第三章藥物的雜質(zhì)檢查藥物分析教研室1第一節(jié)藥物的雜質(zhì)與限量第二節(jié)雜質(zhì)的檢查方法第三節(jié)藥物中一般雜質(zhì)的檢查第四節(jié)特殊雜質(zhì)的檢查與鑒定方法2第一節(jié)藥物的雜質(zhì)與限量藥物的雜質(zhì)與純度藥物雜質(zhì)的來(lái)源藥物雜質(zhì)的分類(lèi)雜質(zhì)的限量3藥物的純度指藥物純凈程度，反映了藥物質(zhì)量的優(yōu)劣。ChP2010版將任何影響藥品純度的物質(zhì)均稱為雜質(zhì)。雜質(zhì)是影響藥物純度的主要因素，雜質(zhì)檢查是藥物純度評(píng)價(jià)的一項(xiàng)重要內(nèi)容。藥物純度檢查也可稱為雜質(zhì)檢查。一、藥物的雜質(zhì)與純度4雜質(zhì)的定義1、藥物存在的無(wú)治療作用2、影響藥物的穩(wěn)定性和療效3、對(duì)人體健康有害的物質(zhì)5藥物試劑共同點(diǎn)均規(guī)定所含雜質(zhì)的種類(lèi)和限度差異藥物純度又稱為藥用規(guī)格，主要從用藥安全、有效和對(duì)藥物穩(wěn)定性等方面考慮雜質(zhì)的生理作用及毒副作用。是從雜質(zhì)可能引起的化學(xué)變化對(duì)使用的影響以及試劑的使用范圍和使用目的加以規(guī)定，它不考慮雜質(zhì)對(duì)生物體的生理作用及毒副作用。分類(lèi)合格品和不合格品基準(zhǔn)試劑、優(yōu)級(jí)純、分析純、化學(xué)純、色譜純、光譜純藥物純度與試劑純度的比較6例如：藥用規(guī)格硫酸鋇（BaSO4）如存在可溶性鋇鹽則導(dǎo)致醫(yī)療事故。檢查：酸溶性鋇鹽、重金屬、砷鹽試劑規(guī)格硫酸鋇對(duì)可溶性鋇鹽不做檢查；檢查氯化物、鐵、灼燒失重7藥物生產(chǎn)過(guò)程引入藥物貯存期間引入雜質(zhì)的來(lái)源二、藥物雜質(zhì)的來(lái)源8（1）所用原料不純、合成工藝中未反應(yīng)完全的原料、合成中間體、副產(chǎn)物等。+(CH3CO)2O+CH3COOHH2SO470—75℃生產(chǎn)過(guò)程中乙酰化不完全水楊酸例1：阿司匹林由水楊酸乙?；频茫ㄒ唬┥a(chǎn)過(guò)程引入的雜質(zhì)9

