生物技術(shù)制藥工藝知識梳理與習(xí)題姓名_________________________地址_______________________________學(xué)號______________________-------------------------------密-------------------------封----------------------------線--------------------------1.請首先在試卷的標(biāo)封處填寫您的姓名，身份證號和地址名稱。2.請仔細(xì)閱讀各種題目，在規(guī)定的位置填寫您的答案。一、選擇題1.生物技術(shù)制藥工藝的基本步驟包括：

a.基因克隆

b.轉(zhuǎn)化

c.表達(dá)

d.純化

e.質(zhì)量控制

2.以下哪種技術(shù)不是細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)？

a.懸浮培養(yǎng)

b.脫落培養(yǎng)

c.固體表面培養(yǎng)

d.半固體培養(yǎng)

3.以下哪種酶在蛋白質(zhì)純化過程中用于裂解細(xì)胞？

a.胰蛋白酶

b.胰島素

c.磷酸酶

d.核酸酶

4.以下哪種方法用于蛋白質(zhì)的初步純化？

a.超濾

b.凝膠過濾

c.離子交換

d.沉淀

5.以下哪種技術(shù)用于蛋白質(zhì)的最終純化？

a.超濾

b.凝膠過濾

c.離子交換

d.高效液相色譜

6.以下哪種方法用于檢測蛋白質(zhì)的活性？

a.Westernblot

b.ELISA

c.Southernblot

d.Northernblot

7.以下哪種技術(shù)用于基因克??？

a.PCR

b.Northernblot

c.Southernblot

d.DNA測序

8.以下哪種方法用于檢測基因表達(dá)？

a.Northernblot

b.Southernblot

c.DNA測序

d.PCR

答案及解題思路：

1.答案：a,b,c,d,e

解題思路：生物技術(shù)制藥工藝的基本步驟通常包括基因克隆、轉(zhuǎn)化、表達(dá)、純化和質(zhì)量控制。這些都是實現(xiàn)目標(biāo)生物制品從實驗室研究到生產(chǎn)應(yīng)用的必要步驟。

2.答案：d

解題思路：細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)通常分為懸浮培養(yǎng)、附著培養(yǎng)和固體表面培養(yǎng)等，半固體培養(yǎng)不是標(biāo)準(zhǔn)的細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。

3.答案：a

解題思路：在蛋白質(zhì)純化過程中，常用胰蛋白酶裂解細(xì)胞以釋放蛋白質(zhì)，因為它能夠特異性地切割細(xì)胞內(nèi)部的蛋白質(zhì)。

4.答案：a,b,c,d

解題思路：超濾、凝膠過濾、離子交換和沉淀都是蛋白質(zhì)初步純化的常用方法，每種方法針對蛋白質(zhì)不同的特性進(jìn)行分離。

5.答案：d

解題思路：高效液相色譜是一種精確的蛋白質(zhì)最終純化技術(shù)，適用于復(fù)雜樣品中微量蛋白的分離和純化。

6.答案：b

解題思路：ELISA（酶聯(lián)免疫吸附測定）是檢測蛋白質(zhì)活性的常用方法，通過標(biāo)記酶來定量檢測蛋白質(zhì)活性。

7.答案：a

解題思路：PCR（聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）是一種基因克隆技術(shù)，通過復(fù)制特定的DNA片段來大量生產(chǎn)DNA。

8.答案：a

解題思路：Northernblot是一種檢測特定RNA（mRNA）表達(dá)的方法，用于分析基因在特定細(xì)胞類型或條件下的表達(dá)水平。二、填空題1.生物技術(shù)制藥工藝主要包括______、______、______、______和______五個步驟。

解答：細(xì)胞株建設(shè)、發(fā)酵生產(chǎn)、提取與精制、純化與濃縮、制劑與包裝

解題思路：根據(jù)生物技術(shù)制藥的基本流程，填入各個步驟，保證順序和內(nèi)容正確。

2.細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)包括______、______、______和______等。

解答：原代培養(yǎng)、傳代培養(yǎng)、懸浮培養(yǎng)、半固體培養(yǎng)

