藥典微生物程度檢驗法第1頁目錄一、版藥典微生物學(xué)檢驗體系發(fā)展二、年版微生物學(xué)檢驗中重大修訂及意義三、版程度標(biāo)準(zhǔn)特點及展望四、藥典純化水標(biāo)準(zhǔn)公告內(nèi)容五、藥典注射用水標(biāo)準(zhǔn)公告內(nèi)容第2頁一、藥典微生物學(xué)檢驗體系發(fā)展中美中、美藥典微生物學(xué)檢驗體系收載情況比較版藥典微生物學(xué)擬收載情況藥典純化水微生物程度公告內(nèi)容

藥典注射用水微生物程度公告內(nèi)容

非無菌藥品微生物程度標(biāo)準(zhǔn)整合、修訂3第3頁版藥典微生物學(xué)擬收載情況檢驗法

①無菌檢驗法②非無菌藥品微生物計數(shù)法③非無菌藥品控制菌檢驗法④抑菌劑效力檢驗法⑤滅菌法⑥生物指示劑抗性檢驗法⑦中藥飲片微生物程度檢驗法標(biāo)準(zhǔn)

非無菌藥品微生物程度標(biāo)準(zhǔn)指導(dǎo)標(biāo)準(zhǔn)

非無菌藥品微生物程度檢驗指導(dǎo)標(biāo)準(zhǔn)制劑通則中制劑通則中相關(guān)制劑項下無菌和微生物程度檢驗要求修訂4第4頁制劑通則中相關(guān)制劑項下[無菌]和[微生物程度]檢驗要求修訂

(1)為確保用藥安全，眼用液體、半固體制劑仍應(yīng)符合無菌檢驗法要求(2)為確保用藥安全，對用于手術(shù)、創(chuàng)傷、燒傷外用制劑如鼻用制劑、軟膏劑、乳膏劑、噴霧劑、氣霧劑、凝膠劑、散劑、涂劑、滴耳劑等仍應(yīng)符合無菌檢驗要求。但在其通則無菌檢驗項下增加：“除另有要求外”。給予有不按無菌檢驗原因(3)在搽劑和酊劑通則項下微生物程度檢驗項下增加：“除另有要求外”。給予有可能需要按無菌檢驗原因第5頁五、品種正文中無菌或微生物程度檢驗及其標(biāo)準(zhǔn)要求1、受熱不穩(wěn)定、制劑不能進(jìn)行最終滅菌無菌工藝產(chǎn)品如：抗生素原料藥、抗生素粉針劑正文中無菌檢驗要求2、經(jīng)驗證后各論化品種檢驗項下：無菌…..或微生物程度……(有詳細(xì)檢驗要求)3、藥用敷料無菌或微生物程度要求及標(biāo)準(zhǔn)4、純化水、注射用水微生物程度要求及標(biāo)準(zhǔn)年版藥典純化水、注射用水[微生物程度]價差方法在參考?xì)W、美藥典只要用水微生物檢驗要求基礎(chǔ)上，由浙江所立課題考查、比對，在所用培養(yǎng)基和方法上將有較大修訂第6頁與USP35版、EP7.0版、JP16版比較，年版中國藥典微生物學(xué)檢驗體系規(guī)劃收載項目和內(nèi)容已基本趨向一致，將使我國藥典微生物學(xué)檢驗成為一個比較完備標(biāo)準(zhǔn)體系，其意義在于：1、全方面與國際藥典標(biāo)準(zhǔn)接軌；2.、從對終產(chǎn)品檢驗向過程控制轉(zhuǎn)變。第7頁二、年版微生物學(xué)檢驗中重大修訂及意義