例2：葡萄糖制備過(guò)程中產(chǎn)生雜質(zhì)酸度：水解試劑帶入乙醇中不溶物：水解中間體(糊精)SO32-：產(chǎn)品用H2SO3漂白可溶性淀粉：水解不完全10（2）植物原料中的結(jié)構(gòu)類(lèi)似物分離不完全；例3：植物中提取鹽酸小檗堿含有藥根堿、巴馬汀等生物堿11鹽酸普魯卡因注射制劑對(duì)氨基苯甲酸高溫滅菌水解進(jìn)一步脫羧轉(zhuǎn)化苯胺引起毒性反應(yīng)H2O例4：鹽酸普魯卡因注射制劑生產(chǎn)過(guò)程中產(chǎn)生新雜質(zhì)（3）藥物在制成制劑的過(guò)程中，也能產(chǎn)生新的雜質(zhì)。12重金屬：Pb,As殘留溶劑：甲醇、乙醇、丙酮（4）重視生產(chǎn)過(guò)程中產(chǎn)生的異構(gòu)體和多晶型的藥物雜質(zhì)。（5）生產(chǎn)中使用的設(shè)備、器皿可能引入重金屬；使用試劑、溶劑、催化劑類(lèi)可能有殘留。13（1）保管不善或貯存時(shí)間過(guò)長(zhǎng)（2）包裝不當(dāng)二、貯藏過(guò)程中引入14藥品水解、氧化、分解聚合、異構(gòu)化晶型轉(zhuǎn)化、潮解、發(fā)霉在外界條件溫度、濕度、陽(yáng)光、空氣、微生物產(chǎn)生雜質(zhì)具有酯、內(nèi)酯、酰胺、環(huán)酰胺及苷類(lèi)藥物在水分存在下均容易水解。具有醚、醛、巰基、酚羥基、硫基、亞硝基以及長(zhǎng)鏈共軛雙鍵等結(jié)構(gòu)的藥物，在空氣中容易被氧化，可使藥物降效、失效甚至產(chǎn)生毒性15三、藥物雜質(zhì)的分類(lèi)1.按來(lái)源可分為:一般雜質(zhì)和特殊雜質(zhì)一般雜質(zhì)指在自然界中分布廣泛，在多種藥物的生產(chǎn)或貯存過(guò)程中容易引入的雜質(zhì)如：酸、堿、水分、氯化物、硫酸鹽、重金屬、砷鹽、硫化物、氰化物、鐵鹽、銨鹽、易炭化物、干燥失重、熾灼殘?jiān)?、溶液顏色與澄清度、有機(jī)溶劑殘留量等。一般雜質(zhì)其檢查方法收載在中國(guó)藥典的附錄中。16特殊雜質(zhì)指在某一個(gè)或某一類(lèi)藥物的生產(chǎn)或貯存過(guò)程中，根據(jù)藥物的性質(zhì)、生產(chǎn)方法和工藝條件，有可能引入的雜質(zhì)如阿司匹林中的游離水楊酸、異煙肼中的游離肼、甾體激素中的其他甾體。

特殊雜質(zhì)檢查方法收載在中國(guó)藥典正文各藥品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中。172.按結(jié)構(gòu)可分為：無(wú)機(jī)雜質(zhì)和有機(jī)雜質(zhì)

無(wú)機(jī)雜質(zhì)

——Cl-、S2-、SO42-

、CN-、As、重金屬

有機(jī)雜質(zhì)

——如有機(jī)藥物中引入的原料，中間體、副產(chǎn)物、分解物、異構(gòu)體、殘留溶劑。

有機(jī)雜質(zhì)可分為特定雜質(zhì)和非特定雜質(zhì)。183.按性質(zhì)可分為

毒性雜質(zhì)

如As、重金屬、氰化物等，對(duì)人體有毒害的雜質(zhì)，

應(yīng)嚴(yán)格控制，以保證用藥的安全。

信號(hào)雜質(zhì)

本身一般無(wú)毒，其含量多少可反映藥物純度水平，

如含量過(guò)多，表明藥物的純度差，提示該藥的生產(chǎn)

工藝或生產(chǎn)控制有問(wèn)題。

如氯化物、硫酸鹽等194.無(wú)效或低效異構(gòu)體、晶型

（1）具有立體異構(gòu)體的藥物，其生物活性有很大差異；

如：腎上腺素的左旋體其升壓作用是右旋體的12倍。

（2）藥物的晶型不同，其理化常數(shù)、溶解性、穩(wěn)定性、體內(nèi)的吸收和療效也有差異。

如：驅(qū)蟲(chóng)藥甲苯咪唑有A、B、C三種晶型。其中C晶型的驅(qū)蟲(chóng)率90%，B晶型的驅(qū)蟲(chóng)率40-60%，A晶型驅(qū)蟲(chóng)率小于20%。20在不影響藥物療效、穩(wěn)定性及不發(fā)生毒性的前提下，允許藥物中存在有一定量的雜質(zhì)。藥物中所含雜質(zhì)的最大允許量稱為雜質(zhì)的限量。四、雜質(zhì)的限量21百分之幾表示（%）或百萬(wàn)分之幾表示（ppm）雜質(zhì)的量≤雜質(zhì)限量＜雜質(zhì)的量藥品合格藥品不合格22雜質(zhì)限量控制方法定量測(cè)定法靈敏度法比較法對(duì)照法限量檢查法23對(duì)照法取限度量的待檢雜質(zhì)對(duì)照品溶液與一定量供試品溶液在相同條件下處理后，比較反應(yīng)結(jié)果，以確定雜質(zhì)含量是否超過(guò)規(guī)定。24寫(xiě)成：L=C×VS×100%V：標(biāo)準(zhǔn)品溶液體積C：標(biāo)準(zhǔn)品溶液濃度S：供試品量標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度×標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積供試品量×100%雜質(zhì)限量