解題思路：回憶細(xì)胞培養(yǎng)的基本方法，根據(jù)題目要求填入相應(yīng)技術(shù)。

3.蛋白質(zhì)純化的常用方法有______、______、______和______等。

解答：鹽析法、凝膠過濾色譜法、離子交換色譜法、親和層析法

解題思路：列舉常用的蛋白質(zhì)純化技術(shù)，保證每個技術(shù)都能有效分離蛋白質(zhì)。

4.質(zhì)量控制主要包括______、______、______和______等。

解答：原料質(zhì)量控制、過程控制、中間產(chǎn)品質(zhì)量控制、產(chǎn)品質(zhì)量控制

解題思路：結(jié)合生物制藥工藝流程，填入各個環(huán)節(jié)的質(zhì)量控制內(nèi)容。

5.基因克隆的常用方法有______、______、______和______等。

解答：黏性末端克隆、平末端克隆、同源重組克隆、PCR克隆

解題思路：根據(jù)基因克隆的基本方法，填入具體技術(shù)名稱。

答案及解題思路：

1.生物技術(shù)制藥工藝主要包括細(xì)胞株建設(shè)、發(fā)酵生產(chǎn)、提取與精制、純化與濃縮、制劑與包裝五個步驟。

解題思路：理解生物技術(shù)制藥的基本流程，識別并填入正確步驟。

2.細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)包括原代培養(yǎng)、傳代培養(yǎng)、懸浮培養(yǎng)、半固體培養(yǎng)等。

解題思路：熟悉細(xì)胞培養(yǎng)的不同技術(shù)，保證填入正確的術(shù)語。

3.蛋白質(zhì)純化的常用方法有鹽析法、凝膠過濾色譜法、離子交換色譜法、親和層析法等。

解題思路：回顧蛋白質(zhì)純化的常見方法，確認(rèn)答案的準(zhǔn)確性。

4.質(zhì)量控制主要包括原料質(zhì)量控制、過程控制、中間產(chǎn)品質(zhì)量控制、產(chǎn)品質(zhì)量控制等。

解題思路：根據(jù)生物制藥的質(zhì)量控制要求，列出各環(huán)節(jié)的質(zhì)量控制要點。

5.基因克隆的常用方法有黏性末端克隆、平末端克隆、同源重組克隆、PCR克隆等。

解題思路：熟悉基因克隆的不同技術(shù)，填入正確的克隆方法。三、判斷題1.生物技術(shù)制藥工藝中，基因克隆是第一步。（）

答案：√

解題思路：在生物技術(shù)制藥工藝中，基因克隆是整個過程中最基礎(chǔ)的一步。它涉及到將目的基因插入到載體中，并使其在宿主細(xì)胞中復(fù)制，為后續(xù)的蛋白質(zhì)表達(dá)或其他生物分子生產(chǎn)奠定基礎(chǔ)。

2.細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)中，懸浮培養(yǎng)是最常用的方法。（）

答案：×

解題思路：在細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)中，最常用的方法是貼壁培養(yǎng)，而不是懸浮培養(yǎng)。懸浮培養(yǎng)主要用于培養(yǎng)懸浮生長的細(xì)胞系，如某些微生物和癌細(xì)胞，但不是普遍采用的細(xì)胞培養(yǎng)方法。

3.蛋白質(zhì)純化過程中，離子交換是常用的初步純化方法。（）

答案：√

解題思路：在蛋白質(zhì)純化過程中，離子交換確實是常用的初步純化方法之一。它基于蛋白質(zhì)表面的電荷差異，通過不同的離子強度和pH條件來分離蛋白質(zhì)。

4.質(zhì)量控制是生物技術(shù)制藥工藝中最重要的環(huán)節(jié)。（）

答案：√

解題思路：質(zhì)量控制是生物技術(shù)制藥工藝中的一環(huán)，保證了產(chǎn)品的安全性和有效性。在制藥過程中，嚴(yán)格的質(zhì)量控制能夠防止不合格產(chǎn)品的生產(chǎn)和流通。

5.基因克隆的常用方法有PCR、Southernblot、DNA測序和Northernblot。（）

答案：×

解題思路：這里列舉的方法中，PCR、Southernblot和Northernblot確實是基因克隆和分析的常用技術(shù)，但DNA測序是用于確定DNA序列的技術(shù)，不是直接用于基因克隆的方法?；蚩寺〉某Ｓ眉夹g(shù)包括PCR、基因重組、分子雜交等。四、簡答題1.簡述生物技術(shù)制藥工藝的基本步驟。

a.原料獲?。簭纳矬w或生物組織中提取目的物質(zhì)。

b.細(xì)胞培養(yǎng)：利用生物技術(shù)手段進(jìn)行細(xì)胞增殖，為生產(chǎn)目的物質(zhì)提供細(xì)胞源。

c.基因重組：將目的基因?qū)胨拗骷?xì)胞，使其表達(dá)所需的蛋白質(zhì)。

d.重組蛋白表達(dá)：通過宿主細(xì)胞的生物合成途徑，表達(dá)并產(chǎn)生重組蛋白。

e.蛋白質(zhì)純化：通過一系列的物理和化學(xué)方法，從培養(yǎng)液中分離和純化目標(biāo)蛋白。

f.質(zhì)量控制：對純化后的蛋白質(zhì)進(jìn)行檢測，保證其質(zhì)量和安全性。

g.制劑加工：將純化的蛋白質(zhì)制備成臨床使用的藥物制劑。

2.簡述細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的分類及其應(yīng)用。

a.培養(yǎng)類型：

原代細(xì)胞培養(yǎng)：直接從生物體內(nèi)取出細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)。