1、試驗環(huán)境重大修訂

①無菌檢驗環(huán)境潔凈度要求

②微生物程度檢驗環(huán)境潔凈度要求2、培養(yǎng)系統(tǒng)重大修訂

①無菌檢驗中培養(yǎng)基德修訂

②微生物計數(shù)法中培養(yǎng)基修訂

③控制菌檢驗法中培養(yǎng)基修訂

④控制菌檢驗法中培養(yǎng)基修訂

⑤抑菌效力測定法中培養(yǎng)基修訂3、對一、二、三部微生物學(xué)附錄整合、修訂第8頁與USP35版、EP7.0版、JP16版比較，年版中國藥典微生物學(xué)檢驗體系規(guī)劃收載項目和內(nèi)容已基本趨向一致，將使我國藥典微生物學(xué)檢驗成為一個比較完備標(biāo)準(zhǔn)體系，其意義在于：1全方面與國際藥典標(biāo)準(zhǔn)接軌；2.從對終產(chǎn)品檢驗向過程控制轉(zhuǎn)變。第9頁1、試驗環(huán)境重大修訂GMP年版對潔凈度要求及確認(rèn)標(biāo)準(zhǔn)潔凈度級別懸浮粒子最大允許數(shù)/立方米浮游菌cfu/m3沉降菌（）cfu/4小時(2)表面微生物靜態(tài)動態(tài)接觸（）cfu/碟5指手套cfu/手套≥0.5μm≥5.0μm(2)≥0.5μm≥5.0μmA級352020352020

1111B級35202935290010555C級352900350290001005025－D級35029000不作要求不作要求20010050－第10頁按試驗性質(zhì)修訂微生物學(xué)檢驗環(huán)境潔凈度無菌檢驗：應(yīng)在潔凈度10000級背景下局部100級單向流空氣區(qū)域內(nèi)或隔離系統(tǒng)中進(jìn)行。無菌檢驗：應(yīng)在潔凈度B級背景下局部A級單向流空氣區(qū)域內(nèi)或隔離系統(tǒng)中進(jìn)行。微生物程度檢驗：應(yīng)在潔凈度10000級背景下局部100級單向流空氣區(qū)域內(nèi)進(jìn)行。微生物程度檢驗：應(yīng)在受控潔凈環(huán)境下（不低于D級）局部不低于B級單向流空氣區(qū)域內(nèi)進(jìn)行。第11頁2、培養(yǎng)基系統(tǒng)重大修訂修訂依據(jù)：經(jīng)過科研課題建立及大量試驗，以國際品牌培養(yǎng)基為對照，考查了中國藥典微生物程度檢驗法、無菌檢驗法中所用國產(chǎn)培養(yǎng)基與USP/BP/JP中所要求培養(yǎng)基粗軍生長能力比較，得出大量試驗數(shù)據(jù)，并經(jīng)過可靠統(tǒng)計分析名為整體微生物檢驗培養(yǎng)基修訂提供了有利技術(shù)支持。修訂意義：(1)糾正了我國在微生物檢驗系統(tǒng)中長久存在對微生物分了培養(yǎng)概念，提升污染微生物檢驗可能。（2）與先進(jìn)國家藥典所用培養(yǎng)基一致，為實現(xiàn)結(jié)果夫人打下主要基礎(chǔ)。第12頁3、對一、二、三部微生物學(xué)附錄整合、修訂需進(jìn)行整合、修訂微生物學(xué)檢驗統(tǒng)計：①無菌檢驗法②微生物檢驗法③指導(dǎo)標(biāo)準(zhǔn)

微生物程度檢驗法應(yīng)用指導(dǎo)標(biāo)準(zhǔn)藥品微生物試驗室規(guī)范指導(dǎo)標(biāo)準(zhǔn)第13頁中國藥典年版微生物程度檢驗法增、修訂

1、微生物程度檢驗法收載形式增、修訂2、試驗環(huán)境增、修訂3、微生物計數(shù)法中增、修訂4、控制菌檢驗法中增、修訂5、非無菌藥品微生物程度標(biāo)準(zhǔn)整合、修訂第14頁中國藥典》年版微生物程度檢驗法修訂后將分為三個附錄：1、非無菌藥品微生物程度檢驗：微生物計數(shù)法2、非無菌藥品微生物程度檢驗：控制菌檢驗法3、非無菌藥品微生物程度標(biāo)準(zhǔn)。修訂后微生物程度檢驗法暫不收載于《中國藥典》年版第二增補本而將直接收載《中國藥典》年版，在正式實施前公告期內(nèi)將深入完善以確保方法適應(yīng)性和可操作性。第15頁非無菌藥品微生物程度標(biāo)準(zhǔn)整合、修訂