=25操作：平行試驗(yàn)比較兩比色管的顏色或濁度，判斷雜質(zhì)含量是否符合規(guī)定。樣品管對(duì)照管26例1：對(duì)乙酰氨基酚中氯化物的檢查

對(duì)照品溶液：標(biāo)準(zhǔn)NaCl溶液（10μgCl-/ml）取5.0ml同法操作比較，濁度不得更大。計(jì)算：氯化物限量是多少？（%）樣品溶液：樣品2.0g100ml25ml依法檢查Cl-水過(guò)濾27靈敏度法在規(guī)定量的供試品溶液中加入試劑，在一定條件下反應(yīng)，觀察有無(wú)正反應(yīng)出現(xiàn)，以不出現(xiàn)正反應(yīng)為合格。即以該檢測(cè)條件下反應(yīng)的靈敏度來(lái)控制雜質(zhì)限量。（不需對(duì)照品）28如：蒸餾水中氯化物的檢查操作：在供試品溶液中加入試劑，在實(shí)驗(yàn)條件下反應(yīng)，不得出現(xiàn)正反應(yīng)。50ml蒸餾水不得發(fā)生混濁HNO3AgNO30.2mgCl-/50mlCl-4μg/ml規(guī)定水中氯化物含量不大于4μg/ml29比較法取一定量供試品，在規(guī)定條件下測(cè)定待檢雜質(zhì)參數(shù)（如吸光度、旋光度等），與規(guī)定數(shù)值（限量）比較，判斷供試品中雜質(zhì)限量。（不需對(duì)照品）30

λ＝310nm下測(cè)定，規(guī)定A310≤0.05例：腎上腺素中腎上腺酮的檢查樣品供試品液（2.0mg/ml）鹽酸溶液腎上腺酮腎上腺素31一般雜質(zhì)檢查規(guī)則

《藥品檢驗(yàn)操作標(biāo)準(zhǔn)》規(guī)定：1.遵循平行操作原則（1）儀器的配對(duì)性如納氏比色管應(yīng)配對(duì)，刻度線高低相差不超過(guò)2mm，砷鹽檢查時(shí)導(dǎo)氣管長(zhǎng)度及孔的大小要一致（2）對(duì)照品與供試品的同步操作32

2.正確的取樣，注意供試品的稱量范圍3.正確的比色、比濁方法4.檢查結(jié)果不符合規(guī)定或在限度邊緣時(shí)應(yīng)對(duì)供試管和對(duì)照管各復(fù)查二份33第二節(jié)雜質(zhì)的檢查方法（一）有機(jī)雜質(zhì)在藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中的項(xiàng)目名稱1.以雜質(zhì)的化學(xué)名稱作為項(xiàng)目名稱阿司匹林中的游離水楊酸腎上腺素中的“酮體檢查”雜質(zhì)A(Ⅰ)2.以某類(lèi)雜質(zhì)的總稱作為項(xiàng)目名稱硝酸毛果云香堿中的“其它生物堿”“有關(guān)物質(zhì)”3.以檢測(cè)方法命名：“雜質(zhì)吸光度”、“易碳化物”等34（二）雜質(zhì)檢查項(xiàng)目的確定雜質(zhì)檢查項(xiàng)目的確定要有針對(duì)性。包括藥物在質(zhì)量研究和穩(wěn)定性考察中檢出的，并在批量生產(chǎn)中出現(xiàn)的雜質(zhì)和降解產(chǎn)物。降解產(chǎn)物和毒性雜質(zhì)通常作為必須的檢查項(xiàng)目。除降解產(chǎn)物和毒性雜質(zhì)外，原料中已控制的雜質(zhì)，在制劑中一般不再控制。單一對(duì)映體，其可能共存的其他對(duì)映體應(yīng)作為雜質(zhì)檢查。消旋體藥物，當(dāng)已有其單一對(duì)映體藥物的法定質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)時(shí)，應(yīng)在給消旋體藥物的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中設(shè)旋光度檢查項(xiàng)目。35（三）雜質(zhì)限度的確定雜質(zhì)限度的制訂應(yīng)考慮如下因素：雜質(zhì)及含一定限量雜質(zhì)的藥品毒理學(xué)研究結(jié)果；給藥途徑；每日劑量；治療周期；給藥人群；雜質(zhì)藥理學(xué)可能的研究結(jié)果；原料藥的來(lái)源；生產(chǎn)成本和消費(fèi)者對(duì)藥品價(jià)格的承受力。36（四）雜質(zhì)檢查方法的選擇與驗(yàn)證專(zhuān)屬性：靈敏度：檢測(cè)限不得大于該雜質(zhì)的報(bào)告限度。37二、雜質(zhì)的常用檢查方法化學(xué)方法色譜方法光譜方法物理方法等。38（一）化學(xué)方法當(dāng)藥物中雜質(zhì)與藥物的化學(xué)性質(zhì)相差較大時(shí)，可選擇合適的試劑，使之與雜質(zhì)發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，從而檢查雜質(zhì)的限量。1.顯色反應(yīng)檢查法：采用比色法，2.沉淀反應(yīng)檢查法：比濁法或重量法3.生成氣體的檢查法4.滴定法：滴定劑只與雜質(zhì)反應(yīng)，以一定濃度的滴定液滴定藥物中的雜質(zhì)，可以定量地測(cè)定雜質(zhì)的含量。如：硫酸亞鐵中高鐵鹽的檢查。39（二）色譜方法色譜方法是有關(guān)物質(zhì)檢查的首選方法。1.薄層色譜法(TLC)2.高效液相色譜法(HPLC)3.氣相色譜法(GC)4.毛細(xì)管電泳法401.薄層色譜法（TLC）