細(xì)胞株培養(yǎng)：經(jīng)過傳代培養(yǎng)后，保持遺傳穩(wěn)定性的一組細(xì)胞。

細(xì)胞系培養(yǎng)：細(xì)胞經(jīng)過多次傳代，可能發(fā)生突變，但仍保持某些特征。

b.應(yīng)用：

基因表達(dá)研究

藥物篩選和毒性測試

細(xì)胞生物學(xué)研究

個性化醫(yī)療

3.簡述蛋白質(zhì)純化的常用方法及其原理。

a.凝膠過濾：利用分子大小差異進(jìn)行分離，原理為分子大小與濾膜孔徑相匹配。

b.離心分離：根據(jù)蛋白質(zhì)密度和沉降系數(shù)不同進(jìn)行分離。

c.電泳：根據(jù)蛋白質(zhì)的電荷和分子大小進(jìn)行分離。

d.膜分離技術(shù)：利用分子大小、電荷、親和力等性質(zhì)進(jìn)行分離。

e.負(fù)電荷層析：根據(jù)蛋白質(zhì)的電荷性質(zhì)進(jìn)行分離。

4.簡述質(zhì)量控制的主要內(nèi)容和目的。

a.主要內(nèi)容：

純度檢測：保證目標(biāo)蛋白的純度達(dá)到要求。

活性檢測：保證蛋白質(zhì)的生物活性符合標(biāo)準(zhǔn)。

穩(wěn)定性測試：評估蛋白質(zhì)在不同條件下的穩(wěn)定性。

毒性檢測：保證藥物安全性。

b.目的：

保證藥物的質(zhì)量和療效。

符合法規(guī)和行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)。

5.簡述基因克隆的常用方法及其原理。

a.方法：

PCR擴增：利用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴增特定DNA片段。

重組DNA技術(shù)：將目的基因插入載體中，再導(dǎo)入宿主細(xì)胞。

酶連接：利用DNA連接酶將目的基因與載體連接。

b.原理：

DNA雙鏈斷裂和修復(fù)：通過限制酶和DNA連接酶實現(xiàn)。

誘導(dǎo)表達(dá)：利用啟動子和終止子構(gòu)建基因表達(dá)系統(tǒng)。

答案及解題思路：

答案：

1.生物技術(shù)制藥工藝的基本步驟包括原料獲取、細(xì)胞培養(yǎng)、基因重組、重組蛋白表達(dá)、蛋白質(zhì)純化、質(zhì)量控制、制劑加工。

2.細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)包括原代細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞株培養(yǎng)和細(xì)胞系培養(yǎng)，應(yīng)用領(lǐng)域包括基因表達(dá)研究、藥物篩選、細(xì)胞生物學(xué)研究和個性化醫(yī)療。

3.蛋白質(zhì)純化的常用方法有凝膠過濾、離心分離、電泳、膜分離技術(shù)和負(fù)電荷層析，原理基于分子大小、密度、電荷和親和力。

4.質(zhì)量控制的主要內(nèi)容是純度檢測、活性檢測、穩(wěn)定性測試和毒性檢測，目的是保證藥物質(zhì)量和安全性。

5.基因克隆的常用方法包括PCR擴增、重組DNA技術(shù)和酶連接，原理涉及DNA雙鏈斷裂和修復(fù)、誘導(dǎo)表達(dá)。

解題思路：

理解并記住生物技術(shù)制藥工藝的各個步驟。

熟悉細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的分類和它們的應(yīng)用領(lǐng)域。

掌握蛋白質(zhì)純化方法及其分離原理。

理解質(zhì)量控制的目的和主要內(nèi)容。

熟悉基因克隆的常用方法和它們的工作原理。五、論述題1.論述生物技術(shù)制藥工藝中，質(zhì)量控制的重要性及其在工藝流程中的作用。

質(zhì)量控制的重要性：

1.保證藥物安全有效。

2.保障藥品質(zhì)量符合國家相關(guān)法規(guī)標(biāo)準(zhǔn)。

3.提高制藥企業(yè)的市場競爭力。

質(zhì)量控制在工藝流程中的作用：

1.預(yù)防不良批次生產(chǎn)。

2.監(jiān)測工藝過程，及時發(fā)覺問題。

3.保證生產(chǎn)出符合要求的合格產(chǎn)品。

2.論述細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)在生物技術(shù)制藥工藝中的應(yīng)用及其優(yōu)勢。