1、藥典委員會微生物專業(yè)委員會修訂思緒2、修訂后程度標(biāo)準(zhǔn)總體結(jié)構(gòu)3、修訂后程度標(biāo)準(zhǔn)各項詳細(xì)要求第16頁藥典委員會微生物專業(yè)委員會修訂思緒修訂思緒(1)版中國藥典一、二、三部微生物程度本中項目標(biāo)對比、整合（2）與美、歐、日藥典比較，修訂中國藥典微生物程度標(biāo)準(zhǔn)整合：采取一部項目作為合并后程度標(biāo)準(zhǔn)基礎(chǔ)1、參考?xì)W、美、日藥典一致表示形式，采取較清楚直觀表格形式列出各類藥品和原敷料微生物程度標(biāo)準(zhǔn)2、菌數(shù)計數(shù)結(jié)果以10n表示；3、以“需氧菌總數(shù)”取代“細(xì)菌數(shù)”，以“耐膽鹽革蘭陰性菌”取代“大腸菌群”第17頁2、修訂后程度標(biāo)準(zhǔn)總體結(jié)構(gòu)（共9項、4個表）

1、制劑通則、品種項下要求無菌制劑及標(biāo)示無菌制劑和原輔料應(yīng)符合無菌檢驗法要求2、用于手術(shù)、燒傷或嚴(yán)重創(chuàng)傷局部給藥制劑應(yīng)符合無菌檢驗法要求3、非無菌化學(xué)藥品及生物制品制劑微生物程度標(biāo)準(zhǔn)4、非無菌不含藥材原粉中藥制劑微生物程度標(biāo)準(zhǔn)5、非無菌含藥材原粉中藥制劑微生物程度標(biāo)準(zhǔn)6、非無菌藥用原料及輔料微生物程度標(biāo)準(zhǔn)7、中藥提取物及中藥飲片微生物程度標(biāo)準(zhǔn)8、有兼用路徑制劑應(yīng)符合各給藥路徑標(biāo)準(zhǔn)9、霉變、長螨者以不合格論第18頁三、版微生物程度標(biāo)準(zhǔn)特點及展望特點：1、很好地分析、匯總了現(xiàn)一、二、三部程度標(biāo)準(zhǔn)項目能考慮和前向性地制訂符合我國傳統(tǒng)中藥特點微生物程度標(biāo)準(zhǔn)2、化學(xué)藥、生物制品程度標(biāo)準(zhǔn)（菌數(shù)及控制菌）已與美、歐、日藥典程度標(biāo)準(zhǔn)一致或更嚴(yán)格3、新設(shè)置中藥提取物和中藥飲片微生物程度標(biāo)準(zhǔn)（僅要求了控制菌），菌數(shù)計數(shù)程度等候調(diào)研數(shù)據(jù)展望：1、結(jié)合GMP管理步伐，深入合理制訂含藥材原粉中藥制劑微生物程度標(biāo)準(zhǔn)2、在開展課題積累數(shù)據(jù)、區(qū)分使用方法基數(shù)上完善中藥提取物、中藥飲片、草藥微生物程度標(biāo)準(zhǔn)第19頁年版藥典抑菌劑效力檢驗法 抑菌劑效力檢驗法指導(dǎo)標(biāo)準(zhǔn)