系將供試品溶液點(diǎn)樣于薄層板上，經(jīng)展開(kāi)、檢視后所得的色譜圖，與適宜的對(duì)照物按同法所得的色譜圖作對(duì)比，用于藥品的鑒別和雜質(zhì)檢查的方法(ChP2010版)。41(1)雜質(zhì)對(duì)照品法:適用于已知雜質(zhì)并能制備雜質(zhì)對(duì)照品的情況。供試品溶液;

一定濃度雜質(zhì)對(duì)照品溶液;分別點(diǎn)樣于同一硅膠薄層板上，展開(kāi)、定位、檢查；供試品中含雜質(zhì)斑點(diǎn)≯相應(yīng)雜質(zhì)對(duì)照斑點(diǎn)；須雜質(zhì)對(duì)照品，應(yīng)用上受限制。42N-甲基哌嗪10μl50μg/ml供試品10μl50mg/ml枸櫞酸乙胺嗪中N-甲基哌嗪的檢查。對(duì)照溶液：50μg/ml

N-甲基哌嗪溶液供試品溶液：50mg/ml結(jié)果：供試品溶液如顯與對(duì)照品溶液相應(yīng)的雜質(zhì)斑點(diǎn)，其顏色與大小與對(duì)照溶液的主斑點(diǎn)比較，不得更大更深限度：0.1%43(2)供試品溶液自身稀釋對(duì)照法:適用于雜質(zhì)結(jié)構(gòu)不確定或無(wú)雜質(zhì)對(duì)照品的情況。供試品溶液;供試品溶液按限量要求稀釋至一定濃度作為對(duì)照溶液；分別點(diǎn)樣于同一硅膠薄層板上，展開(kāi)、定位、檢查；供試品溶液所顯雜質(zhì)斑點(diǎn)≯對(duì)照溶液所顯主斑點(diǎn)顏色；簡(jiǎn)便易行，不需制備對(duì)照品；

44如：吡羅昔康中有關(guān)物質(zhì)的檢查供試液：20mg/mL對(duì)照液：0.2mg/mL(供試液稀釋100倍)供試液與對(duì)照液點(diǎn)于同一薄層板;判斷:供試品溶液雜質(zhì)斑點(diǎn)顏色≯對(duì)照液主斑點(diǎn)顏色45(3)雜質(zhì)對(duì)照品法與供試品溶液自身稀釋對(duì)照法并用法：

藥物中存在多個(gè)雜質(zhì)時(shí)

已知雜質(zhì)有對(duì)照品——雜質(zhì)對(duì)照品法

未知雜質(zhì)或無(wú)對(duì)照品雜質(zhì)——供試品溶液自身對(duì)照法46(4)對(duì)照藥物法：無(wú)合適的雜質(zhì)對(duì)照品，或雜質(zhì)斑點(diǎn)顏色與主藥成分斑點(diǎn)顏色有差異，可用所含待檢雜質(zhì)符合限量要求的該藥品作為對(duì)照品進(jìn)行比較。供試品與其相同藥物對(duì)照品分別點(diǎn)樣于同一薄層板上，展開(kāi)顯色，供試品雜質(zhì)斑點(diǎn)≯對(duì)照藥物中雜質(zhì)斑點(diǎn)數(shù)，顏色不得更深。

