請(qǐng)人提交的注冊(cè)申報(bào)資料進(jìn)行系統(tǒng)評(píng)價(jià)，申報(bào)產(chǎn)品符合安全性、有效性的要求，符合現(xiàn)有認(rèn)知水平，建議準(zhǔn)予注冊(cè)。附件：產(chǎn)品說明書——鸚鵡熱衣原體主要通過接觸患病鳥類、禽類或吸入患病鳥類鼻腔分泌物的氣溶膠和糞便或者全自動(dòng)核酸提取儀，型號(hào)：Auto-Pure20B；生產(chǎn)商：杭州奧盛儀器有限公司，備案號(hào)：浙杭械備由臨床醫(yī)生按照醫(yī)院標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程采集患者的肺泡灌洗液或參考下述樣本采集方法進(jìn)行采集：2.1PCR反應(yīng)液準(zhǔn)備（試劑準(zhǔn)備區(qū)）將各組分充分混合后短暫離心，以使管壁上的2.3PCR擴(kuò)增（擴(kuò)增檢測(cè)區(qū)參照ABI7500儀器說明書進(jìn)行操作）擇None。（注意：passiver2.3.3設(shè)置循環(huán)反應(yīng)程序如下——11Undetermined/Ct＞402結(jié)果判斷參照上表；如內(nèi)標(biāo)通道仍Undetermined或Ct＞40，則需重新提取樣本核酸后再次測(cè)試。結(jié)論不一致，以臨床診斷結(jié)論為準(zhǔn)。對(duì)患者的臨床診斷應(yīng)結(jié)合臨床金標(biāo)準(zhǔn)方法及其癥狀/體征、病5.2×1061×108CFU/mL（55mg/L），美羅培南（100mg/L）、亞胺培南（星（100mg/L）、頭孢哌酮舒巴坦（100mg/L）、利奈唑胺（1）；2.為了避免樣本中任何潛在的生物危險(xiǎn)，檢測(cè)樣本應(yīng)視為具有傳染性物質(zhì)，避免接觸到皮膚和粘盛有消毒劑的容器，并與廢棄物一起滅菌后方可丟棄；樣本操作和處理均需符合相關(guān)法規(guī)要求：3.產(chǎn)物處理：PCR結(jié)束之后，產(chǎn)物容易引起污染，應(yīng)由當(dāng)天不再參與實(shí)驗(yàn)的人員將所有反應(yīng)管放