抑菌劑效力檢驗法將在年版藥典附錄I制劑通則項中相關(guān)制劑項下“生產(chǎn)與貯藏期間應(yīng)符合以下要求”中，增加：“加入抑菌劑（防腐劑）制劑，應(yīng)符合抑菌劑（防腐劑）效力檢驗法相關(guān)要求”（一）體例按《中國藥典》中抑菌劑效力檢驗法指導(dǎo)標(biāo)準(zhǔn)修訂。1、在概述部分增加抑菌劑定義2、產(chǎn)品分類及判斷標(biāo)準(zhǔn)按EP進(jìn)行修訂，依據(jù)給藥路徑分為四類。（二）檢驗方法所用菌種名稱、菌液制備、培養(yǎng)基均參見微生物程度檢驗法（三）培養(yǎng)基適用性檢驗、方法適用性試驗中各試驗菌回收率按70%要求（四）結(jié)果判斷中初始值定位所加菌數(shù)值第20頁年版藥典非無菌藥品微生物程度檢驗指導(dǎo)標(biāo)準(zhǔn)主要增修訂——1、整合原一、二部知道內(nèi)容，為統(tǒng)一指導(dǎo)標(biāo)準(zhǔn)：將一部10點指導(dǎo)和二部10點指導(dǎo)整合為共11點指導(dǎo)主要增修訂——2、增加微生物程度檢驗環(huán)境修訂說明：“非無菌藥品微生物程度檢驗中“受控潔凈環(huán)境是指不低于GMP現(xiàn)行版要求D級潔凈環(huán)境?！敝饕鲂抻啞?、依據(jù)修訂微生物程度標(biāo)準(zhǔn)，除相關(guān)說明：“含動物類原藥材粉口服中藥材要求不得檢出沙門菌。其中動物類原藥材粉是指除蜜蜂、王漿、動物角、阿膠外全部動物類原藥材粉，如牡蠣、珍珠等貝類，海蜇、冬蟲夏草、人工牛黃等”第21頁年版藥典藥品微生物試驗室指導(dǎo)標(biāo)準(zhǔn)

藥品微生物試驗室規(guī)范指導(dǎo)標(biāo)準(zhǔn)藥品微生物試驗室指導(dǎo)標(biāo)準(zhǔn)（一）參考WHO“藥品微生物試驗室規(guī)范指導(dǎo)標(biāo)準(zhǔn)”內(nèi)容進(jìn)行修訂（二）本指導(dǎo)標(biāo)準(zhǔn)框架及內(nèi)容修訂為：“人員、環(huán)境、設(shè)備、試劑和培養(yǎng)基、菌株、樣品、方法、污染廢棄物處理、結(jié)果及質(zhì)量、文件、試驗統(tǒng)計、匯報。”十二個部分第22頁四、藥典純化水標(biāo)準(zhǔn)公告內(nèi)容[修訂]【檢驗】微生物程度取本品不少于1ml，按薄膜過濾法處理后，采取R2A瓊脂培養(yǎng)基，30～35℃培養(yǎng)不少于5天，依法檢驗（通則1105），每1ml供試品中需氧菌總數(shù)不得過100cfu。R2A瓊脂培養(yǎng)基處方及制備：酵母浸出粉0.5g

蛋白胨0.5g

酪蛋白水解物0.5g

葡萄糖0.5g可溶性淀粉0.5g

磷酸二氫鉀0.3g

無水硫酸鎂0.024g

丙酮酸鈉0.3g瓊脂15g

純化水1000ml除葡萄糖、瓊脂外，取上述成份，混合，微溫溶解，調(diào)整pH值使加熱后在25℃pH值為7.2±0.2，加入瓊脂，加熱溶化后，再加入葡萄糖，搖勻，分裝，滅菌。R2A瓊脂培養(yǎng)基適用性檢驗試驗照通則1105中“計數(shù)培養(yǎng)基適用性檢驗”胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基適用性檢驗方法進(jìn)行，試驗菌株為銅綠假單胞菌和枯草芽孢桿菌。應(yīng)符合要求。

起草所：浙江院

復(fù)核所：天津所、陜西所第23頁五、藥典注射用水標(biāo)準(zhǔn)公告內(nèi)容注射用水[修訂]【檢驗】微生物程度取本品不少于100ml，按薄膜過濾法處理后，采取R2A瓊脂培養(yǎng)基，30～35℃培養(yǎng)不少于5天，依法檢驗（通則1105），每100