對(duì)照品與供試品相同，克服2法中對(duì)照品與雜質(zhì)斑點(diǎn)有時(shí)的不可比性。47

可準(zhǔn)確的測(cè)定各組分的峰面積，進(jìn)行雜質(zhì)定量，對(duì)于用HPLC測(cè)定含量的藥物，可采用同一色譜條件進(jìn)行雜質(zhì)檢查。2.高效液相色譜法（HPLC）特點(diǎn)：分離效能高，專(zhuān)屬性強(qiáng)，檢測(cè)靈敏度高，準(zhǔn)確的測(cè)定各組分的峰面積48

（1）外標(biāo)法測(cè)定:適用于有雜質(zhì)對(duì)照品，進(jìn)樣量能精確控制的情況。配制一定濃度雜質(zhì)對(duì)照品對(duì)照液和供試品溶液，分別定量進(jìn)樣，測(cè)定雜質(zhì)峰的響應(yīng)，按外標(biāo)法計(jì)算雜質(zhì)的濃度。也可根據(jù)校正曲線可求供試品溶液中雜質(zhì)的濃度AX:供試品中雜質(zhì)的峰面積CX:供試品中雜質(zhì)的濃度AS’:雜質(zhì)對(duì)照品溶液中雜質(zhì)的峰面積CS’:雜質(zhì)對(duì)照品溶液中雜質(zhì)的濃度49（2）加校正因子的主成分自身對(duì)照測(cè)定法（3）不加校正因子的主成分自身對(duì)照測(cè)定法適用于沒(méi)有雜質(zhì)對(duì)照品的情況。（4）面積歸一化法適用于供試品中結(jié)構(gòu)相似、相對(duì)含量較高且限度范圍較寬的雜質(zhì)含量的粗略考查，如異構(gòu)體相對(duì)含量的檢查。503.氣相色譜法（GC

）GC用來(lái)測(cè)定藥物中揮發(fā)性的雜質(zhì)，如殘留溶劑的檢查常用的方法與HPLC相同，另外還有標(biāo)準(zhǔn)溶液加入法

CX——供試液中組分X的濃度

AX——供試液中組分X的峰面積

ΔCX——所加入的已知濃度待測(cè)組分對(duì)照品的濃度

Ais——加對(duì)照品后組分X的峰面積4.毛細(xì)管電泳法51（三）光譜方法光譜檢查方法是依據(jù)藥物與雜質(zhì)對(duì)光選擇性吸收性質(zhì)差異進(jìn)行的。1.可見(jiàn)-紫外分光光度法(vis-uv)2.紅外分光光度法(IR)3.原子吸收分光光度法521.可見(jiàn)-紫外分光光度法(vis-uv)利用藥物和雜質(zhì)紫外特征吸收的差異；如果藥物在雜質(zhì)的最大吸收處沒(méi)有吸收，則可在此波長(zhǎng)測(cè)定樣品溶液的吸光度，來(lái)控制雜質(zhì)的量利用雜質(zhì)與試劑發(fā)生呈色反應(yīng)，在可見(jiàn)光區(qū)，測(cè)定雜質(zhì)的量。531.地蒽酚2.二羥基蒽醌地蒽酚中二羥基蒽醌的檢查二羥基蒽醌：λmax432nm；地蒽酚：該波長(zhǎng)下無(wú)吸收。規(guī)定：A432≯0.12；雜質(zhì)二羥基蒽醌的限量≤2.0%542.紅外分光光度法(IR)

主要用于藥物中無(wú)效或低效晶型的檢查。某些多晶形藥物由于晶形結(jié)構(gòu)不同，一些化學(xué)鍵的鍵長(zhǎng)、鍵角等發(fā)生不同程度的變化，從而導(dǎo)致紅外吸收光譜中某些特征峰的頻率、峰型和強(qiáng)度出現(xiàn)顯著差異。553.原子吸收分光光度法