細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用：

1.制備重組蛋白質(zhì)藥物。

2.研制基因治療藥物。

3.細(xì)胞治療藥物。

細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的優(yōu)勢：

1.操作簡便，成本低。

2.藥物產(chǎn)量高，純度高。

3.質(zhì)量可控，便于規(guī)?；a(chǎn)。

3.論述蛋白質(zhì)純化過程中，不同純化方法的優(yōu)缺點及適用范圍。

蛋白質(zhì)純化方法的優(yōu)缺點及適用范圍：

1.鹽析法：

優(yōu)點：操作簡便，成本低。

缺點：純度較低，不易分離復(fù)雜混合物。

適用范圍：適用于初步分離。

2.凝膠過濾法：

優(yōu)點：操作簡便，分離效率高。

缺點：對蛋白質(zhì)分子量敏感。

適用范圍：適用于蛋白質(zhì)的初步純化。

3.離子交換層析法：

優(yōu)點：純度較高，可分離不同電荷的蛋白質(zhì)。

缺點：對蛋白質(zhì)的分子量和等電點有一定要求。

適用范圍：適用于蛋白質(zhì)的純化。

4.論述基因克隆技術(shù)在生物技術(shù)制藥工藝中的應(yīng)用及其意義。

基因克隆技術(shù)的應(yīng)用：

1.制備重組蛋白質(zhì)藥物。

2.研究基因功能。

3.開發(fā)新型藥物。

基因克隆技術(shù)的意義：

1.促進(jìn)生物技術(shù)制藥產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。

2.為人類健康事業(yè)做出貢獻(xiàn)。

3.提高我國生物技術(shù)領(lǐng)域的國際競爭力。

5.論述生物技術(shù)制藥工藝的發(fā)展趨勢及其對人類健康的影響。

生物技術(shù)制藥工藝的發(fā)展趨勢：

1.納米技術(shù)、基因編輯技術(shù)等新技術(shù)的應(yīng)用。

2.藥物遞送系統(tǒng)的創(chuàng)新。

3.藥物個性化治療。

對人類健康的影響：

1.提高藥品質(zhì)量和安全性。

2.治療疑難雜癥，延長人類壽命。

3.降低疾病發(fā)生率，提高生活質(zhì)量。

答案及解題思路：

1.答案：

質(zhì)量控制是生物技術(shù)制藥工藝中不可或缺的一環(huán)，對于保證藥物安全有效、保障藥品質(zhì)量符合國家相關(guān)法規(guī)標(biāo)準(zhǔn)、提高制藥企業(yè)的市場競爭力具有重要意義。在工藝流程中，質(zhì)量控制起到預(yù)防不良批次生產(chǎn)、監(jiān)測工藝過程及時發(fā)覺問題、保證生產(chǎn)出符合要求的合格產(chǎn)品的關(guān)鍵作用。

解題思路：

分析質(zhì)量控制的重要性，闡述其在工藝流程中的作用，結(jié)合實際案例說明。

2.答案：

細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)在生物技術(shù)制藥工藝中應(yīng)用廣泛，包括制備重組蛋白質(zhì)藥物、研制基因治療藥物、細(xì)胞治療藥物等。細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)具有操作簡便、成本低、藥物產(chǎn)量高、純度高、質(zhì)量可控、便于規(guī)?；a(chǎn)等優(yōu)勢。

解題思路：

闡述細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用，分析其優(yōu)勢，結(jié)合實際案例說明。

3.答案：

蛋白質(zhì)純化過程中，不同的純化方法具有各自的優(yōu)缺點和適用范圍。鹽析法操作簡便、成本低，但純度較低；凝膠過濾法操作簡便、分離效率高，但對蛋白質(zhì)分子量敏感；離子交換層析法純度較高，可分離不同電荷的蛋白質(zhì)，但對蛋白質(zhì)的分子量和等電點有一定要求。

解題思路：

分別介紹鹽析法、凝膠過濾法、離子交換層析法的優(yōu)缺點和適用范圍，結(jié)合實際案例說明。

4.答案