廣泛用于超微量元素的分析，在雜質(zhì)檢查中，主要用于藥物中金屬雜質(zhì)的檢查，例如維生素中鐵鹽和銅鹽的檢查。通常采用標(biāo)準(zhǔn)加入法控制金屬雜質(zhì)的限量。56（四）其它方法1.熱分析法(thermalanalysis)2.酸堿度檢查法3.物理性狀檢查法57一、氯化物檢查法1．原理

利用氯化物在硝酸酸性條件下與硝酸銀反應(yīng)，生成氯化銀的白色渾濁液，與一定量標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液在相同條件下生成的氯化銀渾濁液比較，以判斷供試品中氯化物是否超過(guò)限量。Cl-+Ag+AgClHNO3第三節(jié)藥物中一般雜質(zhì)的檢查582.檢查方法

藥典附錄593.結(jié)果觀察方法置黑色的背景上，自上向下透視，供試品管中顯出的顏色與對(duì)照品管比較，不得更深。604.注意事項(xiàng)及討論

（1）平行試驗(yàn)樣品管與對(duì)照管要平行操作，比色管要配套。（2）加稀硝酸目的a.加速氯化銀混濁液的生成；b.產(chǎn)生較好的乳濁液；c.避免產(chǎn)生碳酸銀、氧化銀、磷酸銀沉淀。

50ml供試液含稀硝酸10ml，過(guò)多會(huì)增大氯化銀的溶解度，使?jié)岫冉档汀?1（3）氯化物的最適檢測(cè)濃度范圍

50ml供試液中含50—80μgCl-，所產(chǎn)生的濁度梯度明顯。標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液（10μgCl-/ml）5.0—8.0ml。（4）稀釋到40ml后加AgNO3試液的目的使產(chǎn)生的AgCl渾濁均勻硝酸銀加得過(guò)早，由于氯化物濃度過(guò)大而產(chǎn)生AgCl沉淀而影響比濁。62

（5）供試品溶液不澄清需要過(guò)濾過(guò)濾時(shí)的濾紙要先用含硝酸的水溶液（1→100）洗滌，除去濾紙中含有的氯化物。(6)供試品溶液顯堿性的處理方法先中和為中性后再檢查。避免硝酸銀在堿性條件下生成氫氧化銀和氧化銀。63二、硫酸鹽檢查法1．原理

該方法是利用SO42-在鹽酸酸性溶液中與氯化鋇試液作用，生成硫酸鋇的白色渾濁液，與一定量標(biāo)準(zhǔn)硫酸鉀溶液在相同條件下生成的硫酸鋇渾濁液比較，以判斷供試品中硫酸鹽是否超過(guò)限量。642.檢查方法（對(duì)照法）1.取一定量樣品，加水至約40ml，置50ml納氏比色管中2.加稀鹽酸2ml（溶液如不澄清，應(yīng)過(guò)濾）1.取一定量標(biāo)準(zhǔn)硫酸鉀溶液（濃度：100μgSO42-/ml）置50ml納氏比色管中加水稀釋至40ml；2.再加稀鹽酸2ml樣品管對(duì)照管供試品溶液對(duì)照品溶液3.分別加入25% BaCl2試液5.0ml，用水稀釋至50ml搖勻。暗處放置10min置黑色背景上，從上向下觀察，比濁：樣品管≯對(duì)照管平行操作：651)標(biāo)準(zhǔn)K2SO4溶液的濃度和取用量

標(biāo)準(zhǔn)K2SO4溶液100μg/ml，50ml溶液中含0.1～0.5mg時(shí)所顯渾濁梯度明顯，相當(dāng)于標(biāo)準(zhǔn)K2SO4溶液1～5ml。2)鹽酸的作用和加入量可防止碳酸鋇或磷酸鋇等弱酸形成鋇鹽沉淀對(duì)比濁的影響；酸度過(guò)大又可使硫酸鋇溶解，降低檢查靈敏度；以50ml供試溶液中含稀鹽酸2ml為宜。3.注意事項(xiàng)及討論664)供試液和對(duì)照液稀釋后，再加氯化鋇溶液，使生成白色渾濁，而不是白色沉淀5)供試品溶液若需過(guò)濾，應(yīng)先用鹽酸溶液沖洗濾紙，除去硫酸鹽，再濾過(guò)。6)若供試品有色，也可用內(nèi)消色法處理。7)若藥物不溶于水，可加有機(jī)溶劑溶解。如：硫酸普拉睪酮鈉中的硫酸鹽的檢查，先用丙酮-水(1:1)溶解樣品后檢查。67三、鐵鹽檢查法鐵鹽的存在會(huì)加速藥物的氧化和降解，因此要控制鐵鹽的限量。如Vc中含有鐵鹽會(huì)加速Vc的氧化。（一）硫氰酸鹽法——Ch.PUSP（二）巰基醋酸法——BP681．原理該方法是利用Fe3+在鹽酸酸性溶液中與硫氰酸銨試液作用，生成紅色可溶性硫氰酸鐵配位離子，與一定量標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液用同法處理后所顯的顏色進(jìn)行比較，以判斷供試品中鐵鹽是否超過(guò)限量。硫氰酸鹽法692.檢查方法藥典附錄70某些藥物（如葡萄糖、糊精、硫酸鎂）檢查中需加硝酸處理，也可氧化Fe2+成為Fe3+，但必須加熱將剩余的硝酸除去，防止亞硝酸與SCN-作用，生成紅色亞硝酰硫氰化物影響比色。

3.注意事項(xiàng)及討論71

過(guò)量硫氰酸銨的作用使反應(yīng)向正反應(yīng)方向進(jìn)行增加生成的硫氰酸鐵配離子的穩(wěn)定性消除Cl-,PO43-,SO42-,枸櫞酸根等離子干擾72四、重金屬檢查法

重金屬是指在實(shí)驗(yàn)室條件下與硫代乙酰胺或S2-作用顯色的金屬雜質(zhì)，如銀、鉛、汞、酮、鎘、錫、銻、鉍等，由于藥品生產(chǎn)過(guò)程中遇到鉛的機(jī)會(huì)比較多，鉛在體內(nèi)易積蓄中毒，故作為重金屬的代表，以鉛的限量表示重金屬限度。73

第三法：硫化鈉法

第二法：熾灼后的硫代乙酰胺法

第一法：硫代乙酰胺法中國(guó)藥典（2010年版）重金屬的檢查法一共收載了三種方法：741．原理

硫代乙酰胺在弱酸性條件下水解生成H2S與重金屬離子生成黃色到棕黑色的硫化物混懸液，與一定量標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液經(jīng)同法處理后所呈顏色比較不得更深。（對(duì)照法）第一法硫代乙酰胺法75樣品+標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液對(duì)照管(甲)標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液醋酸鹽緩沖液(pH3.5)2ml水25ml樣品水25ml硫代乙酰胺2ml比色放置2min樣品管(乙)監(jiān)控管(丙)醋酸鹽緩沖液(pH3.5)2ml水25ml醋酸鹽緩沖液(pH3.5)2ml稀焦糖2．檢查方法

當(dāng)丙管中顯出的顏色不淺于甲管時(shí)，乙管中顯出的顏色與甲管比較，不得更深。如丙管中顯出的顏色淺于甲管，應(yīng)取樣按第二法重新檢查。76結(jié)果觀察方法置白紙上，自上向下透視，供試品管中顯出的顏色與對(duì)照品管比較，不得更深。771）標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液的配制和取用量用硝酸鉛配制標(biāo)準(zhǔn)鉛貯備液，并加入硝酸防止鉛水解，標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液臨用前稀釋而成。標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液濃度為10μgPb2+/ml；

適宜目視比色范圍為每27ml溶液中含10～20μg的Pb2+，一般取標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液1.0～2.0ml。3.注意事項(xiàng)及討論782.本法用2mlpH3.5的醋酸鹽緩沖液控制溶液pH值為3.0～3.5。酸度增大時(shí)，重金屬離子與硫化氫呈色變淺，甚至不變色。若供試品用強(qiáng)酸溶解，在加入硫代乙酰胺前，加氨水至中性。3.

供試品溶液有色時(shí)的處理方法

外消色法：稀焦糖溶液或其它有色液調(diào)節(jié)，使之與供試品溶液管的顏色一致，然后再加硫代乙酰胺試液比色。

794.干擾物的排除方法

供試品中微量高價(jià)Fe3+存在干擾：弱酸性溶液中Fe3+氧化H2S析出S，產(chǎn)生渾濁影響檢查排除：加入抗壞血酸或鹽酸羥胺使Fe3+還原為Fe2+80五、砷鹽檢查法

1.古蔡氏法2.二乙基二硫代氨基甲酸銀法(Ag-DDC)3.白田道夫法4.次磷酸法81六、干燥失重測(cè)定法干燥失重是指藥物在規(guī)定條件下經(jīng)干燥后所減失的重量，主要是水分，也包括其它揮發(fā)性物質(zhì)。

82測(cè)定方法：常壓恒溫干燥法減壓干燥法與恒溫減壓干燥法干燥劑干燥法熱分析法83（一）常壓恒溫干燥法適用于受熱較穩(wěn)定的藥物。干燥溫度一般為105℃。注意事項(xiàng)

厚度≤5mm，疏松物質(zhì)不超過(guò)10mm含結(jié)晶水的物質(zhì)，可提高干燥溫度含水分多，熔點(diǎn)又低的藥物

先低溫加熱，再逐漸升溫；減壓干燥易吸潮或受熱發(fā)生相變的藥物

采用一定溫度下，干燥一定時(shí)間的失重代替84（二）減壓干燥法或恒溫減壓干燥法適用于熔點(diǎn)低，易融化，受熱不穩(wěn)定或水分難趕除的藥物。

除另有規(guī)定外，壓力應(yīng)在2.67kPa（20mmHg）以下，溫度應(yīng)按照各品種項(xiàng)下的規(guī)定設(shè)置。85（三）干燥劑干燥法適用于受熱易分解或揮發(fā)的供試品。將供試品置于干燥器中，利用干燥器內(nèi)的干燥劑吸收水分，干燥至恒重。干燥劑：硅膠、濃硫酸、P2O5

。86P2O5：鋪于培養(yǎng)皿中，置于干燥器內(nèi)，吸水后，表層結(jié)塊、出現(xiàn)液滴，不能反復(fù)使用硫酸：盛于燒杯中，置于干燥器內(nèi)，可重復(fù)使用用過(guò)的硫酸經(jīng)加熱除去水分后再使用（110℃，30min）變色硅膠（含有CoCl2）CoCl2+2H2OCoCl2

●2H2O可加熱除去水分，反復(fù)使用廉價(jià)，無(wú)腐蝕，最常用的干燥劑吸水效率：P2O5＞變色硅膠＞硫酸87七、水分測(cè)定法可準(zhǔn)確測(cè)定藥物中的結(jié)晶水、吸附水和游離水的含量Ch.PUSPBP—費(fèi)休氏法、甲苯法88熾灼殘?jiān)赣袡C(jī)藥物經(jīng)炭化或揮發(fā)性無(wú)機(jī)藥物加熱分解后，高溫?zé)胱?，所產(chǎn)生的非揮發(fā)性無(wú)機(jī)雜質(zhì)的硫酸鹽。熾灼殘?jiān)鼨z查用于控制不含金屬的有機(jī)藥物或揮發(fā)性無(wú)機(jī)藥物中混入的非揮發(fā)性無(wú)機(jī)雜質(zhì)（金屬氧化物或無(wú)機(jī)鹽類(lèi)）。八、熾灼殘?jiān)鼨z查法891.操作方法90

2.注意事項(xiàng)（1）供試品的取樣量應(yīng)根據(jù)熾灼殘?jiān)蘖亢头Q量誤差決定。一般應(yīng)使熾灼殘?jiān)繛?-2mg，限量一般為0.1%-0.2%.限量0.1%，取樣量約1g

限量0.05%，取樣量約2g

限量1%以上，取樣量可在1g以下（2）含氟的藥物對(duì)瓷坩堝有腐蝕，應(yīng)采用鉑坩堝。91（4）加硫酸處理是使雜質(zhì)，轉(zhuǎn)化為穩(wěn)定的硫酸鹽，并幫助有機(jī)物炭化。但在高溫?zé)胱魄埃仨毜蜏丶訜?，除盡硫酸蒸氣，以免腐蝕高溫爐（3）一些重金屬（Pb）高溫下易揮發(fā)，需將殘?jiān)糇髦亟饘贆z查，則溫度應(yīng)控制在500～600℃熾灼至恒重。92九、易炭化物檢查法檢查藥物中遇H2SO4易炭化或易被氧化呈色的微量有機(jī)雜質(zhì)。方法：目視比色法，H2SO4炭化后與對(duì)照液比較。(ChP